Atlas Digital del Departamento de Biología Celular y Tisular de la Facultad de Medicina

Transcripción

1 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO Atlas Digital del Departamento de Biología Celular y Tisular de la Facultad de Medicina El primer paso de toda técnica histológica es la obtención de la muestra. Aquí observamos un segmento de intestino, quede claro que no procesaremos toda la muestra. Deberemos seleccionar un fragmento representativo, que en la imagen se aprecia en el extremo inferior derecho. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Las muestras representativas seleccionadas se ponen en las cápsulas de inclusión. Estos dispositivos con numerosos huecos permiten la entrada de las soluciones de procesamiento

2 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Este es el procesador automático de tejidos. Aquí se pueden quedar las muestras ya encapsuladas de un día para otro, con lo que se ahorra mucho trabajo TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Aquí se observa el momento en que el procesador automático de tejidos levanta la canastilla con cápsulas en las que se encuentran las muestras para procesamiento histológico.

3 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Este acercamiento nos muestra el detalle de la canastilla y ahora podemos distinguir claramente las numerosas cápsulas de inclusión que contiene TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Esta imagen muestra el centro incluidor de tejidos.

4 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA El personal técnico presiona suavemente, con lo que se libera la parafina líquida TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Estos son los bloques de parafina. Note que la sombra del tejido se aprecia a simple vista.

5 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA El microtomo es el dispositivo que permite fijar el bloque y obtener secciones cuyo espesor se mide en milésimas de milímetro TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Aquí se aprecia el bloque de parafina montado y sobre la cuchilla, la tira de cortes de parafina

6 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Con el debido cuidado, el técnico separa la tira de cortes de parafina de la superficie de la cuchilla TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Se le agrega alcohol a la tira de cortes que se encuentra sobre el portaobjetos, con el fin de que se extiendan las secciones.

7 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Los cortes se extienden aún más en la superficie del baño de flotación. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Los cortes extendidos, son capturados por medio de un portaobjetos de la superficie del baño de flotación

8 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Esta es una cestilla portamuestras. Observe que con este dispositivo el técnico puede manejar hasta 50 laminillas. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Alcohol-ácido Hematoxilina Alcoholes en grados Xilol Eosina Agua amoniacal Alcoholes en grados Aquí observamos la batería de tinciones. crecientes Xilol Aquí observamos la batería de tinciones.

9 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA El técnico va pasando la canastilla con cortes en blanco a lo largo de la batería. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Nuestros cortes pasan a la famosísima hematoxilina

10 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Aquí vemos dos canastillas con cortes ya teñidos con hematoxilina y eosina. Se encuentran en recipientes con xilol, esperando el último paso: el montaje TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA El técnico agrega una gota de resina y posteriormente aplica la lámina cubreobjetos

11 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA Este es el criostato. Se trata de un microtomo rotativo común que se encuentra en el interior de una cámara fría. Con este instrumento se realizan los cortes congelados para estudios transoperatorios

12 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO Atlas Digital del Departamento de Biología Celular y Tisular de la Facultad de Medicina MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO Un microscopio es un instrumento que permite observar estructuras pequeñas. Aquí vemos el aspecto de una pulga y notamos detalles de las patas. Observe que las zonas más gruesas (cuerpo y dorso) se ven obscuras; esto se debe a que para formar una imagen, la luz debe atravesar el cuerpo MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN Este es un corte de lengua teñido con tricrómico de Gomori. Para observar contraste de estructuras, con el microscopio fotónico de iluminación común usamos generalmente colorantes

13 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ESTEREOSCÓPICO El microscopio estereoscópico, o de disección, nos permite observar el detalle de tejidos en fresco, como esta superficie interna intestinal. Las pequeñas salientes se llaman vellosidades. Aquí observamos a mayor aumento el detalle de las vellosidades intestinales con el microscopio estereoscópico.

14 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. Estas son células de descamación de la mucosa oral. Cuesta trabajo identificar el detalle del citoplasma y de los núcleos. Compare con las siguientes imágenes. MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES Aquí observamos las mismas células de descamación de la mucosa oral de la imagen anterior. Compárelas. Note que ahora identificamos claramente los límites celulares, detalles del citoplasma y del núcleo. Este sistema de contraste óptico se conoce como contraste de fases. Observe que las imágenes obtenidas con este sistema se caracterizan por un halo brillante.

15 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY Ahora vemos células de descamación de mucosa oral y la imagen nos permite apreciar claramente contraste de núcleo y citoplasma. Note que la imagen recuerda el aspecto de un relieve. Este sistema de contraste óptico se conoce como interferencia diferencial según Nomarski. MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES Frotis sanguíneo en fresco observado con contraste de fases. No olvide el halo o brillo claro. Estos son eritrocitos.

16 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY RETICULOCITOS Frotis sanguíneo en fresco, observado con el sistema de interferencia diferencial según Nomarski. Observe el aspecto de relieve y note que algunos eritrocitos están muy plegados. Se trata de reticulocitos que normalmente se mueven en el preparado en fresco. MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY Eosinofilo Neutrófilo Frotis sanguíneo observado con interferencia diferencial según Nomarski. Se identifican eritrocitos y dos leucocitos. Observe que uno tiene gránulos gruesos y núcleo bilobulado (eosinófilo), mientras que otro tiene gránulos finos (neutrófilo).

17 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES Estos son macrófagos observados con el sistema de contraste de fases. El halo claro brillante es evidente MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es completamente negro.

18 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es completamente negro MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUS POLARIZADA Esta imagen es parecida al campo oscuro en cuanto que el fondo se ve negro. Pero note que las zonas brillantes pueden tomar varios colores, no sólo el blanco. Este sistema se conoce como luz polarizada. Aquí observamos un fragmento de hueso

19 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA Este es otro hueso en el que se identifican las osteonas. Note el intenso brillo en diversos colores. En realidad en esta imagen tomada con luz polarizada, el Dr. Joaquín Carrillo agregó colores de difracción MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA Este es un corte de músculo esquelético, previamente teñido y observado con luz polarizada. Observe el intenso brillo de las bandas transversales (anisótropas).

20 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. FLUORESCENCIA El microscopio de fluorescencia equipado con un sistema óptico especial es indispensable para la observación de las técnicas de inmunofluorescencia MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF Un sistema de interferencia diferencial que en su tiempo fue muy empleado, es el de Jamin-Lebedeff. En esta y las siguientes imágenes vemos las mismas células de descamación de mucosa oral con colores brillantes que van cambiando.

21 MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff