TEORÍA CELULAR. Matias Schleiden (1838) y Theodore Schwann (1839) LA CÉLULA ES LA UNIDAD FUNDAMENTAL DE TODOS LOS ORGANISMOS.

Transcripción

1 TEORÍA CELULAR BIOLOGÍA CELULAR Matias Schleiden (1838) y Theodore Schwann (1839) LA CÉLULA ES LA UNIDAD FUNDAMENTAL DE TODOS LOS ORGANISMOS. En 1855 Rudolph Virchow: 1) Cada organismo vivo está formado por una o más células. 2) Los organismos vivos más pequeños son células únicas y las células son las unidades fundamentales de los seres vivos. 3) Todas las células provienen de células preexistentes. Modificado de

2 ROBERT HOOKE(1665) Con sus observaciones postuló el nombre célula para referirse a los compartimentos que encontró en un pedazo de corcho, al observar al microscopio ANTON VAN LEEUWENHOEK (1673) Realizó observaciones de microorganismos de charcas, eritrocitos humanos, espermatozoides. THEODOR SCHWANN (1839) Postuló el primer concepto sobre la teoría celular. Las células son las parte elementales tanto de plantas como de animales. RUDOLF VIRCHOW (1850) Escribió: "Cada animal es la suma de sus unidades vitales, cada una de las cuales contiene todas las características de la vida. Todas las células provienen de otras células".

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6 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS BÁSICAS 1. Selección de la muestra 2. Fijación de la muestra 3. Inclusión de la muestra 4. Corte de la muestra 5. Tinción de los cortes 6. Montaje de los cortes 7. Examen de los cortes con el M.O.

7 La fijación hace que precipiten las proteínas tisulares Fijadores usados - formaldehído al 5% ácido pícrico alcohol,... Objetivo preservar los tejidos de forma similar a su estado in vivo aumentar la dureza de la muestra para facilitar su posterior corte

8 deshidratarla muestra con alcoholes de gradación creciente (50% - 70% - 90% - 100%) pasar la muestra por un disolvente(benzol...) introducir la muestra en parafina líquida hasta que la muestra quede completamente embebida en parafina hacer un bloque de parafina sólida que contenga la Muestra Cortes de 5-10 ìm de grosor Los cortes de la muestra se extienden en un portaobjetos de Objetivo Endurecer la muestra homogéneamente para poder obtener cortes finos de ella Método de inclusión en parafina

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11 corte deshidratado y montado en un portaobjetos desparafinizarlos cortex con xilol rehidratarlos cortes con alcoholes de gradación decreciente (100%...50%... agua) tinción de los cortes con un COLORANTE O MEZCLA DE COLORANTES aclarar el exceso de colorante (agua) deshidratarlos cortes montarlos cortes (resina + cubreobjetos de cristal) corte teñido dispuesto para ser estudiado con el M.O.

12 Tinciones BIOLOGÍA CELULAR Hematoxilina-eosina Azan van Gieson Tinciones argénticas Tinciones histoquímicas PAS tinciones de lípidos histoquímica enzimática inmunocitoquímica

13 Microscopios BIOLOGÍA CELULAR Tipo de microscopio Caracteristicas Imagen Usos principales Microscópio de campo claro Usa luz visible como fuente de iluminación, no puede resolver estructuras pequeñas de alrededor de o.2 micras. Para observar especímenes teñidos y contar microorganismos (no virus). Microscópio de campo oscuro Usa un condesador especial con un disco opaco que bloquea la luz. El especímen aparece iluminado con fondo oscuro. Para trabajar con microorganismos que son invisibles en el microscópio de campo claro, debido a que no se tiñen con facilidad. Se usa frecuentemente para Treponema pallidum. Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7th edition.

14 Tipo de microscopio Caracteristicas Imagen Usos principales Microscopio de contraste de fase. Usa un condensardor especial conteniendo un diafragma en forma de disco y una placa de disfracción en el objetivo. La luz directa reflejada o difraccionada forma la imagen. No requiere de tinción Permite una onbservación detallada de estructuras internas de especímenes vivos. Contrate interferencia diferencial (DIC) Similar al contraste de fase, usa diferentes indices refractivos para producir imágenes. Usa dos vigas de luz separadas por un prisma, el especímen se observa coloreado. No requiere de tinción. Para proveer imágenes de tercera dimensión. Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7th edition.

15 Tipo de microscopio Caracteristicas Imagen Usos principales Fluorescencia Usa como fuente de iluminación luz ultravioleta dando color fluorescente(rojo,verde,amarillo, azul) al especímen y emite luz Para técicas de fluorescencia para una rápida detección e identificación de microorganismos en un tejído o especímen clínico. Confocal Usa luz láser para iluminar un palno de el especímen a un tiempo. Para obtener imágenes de segunda o tercera dimensión de células para aplicación medica. Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7th edition.

16 Tipo de microscopio Características Imagen Usos principales Electrónico Transmisión Usa una viga de electrón en lugar de luz. Pueden observarse estructuras más pequeñas que 0.2 micras. Las imágenes tienen apariencia de segunda dimensión. Para observar virus o ultraestructuras internas en secciones delgadas de células. 10, ,000 X. Escaneo Usa una viga de electrón en lugar de luz. Pueden observarse estructuras más pequeñas que 0.2 micras. Las imágenes tienen apariencia de tercera dimensión. Para estudiar caracteristicas superficiales de células y virus ,000 X. Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7th edition.

17 Tipo de microscopio Caracteristicas Imagen Usos principales Escanedo por sonda Escaneo de efecto túnel Usa una sonda delgas de metal que escanea al especímen y produce una imagen revelando baches y depresiones de atómos en la superficie del especímen. Su poder de resolución es más grande que un microscópio electrónico. No requiere preparación especial. Provee muchos detalles internos de moléculas celulares. Fuerza atómica Usa una sonda de metal y diamante, recorren lentamente la superficie del especímen. Produce imágenes de tercera dimensión. No requiere preparación especial. Provee imágenes de moléculas biológicas detalladas cercanas al átomo y procesos moléculares. Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7th edition.

18 Por qué necesitamos de herramientas histológicas para el estudio de las células? En qué se diferencia una tinción simple de una diferencial? De qué depende la selección de los microscópios para realizar un estudio? Para qué y por qué es necesario utilizar un microtómo?