IC BOVINO IC CAPRINO. Immunochromatrographic test for milk species identification. Test Inmunocromatográfico para la detección de mezclas de leche

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María Isabel San Martín Fuentes
hace 6 años
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1 IC BOVINO IC CAPRINO ZE/ICB ZE/ICB100 ZE/ICC ZE/ICC100 Immunochromatrographic test for milk species identification Test Inmunocromatográfico para la detección de mezclas de leche ZEULAB, S.L. C/ Bari, 25 dpdo Zaragoza (SPAIN) Tel.: Fax:

2 ENGLISH SCOPE IC BOVINO kit is a qualitative test to detect the presence of cow s milk in goat or sheep's milk. The test is an immunoassay based on the detection of bovine immunoglobulins (IgG) in milk and cheese samples. IC CAPRINO kit is a qualitative test to detect the presence of goat s milk in sheep's milk. The test is an immunoassay based on the detection of caprine immunoglobulins (IgG) in milk and cheese samples. KIT COMPONENTS ZE/ICB ZE/ICC ZE/ICB100 ZE/ICC100 Strip tests Dilution solution 1 4 Disposable pipettes 25 - Test tubes 25 - Individual rack 1 - SAMPLES Milk: Whole, skimmed, fresh and pasteurised milk, and whey samples can be used with these kits. Heat treatments over 72ºC/15-20 sec can denaturise milk immunoglobulins and give wrong results with these tests. Therefore, they should not be used with samples treated at higher temperatures. If possible, run the test before the heat treatment. Samples can be stored under refrigeration for 1 or 2 days before the assay. For longer period of time, samples should be frozen at -20ºC and thawed out to reach room temperature before running the assay. Cheese: These tests should be used only with cheese produced with treated milk heated at temperatures below 72ºC /15-20 seconds. 2 G-COM-IC.01 Rev 7

3 ENGLISH Sample preparation: 1- Weigh 5 gr of an homogeneous cheese sample and add 10 ml of distilled water. 2- Mix with a pestle and mortar to obtain a fine homogenised sample and centrifuge at 3000 x g for 10 minutes. Alternatively, the sample can be filtered using a filter paper. 3- The supernatant or the filtered solution will be used for testing. TEST PROCEDURE 1. Place a test tube into the individual round rack provided. 2. Dilute the sample: - Milk samples: mix 5 drops of dilution solution with 1 drop (25 μl) of the milk sample from a disposable pipette and mix gently. - Cheese samples: mix 3 drops of dilution solution with 1 drop (25 μl) of the cheese extract from a disposable pipette and mix gently. Use a new disposable pipette for each sample. 3. Place the strip test into a test tube following the arrows direction. Only the white zone below the arrows must be in contact with the sample. 4. Wait for 10 min. 5. Read the results. NEGATIVE: A BLUE line is observed in the white central zone of the strip test. This line indicates that the test has been run properly. POSITIVE: Two lines, BLUE and RED, are observed in the white central zone of the strip test. G-COM-IC.01 Rev 7 3

4 ENGLISH - To achieve the maximum sensitivity of the test dip the strip into the sample for up to 10 min. - If the red line appears after 15 minutes, the result is considered invalid. - When no line appears on the white central zone the assay could have not been run properly or reagents were damaged. The test must be repeated. DETECTION LIMITS AND STABILITY The kit has a shelf life of 12 months and must be stored bewteen 15 and 25ºC and under dried conditions. The strips are very sensitive to humidity and must be kept inside the container provided with a desiccant bag. - Limit of Detection in milk: 0,5 1% of mixture. - Limit of Detection in cheese: 1-2% of mixture. SAFETY This kit should be used following good laboratory practices. Protective clothing is recommended while running the test. A Material Safety Data Sheet is available on request. IC KIT is an in vitro diagnostic test. In analysis implicating legal processes, the results should be re-evaluated with an official reference method. ZEULAB, S.L. do not assume any legal responsibility. 4 G-COM-IC.01 Rev 7

5 OBJETIVO El test IC BOVINO es un inmunoensayo cualitativo que permite detectar la presencia de leche de vaca en leche de oveja o cabra. El test se basa en la detección de inmunoglobulinas (IgG) bovinas presentes en muestras de leche o queso. El test IC CAPRINO es un inmunoensayo cualitativo que permite detectar la presencia de leche de cabra en leche de oveja. El test se basa en la detección de inmunoglobulinas (IgG) caprinas presentes en muestras de leche o queso. MUESTRAS COMPONENTES ZE/ICB ZE/ICC ZE/ICB100 ZE/ICC100 Tiras reactivas Solución de Dilución 1 4 Pipetas desechables 25 - Tubos de ensayo 25 - Soporte individual 1 - ESPAÑOL Leche: El ensayo puede realizarse con leche entera, desnatada, fresca o pasteurizada y con lactosuero. Tratamientos térmicos a temperaturas superiores a las de pasteurización (72ºC/15-20seg) pueden desnaturalizar las inmunoglobulinas y dar lugar a falsos resultados con este test; de modo que no se recomienda su uso con muestras que hayan recibido tratamientos térmicos elevados. Siempre que sea posible, el test deberá realizarse antes del tratamiento térmico. Las muestras de leche se pueden conservar en refrigeración durante 1 ó 2 días o para periodos de tiempo más largos en congelación (-20ºC). En caso de que la muestra esté congelada, ésta deberá de alcanzar la temperatura ambiente antes de su análisis. G-COM-IC.01 Rev 7 5

6 ESPAÑOL Queso: Este test no es apto para muestras de queso producido con leche tratada a temperaturas superiores a las de pasteurización (72ºC/15-20sec). Preparación de las muestras: 1- Pesar 5 gr de queso troceado y añadir 10 ml de agua destilada. 2- Homogeneizar con un potter de vidrio o un mortero hasta obtener una pasta y centrifugar a 3000 x g durante 10 minutos (la centrifugación puede ser sustituida por filtración en un embudo con papel de filtro). 3- El sobrenadante obtenido de la centrifugación o el filtrado se utilizará para el análisis. PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO 1. Colocar el tubo de ensayo sobre el soporte individual suministrado con el kit. 2. Diluir la muestra en un tubo de ensayo: - Muestras de leche: mezclar 5 gotas del tampón de dilución con 1 gota (25 μl) de la leche problema utilizando una pipeta desechable. - Muestras de queso: mezclar 3 gotas del tampón de dilución con 1 gota (25 μl) del extracto de queso utilizando una pipeta desechable. Usar una pipeta desechable diferente para cada muestra. 3. Introducir la tira reactiva en el tubo de ensayo por el extremo marcado con las flechas, evitando que la muestra alcance la zona de las flechas. 4. Esperar 10 min. 5. Leer el resultado. NEGATIVO: Sólo aparece una línea transversal de color AZUL en la zona central blanca de la tira. Esta línea indica que el test funciona correctamente. POSITIVO: Aparecen dos líneas transversales coloreadas una ROJA y otra AZUL. 6 G-COM-IC.01 Rev 7

7 ESPAÑOL - Para obtener el máximo de sensibilidad y asegurarse de los resultados negativos, la lectura final deberá hacerse pasados 10 minutos. - Las líneas que aparezcan pasados 15 minutos no tendrán valor diagnóstico. - Si no aparece ninguna línea coloreada en la zona central el test será inválido. Esto puede ser debido a una incorrecta realización del test o deterioro de los reactivos. En este caso, se recomienda repetir el test con una nueva tira. LIMITE DE DETECCION Y ESTABILIDAD El kit es estable a temperatura ambiente (15-25ºC) durante un mínimo de 12 meses. La tira reactiva es sensible a la humedad y debe de conservarse siempre en el tubo suministrado y manteniendo en su interior la bolsita desecante. - Límite de detección en leche: 0,5-1% de mezcla. - Límite de detección en queso: 1 2% de mezcla. SEGURIDAD Se recomienda el uso de correctas prácticas de laboratorio y el empleo de ropa y material de laboratorio adecuados. Existe una HOJA DE SEGURIDAD a su disposición, puede conseguirla directamente a través de ZEULAB o su distribuidor habitual. El kit IC es un test de diagnóstico in vitro. Los análisis que pudieran tener una implicación de tipo legal deberían confirmarse mediante un procedimiento oficial y realizarse por duplicado o triplicado. ZEULAB no asume ninguna responsabilidad legal. G-COM-IC.01 Rev 7 7

8 PROCEDURE/PROCEDIMIENTO 1. Mix 5 drops of dilution solution and 1 drop of sample in the test tube placed into the individual rack 1. Mezclar 5 gotas de la solución de dilución y 1 gota de muestra en el tubo colocado en el soporte 2. Place the strip test into the tube and wait 5-10 minutes 2. Introducir la tira reactiva dentro del tubo y esperar 5-10 minutos 3. Results 3. Resultados

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