PNT07BIO0072 MEDICIÓN CON EL NANODROP

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1 PNT07BIO0072 MEDICIÓN CON EL NANODROP 2000 Firma Aprobado Nombre Julián Martínez Fernández Cargo Director SGI Fecha de aprobación: Revisión: 00 PNT07BIO0072. Rev 00 Página 1 de 6

2 ÍNDICE CONTROL DE REVISIONES 2 1.-OBJETO Y ALCANCE DESARROLLO PUESTA EN MARCHA Y USO REALIZACIÓN DEL BLANCO LIMPIEZA DEL PEDESTAL. 5 CONTROL DE REVISIONES Nº Rev/Fecha Naturaleza de la revisión PNT07BIO0072. Rev 00 Página 2 de 6

3 1.-OBJETO Y ALCANCE El objeto del presente PNT es facilitar a los usuarios el procedimiento más adecuado para la utilización del equipo NANODROP 2000 del Servicio General de Biología de la. Su aplicación permitirá llevar a cabo un buen uso del equipo por parte de los usuarios del Servicio. 2.- DESARROLLO PUESTA EN MARCHA Y USO. 1. Haga doble clic en el icono de escritorio softwere NanoDrop 2000 y seleccione la aplicación de intereses. 2. Selecciones el ensayo que vaya a realizar: Nuecleic Acid, Protein A280, etc. 3. Aparecerá en la pantalla el siguiente mensaje: Load last workbook..? Pulsar NO. 4. Una vez realizada esta operación aparecerá el siguiente cuadro de diálogo: Routine verefication of measured wavelengths needs to be done. Make sure the arm is down and click ok to start the verification. A continuación pulsar OK. 5. Establecer un blanco con el tampón adecuado. Tomar 1-2 ul del blanco y depositarla en la parte inferior del pedestal, baje el brazo y haga clic en el botón que indica Blanc. Generalmente se usa como blanco el mismo tampón donde la molécula de interés se haya suspendido o disuelto. PNT07BIO0072. Rev 00 Página 3 de 6

4 6. Limpie el pedestal e introduzca el ID de la muestra en el campo correspondiente. Pipetear 1 ul de la muestra y medir. - Se recomienda siempre tomar una nueva alícuota de la muestra para cada medición. Después de una medición: - Limpie los pedestales de medición con un paño de laboratorio que no suelte pelusa. El instrumento está listo para la siguiente muestra REALIZACIÓN DEL BLANCO. En general se recomienda que una parte alícuota del búfer se medirá como si se tratara de una muestra. Esto confirmará que el instrumento está funcionando bien y la muestra seca desde cualquier medición anterior no es una preocupación. Para ejecutar un Blanking Cycle, realice lo siguiente: 1. Carga una alícuota del blanco sobre el pedestal de medición. 2. Haga clic en el botón Blank para guardar la referencia en blanco. 3. Analizar una réplica del fresco en blanco como si se tratara de una muestra mediante la selección de la medida. El resultado debe ser un espectro que varía no más de 0,04 A (10 nm de absorbancia equivalente) 4. Limpie las superficies de medición, tanto del pie y repetir el proceso hasta que el espectro se encuentra dentro de un 0,04. PNT07BIO0072. Rev 00 Página 4 de 6

5 Aunque no es necesario el blanco entre cada muestra, se recomienda que se tome un nuevo blanco cada 30 minutos a la hora de medir muchas muestras LIMPIEZA DEL PEDESTAL. 1. Aplicar 3-5 ul de dh2o a la parte inferior del pedestal. Nunca use una jeringa para aplicar el agua des-ionizada o ningún otro líquido a la superficie del instrumento. 2. Baje el brazo de la parte superior del pedestal para formar una columna de líquido; dejar que repose durante unos 2-3 minutos. 3. Limpie el agua de la parte superior e inferior del pedestal con un paño seco que no deje pelusas. - Entre medición: Limpie la muestra desde la parte superior e inferior pedestales con un paño limpio y seco, el paño que no suelte pelusa al limpiar, para evitar que arrastre la muestra y evitar la acumulación de residuos. - Entre usuarios: Una limpieza final de la superficie de medición, tanto con dh2o se recomienda después de la medición de la última muestra. - Limpieza adicional: Sustituir HCL 0,5 M para la dh2o en el procedimiento anterior cuando las proteínas se han secado en el pedestal. - Descontaminación - Use una solución desinfectante, como una solución al 0,5% de hypochorite de sodio (1:10 de dilución de la solución de lejía comercial común, recién preparada), para PNT07BIO0072. Rev 00 Página 5 de 6

6 descontaminar los pedestales de medición. A continuación limpiar con 3-5 ul de dh20. El uso de detergentes o alcohol isopropílico no es recomendable, ya que puede afectar a las superficies de medición del pedestal. Si bien se utiliza, es importante seguir con 3-5 ul de dh2o. PNT07BIO0072. Rev 00 Página 6 de 6