TÉCNICAS INTELIGENTES EN BIOINFORMÁTICA. Modelización del quorum sensing en la bacteria Vibrio Fisheri
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- José Luis Alfonso San Segundo Fernández
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1 TÉCNICAS INTELIGENTES EN BIOINFORMÁTICA Modelización del quorum sensing en la bacteria Vibrio Fisheri Mario de J. Pérez Jiménez Grupo de investigación en Computación Natural Dpto. Ciencias de la Computación e Inteligencia Artificial Universidad de Sevilla Máster Universitario en Lógica, Computación e Inteligencia Artificial Curso
2 El fenómeno del Quorum Sensing Quorum sensing: mecanismo de control de expresión de genes en función de la densidad celular 1. Este fenómeno permite a una colonia de bacterias dar una respuesta coordinada. Emisión de luminiscencia (Vibrio Fischeri) Secreción de sustancias viscosas provocando infecciones (Pseudomona aeruginosa, Gram negativa) Liberación de toxinas que matan a organismos que servirán de alimento (Pfiesteria) 1 C.M. Waters, B.L. Bassler. Quorum Sensing: Cell-to-Cell Communication in Bacteria. Annual Review of Cell and Developmental Biology, 21 (2005), / 1
3 La bacteria Vibrio Fischeri (I) Bio luminiscencia: capacidad de los organismos vivos para producir luz visible/perceptible. Vibrio Fischeri: una especie de bacteria bio luminiscente. La primera especie en la que se descubrió y se describió el ACYL-homoserina lactosa (la señal clave en el quorum sensing). 3 / 1
4 La bacteria Vibrio Fischeri (II) Puede vivir: Libremente en el plancton marino. En estado de simbiosis en un calamar (Euprymna scolope) o en ciertos peces. Aunque es poco frecuente, aparece como un patógeno en ciertos invertebrados. 4 / 1
5 La bacteria Vibrio Fischeri (III) Es capaz de producir luz en determinadas condiciones. NO en el plancton. SÍ en simbiosis. La producción de luz en el organismo anfitrión: Atraen a las presas. Permite acciones de camuflaje: Durante la caza nocturna, los órganos de lumniscencia se dirigen al fondo marino eliminando la sombra. 5 / 1
6 La bacteria Vibrio Fischeri (IV) Mecanismo del Quorum Sensing en Vibrio Fischeri (K.H. Nealson y J.W. Hasting, 1979; K.L Visic et al., 2000): 6 / 1
7 La región Lux Box del ADN de la bacteria produce proteína Lux R (que sintetizan receptores) y proteínas Lux I que sintetizan señales OHHL. Ese proceso se produce a niveles basales, con prioridad en el Lux R. Las señales se difunden al entorno (y entran en la bacteria) a través de la membrana plasmática. Cuando la concentración de señales en el interior supera una barrera: El receptor Lux R se una a la señal OHHL formando un complejo Lux R OHHL que actúa como factor de transcripción. Ese complejo enlaza a la región Lux Box provocando: Incremento en la producción de señales y receptores (ahora con prioridad a las señales). La activación de un clúster de 5 genes. 7 / 1
8 Modelo del QS en la bacteria Vibrio fischeri 2 Sistema P multientorno de orden (25, 1, N). donde: ME = (G, Γ, Σ, Π 1, {c r : r R Π1 }, E 1,..., E 25, R E ) G representa la estructura del multientorno (25 entornos). Γ = {LuxR, LuxR.OHHL, LuxBox, LuxR.OHHL.LuxBox, OHHL}. E i =, para i = 1,..., 25. Π 1 = (Σ, L, µ, M 1, R Π1 ) L = {b}. µ = [ ]. M 1 = {LuxBox}. donde: 2 F.J. Romero, M.J. Pérez-Jiménez. A model of the Quorum Sensing System in Vibrio Fischeri using P systems. Artificial Life, 14, 1 (2008), / 1
9 Estructura del sistemas P multicompartimental 9 / 1
10 Reglas de los sistemas Π 1 (bacterias): R Π1 r 1 : [ LuxBox ] b c 1 [ LuxBox + OHHL ]b r 2 : [ LuxBox ] b c 2 [ LuxBox + LuxR ]b r 3 : [ LuxR + OHHL ] b c 3 [ LuxR.OHHL ]b r 4 : [ LuxR.OHHL ] b c 4 [ LuxR + OHHL ]b r 5 : [ LuxR.OHHL + LuxBox ] b c 5 [ LuxR.OHHL.LuxBox ]b r 6 : [ LuxR.OHHL.LuxBox ] b c 6 [ LuxR.OHHL + LuxBox ]b r 7 : [ LuxR.OHHL.LuxBox ] b c 7 [ LuxR.OHHL.LuxBox + OHHL ]b r 8 : [ LuxR.OHHL.LuxBox ] b c 8 [ LuxR.OHHL.LuxBox + LuxR ]b r 9 : [ OHHL ] b c 9 OHHL [ ]b c r 10 : [ OHHL ] 10 b [ ]b c r 11 : [ LuxR ] 11 b [ ]b c r 12 : [ LuxR.OHHL ] 12 b [ ]b 10 / 1
11 Representación gráfica de las reglas en las bacterias 11 / 1
12 Reglas de los entornos: R E c r 13 : OHHL [ ] 13 b [ OHHL ]b c r 14 : [ OHHL ] 14 ei [ ]ei r 15 : [ OHHL ] ei [ ] ej e c 15 [ ] ei [ OHHL ] ej c r 16 : [ [ ] b ] ei [ ] 16 ej [ ]ei [ [ ] b ] ej Constantes estocásticas asociadas a las reglas: c 1 = 2, c 2 = 2, c 3 = 9, c 4 = 1, c 5 = 10, c 6 = 2, c 7 = 250, c 8 = 200, c 9 = 50, c 10 = 30, c 11 = 20, c 12 = 20, c 13 = 1, c 14 = 5, c 15 = 8, c 16 = / 1
13 Resultados y Discusiones El modelo descrito ha sido representado en SBML, Systems Biology Markup Language 3. El código SBML fue generado usando CellDesigner 4. Semántica basada en el algoritmo multicompartimental de Gillespie. Las simulaciones han sido ejecutadas usando un programa escrito en C con un fichero de entrada SBML especificando nuestro modelo. Se ha estudiado la conducta emergente del sistema para poblaciones de diferente tamaño, a fin de examinar cómo las bacterias pueden percibir la densidad celular. 3 SBML Web Site 4 Cell Designer Web Site 13 / 1
14 En primer lugar, hemos considerado una población de 100 bacterias. Evolución en el tiempo del número de bacterias quoratadas y el número de señales OHHL en el entorno: Quorated Bacteria OHHL molecules time time Número de bacterias excitadas (izquierda) y señales en el entorno (derecha) 14 / 1
15 Correlación entre el número de señales en el interior de una bacteria (izquierda) y la ocupación del LuxBox por el complejo (derecha): OHHL 12 LuxBox occupied Time Time Número de señales y ocupación del LuxBox en una bacteria 15 / 1
16 Evolución del número de aplicaciones de la regla que representa la producción basal (izquierda) y la regla que representa la producción masiva de señales (derecha) Number of Applicattions Number of Applications time time Número de aplicaciones de las reglas r 1 y r 7 en una población de 300 bacterias r 1 : [ LuxBox ] b c 1 [ LuxBox + OHHL ] b r 7 : [ LuxR.OHHL.LuxBox ] b c 7 [ LuxR.OHHL.LuxBox + OHHL ] b 16 / 1
17 Se analiza cómo las bacterias perciben el número de individuos de la colonia, examinando el comportamiento de una población de 10 bacterias. Quorated Bacteria OHHL Time 0 Time Bacterias excitadas y señales en el entorno en una población 10 bacterias En este caso, la señal no se acumula en el entorno. Sólo una bacteria es excitada conjeturando mal el tamaño de la colonia. 17 / 1
18 Se analiza el comportamiento de la bacteria que fue excitada. La producción masiva de señales pasaban al entorno por difusión, en donde no habían sufientes bacterias para percibirlas. Cuando la bacteria percibe que la señal no se acumula en el entorno, entonces modifica su comportamiento y pasa a baja-regulación. OHHL BACTERIUM 2 LuxBox occupied BACTERIUM Time 0.0 Time Comportamiento de la bacteria en una población de 10 bacterias 18 / 1
19 Finalmente, se observa que la población de 10 bacterias permanece en un estado de baja regulación. Number of Applications [ LuxBox ]b > [ LuxBox, OHHL ]b Number of Applications [ LuxBox LuxR OHHL ]b > [ LuxBox LuxR OHHL, OHHL ]b Time Time Número de aplicaciones de las reglas r 1 y r 7 en una población de 10 bacterias 19 / 1
20 Los resultados que se deducen de nuestro modelo están de acuerdo con los resultados que se han obtenido experimentalmente en el laboratorio 5. Nuestra aproximación, usando sistemas P multientorno con semántica derivada de una extensión del algoritmo de Gillespie, confirma la habilidad del sistema computacional para detectar conductas emergentes. 5 E.P. Greenberg, H.B. Kaplan, H.B. Overproduction and purification of the luxr gene product: Transcriptional activator of the vibrio fischeri luminescence system. Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, 84 (1997), / 1
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