UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR FACULTAD DE INGENIERIA PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL LABORATORIO No 1 EL MICROSCOPIO

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1 UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR FACULTAD DE INGENIERIA PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL LABORATORIO No 1 EL MICROSCOPIO OBJETIVOS Identificar y reconocer cada una de las partes del microscopio y su función, mediante la descripción dada. Adquirir habilidad en la realización de montajes húmedos. MATERIALES Portaobjetos, cubreobjetos, gotero, hilos de colores, tijeras, periódico, revistas, agua de charco (coloración verde), colores, hoja de examen cuadriculada, papel absorbente, marcador. PRE LABORATORIO Realice un cuadro comparativo entre las clases de microscopio explicando sus diferencias Utilizando un diagrama explique el sistema de lentes fundamentales para el principio óptico del microscopio compuesto. Porque razón el objetivo de inmersión debe sumergirse en un liquido especial (aceite de cedro) para poder observar la imagen del microscopio? Enumere las diferencias entre un montaje húmedo y un montaje seco. MARCO TEÓRICO. El hombre llevado por el afán de revelar el misterio de ciertos milagros, se atrevió a penetrar en regiones habitadas por enemigos, seres invisibles. Un mundo cuyo conocimiento es en definitiva más importante para el verdadero bienestar de la estirpe humana, un mundo que nos llevo no solo a conocer diferentes microorganismos, también estructuras que conforman nuestro cuerpo y el de otros sistemas vivos; cuando en la humanidad nace el deseo de investigación científica, aparecen instrumentos como el MICROSCOPIO. El MICROSCOPIO, es un aparato óptico mecánico, el cual permite aumentar el tamaño de estructuras invisibles al ojo humano. Fue inventado por Hans y Zacarías Janssen, pero reconocido por el gran fabricante e investigador Antón Van Leuwenhoek. Hay diferentes variedades de microscopio pero en nuestra práctica vamos a trabajar con el microscopio fotonico, básicamente todos los microscopios cuentan con tres sistemas que son: Sistema Mecánico Sistema Optico Sistema De Iluminación Sistema Mecánico.

2 Base o Pie: estabilidad al microscopio gracias a su peso. Brazo o Columna: prolongación superior del pie, mango del cual se sostienen y transporta el microscopio; sirve de sostén para otros elementos. Platina: es una superficie plana que lleva un orificio central (el cual deja pasar la luz), sobre este se coloca la lamina portaobjetos, la cual se sujeta mediante pinzas a un carro móvil Tubo Optico: puede ser recta o inclinada, tiene soporte o brazo que se une a la platina y a la base del microscopio, proporciona sostén a los objetivos y al ocular. Reglillas: colocadas en el área superior de la platina, determinan las coordenadas X,Y, las cuales permiten la localización de un punto dado en la preparación. Sistema de Enfoque: consta de dos tornillos que accionan una cremallera y permiten ajustar la distancia requerida o distancia de trabajo, según el objetivo que se emplee, mediante el desplazamiento del tubo óptico, o de la platina en algunos modelos se diferencian dos tornillos. Tornillo Macrometrico, permite enfocar la imagen. Tornillo Micrométrico, más pequeño, de movimiento rápido y ajuste fino, permite dar nitidez a la imagen. Portaobjetivos o Revolver: dispositivo metálico el cual lleva dos, tres, cuatro o cinco objetivos y mediante un movimiento giratorio permite cambiar de objetivo. Sistema Óptico. Condensador: se localiza debajo de la platina consta de una lente convergente que recoge los rayos de luz y los concentra en el plano de la muestra mejorando la iluminación sobre la preparación. Objetivo: localizados hacia la parte media del aparato, producen una imagen ampliada del objeto (lente frontal) y esta imagen intermedia es captada (lente media) y sufre una nueva ampliación por el ocular (lente superior). Los objetivos se clasifican en seco y de inmersión. - Objetivos Secos: son los que se emplean más corrientemente, entre la lente frontal y el cubreobjetos solo hay aire, generalmente hay de menor aumento (10X) y de mayor aumento (40X). - Objetivo de Inmersión: debe interponerse entre la lente frontal y la preparación un líquido que por su índice de refracción apropiado permita un mayor grado de luminosidad. Este líquido puede ser agua, aceites, glicerina, el mas utilizado es el aceite de cedro. Prismas: la porción media de los microscopios modernos contienen prismas en su interior y su función es proyectar la imagen formada por el objetivo sobre el plano ocular. Ocular: localizado en la parte superior del aparato formado por un sistema de lentes. Es el punto de mira del observador, aumenta la imagen dada por el objetivo, el ocular corriente es de 10X.

3 Sistema De Iluminación Lámpara eléctrica. Filtros: cristales de colores que nos ofrecen luz la cual viabiliza la observación microscópica. Diafragma: se localiza inmediatamente debajo del condensador regula la cantidad o intensidad de la luz que debe ir a la preparación, por cierre o abertura del mismo. Distancia Frontal o Distancia de Trabajo. Es el espacio que existe entre la superficie del lente del objetivo y la laminilla, una vez se encuentre enfocada la preparación. A mayor aumento del objetivo, disminuye la distancia de trabajo, los microscopios con lentes parafocales poseen un sistema de enfoque a diferentes aumentos. Así, una vez enfocada la preparación a menor aumento, queda enfocada al utilizar al objetivo de mayor aumento. Para un ajuste mayor se debe mover ligeramente el tornillo micrométrico. Principios Ópticos. Toda lente o sistema de lentes que interpuesto entre un objeto próximo al ojo, permite observar aquel de un tamaño mayor y con detalles no visibles a simple vista se le considera un microscopio. El microscopio compuesto consta de dos sistema de lentes convergentes y la imagen del objeto observado a través de el es real, invertida y muy aumentada. Poderes del Microscopio. Se podría pensar que al emplear lentes adicionales se lograrían mayores aumentos, pero en la formación de la imagen no solo importa la ampliación, se requiere que la imagen sea nítida, para lo cual es necesario combinar los diferentes poderes del microscopio, como son: Poder de Aumento: permite magnificar la imagen, en general el aumento (A), esta dado por la relación: A = Tamaño De La Imagen Tamaño Del Objeto En el microscopio compuesto, el aumento total es igual al producto del aumento del objetivo por el aumento del ocular. A. total = A. del objetivo x A. del ocular Poder de Resolución: se refiere a la capacidad de un sistema óptico de presentar dos puntos próximos distintos o separados; se especifica por la distancia mínima en que se logra diferenciar esos dos puntos. Poder de Definición: permite formar imágenes claras con contornos definidos. Poder de Profundidad de Campo o Penetración de Foco: permite observar varios planos en un mismo enfoque.

4 PROCEDIMIENTO Identificación de las partes del microscopio: Con el microscopio que tiene a su disposición, localice e identifique las partes de este, teniendo en cuenta el fundamento teórico. Preparación de un montaje húmedo: Sobre la lamina portaobjetos limpia coloque una gota de agua, dentro de la gota coloque el objeto que se va a observar. Para nuestro ejercicio se utilizaran: letras en blanco y negro, a color e hilos de diferentes colores. Coloque la laminilla sobre el portaobjetos en posición oblicua y apoyando una arista, sobre el portaobjetos, al lado de la gota, déjela caer suavemente sobre la gota. Evite que se formen burbujas de aire. La preparación debe quedar completamente cubierta y embebida por el liquido, evite el exceso de agua, (o de colorante, en preparación coloreadas), en los bordes de la laminilla o sobre esta, retire el exceso con papel absorbente, no olvide con un lápiz de cera marcar la lamina al lado derecho; antes de colocar la lamina sobre la platina, fíjese que esté completamente seca en la parte inferior. Si se ve que la preparación se esta deshidratando, agregue unas gotas de agua por el borde de la laminilla. Enfoque visual a menor aumento: La preparación se coloca sobre la platina y se fija con las pinzas. Centrada en la platina y mirando por fuera, acerque el objetivo de menor aumento en la lamina, girando el tornillo macrométrico, hasta que quede a una distancia ligeramente menor que la distancia de trabajo (aproximadamente 5mm). Ahora enfoque a través del ocular, subiendo lentamente el objetivo (o retirando la platina segur el microscopio) hasta ver la imagen del preparado. Una vez obtenida la imagen complete el enfoque con el tornillo de ajuste fino (el micrométrico), si es necesario gradué la intensidad luminosa, ajustando la apertura del diafragma y la altura del condensador, si el condensador es fijo, varíe la distancia de luz. Evite la sobre iluminación. Esquematice la observación asegúrese de no aumentar detalles que no corresponden. Enfoque visual a mayor aumento: Una vez observada la preparación a menor aumento, pase a posición de trabajo de mayor aumento, girando suavemente el revolver. Si la lente tropieza con la preparación, levante el objetivo empleando el tornillo macrométrico, y proceda como en el caso anterior, observando por fuera y no a través del ocular. (En este caso la distancia al cubreobjeto es de menos de un mm). Enfóquela imagen con el tornillo micrométrico, siempre alejando el objeto de la preparación.

5 Una vez observada la preparación con la letra, dibuje anotando el aumento correspondiente, repita el procedimiento con los hilos de colores y diferentes letras también a color. Enfoque visual con el objetivo de inmersión: Coloque una gota muy pequeña de aceite de inmersión sobre la laminilla (si la preparación es un extendido fijado al calor, coloque una gota de aceite de inmersión directamente sobre la lamina en nuestro ejercicio se utilizara el frotis de sangre) proceda como en el caso anterior, teniendo en cuenta que la distancia de trabajo es menor con el objetivo de inmersión y se requiere mayor intensidad de luz. Adecue el condensador de acuerdo a las necesidades. Esquematice la observación. Inicie sus observaciones con el objetivo de menor aumento, el cual le brindara una imagen panorámica amplia y con mayor profundidad de foco. Luego pase a mayor aumento y precise las estructuras. Siéntese en posición correcta y cómoda para observar y dibujar. Los dibujos deben ser claros y deben guardar proporciones. Acostúmbrese a observar con ambos ojos abiertos esto le evitara fatiga ocular. Recomendaciones para el cuidado del microscopio. Cuidadosamente llene la hoja de inventario de los datos correspondientes al microscopio asignado. Familiarícese con el microscopio y antes de usarlo revise si todas las partes se encuentran limpias y en buen estado. Si presenta algún daño avise inmediatamente al profesor. No enfoque a mayor aumento guiando el tornillo Macrométrico y mirando simultáneamente a través del ocular; puede fácilmente romper la preparación. Una vez realizada la observación limpie con papel de lentes los objetivos, utilice papel para lentes no use pañuelo. En las preparaciones de montaje húmedo o coloreadas, no debe quedar liquido sobre la lamina o debajo de ella. Las preparaciones no deben tocar la lente frontal de los objetivos. Al colocar o retirar una lamina el objetivo de menor aumento debe estar en posición de trabajo. Cuando utilice micropreparados fíjese que la laminilla quede en la cara superior de la lámina, es decir mirando hacia el objetivo. Mantenga seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama algún líquido séquelo utilizando la bayetilla o el papel absorbente. Limpie siempre el objetivo de inmersión después de usarlo, solo con papel para lentes. No debe retirar ningún componente óptico o mecánico del microscopio, ni intercambiar los oculares. Una vez utilizado el microscopio, debe quedar limpio y con el objetivo de menor aumento en posición de trabajo.

6 Para transportar el microscopio, tómelo del brazo del aparato con una mano y con la otra de la base, siempre en posición vertical, pues al voltearlo se puede caer una de las lentes o el espejo. POST LABORATORIO Cuales diferencias encuentra en el enfoque entre los diferentes objetivos. En el momento del enfoque si cree estar manejando demasiada luminosidad, que haría?, justifique su respuesta. Cuales ventajas encuentra en un montaje húmedo y cual en un montaje seco. Porque se ven las imágenes invertidas en el microscopio Que función cumple el aceite de inmersión en microscopia óptica?