Calidad de Semillas de Soja
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- Trinidad Ayala del Río
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1 Calidad de Semillas de Soja Ings. Agrs. Miriam Raquel Arango y Roque Mario Craviotto INTA Oliveros, Santa Fe Poderosas herramientas han surgido para evaluar la calidad de las semillas de soja, atributo determinante del éxito económico de la empresa agropecuaria Se entiende por calidad de semillas a una serie de cualidades que deben reunir en conjunto y no en forma aislada; en general las semillas que poseen alta calidad presentan un alto grado de pureza botánica, bajo contenido de humedad, alta sanidad, alta viabilidad, alto vigor, bajo nivel de daño mecánico, buen tamaño, buen peso, alto grado de uniformidad y buena apariencia. El nivel de calidad se establece mediante análisis especiales. La comercialización nacional e internacional de semillas de soja se lleva a cabo sobre la base del análisis de Germinación Estándar conocido también como Poder Germinativo, esta es una de las pruebas más usadas; la misma demanda entre 5 a 8 días para la producción de las plántulas que luego serán evaluadas de acuerdo con el criterio de manuales de evaluación específicos. En este caso, el valor de germinación obtenido en condiciones totalmente controladas, puede que no refleje la emergencia de campo, especialmente en condiciones subóptimas o de estrés. En la actualidad hay modernos métodos que permiten determinar el valor de vigor, entre ellas, la prueba topográfica por tetrazolio, la de conductividad eléctrica y la de envejecimiento acelerado. Estas dos últimas brindan la posibilidad de obtener los resultados en 24 horas o menos. PRUEBA TOPOGRÁFICA POR TETRAZOLIO Se trata de un instrumento de diagnóstico que muestra detalles importantes como la obtención rápida de valores de potencial de germinación, vigor e identificación de daños mecánicos, del ambiente, de chinches, por calor y por heladas. Su aplicación muestra la diferencia entre tejidos vivos y sanos, débiles, deteriorados y muertos por distinta coloración. Las semillas se pueden clasificar según un patrón de clases acorde con la intensidad de color, la consistencia de los tejidos y la localización de las distintas áreas deterioradas o sanas. Se basa en las propiedades de la sal 2,3,5 cloruro de trifenil tetrazolio que en solución acuosa es incolora y en los tejidos vivos de la semilla se transforma en una sustancia no difusa, de color rojo que se denomina " formazan". La concentración de tetrazolio, la temperatura y tiempo de reacción utilizada en el método como así también otros factores como ph, luz pueden afectar la coloración de los tejidos, siendo muy importante indicar las condiciones en que se lleva a cabo la prueba. Para semilla de soja con una concentración de 0.075% de la sal, el color rosado pálido caracteriza a un tejido 24
2 sano; los deteriorados muestran una coloración roja intensa con motivo de la mayor actividad respiratoria y los tejidos muertos no se colorean, quedan blancos. En ocasiones los tejidos muy sanos muestran una falta de coloración o un color blanco brillante pero siempre acompañada de una muy buena consistencia que los diferencia de los tejidos muertos que presentan color blanco opaco y muy poca consistencia. Una importante particularidad de esta técnica es la posibilidad de realizar un diagnóstico de la calidad de la semilla dentro de un período de 24 horas. En la actualidad se logró acortar el período de duración de la prueba, que puede realizarse en un tiempo menor dentro del mismo día de iniciado el análisis. Esta modificación evita el preacondicionamiento de la muestra que demandaba de 16 a 18 horas de imbibición en papel toalla. La prueba requiere de un personal capacitado, que tenga perfecto conocimiento de las estructuras anatómicas tanto de la semilla seca de la especie que se va a evaluar como así de los órganos que estas pequeñas estructuras originarán durante la germinación. LA PRUEBA EN LOS DAÑOS En el daño mecánico, aplicando esta prueba en las distintas etapas de producción, se puede saber la magnitud de la lesión e identificar qué maquinaria en particular la está produciendo para disminuirla o evitarla. Prueba Topográfica por Tetrazolio: Daño Mecánico En el daño de la chinche se puede estimar el momento en que se produjo el ataque, brinda información sobre la efectividad del tratamiento y determina si este fue realizado en el momento oportuno. Prueba Topográfica por Tetrazolio: Daño de Chinche En el daño por heladas se reconoce la lesión porque las semillas afectadas pueden quedar de color verde, presentar una coloración rojo oscuro y los tejidos adquirir una consistencia acuosa. Los daños por efecto del calor se reconocen porque los tejidos permanecen sin tinción, flácidos y con una coloración blanco opaco. Además se puede caracterizar por una grieta transversal en la parte media de los cotiledones. El daño producido por el ambiente merece una mención especial por la magnitud en que se manifiesta en las últimas campañas como consecuencia de las condiciones climáticas imperantes, ya que en algunos materiales genéticos la muestra remitida al laboratorio presenta diversas características, entre ellas, semillas totalmente arrugadas y abolladas. Tradicional Este fenómeno se origina cuando el proceso de llenado del grano en la chaucha coincide 25
3 con un severo estrés hídrico en el suelo y temperaturas ambientales superiores a 30ºC, interrumpiéndose el ritmo de llenado del grano de manera que no se puede recomponer aun cuando las condiciones estresantes cambien y se tornen favorables. Los cultivares que poseen períodos de llenado muy corto serán siempre los más afectados por este fenómeno climático estresante. La aplicación de la Prueba por Tetrazolio a muestras de semillas con distintas particularidades permitió corroborar que el daño ambiental sufrió intensificación y ampliación del patrón de daño característico. Las observaciones realizadas en semillas de soja cosechadas y trilladas en forma manual, para deslindar del análisis toda posibilidad de ocurrencia de daño mecánico, permitieron detectar nuevas manifestaciones del daño ambiental. Estas son: - En la zona central de los cotiledones correspondiente al PIT (depresión en la superficie externa de los cotiledones) compuesto por un grupo de células especializadas, en oposición directa al "antipit" del tegumento, que es una camada de células en la superficie ventral del tegumento; aparición de un área muy marcada y deteriorada o muerta. Está acompañada, a veces, por bandas ascendentes de tejido deteriorado o muerto, continúas o no, hacia la zona de unión de los cotiledones con eje radícula hipocótilo. con el eje radícula hipocótilo. Presencia de tejido deteriorado o muerto en estas mismas zonas; este se manifiesta en profundidad en el interior del cotiledón. - Presencia de áreas en forma de bandas deterioradas o muertas, extendiéndose hacia la zona proximal y distal de uno o ambos cotiledones. - Presencia de áreas deterioradas o muertas de distinta extensión en la zona central de uno o ambos cotiledones. - Presencia de áreas deterioradas en proximal y/o distal del cotiledón pero solo en su interior. - Aparición de áreas más o menos extendidas de tejido deteriorado o muerto en proximal o distal a la zona de unión de los cotiledones - En una misma semilla pueden coexistir daños no tradicionales y tradicionales como garras o bandas continuas de tejidos deteriorados o muertos, homólogas en los cotiledones. 26
4 soja para nuestro país, desde hace varios años se recomienda y utiliza la técnica de conductividad eléctrica individual para detectar niveles de calidad en lotes de soja. Partes constituyentes del equipo SAD 900-S Esta descripción detallada de la sintomatología constituye a nuestro criterio un paso muy importante en la redefinición del daño causado por el ambiente de producción de simiente de soja. Ello no significa que los patrones de daño utilizados hasta el presente dejen de tener vigencia, sino por el contrario que en el futuro estos nuevos patrones deberán incluirse en el patrón tradicional. PRUEBA DE CONDUCTIVIDAD ELÉCTRICA Esta prueba estima la germinación y el vigor de las semillas sobre la base de la medición de la liberación de electrolitos al medio como consecuencia del estado de integridad de las membranas celulares, las semillas deterioradas o muertas liberan al medio mayor cantidad de electrolitos que las sanas y vigorosas. En la Argentina se dispone del SAD 9000-S, un equipo de ultima generación para la medición de conductividad eléctrica de semillas individuales, que cuenta con un software de gran utilidad para la presentación e interpretación de datos. Este sistema ha sido desarrollado en forma conjunta entre la Estación Experimental Agropecuaria Oliveros del INTA y la empresa Consultar Ingeniería e Informática de Rosario, provincia de Santa Fe. Cuando en el 2002 se actualizaron las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas (ISTA), se incorporó un capítulo específico para vigor donde se validaron los métodos de conductividad eléctrica masal para arveja y el de envejecimiento acelerado para soja. Dada la importancia económica que tiene la ENVEJECIMIENTO ACELERADO Es una de las técnicas más utilizadas en soja para evaluar el vigor tanto en la Argentina como en Brasil. Esta prueba se utilizó en un principio para medir el potencial de almacenamiento de los lotes de semillas y luego para medir el vigor de lotes, es decir la capacidad de las semillas de germinar en condiciones subóptimas o de estrés. Se fundamenta en someter a las semillas a condiciones totalmente opuestas a un buen almacenamiento, esto es alta temperatura (41ºC), alta humedad relativa (cercana al 100%) y tiempo (72 horas), en minicámaras o cámaras especiales de envejecimiento acelerado. Luego, las semillas se someten a una prueba de germinación estándar durante 7 días en cámaras de germinación y se evalúan las semillas germinadas en normales y anormales, según el criterio ISTA. El resultado se expresa como porcentaje de semillas vigorosas y se puede utilizar para comparar lotes de semillas y decidir su destino. CONCLUSIONES Si bien todas estas pruebas y otras sugeridas y recomendadas para la especie son muy importantes, cuando se trata de evaluar la calidad y distinguir niveles de calidad entre lotes de simiente de soja se debe tener en cuenta que ninguna de ellas es de por sí definitoria. Es decir que para un diagnóstico avanzado y preciso, hay que recurrir necesariamente a confrontar los resultados de diferentes pruebas con el fin de alcanzar el mejor diagnóstico posible. Cada una de estas 27
5 Semillas de soja en fincaras de Envejecimiento Acelerado Cámara Múltiple de Envejecimiento Acelerado pruebas extrae del lote de simiente una información que no es lograda por cualquier otra y solamente a través de su complementación es posible tomar decisiones confiables y elegir el destino del lote. Bibliografía Arango,M.R.; Salinas,A.R.; Craviotto, R.M.;Yoldjian,A.M. Estimación de la germinación en soja a través de la conductividad eléctrica.actas XII Congreso Brasilero de Semillas Curitiba- Brasil ASSOCIATION OFFICIAL SEED ANALYSTS.AOSA. Seed Vigor Testing Handbook, Contribution Nº 32 to de Handbook on Seed Testing. 93 p Craviotto, R.M.; Fared,M.; Montero, M. Prueba Topográfica por Tetrazolio. Patrones para la especie soja. INTA EEA Oliveros. ISSN , p. Hampton,J.G. and TeKrony D.M. Handbook of Vigour Test Methods. ISTA. Zurich, Switzerland p. Reglas Internacionales para Análisis de Semillas, Reglas ISTA Seed Sci. & Technol, 24 Suplement. Zurich, Switzerland. 28
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