WESTERN BLOT TECHNIQUE STANDARDIZATION OF THE DIAGNOSIS OF HUMAN FASCIOLOSIS USING Fasciola hepatica EXCRETED-SECRETED ANTIGENS.

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1 ARTÍCULO ORIGINAL ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE WESTERN BLOT PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA FASCIOLOSIS HUMANA UTILIZANDO ANTIGENOS DE EXCRECIÓN-SECRECIÓN DE Fasciola hepatica Hermes Escalante RESUMEN Objetivos. Western blot Fasciola hepatica - Materiales y métodos. Minimum Essential Eagle pool de sueros de Western blot Resultados Conclusiones. Palabras clave WESTERN BLOT TECHNIQUE STANDARDIZATION OF THE DIAGNOSIS OF HUMAN FASCIOLOSIS USING Fasciola hepatica EXCRETED-SECRETED ANTIGENS ABSTRACT Objectives.Western blot Fasciola hepaticamaterials and methods. Results. Conclusions. Key words INTRODUCCIÓN Fasciola hepatica (F. hepatica) que permiten ubicarla como la segunda parasitosis el ovino y bovino a b c d

2 Western blot en fasciolasis humana rasitaria de gran impacto en humanos en el mundo parasitados por Fasciola hepatica - gitudinal y altitudinal a nivel mundial - del Sur el número de casos humanos en el Perú - zonas ganaderas con las mayores poblaciones de gana- - - corresponde a la etapa migratoria del parásito en el - pruebas serológicas de gran ayuda en la detección de esta parasitosis F. hepatica ser positiva aunque los exámenes coproparasitoscópi- en los conductos biliares - tica hepático de heces son positivos - F. hepatica prepatente y crónica baja sensibilidad de los exámenes coproparasitoscópicos - genos empleados - F. hepatica son considerados potentes inductores de la respuesta en el inmunodiagnóstico - - ) - Western blot - parasitosis Western blot la cisticercosis y la hidatidosis centro de salud aportando una mejora en el diagnóstico - el presente estudio estuvo orientado a estandarizar la Western blot Fasciola hepaticacamente relevantes y evaluar el valor diagnóstico de la

3 Escalante H et al. MATERIALES Y MÉTODOS Fasciola hepatica. in vitro medio mínimum essential eagle F. hepatica - - lavaron los parásitos con buffer - ejemplares de F. hepatica quien obtuvo dicho material durante el desarrollo de la dos correlativamente para el desarrollo de la investiga- - Los sueros de pacientes con otras parasitosis se Western blot se realizó - se hizo usando un buffer -

4 Western blot en fasciolasis humana Fasciola hepatica Fasciola hepatica Fasciola hepatica Fasciola hepatica Fasciola hepatica Fasciola hepatica Fasciola hepatica Figura 1 Fasciola hepatica reconocidos por Western blot usando un pool de sueros de pacien- Tween en agitación constante a temperatura ambiente por una Tween- - RESULTADOS pool Figura 2 Fasciola hepatica Western blot

5 Escalante H et al. A : Sueros de pacientes con triquinosis D : Sueros de pacientes con toxoplasmosis E : Sueros de pacientes con cisticercosis H : Sueros de pacientes con taeniosis L : Sueros de pacientes con estrongiloidiosis Figura 3Western blot Fasciola. hepatica reconocidos por sueros con Western blot - - Tabla 1 Western blot Fasciola hepatica para la detección de anticuerpos en Valor (IC 95 %) Razón de verosimilitud -

6 Western blot en fasciolasis humana - - DISCUSIÓN inducir la respuesta inmune Se sabe que el parásito encontrado en el tegumento del parásito unos gránulos y maduro respectivamente encontrado que estas estructuras poseen componentes in vitro y los excretados por el parásito in vivo humana y animal - Western blot para el posteriormente humana - mientras que utilizando sueros de humanos encontra- De las seis bandas detectadas se han considerado - por otros investigadores En estudios realizados tectaba en los sueros desde la primera semana de ovoposición está presente en todos los sueros que dieron reacción - - presentes en los estadios inmaduros y adultos del trematodo las más importantes en la respuesta inmune tradas en el presente trabajo de investigación no son diendo dar reacciones cruzadas debido a que poseen - F. hepatica cuales se reporta reacción cruzada con sueros de ani- Schistosoma mansoni y Trichinella spiralis Western blot F. hepatica Western blot jos F. hepatica

7 Escalante H et al. Paragonimus Schistosoma Clonorchis Opistorchis para evaluar la reacción cruzada con F. hepatica; sin Paragonimus Western blot excreción-secreción de Fasciola hepatica cuenta con AGRADECIMIENTOS - Contribuciones de autoría recolección de muestras y en la realización de las pruebas Fuentes de nanciamiento Con ictos de interés REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Marcos LA, Terashima A, Samalvides F, Miranda E, Tantaleán M, Espinoza J et al. - - Fasciola hepatica 2. Mas-Coma MS, Esteban JG, Bargues MD. Epidemiologia 3. Mas-Coma S mic areas 4. Marcos LA, Terashima A, Leguía G, Canales M, Espinoza JR, Gotuzzo E. Fasciola hepatica en el 5. Esteban JG, Bargues MD, Mas-Coma S. 6. Esteban JG, Flores A, Angeles R, Mas-Coma MS High 7. Bjorland J, Bryan RT, Strauss W, Hillyer G, Mcauley J 8. Marcos L, Maco V, Florencio L, Terashima A, Samalvides F, Miranda E, et al Esteban JG, Gónzalez C, Bargues MD, Angeles R, Sánchez C, Náquira C, et al Mas-Coma S, Angeles R, Esteban JG, Bargues MD, Buchon P, Franken M, et al. Trop Med 11. Espinoza JR, Terashima A, Herrera-Velit P, Marcos LA - Rev Peru Med Exp Salud 12. Li O, Leguía G, Espino A, Duménigo B, Díaz A, Otero O. tico de Fasciola hepatica Marcos LA, Yi P, Machicado A, Andrade R, Samalvides F, Sánchez J, et al. Fasciola hepatica 14. Timoteo O, Maco V, Neyra V, Yi PJ, Leguía G, Espinoza JR. Fasciola hepatica 15. Cornejo H, Oblitas F, Cruzado S, Quispe W. Evaluación Fasciola hepatica 16. Espinoza JR, Maco V, Marcos L, Sáez S, Neyra V, Terashima A, et al Fasciola hepatica 17. Rivera Marrero CA, Santiago N, Hillyer GV immunodiagnostic antigens in the excretory-secretory pro-

8 Western blot en fasciolasis humana 18. Carnevale S, Rodríguez MI, Santillan G, Labbe JH, Cabrera MG, Bellegarde EJ, et al Espino AM, Duménigo BE, Fernández R, Finlay CM. immunosorbent assay using excretory-secretory products 20. Diaz A, Li-Elias O, Otero O, Garcia C, Espino AM. - Western blot F. hepatica experimentalmente. 21. Colmenares C, Méndez L, Díaz-Bello. creción-secreción de Fasciola hepatica aplicación en inmunodiagnóstico Espino AM, Diaz A, Perez A, Finlay CM. antigenemia and coproantigens during a human Fasciola hepatica 23. Maco V, Marcos L, Terashima A, Samalvides F, Miranda E, Espinoza J, et al. - Fasciola hepatica 24. Cruz O, Pérez MT, Lubián AL, Montano L, Silva E. oral y orina como muestras alternativas en el diagnóstico 25. Saavedra H, Gonzales, Alvarado M, Porras M, Vargas V, Cjuno RA, et al ticercosis en el Perú 26. Sarimehmtoglu HO. Fasciola hepatica in cattle using excre- 27. Bradford M. protein-dye binding 28. Tsang V, Hancock K, Wilson M Espino A, Borges A, Duménigo B. Fasciola hepatica de posible utilidad en el diagnóstico de la 30. Miranda M, García Z. Fasciola hepatica 31 Knobloch J. moral antibody response and antigenemia- 32. Gorman T, Sánchez R, Fredes, Alcaino H Silva M, Gorman T, Alcaíno H. - Fasciola hepatica obtenida mediante inmunoadsorción 34. Hillyer GV, Soler de Galanes M, Delgado Azañero E Fredes F, Alarcón J, Ilabaca P, Alcaíno H. Evaluación Fasciola he- patica- Correspondencia: o Correo electrónico: hermesmario@hotmail.com Consulte la versión electrónica de la Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública en

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