LDH LACTATE DEHYDROGENASE (LD)
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- Gerardo Giménez Gallego
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1 AU US Instrucciones de uso 2017 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. LDH LACTATE DEHYDROGENASE (LD) OSR x 40 ml R1, 4 x 20 ml R2 OSR x 51 ml R1, 4 x 26 ml R2 Sólo para uso en diagnóstico in vitro. REVISIÓN ANUAL Solo para uso con receta médica Revisado por Fecha Revisado por Fecha PRINCIPIO INDICACIONES Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de actividad de lactato deshidrogenasa (EC ) en suero humano en los analizadores Beckman Coulter AU. RESUMEN Y EXPLICACIÓN Los niveles altos de lactato deshidrogenasa (LD) en suero son provocados por un infarto de miocardio, enfermedades hepáticas, anemias perniciosas y megaloblásticas, embolias pulmonares, tumores y distrofias musculares. 1 Un análisis combinado de isoenzimas LD y CK (creatina quinasa) proporciona un diagnóstico definitivo de infarto de miocardio grave. 2 METODOLOGIA El procedimiento de LD utiliza una modificación del método de Wacker y col., 3,4 que utiliza la reacción del lactato al piruvato. El lactato y el NAD se convierten en piruvato y NADH catalizado por LD. NADH absorbe fuertemente la luz a 340 nm, mientras que el NAD no. La velocidad del cambio de la absorbencia a 340 nm es proporcional a la actividad de LD en la muestra. Lactato + NAD + Piruvato + NADH + H + LD JULIO 2017 Página 1 de 9
2 MUESTRA ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LA MUESTRA Varios investigadores han estudiado la estabilidad del LD en suero a diferentes temperaturas de almacenamiento. Aunque los resultados son inconsistentes, se ha establecido que las isoenzimas del corazón son más estables que las isoenzimas hepáticas. En cualquier caso, es esencial asegurarse de que los resultados de una recogida estándar y de un procedimiento de almacenamiento sean consistentes. Es preferible no refrigerar o congelar las muestras y realizar los análisis lo antes posible manteniendo las muestras a temperatura ambiente (15 25 C). 5 Condiciones de manipulación adicionales específicas al laboratorio: OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE ESPECÍMENES Se recomiendan muestras de suero o plasma heparinizado, libres de hemólisis. Quitar el suero del coágulo lo antes posible para minimizar la hemólisis. 5 Los anticoagulantes de citrato y oxalato interfieren con el ensayo. Instrucciones adicionales para la preparación de muestras de pacientes específicas al laboratorio: Condiciones de tipo adicionales específicas al laboratorio: REACTIVOS CONTENIDOS Reactivo de LD Ubicación de almacenamiento de reactivos en este laboratorio: LDH OSR General Chemistry ES- Instrucciones de uso BAOSR6x27 05 Página 2 de 9 JULIO 2017
3 ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. No ingerir. Nocivo por ingestión. 2. Contiene azida de sodio como conservante que puede reaccionar con los arqueados en tuberías de cobre y formar compuestos explosivos. Incluso si el reactivo contiene cantidades mínimas de azida de sodio, los sumideros deberían drenarse correctamente con agua cuando se deseche el reactivo. INGREDIENTES DE LOS REACTIVOS Concentración final de los ingredientes reactivos: Amortiguador de AMP, ph 8,9 (37 C) Lactato NAD mmol/l 70 mmol/l 10 mmol/l También contiene conservantes. PRECAUCIÓN El conservante azida sódica puede formar compuestos explosivos en las tuberías metálicas de desagüe. Consulte el NIOSH Bulletin: Explosive Azide Hazard (Boletín de NIOSH: Peligro de explosión con la azida) (16/8/76). Para evitar la posible acumulación de compuestos de azida, limpie con agua los tubos de desagüe tras la eliminación del reactivo sin diluir. Para desechar la azida sódica deben seguirse las normativas locales adecuadas. CLASIFICACIÓN DE MATERIAL PELIGROSO SEGÚN EL SGA LDH R1 ADVERTENCIA LDH R2 H316 H317 P280 P332+P313 P333+P313 P362+P364 ADVERTENCIA Provoca irritación cutánea leve. Puede provocar una reacción cutánea alérgica. Use guantes/ropa de protección y equipo de protección para los ojos/la cara. En caso de irritación cutánea: Consultar a un médico. En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un médico. Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla. 2-amino-2-metil-1-propanol 2-5% masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona [EC# ] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC# ] (3:1) < 0,05% JULIO 2017 Página 3 de 9
4 H317 P280 P333+P313 P362+P364 Puede provocar una reacción cutánea alérgica. Use guantes/ropa de protección y equipo de protección para los ojos/la cara. En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un médico. Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla. masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona [EC# ] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC# ] (3:1) < 0,05% La hoja de datos de seguridad está disponible en techdocs.beckmancoulter.com EQUIPO Y MATERIALES Para los analizadores AU400/400 e /480, AU640/640 e /680, AU2700/5400/AU5800 y DxC 700 AU de Beckman Coulter. Ubicación de almacenamiento de los tubos de ensayo o de las copas de muestra en este laboratorio: PREPARACION DEL REACTIVO El reactivo de LD está listo para utilizarse. No precisa preparación. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD 1. Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8 C, los reactivos sin abrir permanecerán estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. 2. Los reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en el compartimento refrigerado del analizador. 3. Los reactivos sin abrir son estables durante 14 días al almacenarse en el compartimento refrigerado del analizador AU5800. INDICIOS DE DETERIORO Los signos visibles de crecimiento microbiano, turbidez, precipitado o cualquier cambio en el color del reactivo pueden indicar degradación y justifican la interrupción del uso. Requisitos de almacenamiento adicionales específicos al laboratorio: ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIÓN FINAL El analizador Beckman Coulter AU computa automáticamente cada determinación en el mismo intervalo de tiempo. LDH OSR General Chemistry ES- Instrucciones de uso BAOSR6x27 05 Página 4 de 9 JULIO 2017
5 CALIBRACIÓN INFORMACION SOBRE LA CALIBRACIÓN La calibración de este proceso de lactato deshidrogenasa en AU/400/400 e y 640/640 e se basa en el coeficiente de extinción biocromático de NADH, que tiene una concentración molar de a 340/380 nm. En DxC 700 AU/AU5800/2700/5400/680/480 se basa en una medición experimental de la concentración molar en 340/660 nm. CONTROL DE CALIDAD Durante el funcionamiento del analizador AU de Beckman Coulter, se deben analizar al menos dos niveles de material de control de calidad adecuado como mínimo una vez al día. Además, deben realizarse los controles tras la calibración, con cada nuevo lote de reactivo y después de realizar pasos específicos de mantenimiento o resolver problemas, como se describe en la guía del usuario o en las instrucciones de uso (IFU) del analizador AU de Beckman Coulter correspondiente. Las pruebas de control de calidad se deben realizar según los requisitos normativos y el procedimiento estándar de cada laboratorio. Ubicación de los controles usados en este laboratorio. NOMBRE DEL CONTROL TIPO DE MUESTRA ALMACENAMIENTO PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA Se puede encontrar una lista completa de parámetros de prueba y el procedimiento operativo en la guía de usuario o las instrucciones de uso (IFU) adecuadas del analizador AU de Beckman Coulter. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Impresos automáticamente para cada muestra en U/L a 37. INFORME DE RESULTADOS RESULTADOS ESPERADOS Adultos: U/L Los valores previstos pueden variar en función de la edad, el sexo, el régimen alimenticio, y la ubicación geográfica. Cada laboratorio deberá prever unos valores acordes con las prácticas correctas de laboratorio. JULIO 2017 Página 5 de 9
6 Intervalos de referencia esperados en este laboratorio: INTERVALOS TIPO DE MUESTRA UNIDADES Información adicional sobre el informe de resultados, específica al laboratorio: NOTAS SOBRE PROCEDIMIENTOS INTERFERENCIAS Los resultados de estudios 6 muestran que las siguientes sustancias interfieren con el procedimiento del LD. Los criterios para una interferencia no significativa es una recuperación dentro del 10 % del valor inicial. Bilirrubina: Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 40 mg/dl de bilirrubina sin interferencia significativa hasta mg/dl de Intralipid* *Intralipid, fabricado por KabiVitrium Inc., es una emulsión grasa IV al 20 % utilizada para emular muestras extremadamente turbias. Incluso una hemólisis mínima causa aumentos significativos en el LD debido a los altos niveles de esta enzima en los glóbulos rojos. 1 La información presentada se basa en resultados de estudios de Beckman Coulter y es actual en la fecha de la publicación. Beckman Coulter Inc., no garantiza la precisión o integridad de los resultados generados por estudios futuros. Para obtener más información acerca de las sustancias interferentes, consulte Young 7 para obtener una compilación de las interferencias informadas con esta prueba. Notas del procedimiento específico del laboratorio: CARACTERÍSTICAS DEL RENDIMIENTO CARACTERÍSTICAS DEL RENDIMIENTO Los siguientes datos se obtuvieron con el reactivo de LD en los analizadores Beckman Coulter AU según los procedimientos establecidos. Los resultados obtenidos por laboratorios individuales pueden ser diferentes. LDH OSR General Chemistry ES- Instrucciones de uso BAOSR6x27 05 Página 6 de 9 JULIO 2017
7 INTERVALO DINÁMICO/INTERVALO DE MEDICIÓN ANALÍTICA El proceso de LD es lineal de 25 a 1200 U/L. Las muestras que superen el límite mayor de linealidad deberían diluirse y repetirse. Las muestras pueden diluirse, repetirse y multiplicarse mediante el factor de dilución automáticamente al utilizar REPETIR AUTOMÁTICAMENTE LA SERIE. SENSIBILIDAD El cambio típico en la concentración por minuto para 1 U/L de LD es de 0,09 mabsorbencia en 340/380 nm y 0,12 mabsorbencia en 340/660 nm. COMPARACION DE METODOS Referencia 8 Se utilizaron muestras de pacientes para comparar con este reactivo de LD. La tabla a continuación demuestra el rendimiento representativo en los analizadores AU. Método Y Método X DxC 700 AU AU5800 Pendiente 1,00 Intercepción 0,2 Coef. de correlación (r) 1,0000 N.º de muestras (n) 122 Rango (U/L) PRECISION Referencia 8 Las estimaciones de precisión, basadas en recomendaciones del CLSI, 9 concuerdan con los resultados típicos. La precisión intraserie es inferior al 5 % CV y la precisión total es inferior al 10 % CV. Se realizaron ensayos de control de sueros y los datos se procesaron conforme a las recomendaciones del CLSI citadas anteriormente. N=60 Dentro de la serie Total Promedio, U/L DE CV% DE CV% 101 0,7 0,7 2,2 2, ,4 0,6 7,5 1,8 INFORMACIÓN ADICIONAL DxC 700 AU requiere que cada aplicación de reactivo tenga un formato estándar de nombre cerrado de prueba abreviado. Este nombre cerrado de prueba es necesario para permitir la carga automatizada de la información del calibrador para cada aplicación como parte del sistema cerrado de DxC 700 AU. Consulte en la siguiente tabla el nombre cerrado de la prueba asignado a cada aplicación para este ensayo. Nombre del análisis LDH1U Descripción LDH (suero) Notas al pie de la hoja de configuración # Definido por el usuario JULIO 2017 Página 7 de 9
8 * Valores establecidos para trabajar en U/L. Para trabajar con unidades del SI (µkat/l), dividir entre 60. AU5800: Ψ Factores específicos de los parámetros proporcionados por el ingeniero de servicio para cada anillo Ψ Factor del sistema HISTORIAL DE REVISIONES Se ha actualizado la sección Equipo y materiales Historial de revisión de la versión anterior Se ha añadido el historial de revisión Actualizaciones de DxC 700 AU Se ha añadido Con receta Sección de SGA revisada Se han añadido el francés y el portugués LDH OSR General Chemistry ES- Instrucciones de uso BAOSR6x27 05 Página 8 de 9 JULIO 2017
9 REFERENCIAS 1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 3 rd Edition, W.B. Saunders, Roe, C.R., Limbird, L.E., Wagner, G.S. and Nerenberg, S.T., J Lab Clin Med, 80: 577, Wacker, W. E. C., Ulmer, D.D. and Vallee, B.L., N. Eng J Med, 255: 449, Amador, E., Dorfman, L. E. and Wacker, W.E.C., Clin Chem, 9: 391, Beckman Coulter Inc. data on samples collected from 200 blood donors in North Texas. 6. CLSI/NCCLS, Interference Testing in Clinical Chemistry, EP7-P, Young, D.S., Effects of Drugs in Clinical Laboratory Tests, 5 th Edition, AACC Press, Data is on file for specific AU analyzers. 9. CLSI/NCCLS, Evaluation Protocol EP-5-T2, Beckman Coulter, Inc., 250 S. Kraemer Blvd., Brea, CA U.S.A. JULIO 2017 Página 9 de 9
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