SUSCEPTIBILIDAD A LOS AGENTES ANTI- MICROBIANOS EN LA GANADERÍA PARA CARNE DEL URUGUAY
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- Cristián Juan Villalba Quintana
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1 SUSCEPTIBILIDAD A LOS AGENTES ANTI- MICROBIANOS EN LA GANADERÍA PARA CARNE DEL URUGUAY Dr. Federico Fernández División Sanidad Animal DGSG/MGAP Jornadas sobre Resistencia Antimicrobiana en humanos y animales, 15 de junio de 2015
2 I.INTRODUCCIÓN El motivo principal de preocupación en materia de resistencia antibiótica, es la amenaza que ésta representa para la salud humana, existiendo la posibilidad de ingresar en una era pos- antibiótica (Berkowitz, 1995; Tenover & Hughes, 1996).
3 I.INTRODUCCIÓN Hay cinco principios a destacar frente al problema de la resistencia. Dependiendo de la droga y el tiempo de uso, la resistencia inexorablemente va a aparecer. La resistencia es progresiva, hasta alcanzar niveles altos. Aquellos organismos que son resistentes a una droga, más fácilmente lo van a ser a varias otras. La resistencia puede ir desapareciendo, pero lentamente. El uso de un antibiótico por un sujeto afecta a los demás de su entorno, así como al ambiente que le rodea(levy, 1998 ).
4 I.INTRODUCCIÓN Con el uso de antibióticos en el ganado existe el riesgo de transferencia de microorganismos zoonóticos resistentes a los antibióticos, selección de resistencia en poblaciones bacterianas comensales no patógenas transferencia de esta resistencia a los comensales del intestino humano
5 I.INTRODUCCIÓN Hay una serie de factores que contribuyen a ese uso excesivo de antibióticos: insuficiente educación sobre su uso prudente, administración por personas con formación insuficiente, dosis y combinaciones inapropiadas, falta de diagnóstico, prescripción innecesaria, aumento de la ganadería intensiva.
6 I.INTRODUCCIÓN Susceptibilidad a los agentes antimicrobianos en la ganadería para carne del Uruguay, procura determinar el perfil de susceptibilidad a estos fármacos en los ganados para carne, a nivel de establecimiento productor, en todo el país.
7 II.MATERIALES Y MÉTODOS Se buscó seguir los lineamientos y protocolos utilizados por el Sistema Nacional de Monitoreo de la Salud Animal (NAHMS), del Departamento de Agricultura de EUA (USDA), con algunas adaptaciones a nuestro medio. Para estos se contó, en la etapa preparatoria y durante el desarrollo del proyecto, con el entrenamiento y asesoramiento del Laboratorio Veterinario de la Universidad Estatal de Colorado (CSU) y de técnicos del CEAH-APHIS.
8 II.MATERIALES Y MÉTODOS Se realizó el estudio sobre la categoría novillos en la etapa de terminación, tanto en establecimientos de ciclo completo como en aquellos dedicados al engorde. Se trabajó sobre E. coli genérica como indicador ya que esta bacteria es usada frecuentemente como representativa de las enterobacterias de la flora intestinal, obteniéndose de las heces (Sorum & Sunde, 2001)
9 II.MATERIALES Y MÉTODOS El laboratorio de análisis fue el departamento de Protección de Alimentos de la Dirección de Laboratorios Veterinarios del Ministerio de Ganadería, Agricultura y Pesca (DILAVE-MGAP). Se identificó como principal objetivo del muestreo los novillos de 3 años o más, excluyéndose los establecimientos que tenían menos de 30 animales en esa categoría
10 II.MATERIALES Y MÉTODOS El muestreo fue en dos etapas, en la primera etapa la unidad primaria de selección fueron los establecimientos que estaban estratificados en 3 categorías: engorde a corral intensivo (feedlot), engorde tradicional (pasturas) y engorde de novillos en establecimientos lecheros (lechería). Dentro de cada estrato, se seleccionaron aleatoriamente por números generados en una computadora 30 establecimientos del giro lechero y 100 del giro ganadero y se incluyeron todos los establecimientos que engordan animales a corral (feedlot). Se estudiaron 10 establecimientos por mes, durante un año. Se tomó una muestra proporcionalmente mayor en establecimientos lecheros, estableciendo un sesgo, teniendo en cuenta que ese sistema de producción teóricamente podría presentar mayor frecuencia de problemas de resistencia antimicrobiana, por el uso más común de antimicrobianos
11 Establecimientos ganaderos muestreados según el tipo de producción II.MATERIALES Y MÉTODOS
12 II.MATERIALES Y MÉTODOS Aislamiento e identificación de cepas genéricas de Escherichia coli. Pruebas de Resistencia a los anti-microbianos Las cepas aisladas de E. coli genérico fueron probadas por la resistencia a los antimicrobianos según la prueba de susceptibilidad a la difusión de los discos (Kirby-Bauer) La selección de los antimicrobianos a probar se hizo en función de aquellos más utilizados en el mercado de Uruguay, de su facilidad de desarrollar resistencia y de la opinión de expertos en el tema. Los antimicrobianos representados pertenecen a los grupos de los β-lactámicos (penicilinas y cefalosporinas), tetraciclinas, aminoglicósidos, quinolones, sulfonamidas y combinaciones. Controles de Calidad y Niveles de Detección Estudio de asociaciones de hallazgos, según tipo de explotación χ2 y Fisher; Kruskal-Wallis
13 II.MATERIALES Y MÉTODOS Una vez realizada la prueba de los discos de difusión e incubada la placa se procedió a medir el diámetro del halo de inhibición de crecimiento del agente. Las categorías para la interpretación de los resultados fueron: Susceptible: significa que el agente de la cepa bacteriana aislada, puede ser inhibido por la dosis recomendada del antimicrobiano. Intermedio: está categoría está dada por una zona que previene de discrepancias en las interpretaciones, en otras palabras que organismos resistentes sean catalogados como susceptibles o la situación inversa. Resistente: las cepas resistentes no son inhibidas por la dosis y secuencia recomendada
14 III. RESULTADOS Giro Frecuencia Muestra Porcentaje Ganaderos % Lecheros % Feedlot % T O T A L % Número de establecimientos según giro de producción, establecimientos muestreados y porcentaje de muestreo. (Predios con más de 30 novillos)
15 III. RESULTADOS Antimicrobiano Obs Media Desv. St.. Min Max Ampicilina am Amoxilina amc Ceftiofur xnl Streptomicina s Gentamicina gm Sulfasozasola g Trimetoprin/Sulph sxt Ac. Nalidixico na Tectraciclina te Cloranfenicol C Resultados de las pruebas antimicrobianas realizadas en los aislamientos de E. coli genérica
16 III. RESULTADOS Antimicrobiano Porcentajes Obsv Resistencia Intermedios Susceptible Ampicilina am 2% 8% 90% 1547 Amoxilina amc 0% 9% 91% 1506 Ceftiofur xnl 0% 0% 100% 1578 Estreptomicina s 3% 17% 80% 1549 Gentamicina gm 0% 0% 100% 1545 Sulphasozasola g 0% 0% 99% 1547 Trimetoprin/Sulph sxt 0% 0% 100% 1536 Ac Nalidíxico na 0% 1% 99% 1535 Tectraciclina te 2% 5% 93% 1545 Cloranfenicol c 1% 0% 99% 1538 Resultados categorizados de las pruebas antimicrobianas realizadas en los aislamientos de E. coli genérica
17 III. RESULTADOS Antimicrobiano Porcentajes Obsv Resistencia Intermedios Susceptible Ampicilina am 4% 14% 82% 1547 Amoxilina amc 1% 17% 82% 1506 Ceftiofur xnl 0% 2% 98% 1578 Estreptomicina s 8% 20% 72% 1549 Gentamicina gm 0% 0% 100% 1545 Sulfasozasola g 0% 3% 97% 1547 Trimetoprin/Sulph sxt 1% 0% 99% 1536 Ac Nalidíxico na 3% 0% 97% 1535 Tectraciclina te 4% 12% 84% 1545 Cloranfenicol c 2% 0% 98% 1538 Resultados categorizados de las pruebas antimicrobianas realizadas en los aislamientos de E. coli genérica proyectados a la población según el diseño del muestreo
18 III. RESULTADOS No se observaron asociaciones significativas entre el tipo de producción y los grupos de las cefalosporinas (ceftiofur), la gentamicina del grupo de los aminoglicósidos, las sulfonamidas combinadas (trimethoprim/ sulfametoxasole) y el cloranfenicol.. Los antimicrobianos asociados fueron: ampicilina y amoxilina por las penicilinas, estreptomicina por los aminoglicosidos, sulfosozasole por las sulfas, ácido nalidíxico por los quinolones y la tetraciclina. Los mayores contrastes se observan entre el giro lechero y los feedlots
19 Relación entre el giro de producción y la clasificación de resistencia de las cepas de E. coli genérica aisladas frente a la ampicilina Relación entre el giro de producción y la clasificación de resistencia de las cepas de E. coli genérica aisladas frente a la estreptomicina. III. RESULTADOS
20 Relación entre el giro de producción y la clasificación de resistencia de las cepas de E. coli genérica aisladas frente a la tetraciclina Relación entre el giro de producción de los establecimientos y la clasificación de resistencia de las cepas de E. coli genérica aisladas frente a la tetraciclina según el diseño del estudio Cuando se probaron todas las posibles asociaciones tomando en cuenta el diseño del muestreo, sólo fue significativa la que se plantea respecto a la tetraciclina
21 III. RESULTADOS Porcentaje de establecimientos esperados en la población, calificados como resistentes, en función de sus valores medios en la muestra de antibiogramas y sus correspondientes error estándares (EE) Antimicrobiano % Resist. Feedlot Pasturas Lechería TOTALES EE % Resist. EE % Resist. EE % Resist. Ampicilina am 7,69 7,69 1,11 1, ,13 1,09 Estreptomicina s ,11 1, ,09 1,09 Tectraciclina te 15,38 10, ,06 0,04 EE De todos los grupos de antimicrobianos estudiados sólo en 3 de ellos se clasificó algún establecimiento como resistente, dado que la media de sus aislamientos cayó en el área de resistencia
22 III. RESULTADOS La expresión fenotípica de las 85 cepas resistentes aisladas permite observar 23 combinaciones diferentes de resistencia. La más alta frecuencia corresponde a una mono resistencia 69% (59/85), en segundo lugar tenemos las resistencias a 2 agentes 13% (11/85), seguidas por las de 3 agentes 8% (7/85) y con más de 3 agentes el complemento de 8% (7/85). Sólo una de las cepas aisladas fue resistente a 6 anti-microbianos. Mirados individualmente los antimicrobianos que generaron más resistencia son: estreptomicina 47%, ampicilina 38% y tetraciclina 32%, de los aislamientos con resistencia.
23 Categoría Freq. Percent Cum. Susceptibles ,52 94,52 S 30 1,94 96,45 AM 15 0,97 97,42 TE 11 0,71 98,13 NA 2 0,13 98,26 SXT 1 0,06 98,32 AMC 1 0,06 98,39 AMC & AM 3 0,19 98,58 AM & TE 2 0,13 98,71 AM & NA 1 0,06 98,77 AM & SXT 1 0,06 98,84 AM & S 1 0,06 98,90 TE & S 2 0,13 99,03 TE & SXT 1 0,06 99,10 AM, TE & C 2 0,13 99,23 AM, AMC & C 1 0,06 99,29 AM, NA & C 1 0,06 99,35 AM, S & TE 1 0,06 99,42 S, G y TE 2 0,13 99,55 AM, S, NA & TE 1 0,06 99,61 AM, S, G, TE & C 3 0,19 99,81 AM, S, G, TE & SXT 1 0,06 99,87 AM, AMC, SXT, NA & C 1 0,06 99,94 AM, XNL,S, G, TE & C 1 0,06 100,00 Total ,00
24 IV. DISCUSIÓN El comportamiento de las cepas aisladas mostró buena sensibilidad Sulphmethoxazole/Trim. Tetraciclina Sulphasozasola Streptomicina Ceftiofur Amoxilina Gentamicina Ampicilina Chloranfenicol Nalidixico ac.
25 IV. DISCUSIÓN Exceptuando a la estreptomicina, que muestra una sensibilidad del 80% la susceptibilidad para el resto de los agentes antimicrobianos es en todo los casos superiores al 90%. Cuando se proyecta su resultado a la población se deprime un poco pero sin cambiar el concepto. Podemos esperar encontrar a nivel poblacional hasta un 8% de resistencia para el caso de estreptomicina
26 IV. DISCUSIÓN En general se observó independencia entre los giros de producción y el comportamiento de algunos de los agentes antimicrobianos Se observó la presencia de agentes (ampicilina, amoxilina,estreptomicina, sulfosozasole, ácido nalidixico y la tetraciclina) cuyo comportamiento no fue independiente de los sistemas productivos, pero no se observa un patrón común para las mismas
27 IV. DISCUSIÓN Esto puede ser debido a que haya un uso distintivo de los agentes según los sistemas, o que se trate de asociaciones ficticias, hipótesis que se considera más factible ya que cuando se toma en cuenta el diseño del muestreo en su mayoría desaparece con la única excepción de las tetraciclinas La lógica indica que los diferentes sistemas productivos deben realizar un uso distintivo de los antimicrobianos los cuales de esta forma pueden seleccionar para resistencia en forma diferencial.
28 IV. DISCUSIÓN De todas formas los niveles de resistencia encontrados son los esperables en una población con una baja exposición a estos agentes. El comportamiento de los establecimientos mostrado muestra una mayor resistencia en establecimientos con producción feedlot para los casos de ampicilina y tetraciclina. De las diferencias planteadas la única que es estadísticamente significativa es la última (tetraciclina)
29 IV. DISCUSIÓN No obstante este escenario nos muestra que la gran mayoría de establecimientos no tienen ninguna presencia de cepas resistentes. El análisis fenotípico de las resistencias en el presente estudio, muestra que las múltiples están en el entorno del 30%, lo cual es un valor inferior al presente en otros países. Este no parece ser un factor de preocupación en lo inmediato donde sólo un 1,6 % de los aislamientos totales presentaron resistencia múltiple
30 V. CONCLUSIONES Sin embrago se debe continuar monitoreando la situación como es recomendado por la OMS. De esta forma se podrá detectar a tiempo cambios en estos patrones y por otro lado promocionar un manejo prudente de los agentes antimicrobianos. Esta información puede contribuir favorablemente para posicionar aún mejor nuestras carnes en los mercados consumidores
31 Gracias por la atención
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