Género Mycobacterium
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- José Luis Poblete Ríos
- hace 6 años
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1 Género Mycobacterium
2 Género Mycobacterium M. tuberculosis M. bovis M. microti M. africanum M. canetti M. kansasii M. scrofulaceum M. intracellulare-avium M. fortuitum M. smegmatis M. leprae Complejo M. tuberculosis MNT o MOTT
3 TUBERCULOSIS: adquisición de la primoinfección Inhalación Establecimiento en pulmones M. tuberculosis Primoinfección Reproducción sin impedimentos Lesión granulomatosa Lesión exudativa con PMNs ineficaces
4 La lesión granulomatosa 1. Céls epitelioides y Mɸ 3. Linfocitos T BAAR 2. Céls gigantes y Mɸ 4. Fibroblastos
5 Inmunidad celular o CMI (Inmunidad Mediada por Células) Linfocitos Th1 Linfocitos Th1
6 Principales factores de defensa contra la TB CMI (Cellular Mediated Immunity) + DTH (Delayed-Type Hypersensitibity)
7 Principales factores de defensa contra la TB: PPD CMI (Cellular Mediated Immunity) DTH (Delayed-Type Hypersensitibity) CMI (Cellular Mediated Immunity)
8 Principales factores de defensa contra la TB: Tc Th1 Th1 Tc Tc Tc (macrophage)
9 Principales factores de defensa contra la TB: NK NK NK
10 Papel de los macrófagos en la TB El µo crece (macrophage) El µo no crece normalmente y buena parte es destruida
11 Cómo inició y se controló la respuesta? Th1 Th1 Th1 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12 IL-12
12 La primoinfección No es detectable con rayos X Se sabe que existe porque el individuo se convierte en tuberculina + Se considera que, con ella, el individuo puede estar protegido de infecciones posteriores El o y las defensas del hospedero están en equilibrio Si el equilibrio se rompe TB
13 Primoinfección Inmunode ficiencia Reactivación El tejido sufre necrosis caseosa Fibrosis: los fibroblastos liberan colágena El tejido se desprende dejando cavernas Los capilares se erosionan: hemorragia y diseminación hematógena del o
14 Evolución La fibrosis (calcificación según el médico) es detectable por rayos X Las clásicas cavernas de la TB son detectables por rayos X La hemorragia origina hemóptisis La diseminación del o da lugar a TB en diversas regiones anatómicas, ya que el agente causal no es organotrópico: TB miliar Los principales síntomas de la TB pulmonar son fiebre, pérdida de peso, astenia y hemóptisis
15 EN INMUNODEPRIMIDOS: M. tuberculosis Inhalación Establecimiento en pulmones Reproducción sin impedimentos El tejido sufre necrosis caseosa S I N G R A N U L O M A Fibrosis: los fibroblastos liberan colágena El tejido se desprende dejando cavernas Los capilares se erosionan: hemorragia y diseminación hematógena del o
16 Inoculación intradérmica de M. tuberculosis Fenómeno de Koch días después: induración-ulceración de la zona y los nódulos linfáticos cercanos manifiestan necrosis caseosa 6 semanas después: una segunda inoculación intradérmica del bacilo de Koch 2 días después: induración-ulceración de la zona, pero la cicatrización es rápida y los nódulos linfáticos no son afectados
17 La vacuna BCG (Bacilo de Calmette y Guerin) Atenuación M. bovis BCG 231 pases, 13 años Se aplica intradérmicamente o por multipuntura cutánea 4 semanas después: ulceración en el sitio de inoculación y, después de 8 semanas totales, el proceso se resuelve dejando una cicatriz queloide en la zona
18 Prueba de la tuberculina a) Obtención del antígeno (PPD) Varias colonias de M. tuberculosis se colocan en un recipiente con SSI estéril y se les destruye con calor (en autoclave) El contenido se filtra y, al filtrado, se le agrega una solución de (NH 4 ) 2 SO 4 para precipitar las tuberculinoproteínas remanentes (PPD)
19 Prueba de la tuberculina b) Realización Se inoculan 2 U de PPD por vía intradérmica (en un antebrazo) La prueba se considera positiva si, 48 h después, aparece un eritema de por lo menos 5 mm de diámetro en el sitio de inoculación
20 Prueba de la tuberculina c) Utilidad Para establecer si una vacunación (de 8 semanas antes) cumplió induciendo la respuesta inmune; la positividad no garantiza niveles protectores Para detectar si un individuo no vacunado ha adquirido la primoinfección No es útil para establecer el Dx de TB, excepto cuando se trata de niños pequeños
21 Patogenia asociada a la TB El o es un parásito intracelular facultativo El o se transmite por las vías: Inhalatoria (++++++) Oral (++), por ingesta de leche de bovinos infectados Cutánea (+) Oftálmica (+)
22 Patogenia asociada a la TB Principales factores de virulencia del μo: El factor cordón 6,6 -dimicoliltrehalosa, es leucotóxico: inhibe a la succinato- DH, provoca hinchamiento de las mitocondrias y separa a los ribosomas del RER Los sulfolípidos, actúan como fagolisosomasa El complejo SOD-catalasa, neutraliza el poder oxidante de los iones O 2 y O 2 =
23 Epidemiología Hay dos mil millones de individuos infectados en el mundo 14 millones de casos activos crónicos millones de casos nuevos anuales. 2 millones fallecen anualmente (400,000 con SIDA y 70,000 niños) Se han detectado 650,000 casos de TB multi-resistente (MDR)
24 Epidemiología En EUA, la frecuencia creció 18% de 1985 a 1991 y continuó aumentando En EUA, en 2016 hubieron 700 defunciones y una incidencia de 10,000 casos, 60% de los cuales ocurrió en extranjeros: 1,600 MX, 800 filipinos, alrededor de 500 chinos, 500 hindúes, 500 vietnamitas, etc. En EUA, denominan la nueva TB al padecimiento, debido a que las cepas actuales son más virulentas y más resistentes a los fármacos
25 Epidemiología Las edades más afectadas son: 0 a 3 años; 13 a 27 años con predominio en la mujer; de los 73 años en adelante Los principales factores predisponentes, son: La desnutrición y el sobre-esfuerzo El tratamiento con corticoesteroides La silicosis y otras afecciones asociadas a la contaminación ambiental Las enfermedades debilitantes
26 Epidemiología En México, son menos afectados los menores de 15 años y la incidencia en el sexo masculino es mayor (1.3/1) En México, también existe relación entre la TB y el SIDA; los enfermos con ésta son afectados por C. albicans (37.6%), Pneumocystis carinii (12.2%) o TB (tanto pulmonar como diseminada, 11.5%) En México, ocurren el 9% de los casos mundiales: 85% de TB pulmonar y 1.2% de TB meníngea, con 27,000 casos anuales (3,000 TB/SIDA) y 3,000 decesos en el mismo lapso
27 Tratamiento (drogas antituberculosas) De primera elección Isoniazida (INH) Etambutol (Emb) Rifamicina (RIF) Estreptomicina (Sm) Pirazinamida (PIR) De segunda elección Capreomicina Cicloserina Etionamida Ácido p-aminosalicílico (PAS) Los regímenes terapéuticos contemplan combinaciones de las anteriores y suelen instituirse para 6 a 9 meses
28 Resistencia a las drogas antituberculosas MDR-TB (multidrug resistant TB): cuando la bacteria es resistente a INH y RIF, las más eficaces para tratar a la mayoría de los enfermos XDR-TB (TB extensivamente resistente): cuando, además, hay resistencia a las fluoroquinolonas y a por lo menos uno entre amikacina, kanamicina o capreomicina
29 Diagnóstico de laboratorio Obtención y procesamiento de la expectoración Descontaminación Fluidificación Concentración NaOH al 4% N-acetil L-cisteína Centrifugación a 5,000g Sedimento (SED)
30 Diagnóstico de laboratorio Principales metodologías SED Baciloscopía 1 Cultivo clásico y diferenciación BQ Radiometría PCR 1 = La tinción de Ziehl Neelsen o sus equivalentes también suele(n) realizarse directamente a partir de muestras no procesadas
31 Diagnóstico de laboratorio SED Tinción de Ziehl Neelsen Fucsina fenicada (12 mins) en caliente Decoloración con alcohol-ácido Tinción simple con colorante de contraste
32 Diagnóstico de laboratorio SED Cultivo y diferenciación bioquímica Incubación 15 a 25 días a 35 C en 10% de CO 2 Colonias amarillo claro mate, duras, con aspecto granular Acumulación de niacina Reducción de nitratos Hidrólisis del Tween 80 Arilsulfatasa Desarrollo en T 2 H Termocatalasa a 68 C Ureasa
33 Diagnóstico de laboratorio Método radiométrico Emplea frascos con medio líquido Cohen Middlebrook 7H12a (o 12B) que contiene 4 Ci de ácido palmítico marcado con 14 C. El o cataboliza dicho ácido graso, liberando 14 CO 2, el cual es detectado por el instrumento BACTEC 460. Éste procesa la información y la transforma en un índice de crecimiento (IC) de 1 a 999: a mayor número de o, mayores serán el 14 CO 2 y el IC.
34 Diagnóstico de laboratorio Método radiométrico Se adiciona a los frascos la mezcla PANTA (polimixina B, anfotericina B, ácido nalidíxico, trimetoprim y azlocilina), para inhibir μos de la flora habitual. Alta sensibilidad. Detecta el crecimiento micobacteriano en 9 a 14 días. La detección presuntiva del μo se puede efectuar al mismo tiempo que las pruebas de susceptibilidad, lo que reduce a aproximadamente 15 días la obtención de los resultados (Dx + Tx).
35 Diagnóstico de laboratorio Se requieren: SED Método radiométrico Frascos con medio 12B PANTA NAP (p-nitro- acetilamino- hidroxipropiofenona): inhibe al complejo M. tuberculosis, pero no a las MNT Drogas antituberculosas Instrumento BACTEC 460
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37 Diagnóstico de laboratorio Método radiométrico Fco. Ctdo adic ml SED Incubac hasta IC Utilidad F1 F2 Fa Fb Fc Fx F1 100 Detección de BAAR (Ziehl Neelsen) NAP 0.5 F1 100 Diferenciar a M. Tb de MNT INH 0.5 Fx 30 Suscep o resist a INH RIF 0.5 Fx 30 Suscep o resist a RIF Emb 0.5 Fx 30 Suscep o resist a Emb Fx 30 Control de suscep 10
38 Diagnóstico de laboratorio: PCR Requerimientos: SED ( DNA de M. tuberculosis?) Tubo de reacción Primers Taq polimerasa I dntps (ATP, TTP, CTP y GTP) MgCl2 Termociclador
39 Diagnóstico de laboratorio: PCR Cada ciclo de PCR se constituye por 3 etapas: Desnaturalización Alineamiento de los primers Elongación de los primers 3 min a 94 C 3 min a C 3 min a 72 C
40 PCR 94 C 45 C 72 C
41 Diagnóstico de laboratorio: PCR En general, el tiempo destinado a la amplificación varía entre 2 y 7 h Una vez finalizado el lapso para la supuesta amplificación, se procede a detectar si está presente el segmento correspondiente: corriendo una electroforesis
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43 Mycobacterium leprae (el bacilo de Hansen) Es un parásito intracelular obligado Crece dentro de diversas células, pero lo hace mejor dentro de los macrófagos, incluidos los del SN Muestra mayor afinidad por los tejidos fríos del cuerpo: nariz, lóbulos de las orejas, nuca, cejas, testículos y espinillas No desarrolla in vitro: sólo se le ha podido cultivar en el armadillo y el cojinete plantar del ratón.
44 La lepra Sólo el 10 a 15 % de la población mundial es susceptible Se transmite a través de emisiones nasales de los enfermos; éstas son inhaladas, o bien, penetran por escoriaciones de la piel de los individuos en riesgo Es crónica, mutilante, de evolución lenta Su período de incubación varía entre los 8 meses y los 30 años Afecta principalmente a los tejidos cutáneo, subcutáneo y cartilaginoso
45 La lepra Inicia con una mácula hipopigmentada en la piel, la cual después es sustituida por numerosos lepromas Signos y síntomas: Anestesia local, por la afectación del tejido nervioso El tabique nasal suele desaparecer Lo anterior y la presencia de lepromas en la cara, provocan que el enfermo evidencie la clásica fascies leonina
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47 La lepra Los extremos en gravedad de la afección hacen referencia a la citología de la zona afectada y a la prueba de la lepromina: La lepra tuberculoide es la menos grave y se caracteriza por la presencia de algunos linfocitos y macrófagos, así como por la escasés de células lepra. La prueba de la lepromina resulta positiva La lepra lepromatosa es la de mayor gravedad, no se evidencian linfocitos y las células lepra son abundantes; la prueba de la lepromina es negativa
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49 La lepra El Dx se realiza con base en: a)la detección de los signos clínicos; b)el estudio de biopsias del tejido afectado teñidas por Ziehl Neelsen; c)pcr Fármacos adecuados para su Tx: rifamicina + Diamino-difenil-sulfona (dapsona o DDS), administrados durante: 3-5 años para la forma tuberculoide y, Toda la vida para la forma lepromatosa
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