Técnicas Rápidas en el Desempeño del Trabajo de Salud Pública. Juan Carlos Montero Rubio
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- Marta Duarte Méndez
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1 Técnicas Rápidas en el Desempeño del Trabajo de Rubio
2 Debilidades del Cultivo (I) Baja Recuperación: El procedimiento ISO permite obtener el recuento de Legionella sp por diferentes rutas elegidos por el analista en función de las características del agua. El resultado final es el del procedimiento que de mayor resultado (no Pseudomona hace la media). aeruginosa Tratamientos (Ácido, Calor, Sin tratamiento), Pseudomona Siembra (Volumenes, Medios) aeruginosa Concentración, Sobre membrana, Siembra Directa, Legionella pneumpophila Legionella pneumpophila Enmascaramiento debido a la microbiota acompañante: Crecimiento confluente o invasivo. Inhibición debido a la microbiota acompañante. (Cotuk, A. et al., 2005; Amin A. et al., 2013; Giao M.S. et al., 2011) Posibles células viables y no cultivables (Alleron L et al, 2008). Francisco Javier Castro, LRSP Comunidad de Madrid
3 Debilidades del Cultivo (II) Baja Precisión: Recuentos de Colonias de muy distinta procedencia: 1 vacuola bacterias 1 UFC (Berg SG, 1998). Δ t = 6 h; En el 52% de las muestras diferencias 1 log 10 (McCoy WF et al, 2012). Crecimiento lento. Resultados más allá de una semana. Rowbotham, 1983
4 Año Técnicas rápidas en el desempeño del trabajo de Rango de satisfactorios en los ensayos intercomparación participados (LICS) Valor inferior Z-score Z-score Valor superior (ufc/l) (ufc/l) inferior superior Rango , ,9 5,73E ,8 4,05E , ,8 8,26E , ,34E ,5 1,18E ,4 9,80E , ,6 4,99E ,9 7,92E ,90E , ,5 9,60E , ,08E , ,25 5,98E , ,29 8,28E , ,48 8,57E , ,27 4,98E , ,63 4,09E , ,71 1,10E , ,51 1,15E , ,35 4,29E ,26 3,20E , ,27 1,28E , ,41 1,03E , ,32 4,09E ,3 7,98E+04 X S 1,08E+05 1,29E+05
5 Figura 1.- Representación de un ensayo interlaboratorios con una muestra preparada con Legionella exclusivamente.
6 Separación Inmunomagnética (SIM)
7 Técnicas rápidas en el desempeño del trabajo de
8 Técnicas rápidas en el desempeño del trabajo de
9 Técnicas rápidas en el desempeño del trabajo de
10 Técnicas rápidas en el desempeño del trabajo de
11 Objetivo Comparar efectividad y eficiencia de los métodos rápidos de detección y recuento de Legionella spp frente al método de la norma ISO 11731, (Water quality - detection and enumeration of Legionella. UNE-ISO 11731, 2007) para tener elementos objetivos que permitan tomar decisiones respecto a su implantación en un laboratorio de salud pública.
12 Conclusiones Los resultados de los métodos analizados presentan un porcentaje de coincidencia frente a nivel de actuación cercano al 90%. Los métodos alternativos utilizados muestran ser tanto o más efectivos para la detección de Legionella spp. en muestras de rutina que el método de referencia. La elección de uno u otro se debe motivar en otro tipo de elementos tales como coste, objetivos del análisis, disponibilidad de medios y personal o el tipo de muestras gestionadas en el laboratorio. Frente a muestras muy sucias el método que peor respuesta presenta es el cultivo en placa, debido principalmente a la presencia de microbiota interferente. En el caso de qpcr, esta suciedad puede provocar inhibiciones en la detección, debido a sustancias presentes en la muestra.
13 Limitaciones Separación Inmunomagnética. La legislación para torres de refrigeración solo admite ISO (ISO 11731, 1998). Aunque se expresa en UFC equivalentes, los resultados no son siempre coincidentes con el método de referencia. No disponibilidad de la bacteria para estudios posteriores. Posibilidad de fasos + en muestras coloreadas. Infraestimación con respecto a otras técnicas rápidas en muestras con bacterias de Legionella sp no libres. Se desconocen otras hasta el momento.
14 Investigación ambiental Inspección de las instalaciones. Toma de muestras ambientales. Ensayos. Detección Rápida Decisiones Test rápido Reducir Tiempo de exposición L+D Reforma estructural Paralización total/parcial Acción oportuna
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