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1 Quito Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN-ISO Primera edición CALIDAD DEL AGUA. DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESCHERICHIA COLI Y DE BACTERIAS COLIFORMES. PARTE 1: MÉTODO DE FILTRACIÓN EN MEMBRANA (ISO :2000, IDT) WATER QUALITY. DETECTION AND ENUMERATION OF ESCHERICHIA COLI AND COLIFORM BACTERIA PART 1: MEMBRANE FILTRATION METHOD (ISO :2000, IDT) Correspondencia: Esta Norma Técnica Ecuatoriana es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO :2000. DESCRIPTORES: Calidad agua, detección, recuento, bacterias, filtración, membrana. ICS: Páginas ISO 2000 Todos los derechos reservados INEN 2014

2 NTE INEN-ISO Prólogo nacional Esta Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN-ISO es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO :2000, Water quality. Detection and enumeration of Escherichia coli and coliform bacteria. Part 1: Membrane filtration method, la fuente de la traducción es la norma adoptada por AENOR. El comité nacional responsable de esta Norma Técnica Ecuatoriana y de su adopción es el Comité Interno del INEN. ISO 2000 Todos los derechos reservados INEN i

3 - 5 - ISO :2000 ÍNDICE Página INTRODUCCIÓN OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN NORMAS PARA CONSULTA TÉRMINOS Y DEFINICIONES FUNDAMENTO APARATOS Y MATERIAL DE VIDRIO MEDIO DE CULTIVO Y DILUYENTE MUESTREO PROCEDIMIENTO EXPRESIÓN DE RESULTADOS INFORME DE ENSAYO ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ANEXO A (Informativo) INFORMACIÓN MICROBIOLÓGICA COMPLEMENTARIA SOBRE LAS BACTERIAS COLIFORMES ANEXO B (Normativo) MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS BIBLIOGRAFÍA... 15

4 ISO : INTRODUCCIÓN La presencia y el nivel de contaminación fecal constituye un factor importante en la evaluación de la calidad de una masa de agua y del riesgo de infección que representa para la salud humana. El análisis de muestras de agua para detectar la presencia de Escherichia coli, que normalmente habita en el tracto intestinal de hombres y otros animales de sangre caliente, proporciona una indicación de este tipo de contaminación. Los resultados del análisis de bacterias coliformes pueden resultar más difíciles de interpretar dado que algunas bacterias coliformes viven en el suelo y en las aguas dulces superficiales y, por tanto, no tienen siempre un origen intestinal. La presencia de bacterias coliformes, aunque no pruebe de forma concluyente una contaminación de origen fecal, si puede indicar fallos en el tratamiento o en la distribución del agua. La identificación de las cepas aisladas puede permitir en ocasiones obtener información acerca de su origen. 1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN Esta parte de la Norma ISO 9308 especifica un método de referencia (ensayo estándar) para la detección y recuento de Escherichia coli y bacterias coliformes en agua destinada al consumo humano. El método estándar se basa en la filtración en membrana, el posterior cultivo en un medio de agar de diferenciación y el cálculo del número de los organismos objeto de ensayo en la muestra. El método estándar es poco selectivo y permite la detección de bacterias dañadas. Debido a esta baja selectividad, el crecimiento de la flora bacteriana general puede afectar a la fiabilidad del recuento de E. coli y bacterias coliformes, por ejemplo, en algunas aguas potables, tales como las aguas de pozos poco profundos, que no han sido desinfectadas y que dan lugar a importantes crecimientos de flora interferente. Esta parte de la Norma ISO 9308 es, por tanto, especialmente adecuada para agua desinfectada y otras aguas potables con bajas densidades bacterianas. Esta parte de la Norma ISO 9308 incluye un método rápido (ensayo rápido) para la detección, en menos de 24 h, de E. coli en aguas destinadas al consumo humano, y que puede resultar muy útil en aquellos casos en los que se requiere una rápida información. El ensayo rápido se basa en la filtración en membrana, el posterior cultivo, en condiciones selectivas, y el cálculo del número de E. coli en la muestra. Los ensayos estándar y rápido descritos en esta parte de la Norma ISO 9308 son aplicables a otros tipos de aguas, siempre que la materia en suspensión o la flora de fondo no interfieran en la filtración, el cultivo y el recuento. 2 NORMAS PARA CONSULTA Las normas que a continuación se relacionan contienen disposiciones válidas para esta norma internacional. En el momento de la publicación las ediciones indicadas estaban en vigor. Toda norma está sujeta a revisión por lo que las partes que basen sus acuerdos en esta norma internacional deben estudiar la posibilidad de aplicar la edición más reciente de las normas indicadas a continuación. Los miembros de CEI y de ISO poseen el registro de las normas internacionales en vigor en cada momento. ISO/CEI Guía 2. Normalización y actividades relacionadas. Vocabulario general. ISO 3696:1987 Agua para uso en análisis de laboratorio. Especificación y métodos de ensayo. ISO :1980 Calidad del agua. Muestreo. Parte 1: Guía para el diseño de los programas de muestreo. ISO : 1991 Calidad del agua. Muestreo. Parte 2: Guía para las técnicas de muestreo. ISO :1994 Calidad del agua. Muestreo. Parte 3: Guía para la conservación y manipulación de las muestras. ISO :1999 Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Preparación de las muestras de ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para examen microbiológico. Parte 1: Reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y las diluciones decimales. ISO 8199:1988 Calidad del agua. Guía general para el recuento de microorganismos sobre medio de cultivo.

5 INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA Documento: NTE INEN-ISO TÍTULO: CALIDAD DEL AGUA. DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESCHERICHIA COLI Y DE BACTERIAS COLIFORMES. PARTE 1: MÉTODO DE FILTRACIÓN EN MEMBRANA (ISO :2000, IDT) Código: ICS ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fechas de consulta pública: al Fecha de iniciación del estudio: Comité Interno del INEN: Fecha de iniciación: Fecha de aprobación: Integrantes del Comité Interno: NOMBRES: Eco. Agustín Ortiz (Presidente) Ing. José Luis Pérez Ing. Paola Castillo Ing. Tatiana Briones Ing. Laura González Ing. Bolívar Cano Ing. Gonzalo Arteaga (Secretaría Técnica) INSTITUCIÓN REPRESENTADA: DIRECCION EJECUTIVA COORDINACIÓN GENERAL TÉCNICO DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN DIRECCIÓN DE VALIDACIÓN Y CERTIFICACIÓN DIRECCIÓN DE METROLOGÍA DIRECCION DE REGLAMENTACIÓN DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN Otros trámites: Compromiso Presidencial N del 08 de junio del 2013, para el fortalecimiento de normas del Instituto Ecuatoriano de Normalización INEN La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No de Registro Oficial Suplemento No. 156 de