Proyecto de investigación Universidad de Chile / ASOEX Comité de Arándanos:

Transcripción

1 Proyecto de investigación Universidad de Chile / ASOEX Comité de Arándanos: Ing. Agr. M.Sc. Marcela Esterio Grez Prof. Asociado U. de Chile Ing. Agr. MS. Ph.D. Jaime Auger Saavedra Prof. Titular U. de Chile

2 Caracterización genética y fenotípica de las poblaciones predominantes de Botrytis cinerea en 3 zonas productoras de Arándanos. Temporada Resistencia a fungicidas? Variabilidad y recombinación genética? Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / mesterio@uchile.cl

3 BOTRYTIS PRESENTA una dinámica poblacional, GRAN VARIABILIDAD GENÉTICA DADA POR AL MENOS DOS ESPECIES Y 4 GENOTIPOS POR ELLO POBLACIONES DEL HONGO PRESENTAN distinta agresividad y REACCIONAN DIFERENTEMENTE FRENTE A cambios en EL MANEJO (FUNGICIDAS), afectando la eficacia del Control QUÍMICO Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / mesterio@uchile.cl

4 Según estudio PUC, 2011 (Innova Corfo): Períodos críticos: Floración (botón floral a plena flor) Desde pintón a cosecha Mayor respuesta a fungicidas: Precosecha: desde fruto pintón a madurez Lo anterior debe verificarse : USO DE CEPAS DE BOTRYTIS MARCADAS, bajo condiciones controladas

5 La resistencia a un fungicida: modificación genética de un patógeno que le otorga una menor sensibilidad. adaptación estable y heredable (Leroux et al., 1998) y puede ser causada por varios mecanismos: (i) alteración del sitio de acción, lo cual reduce o anula la unión o contacto con el fungicida; (ii) síntesis de una enzima alternativa capaz de sustituir la enzima patogénica bloqueada; (iii) sobre producción de un metabolito que bloqueé al fungicida, y (iv) por degradación metabólica del fungicida a través de producción de enzimas secretadas por el patógeno. (Gisi et al., 2000; Gullino et al., 2000, Fluit et al., 2001; MgGrath, 2001) Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / mesterio@uchile.cl

6 Botryticidas,, y Benomilo Estrobilurinas iprodione fenhexamid tebuconazoles Pyrimethanil Cyprodinil fludioxonil boscalid Fungicidas biológicos fluazinam Otras alternativas de control complementario Fungicidas Orgánicos CÍTRICOS Mezclas de activos Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / mesterio@uchile.cl

7 Objetivos: Determinar los niveles de infección en tres épocas (Floración, Precosecha temprana y Precosecha tardía) en tres zonas (TALCA, Los Ángeles y Río Bueno). Determinar los niveles de sensibilidad a 4 fungicidas (fenhexamid, fludioxonil, Switch e Iprodione) Determinar la correspondencia genotípica de las mismas poblaciones (en proceso)

8 Aspectos Claves a considerar para diseñar el Programa de control de la próxima temporada Conocer el nivel de sensibilidad de las poblaciones locales a las moléculas fungicidas base de los programas de control. Por qué? Porque las poblaciones presentan alta variabilidad genética y son dinámicas, cambian según el manejo (presión fungicida) al que hayan sido sometidas Cómo? Mediante monitoreos de Sensibilidad

9 Y para ello es indispensable. Elección del cuartel más representativo del predio-cv. Marcaje de al menos 6 a 7 sectores por Cuartel Colecta de muestras desde cada sector Cuándo? 1) Post-aplicación de Plena Flor Flores asintomáticas ( desde cada sector) 2) Al momento de la cosecha Frutos sintomáticos (15 a 20 frutos con botrytis) colectados completamente al azar desde distintos ramilletes de cada sector Predio:x Sector 1

10 Cuartel representativo sectores de muestreo X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X Sector 1 X 20 X X X X Sector 3 X X X X X X X X X X X X Sector 2 X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X Flores / colecta 1 X X X X X X X X X 7 a 12 frutos sintomáticos en colecta 2 (precosecha) X X X X X X X X X Sector 5 X X X X X X X Sector 4 X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X Sector 6 X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

11 14 días de incubación a 20 C, evaluaciones : 7 y 14 días Importancia de AVISO DE COLECTA Y ENVÍO DE MUESTRAS AL LAB. MÍNIMO 4 DÍAS ANTES DE LA FECHA DE COLECTA

12 Técnicas de diagnóstico de sensibilidad a fungicidas Evaluación del efecto fungicida sobre el Crecimiento miceliar Evaluación del efecto fungicida sobre la Germinación conidial Evaluación del efecto fungicida sobre la elongación del tubo germinativo

13 Evaluación del efecto fungicida sobre el Crecimiento miceliar (mm) del patógeno Sin F Sin F Con F Con F Sensible Sensible Resistente Resultado: Valores a cada molécula de interés

14 Evaluación del efecto fungicida sobre la Germinación / elongación de tubo germinativo del patógeno Sin Fungicida Con Fungicida Sensible Resistente Resultado: Valores a cada molécula de interés

15 Interpretación de Resultados Cuantificación de la resistencia: Parámetros de Resistencia para un análisis adecuado de los resultados El objetivo es poder establecer Cuándo se puede considerar que la pérdida de sensibilidad puede traducirse en un riesgo de pérdida de eficacia a nivel de campo?

16 Parámetros calculados: 1. Índice de R 0, Altamente sensible [AS] Sensible [S] Levemente resistente [LR] Moderada resistencia [MR] Alta resistencia [AR] Eficacia de Campo Niveles de sensibilidad normal Resistencia Biológica reducida RIESGO Resistencia de campo (pérdida de eficacia) Índice de resistencia Frecuencia de aislados resistentes Baja [ < 10 % ] Alta [ > 50 % ] Bajo [ 5 15 ] / + + Alto [ > 100 ] + / R C Eficacia de campo: ++ excelente, + aceptable, --- no aceptable 2. Frecuencia de R Fuente: Anne-Sophie Walker, INRA- Thiverval-Grignon, Francia, Workshop de Resistencia a Botryticidas U. de Chile InnovaChile, Proporción de Aislados en las distintas categorías de sensibilidad (S, LR, MR, AR) Lab. Fitopatología Frutal y Molecular/ mesterio@uchile.cl

17 RESULTADOS NIVELES DE INFECCIÓN Y NIVELES DE SENSIBILIDAD A: fenhexamid, fludioxonil, iprodione y Switch

18 Zona 1: Talca Predio: Agrícola del Alto Pelarco

19 Infección Floración Talca según variedades Legacy > Brigitta

20 1,5 Valores promedio por fungicida / Agrícola del Alto Pelarco variedad Legacy v/s Brigitta / flor 1,39 1,0 0,95 0,5 0,0 0,25 0,12 0,03 0,03 0,03 0,04 fenhexamid fludioxonil Switch iprodione 0,1 µg/ml 1 0,1 µg/ml 1 0,1 µg/ml 1 1 µg/ml 1 (Puntos de corte sensibilidad) LEGACY BRIGITTA

21 FENHEXAMID Floración, Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-15A 0,05 E1-15B 0,03 0,05 E1-15C 0,07 E1-16A 0,04 E1-16B 0,06 0,04 E1-16C 0,03 E1-17A 0,04 E1-17B 0,05 0,05 E1-17C 0,06 AGRÍCOLA DEL E1-18A 0,07 ALTO PELARCO LEGACY E1-18B IR: 20,53 0,10 FR: 9,5 % E1-18C 0,02 0,06 E1-19A 0,03 E1-19B 0,98 0,60 E1-19C 0,78 E1-20A 0,03 E1-20B 0,02 0,03 E1-20C 0,04 E1-21A 0,02 E1-21B 0,03 0,03 E1-21C 0,03 0,12 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-22A 0,020 E1-22B 0,051 0,05 E1-22C 0,070 E1-23A 3,870 E1-23B 0,022 1,31 E1-23C 0,031 E1-24A 0,030 E1-24B 0,099 0,07 E1-24C 0,089 AGRÍCOLA DEL E1-25A 0,020 ALTO PELARCO BRIGITTA E1-25B IR: 25,49 0,037 FR: 14,3 E1-25C 0,095 0,05 E1-26A 0,041 E1-26B 0,036 0,06 E1-26C 0,096 E1-27A 0,060 E1-27B 0,068 0,10 E1-27C 0,179 E1-28A 0,072 E1-28B 0,047 0,08 E1-28C 0,131 0,25 En ambas variedades los valores superaron el punto de corte de sensibilidad establecido para fenhexamid ( > 0,1µg/mL), pero los parámetros de resistencia se encuentran aún bajo los puntos críticos (IR<100 y FR <50%), por lo que por el momento la pérdida en sensibilidad al fungicida no estaría asociada a pérdida de eficacia del fungicida a nivel de campo.

22 IPRODIONE Floración Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-15A 1,19 E1-15B 1,14 1,03 E1-15C 0,77 E1-16A 1,06 E1-16B 1,31 1,16 E1-16C 1,10 E1-17A 4,69 E1-17B 6,72 4,13 E1-17C 0,97 AGRÍCOLA DEL E1-18A 0,75 ALTO PELARCO E1-18B 0,67 1,01 LEGACY IR: 2,89 E1-18C 1,62 FREC: 43% E1-19A 1,22 E1-19B 0,84 0,93 E1-19C 0,74 E1-20A 0,75 E1-20B 0,71 0,73 E1-20C 0,72 E1-21A 0,78 E1-21B 0,76 0,77 E1-21C 0,77 1,39 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-22A 0,53 E1-22B 0,93 0,69 E1-22C 0,60 E1-23A 1,00 E1-23B 3,97 1,92 E1-23C 0,78 E1-24A 0,66 E1-24B 0,82 0,80 E1-24C 0,92 AGRÍCOLA DEL E1-25A 0,61 ALTO PELARCO E1-25B 0,38 0,59 BRIGITTA IR: 2,18 E1-25C 0,77 FR: 29% E1-26A 0,70 E1-26B 0,68 0,81 E1-26C 1,04 E1-27A 0,80 E1-27B 0,81 0,94 E1-27C 1,21 E1-28A 1,06 E1-28B 0,7 0,95 E1-28C 1,08 0,95 En Legacy el valor promedio supera levemente el punto crítico de sensibilidad considerado para iprodione ( > 1µg/mL), pero en ambas variedades los parámetros de resistencia calculados señalan que por el momento las poblaciones se comportan como moderada a levemente resistentes (legacy y Brigitta, respectivamente).

23 Consideraciones generales: Poblaciones levemente resistentes a fenhexamid (Teldor); altamente sensibles a Switch (cyprodinil & fludioxonil), y leve a moderadamente resistentes a iprodione. Según los parámetros de resistencia calculados (IR y FR). Por el momento no existiría riesgo de pérdida de eficacia a nivel de campo para ninguno de los fungicidas evaluados. Comportamiento distinto entre variedades a estos fungicidas; fenhexamid sería más problemático en el caso de Brigitta y en el caso de iprodione de mayor gravedad en Legacy que en Brigitta. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,19 0,02 3,87 24,43 12% fludioxonil 0,03 0,009 0,085 0,00 0% Switch 0,04 0,004 0,085 0,00 0% iprodione 1,17 0,38 6,72 2,66 36%

24 Niveles de infección Precosecha temprana (pintón)

25 Precosecha temprana TALCA Niveles de infección Arándanos variedad Brigitta v/s Legacy / estadio precosecha temprana / Sociedad Agrícola Alto del Pelarco Porcentaje(%) de frutos con botrytis 50,0 45,0 40,0 35,0 30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5,0 0,0 10,0 8,3 11,0 6,8 1,5 1,1 7 días 14 días Total Brigitta Legacy evaluaciones Legacy > Brigitta

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27 FENHEXAMID - Precosecha Temprana, Alto de Pelarco Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-43A 0,20 AGRÍCOLA DEL ALTO PELARCO IR: 20,95 FR: 95% LEGACY E1-43B 7,69 E1-43C 0,27 E1-44A 0,10 E1-44B 0,23 E1-44C 0,10 E1-45A 0,47 E1-45B 0,15 E1-45C 0,08 E1-46A 20,13 E1-46B 0,51 E1-46C 0,15 E1-47A 0,14 E1-47B 0,27 E1-47C 0,20 E1-48A 0,33 E1-48B 0,20 E1-48C 0,23 E1-49A 0,17 E1-49B 0,11 E1-49C 0,16 2,72 0,14 0,23 6,93 0,20 0,25 0,15 1,52 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-50A 0,11 E1-50B 0,05 0,13 E1-50C 0,23 E1-51A 0,19 E1-51B 0,14 0,14 E1-51C 0,09 E1-52A 0,05 E1-52B 0,04 0,05 E1-52C 0,06 AGRÍCOLA DEL ALTO PELARCO IR: 22,06 FR: 29 % BRIGITTA E1-53A 0,05 E1-53B 0,53 E1-53C 0,03 E1-54A 0,04 E1-54B 0,05 E1-54C 5,24 E1-55A 0,02 E1-55B 0,09 E1-55C 0,04 E1-56A 0,03 E1-56B 0,05 E1-56C 0,04 0,20 1,78 0,05 0,04 0,34 En ambas variedades las poblaciones presentan valores promedio superiores al punto de corte de sensibilidad establecido para la molécula ( > 0,1µg/mL). En Legacy aunque predominan en la población los aislados resistentes solo 2 corresponden a aislados altamente resistentes (> 3 µg ml), y la mayoría son aislados levemente resistentes (0,1-0,3 µg/ml). En Brigitta en cambio, aunque también el valor promedio supera el punto de corte predominan más los aislados sensibles (1 de moderada y 1 de alta resistencia, > 0,3µg/mL y > 3 µg/ml, respectivamente).

28 IPRODIONE Precosecha Temprana, Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-43A 1,65 E1-43B 0,91 1,11 E1-43C 0,77 E1-44A 1,40 E1-44B 1,36 1,54 E1-44C 1,87 E1-45A 0,95 E1-45B 1,32 1,69 E1-45C 2,81 AGRÍCOLA DEL E1-46A 0,95 ALTO PELARCO E1-46B 0,87 1,03 LEGACY IR: 1,74 E1-46C 1,26 FR: 67% E1-47A 1,80 E1-47B 1,38 1,46 E1-47C 1,20 E1-48A 0,98 E1-48B 0,98 1,15 E1-48C 1,49 E1-49A 2,16 E1-49B 1,36 1,61 E1-49C 1,30 1,37 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-50A 1,42 E1-50B 0,91 1,16 E1-50C 1,14 E1-51A 1,06 E1-51B 0,79 0,83 E1-51C 0,63 E1-52A 1,68 E1-52B 1,67 1,41 E1-52C 0,89 AGRÍCOLA DEL E1-53A 1,13 ALTO PELARCO E1-53B 0,65 0,95 BRIGITTA IR: 1,53 E1-53C 1,06 FR: 52% E1-54A 1,00 E1-54B 0,95 0,90 E1-54C 0,76 E1-55A 0,85 E1-55B 1,40 1,01 E1-55C 0,77 E1-56A 1,08 E1-56B 1,06 1,03 E1-56C 0,95 1,04 En ambas variedades se detectá un predominio de aislados resistentes a iprodione (FR < 50%), con valores promedio que superan levemente el punto crítico de sensibilidad considerado para iprodione ( > 1µg/mL), pero con valores IR bastante bajos, por lo que el riesgo de pérdida de eficacia a sociado a la perdida de sensibilidad por el momento es solo moderado.

29 Consideraciones generales: En general en Precosecha temprana se detecta un incremento de los aislados resistentes a fenhexamid e iprodione. En fenhexamid, más del 60% de los aislados se comportan como resistentes, pero la gran mayoría se presentan con resistencia leve. Predominio de resistencia leve a iprodione y, Alta sensibilidad a Switch y a fludioxonil. FUNGICIDA MIN MAX IR FR Fenhexamid 0,95 0,02 20,13 29,27 62% fludioxonil 0,02 0,028 0,031 0,00 0% Switch 0,05 0,01 0,09 0,00 0% Iprodione 1,21 0,63 2,81 1,68 60%

30 Zona 1: Talca Predio: Agrícola del Alto Pelarco

31 Niveles de infección comparación por variedad Niveles de infección Arándanos Brigitta v/s Legacy / estadio precosecha tardía / Sociedad Agrícola Alto del Pelarco Porcentaje(%) de f rutos con botrytis ,9 9,6 3,9 3,7 0,2 0,7 7 días 14 días Total Brigitta Legacy evaluaciones Legacy > Brigitta

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33 FENHEXAMID Precosecha Tardía, Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-85A 0,03 E1-85B 0,22 0,13 E1-85C 0,14 E1-86A 0,10 E1-86B 0,10 0,08 E1-86C 0,04 E1-87A 0,08 E1-87B 0,10 0,10 E1-87C 0,11 AGRÍCOLA DEL E1-88A 0,19 ALTO PELARCO LEGACY E1-88B 0,26 IR: 3,17 FR: 81% E1-88C 0,11 0,19 E1-89A 0,11 E1-89B 0,26 0,20 E1-89C 0,23 E1-90A 0,08 E1-90B 0,14 0,17 E1-90C 0,28 E1-91A 0,31 E1-91B 0,26 0,24 E1-91C 0,15 0,16 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-92A 0,16 E1-92B 0,19 0,20 E1-92C 0,26 E1-93A 0,06 E1-93B 0,24 0,12 E1-93C 0,06 E1-94A 0,05 E1-94B 0,06 0,08 E1-94C 0,13 AGRÍCOLA DEL E1-95A 1,67 ALTO PELARCO BRIGITTA E1-95B 0,04 IR: 5,20 FR: 57% E1-95C 0,26 0,66 E1-96A 0,05 E1-96B 0,08 0,06 E1-96C 0,05 E1-97A 0,18 E1-97B 0,17 0,18 E1-97C 0,18 E1-98A 0,11 E1-98B 0,08 0,13 E1-98C 0,19 0,20 En ambas variedades las poblaciones presentan valores promedio superiores al punto de corte de sensibilidad establecido para la molécula ( > 0,1µg/mL). En Legacy aunque predominan en la población los aislados resistentes solo 1 corresponde a aislado moderadamente resistente ( > 0,3 µg/ml) y la gran mayoría son aislados levemente resistentes (0,1-0,3 µg/ml). En Brigitta es menor la frecuencia de resistencia (FR), pero el valor promedio y el índice de resistencia (IR) es mayor que en Legacy, por lo que ambas poblaciones se comportan como levemente resistentes a la molécula. Por la mayor frecuencia detectada se sugiere continuar con los monitoreos durante la próxima temporada.

34 SWITCH Precosecha Tardía, Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-85A 0,04 E1-85B 0,04 0,03 E1-85C 0,02 E1-86A 0,06 E1-86B 0,04 0,05 E1-86C 0,04 E1-87A 0,03 E1-87B 0,07 0,04 E1-87C 0,03 AGRÍCOLA DEL E1-88A 0,03 ALTO PELARCO E1-88B 0,06 0,04 LEGACY IR: 0 E1-88C 0,05 FR: 0% E1-89A 0,02 E1-89B 0,06 0,04 E1-89C 0,05 E1-90A 0,06 E1-90B 0,03 0,03 E1-90C 0,02 E1-91A 0,05 E1-91B 0,03 0,04 E1-91C 0,03 0,04 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-92A 0,09 E1-92B 0,04 0,06 E1-92C 0,04 E1-93A 0,05 E1-93B 0,02 0,04 E1-93C 0,04 E1-94A 0,01 E1-94B 0,02 0,02 E1-94C 0,03 AGRÍCOLA DEL E1-95A 0,06 ALTO PELARCO E1-95B 0,03 0,04 BRIGITTA IR: 7,12 E1-95C 0,03 FR: 14% E1-96A 0,04 E1-96B 0,05 0,04 E1-96C 0,04 E1-97A 0,31 E1-97B 0,16 0,27 E1-97C 0,36 E1-98A 0,04 E1-98B 0,03 0,04 E1-98C 0,04 0,07 Se mantiene un alto nivel de sensibilidad a la mezcla fungicida en las dos variedades ( < 0,1µg/mL) pero, que es absoluta en Legacy. En Brigitta aunque se detectan los primeros 3 aislados resistentes como predominan los sensibles los parámetros de resistencia calculados indican que no existiría por el momento riesgo alguno de pérdida de eficacia a nivel de campo.

35 IPRODIONE Precosecha Tardía, Talca variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-85A 0,97 E1-85B 1,25 0,96 E1-85C 0,65 E1-86A 0,77 E1-86B 0,47 0,67 E1-86C 0,77 E1-87A 0,72 E1-87B 0,62 0,70 E1-87C 0,77 AGRÍCOLA DEL E1-88A 0,79 ALTO PELARCO E1-88B 0,82 0,78 LEGACY IR: 1,5 E1-88C 0,73 FR: 14% E1-89A 0,80 E1-89B 0,60 0,82 E1-89C 1,06 E1-90A 0,74 E1-90B 0,75 0,77 E1-90C 0,84 E1-91A 1,01 E1-91B 0,78 0,83 E1-91C 0,68 0,79 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-92A 1,04 E1-92B 0,63 0,75 E1-92C 0,60 E1-93A 0,69 E1-93B 0,56 0,70 E1-93C 0,84 E1-94A 0,92 E1-94B 0,83 0,86 E1-94C 0,82 AGRÍCOLA DEL E1-95A 0,59 ALTO PELARCO E1-95B 0,74 0,76 BRIGITTA IR: 1,51 E1-95C 0,96 FR: 24% E1-96A 0,67 E1-96B 0,64 0,71 E1-96C 0,82 E1-97A 1,14 E1-97B 1,25 1,14 E1-97C 1,04 E1-98A 0,66 E1-98B 0,69 0,79 E1-98C 1,02 0,82 Al término de la temporada se detecta un nivel aceptable de sensibilidad a iprodione en las poblaciones del patógeno recuperadas desde ambas variedades, bajos valores, IR y FR inferiores a los puntos críticos.

36 Consideraciones generales: En general se detecta una mayor sensibilidad a fenhexamid que en épocas anteriores (< promedio, mínimos y máximos y < IR), y solo un leve incremento de la frecuencia de resistencia; una situación similar ocurre con iprodione. Se detectan los primeros aislados que superan el punto de corte establecido para Switch ( > 0,1µg/mL), pero se mantiene una absoluta sensibilidad a fludioxonil. Los resultados sugieren mantener monitoreo de las poblaciones a fenhexamid y Switch, que son los fungicidas base del control de botrytis en frutales y vides. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,19 0,03 1,67 3,98 69% fludioxonil 0,02 0,002 0,04 0,00 0% Switch 0,06 0,01 0,31 6,97 7% iprodione 0,80 0,47 1,25 1,50 19%

37 NIVELES DE INFECCIÓN FLORACIÓN Zona 2: Los Ángeles Predio: Agrícola Santa Carmen

38 Legacy > Brigitta FLORACIÓN Los Ángeles

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40 FENHEXAMID Floración, Los Ángeles variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-1A 0,02 E1-1B 0,03 0,24 E1-1C 0,64 E1-2A 0,04 E1-2B 0,02 0,08 E1-2C 0,18 E1-3A 0,05 E1-3B 0,04 0,03 E1-3C 0,02 AGRICOLA SANTA E1-4A 0,02 CARMEN LEGACY E1-4B 0,02 0,44 IR: 17,73 E1-4C 0,03 FR: 19% E1-5A 1,29 E1-5B 0,04 0,04 E1-5C 0,03 E1-6A 0,04 E1-6B 0,04 0,07 E1-6C 0,04 E1-7A 0,13 E1-7B 0,04 0,03 E1-7C 0,03 0,13 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-8A 0,08 E1-8B 0,05 0,07 E1-8C 0,08 E1-9A 12,54 E1-9B 0,43 4,34 E1-9C 0,04 E1-10A 0,11 E1-10B 0,04 0,06 E1-10C 0,04 AGRICOLA SANTA E1-11A 0,05 CARMEN BRIGITTA E1-11B 0,06 0,05 IR: 69,89 E1-11C 0,03 FR: 19,04% E1-12A 0,05 E1-12B 0,05 0,05 E1-12C 0,05 E1-13A 0,05 E1-13B 0,03 0,05 E1-13C 0,07 E1-14A 0,05 E1-14B 0,12 0,07 E1-14C 0,05 0,67 Las poblaciones recuperadas desde Brigitta presentan aparentemente un menor nivel de sensibilidad a fenhexamid que las recuperadas desde Legacy, pero ello se debe a un valor muy alto de de un solo aislado (E1-9A= 12,54 µg/ml) que incrementa el índice de resistencia (IR). En Legacy el valor supera levemente el punto de corte ( = 0,1 µg/ml). En los dos casos los resultados señalan que por el momento que las poblaciones se comportan mayoritariamente como sensibles al fungicida.

41 IPRODIONE Floración, Los Ángeles variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-1A 0,50 E1-1B 1,02 0,73 E1-1C 0,67 E1-2A 0,81 E1-2B 0,89 0,82 E1-2C 0,77 E1-3A 0,88 E1-3B 0,68 0,76 AGRICOLA SANTA CARMEN IR: 2,51 FR: 19% LEGACY E1-3C 0,72 E1-4A 0,90 E1-4B 0,27 E1-4C 4,26 E1-5A 0,74 E1-5B 0,89 E1-5C 0,97 E1-6A 1,20 E1-6B 1,04 E1-6C 0,76 E1-7A 0,77 E1-7B 0,73 E1-7C 0,78 1,81 0,87 1,00 0,76 0,96 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-8A 1,23 E1-8B 0,89 0,92 E1-8C 0,63 E1-9A 3,72 E1-9B 0,82 1,73 E1-9C 0,64 E1-10A 0,87 E1-10B 0,82 0,84 AGRICOLA SANTA CARMEN IR: 1,98 FR: 48% BRIGITTA E1-10C 0,84 E1-11A 1,46 E1-11B 0,80 E1-11C 1,23 E1-12A 0,97 E1-12B 1,44 E1-12C 1,08 E1-13A 1,34 E1-13B 1,16 E1-13C 0,70 E1-14A 1,18 E1-14B 1,57 E1-14C 0,59 1,16 1,16 1,07 1,11 1,14 En relación a iprodione, en ambas variedades la pérdida de sensibilidad por el momento no tendría implicancias de pérdida de eficacia a nivel de campo, presentando un mayor riesgo potencial Brigitta que Legacy porque la frecuencia de aislados resistentes de la población analizada es cercana al 50 % y valor promedio está levemente sobre el punto de corte de sensibilidad al fungicida ( < 0,1µg/mL). En Legacy el valor es solo levemente inferior a éste, y los parámetros de resistencia calculados indican por el momento un nivel aceptable de sensibilidad y de eficacia a nivel de campo,

42 Consideraciones generales: Las poblaciones recuperadas desde Brigitta presentan menor sensibilidad a fenhexamid que las recuperadas desde Legacy. Ambas poblaciones se comportaron como altamente sensibles a Switch y a fludioxonil. En relación a iprodione, en ambas variedades la pérdida de sensibilidad por el momento no tendría implicancias de pérdida de eficacia a nivel de campo, y de acuerdo a éstos resultados sería más crítica en Brigitta que en Legacy. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,40 0,02 12,54 46,60 19% fludioxonil 0,02 0,016 0,046 0,00 0% Switch 0,03 0,002 0,065 0,00 0% iprodione 1,05 0,50 4,26 2,16 33%

43 NIVELES DE INFECCIÓN PRECOSECHA TEMPRANA (PINTÓN) Zona 2: Los Ángeles Predio: AGRÍCOLA SANTA CARMEN

44 PRECOSECHA TEMPRANA LOS ÁNGELES Niveles de infección Arándanos variedad Brigitta v/s Legacy / estadio precosecha temprana / Agrícola Santa Carmen Porcentaje(%) de frutos con botrytis ,2 0,2 4,1 2,3 4,4 7 días 14 días Total evaluaciones 2,6 Brigitta Legacy Legacy < Brigitta

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46 FENHEXAMID - Precosecha temprana, Los Ángeles, variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-57A 0,02 E1-57B 0,08 0,04 E1-57C 0,03 E1-58A 0,05 E1-58B 0,03 0,04 E1-58C 0,03 E1-59A 0,03 E1-59B 0,03 0,20 E1-59C 0,53 AGRÍCOLA SANTA E1-60A 0,02 CARMEN LEGACY IR: 75,91 E1-60B 0,04 0,03 FR: 19% E1-60C 0,04 E1-61A 0,08 E1-61B 14,02 4,73 E1-61C 0,10 E1-62A 0,07 E1-62B 0,06 0,06 E1-62C 0,04 E1-63A 0,16 E1-63B 0,08 0,11 E1-63C 0,09 0,74 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-64A 0,10 E1-64B 0,24 0,16 E1-64C 0,13 E1-65A 0,09 E1-65B 0,11 0,11 E1-65C 0,12 E1-66A 0,09 E1-66B 0,03 0,07 E1-66C 0,09 AGRÍCOLA SANTA CARMEN IR: 12,48 FR: 62% BRIGITTA E1-67A 0,17 E1-67B 7,90 E1-67C 2,1E-05 E1-68A 0,10 E1-68B 0,20 E1-68C 0,11 E1-69A 0,10 E1-69B 0,11 E1-69C 0,09 E1-70A 0,04 E1-70B 0,13 E1-70C 0,04 2,69 0,14 0,10 0,07 0,48 En var. Legacy se detectó un predominio de aislados sensibles, IR alto se incrementa en base a valor de un solo aislado (E1-61B). En cambio en Brigitta predominaron los aislados resistentes, pero la mayoría con excepción de un aislado (E1-67B) corresponden a aislados levemente resistentes.

47 IPRODIONE Precosecha Temprana, Los Ángeles, vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-57A 0,64 E1-57B 0,82 0,82 E1-57C 0,99 E1-58A 1,10 E1-58B 0,73 0,83 E1-58C 0,67 E1-59A 0,69 E1-59B 1,04 0,94 E1-59C 1,09 AGRÍCOLA E1-60A 0,94 SANTA CARMEN E1-60B 0,68 0,86 LEGACY IR: 1,97 E1-60C 0,96 FR: 29% E1-61A 1,04 E1-61B 4,28 2,05 E1-61C 0,82 E1-62A 0,97 E1-62B 0,91 0,94 E1-62C 0,95 E1-63A 0,88 E1-63B 1,22 0,95 E1-63C 0,75 1,06 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-64A 0,37 E1-64B 0,81 0,79 E1-64C 1,19 E1-65A 0,86 E1-65B 0,85 0,85 E1-65C 0,85 E1-66A 0,71 E1-66B 0,82 0,78 E1-66C 0,81 AGRÍCOLA E1-67A 0,71 SANTA CARMEN E1-67B 4,12 1,99 BRIGITTA IR: 2,18 E1-67C 1,15 FREC: 33,3% E1-68A 1,08 E1-68B 1,00 0,95 E1-68C 0,78 E1-69A 0,80 E1-69B 1,77 1,30 E1-69C 1,34 E1-70A 0,69 E1-70B 0,89 0,77 E1-70C 0,74 1,06 En ambas variedades los valores promedios se mantienen estables y cercanos al punto de corte de sensibilidad establecido para iprodione ( = 1 µg/ml) pero, se detectan variaciones en los parámetros calculados; en Legacy sube la frecuencia pero baja el índice de resistencia, y lo contrario ocurre en Brigitta. Los resultados obtenidos señalan que por el momento la pérdida de sensibilidad detectada en ambas poblaciones aún no puede ser asociada a pérdida de eficacia del fungicida a nivel de campo.

48 Consideraciones generales: En precosecha temprana se detectó un comportamiento muy similar al observado en floración en ambas variedades. Las dos poblaciones presentaron menor sensibilidad a fenhexamid, pero no están a nivel crítico de pérdida de eficacia a nivel de campo; en las dos variedades los índices de resistencia se incrementaron en base al valor excesivamente alto de un solo aislado (14,02 y 7,9, Legacy y Brigitta, respectivamente). Ambas poblaciones se comportaron como altamente sensibles a Switch y a fludioxonil. En relación a iprodione, en ambas variedades los niveles de sensibilidad por el momento se mantienen estables. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,61 2,1E-05 14,02 27,56 41% fludioxonil 0,02 0,023 0,014 0,00 0% Switch 0,02 0,05 0,01 0,00 0% iprodione 1,06 0,37 4,28 2,07 32%

49 NIVELES DE INFECCIÓN PRECOSECHA TARDÍA Zona 2: Los Ángeles Predio: AGRÍCOLA SANTA CARMEN

50 Niveles de infección comparación por variedad Niveles de infección Arándanos Brigitta v/s Legacy / estadio precosecha tardía / Agrícola Santa Carmen Porcentaje(%) de frutos con botrytis ,2 10,6 3,9 4,1 0,2 1,4 7 días 14 días Total Brigitta Legacy evaluaciones Legacy > Brigitta

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52 FENHEXAMID - Precosecha tardía, variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1 99A 0,25 E1-99B 0,15 0,18 E1-99C 0,17 E1-100A 0,17 E1-100B 0,07 0,08 E1-100C 0,12 E1-101A 0,05 E1-101B 0,09 0,66 E1-101C 1,83 AGRÍCOLA SANTA E1-102A 0,06 CARMEN LEGACY E1-102B IR: 9,49 0,05 0,47 FR: 52% E1-102C 0,06 E1-103A 1,29 E1-103B 0,09 0,55 E1-103C 1,52 E1-104A 0,04 E1-104B 0,04 0,11 E1-104C 0,12 E1-105A 0,17 E1-105B 0,28 0,16 E1-105C 0,03 0,32 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-106A 0,09 E1-106B 0,04 0,07 E1-106C 0,08 E1-107A 0,09 E1-107B 0,06 0,07 E1-107C 0,06 E1-108A 12,58 E1-108B 0,29 4,40 E1-108C 0,31 AGRÍCOLA E1-109A 0,13 SANTA CARMEN BRIGITTA E1-109B IR: 20,47 0,06 0,14 FR: 48% E1-109C 0,25 E1-110A 0,09 E1-110B 0,15 0,16 E1-110C 0,26 E1-111A 0,20 E1-111B 0,08 0,11 E1-111C 0,04 E1-112A 0,11 E1-112B 0,08 0,11 E1-112C 0,13 0,72 En Legacy valores IR señalan un nivel de pérdida de sensibilidad leve, pero la FR se encuentra a nivel crítico (FR> 50%). En Brigitta valores IR se incrementan y FR muy cercano al 50%. En las 2 poblaciones analizadas los valores, superan el punto de corte de sensibilidad establecido para la molécula ( > 0,1µg.mL) siendo particularmente mayor en el caso de Brigitta, en donde el promedio corresponde a aislados moderadamente resistentes. En las dos variedades por el momento la pérdida de sensibilidad no puede asociarse a pérdida de eficacia del fungicida a nivel de campo.

53 SWITCH - Precosecha tardía, Los Ángeles variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-99A 0,04 E1-99B 0,09 0,07 E1-99C 0,08 E1-100A 0,03 E1-100B 0,02 0,03 E1-100C 0,04 E1-101A 0,04 E1-101B 0,04 0,13 E1-101C 0,31 E1-102A 0,07 AGRÍCOLA SANTA CARMEN E1-102B 0,03 0,04 LEGACY IR: 6,25 E1-102C 0,02 FR: 9,5% E1-103A 0,04 E1-103B 0,17 0,08 E1-103C 0,03 E1-104A 0,02 E1-104B 0,02 0,02 E1-104C 0,03 E1-105A 0,02 E1-105B 0,03 0,02 E1-105C 0,02 0,06 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-106A 0,03 E1-106B 0,05 0,04 E1-106C 0,03 E1-107A 0,03 E1-107B 0,01 0,02 E1-107C 0,02 E1-108A 0,03 E1-108B 0,03 0,03 E1-108C 0,02 AGRÍCOLA E1-109A 0,05 SANTA CARMEN E1-109B 0,03 0,04 BRIGITTA IR: 0 E1-109C 0,05 FR: 0% E1-110A 0,02 E1-110B 0,04 0,03 E1-110C 0,03 E1-111A 0,03 E1-111B 0,03 0,02 E1-111C 0,02 E1-112A 0,02 E1-112B 0,02 0,02 E1-112C 0,03 0,03 Las dos poblaciones analizadas presentan valores inferiores al punto de corte de sensibilidad considerado para la mezcla fungicida ( = 0,1µg/mL). En var Legacy: Predominio de aislados sensibles pero, se detectan los primeros aislados resistentes (2).En var. Brigitta toda la población analizada se comportó como altamente sensible a Switch.

54 IPRODIONE Precosecha Tardía, Los Ángeles vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-99A 1,04 E1-99B 0,85 0,84 E1-99C 0,63 E1-100A 0,65 E1-100B 0,83 0,82 E1-100C 0,97 E1-101A 0,72 E1-101B 0,72 2,08 E1-101C 4,81 AGRÍCOLA E1-102A 2,67 SANTA CARMEN E1-102B 0,71 1,40 LEGACY IR: 3,49 E1-102C 0,80 FR: 24% E1-103A 0,91 E1-103B 1,23 0,97 E1-103C 0,77 E1-104A 3,65 E1-104B 0,73 1,65 E1-104C 0,57 E1-105A 0,99 E1-105B 0,79 0,80 E1-105C 0,62 1,22 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-106A 5,10 E1-106B 1,19 2,34 E1-106C 0,72 E1-107A 0,74 E1-107B 0,71 0,72 E1-107C 0,72 E1-108A 3,55 E1-108B 0,81 1,78 E1-108C 0,97 AGRÍCOLA E1-109A 0,81 SANTA CARMEN E1-109B 4,98 2,18 BRIGITTA IR: 4,97 E1-109C 0,77 FR: 24% E1-110A 0,69 E1-110B 0,83 0,88 E1-110C 1,12 E1-111A 0,48 E1-111B 0,43 0,39 E1-111C 0,26 E1-112A 0,40 E1-112B 0,44 0,44 E1-112C 0,49 1,25 En general, aunque se detectan leves incrementos en los valores de las dos poblaciones analizadas y en el índice de resistencia, la frecuencia de aislados resistentes disminuye en ambas. Los resultados obtenidos señalan una mantención de la condición observada en Precosecha temprana respecto a eficacia del fungicida a nivel de campo (nivel de sensibilidad no asociado a pérdida de eficacia).

55 Consideraciones generales: En Precosecha tardía el valor promedio es mayor en Legacy que en Brigitta, (0,32 4 v/s 0,72), y existe una mayor frecuencia de aislados con menor sensibilidad en Brigitta que en Legacy pero solo en esta última variedad se detecta una disminución de los valores promedios respecto de precosecha temprana (0,74 y 0,48µg ml -1, Legacy y Brigitta, respectivamente). Ambas poblaciones se comportaron como altamente sensibles a fludioxoni y a Switch. En ésta última molécula si bien sigue manteniéndose un nivel alto de sensibilidad y sin riesgo alguno de pérdida de eficacia a nivel de campo, los valores se incrementan levemente, detectándose en Legacy los primeros aislados que superan el punto de corte de sensibilidad establecido para la molécula. En relación a iprodione, en ambas variedades los niveles de sensibilidad por el momento no tendrían implicancias de pérdida de eficacia a nivel de campo, pero tendría que ser revaluada en próximas temporadas, debido a que se detectan al final de la temporada incrementos que debieran ser monitoreados. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,52 0,03 12,58 11,58 50% fludioxonil 0,02 0,01 0,06 0,00 0% Switch 0,05 0,02 0,31 6,05 5% iprodione 1,24 0,26 5,1 4,17 21%

56 NIVELES DE INFECCIÓN FLORACIÓN ZONA 3: RÍO BUENO ZONA SUR (VISTA HERMOSA)

57 Infección FLORACIÓN, Río Bueno Brigitta > Legacy

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59 FENHEXAMID Floración, Río Bueno, cvs. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-29A s/r E1-29B 0,045 0,04 E1-29C 0,030 E1-30A 0,052 E1-30B 0,079 0,20 E1-30C 0,049 E1-31A 0,463 E1-31B 0,049 0,38 E1-31C 0,084 E1-32A 0,999 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 34,97 FR: 40% LEGACY E1-32B 9,873 E1-32C 0,048 E1-33A 0,043 E1-33B 0,444 E1-33C 0,759 E1-34A 0,043 E1-34B 0,712 E1-34C 0,149 E1-35A 0,037 E1-35B 0,038 E1-35C 0,536 3,32 0,42 0,30 0,29 * s/r= sin rescate, aislado contaminado 0,70 PREDIO CULTIVAR MUESTRA FUNDO VISTA HERMOSA IR: 7,46 FR: 52% BRIGITTA E1-36A 0,045 E1-36B 0,052 E1-36C 0,136 E1-37A 0,336 E1-37B 0,030 E1-37C 0,033 E1-38A 0,481 E1-38B 0,055 E1-38C 0,136 E1-39A 0,026 E1-39B 0,308 E1-39C 0,043 E1-40A 0,103 E1-40B 0,062 E1-40C 0,046 E1-41A 0,176 E1-41B 0,103 E1-41C 0,019 E1-42A 1,367 E1-42B 0,101 E1-42C 0,120 0,08 0,13 0,22 0,13 0,07 0,10 0,53 0,18 Aunque en Legacy los parámetros de resistencia se encuentran bajo los puntos críticos (IR <100 y FR <50%), los valores son muy superiores a los detectados en Brigitta.

60 SWITCH - Floración Río Bueno, variedades Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-29A s/r E1-29B 0,028 0,02 E1-29C 0,019 E1-30A 0,038 E1-30B 0,081 0,05 E1-30C 0,028 E1-31A 0,040 E1-31B 0,034 0,04 E1-31C 0,041 FUNDO VISTA E1-32A 0,039 HERMOSA E1-32B 0,025 0,03 LEGACY IR:0 E1-32C 0,028 FR: 0% E1-33A 0,018 E1-33B 0,024 0,03 E1-33C 0,042 E1-34A 0,032 E1-34B 0,060 0,04 E1-34C 0,023 E1-35A 0,031 E1-35B 0,023 0,03 E1-35C 0,032 S/R: sin rescate, islado contaminado 0,03 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-36A 0,020 E1-36B 0,039 0,06 E1-36C 0,108 E1-37A 0,090 E1-37B 0,024 0,04 E1-37C 0,019 E1-38A 0,036 E1-38B 0,031 0,03 E1-38C 0,035 FUNDO VISTA E1-39A 0,030 HERMOSA E1-39B 0,031 0,03 BRIGITTA IR: 5,07 E1-39C 0,027 FR: 9,5% E1-40A 0,042 E1-40B 0,266 0,12 E1-40C 0,045 E1-41A 0,046 E1-41B 0,055 0,04 E1-41C 0,016 E1-42A 0,047 E1-42B 0,037 0,04 E1-42C 0,032 0,05 Se mantiene un alto nivel de sensibilidad en las poblaciones analizadas de las dos variedades. Sin embargo, en Brigitta al igual que en Los Ángeles, se detecta inicio de pérdida de sensibilidad a la mezcla fungicida (2 aislados superan el punto de corte considerado para Switch).

61 FLUDIOXONIL Floración, Río Bueno, cvs. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-29A s/r E1-29B 0,011 0,01 E1-29C 0,007 E1-30A 0,017 E1-30B 0,023 0,02 E1-30C 0,021 E1-31A 0,021 E1-31B 0,022 0,02 E1-31C 0,021 E1-32A 0,023 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FR: 0% LEGACY E1-32B 0,023 E1-32C 0,018 E1-33A 0,023 E1-33B 0,024 E1-33C 0,024 E1-34A 0,010 E1-34B 0,018 E1-34C 0,017 E1-35A 0,023 E1-35B 0,015 E1-35C 0,017 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-36A 0,023 E1-36B 0,009 0,02 E1-36C 0,020 E1-37A 0,022 E1-37B 0,017 0,02 E1-37C 0,018 E1-38A 0,021 E1-38B 0,020 0,02 E1-38C 0,024 E1-39A 0,012 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FR: 0% BRIGITTA E1-39B 0,023 E1-39C 0,023 E1-40A 0,023 E1-40B 0,078 E1-40C 0,011 E1-41A 0,023 E1-41B 0,021 E1-41C 0,014 E1-42A 0,019 E1-42B 0,019 E1-42C 0,017 0,02 0,04 0,02 0,02 0,02 Se mantiene un nivel de sensibilidad absoluto a la molécula.

62 IPRODIONE Floración, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-29A s/r E1-29B 1,31 1,22 E1-29C 1,12 E1-30A 0,84 E1-30B 1,03 1,39 E1-30C 2,29 E1-31A 0,88 E1-31B 0,83 0,95 E1-31C 1,14 FUNDO VISTA E1-32A 0,58 HERMOSA E1-32B 4,76 1,91 LEGACY IR: 2,60 E1-32C 0,38 FR: 35% E1-33A 0,90 E1-33B 0,60 0,70 E1-33C 0,59 E1-34A 0,79 E1-34B 1,08 0,82 E1-34C 0,60 E1-35A 0,52 E1-35B 0,90 0,69 E1-35C 0,65 1,10 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-36A 0,60 E1-36B 1,24 0,92 E1-36C 0,91 E1-37A 0,58 E1-37B 1,18 0,94 E1-37C 1,07 E1-38A 0,64 E1-38B 1,45 0,97 E1-38C 0,83 FUNDO VISTA E1-39A 0,20 HERMOSA E1-39B 0,42 0,29 BRIGITTA IR: 2,32 E1-39C 0,25 FR: 19% E1-40A 0,68 E1-40B 0,61 0,61 E1-40C 0,54 E1-41A 0,40 E1-41B 0,54 0,44 E1-41C 0,37 E1-42A 0,61 E1-42B 0,46 0,49 E1-42C 0,39 0,66 Se detectan diferencias entre variedades, la población de Legacy presenta un valor levemente superior al punto de corte establecido para iprodione ( = 1µg/mL), en cambio, en Brigitta el valor de es inferior a éste (1,1 v/s 0,66 µg/ml). Los resultados señalan un nivel de leve resistencia en Legacy y de una sensibilidad aceptable en Brigitta.

63 Consideraciones generales: A diferencia de lo detectado en las otras dos localidades en Río Bueno, se detecta en Legacy un mayor nivel de pérdida de sensibilidad a fenhexamid que en Brigitta. Según los parámetros de resistencia calculados (IR y FR) la molécula con un eventual mayor riesgo de pérdida de eficacia a nivel de campo sería fenhexamid, especialmente en el caso de Legacy. Alta sensibilidad a Switch (cyprodinil & fludioxonil), pero en Brigitta, se detectan 2 aislados que superan el punto de corte a Switch. Ninguno de los aislados analizados se comportó como resistente a fludioxonil. En Switch la molécula que está parando la resistencia a cyprodinil es fludioxonil, por lo que el resultado obtenido es importante e indica la necesidad de realizar un mejor posicionamiento del producto y en una dosis adecuada para mantener la eficacia de la mezcla. Las poblaciones son levemente resistentes a iprodione en Legacy y de sensibilidad aceptable en Brigitta. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,44 0,019 9,87 19,87 46% fludioxonil 0,02 0,007 0,08 0,00 0% Switch 0,04 0,016 0,27 5,25 5% iprodione 0,88 0,20 4,76 2,66 27%

64 NIVELES DE INFECCIÓN PRECOSECHA TEMPRANA (PINTÓN) ZONA 3: RÍO BUENO ZONA SUR (VISTA HERMOSA)

65 INFECCIÓN PRECOSECHA TEMPRANA RÍO BUENO Legacy < Brigitta

66

67 FENHEXAMID Precosecha Temprana, Río Bueno, vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-71A 0,08 E1-71B 0,11 0,16 E1-71C 0,29 E1-72A 0,11 E1-72B 0,11 0,10 E1-72C 0,09 E1-73A 0,24 E1-73B 0,11 0,16 E1-73C 0,13 FUNDO VISTA E1-74A 0,13 HERMOSA LEGACY E1-74B 0,13 IR: 26,16 FR: 86% E1-74C 0,16 0,14 E1-75A 27,93 E1-75B 0,17 9,64 E1-75C 0,83 E1-76A 0,10 E1-76B 0,16 0,10 E1-76C 0,04 E1-77A 0,51 E1-77B 1,17 0,63 E1-77C 0,21 1,56 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-78A 0,66 E1-78B 1,15 0,61 E1-78C 0,04 E1-79A 0,34 E1-79B 0,10 0,18 E1-79C 0,10 E1-80A 0,07 E1-80B 0,13 0,12 E1-80C 0,16 FUNDO VISTA E1-81A 0,30 HERMOSA BRIGITTA E1-81B 0,36 IR: 5,52 FREC: 71% E1-81C 0,29 0,32 E1-82A 0,12 E1-82B 0,04 0,07 E1-82C 0,04 E1-83A 0,03 E1-83B 0,35 0,16 E1-83C 0,12 E1-84A 0,24 E1-84B 0,17 0,17 E1-84C 0,10 0,23 Se mantiene la tendencia detectada en Floración respecto a sensibilidad a fenhexamid; las poblaciones recuperadas de Legacy presentan una mayor pérdida de sensibilidad a la molécula que las recuperadas desde Brigitta y en las dos poblaciones analizadas existe un predominio de aislados resistentes.

68 SWITCH Precosecha temprana, Río Bueno, cvs. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-71A 0,02 E1-71B 0,09 0,04 E1-71C 0,02 E1-72A 0,05 E1-72B 0,02 0,04 E1-72C 0,06 E1-73A 0,01 E1-73B 0,10 0,08 E1-73C 0,13 FUNDO VISTA E1-74A 0,02 HERMOSA E1-74B 0,02 0,02 LEGACY IR: 3,32 E1-74C 0,02 FR: 9,5% E1-75A 0,02 E1-75B 0,02 0,02 E1-75C 0,04 E1-76A 0,05 E1-76B 0,07 0,04 E1-76C 0,01 E1-77A 0,05 E1-77B 0,04 0,04 E1-77C 0,03 0,04 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-78A 0,04 E1-78B 0,04 0,03 E1-78C 0,01 E1-79A 0,04 E1-79B 0,02 0,02 E1-79C 0,01 E1-80A 0,01 E1-80B 0,03 0,03 E1-80C 0,05 FUNDO VISTA E1-81A 0,04 HERMOSA E1-81B 0,01 0,03 BRIGITTA IR: 0 E1-81C 0,05 FR: 0% E1-82A 0,02 E1-82B 0,01 0,02 E1-82C 0,02 E1-83A 0,01 E1-83B 0,03 0,02 E1-83C 0,03 E1-84A 0,06 E1-84B 0,04 0,04 E1-84C 0,02 0,03 Se mantiene un alto nivel de sensibilidad a la mezcla en ambos variedades, los escasos 2 aislados que superaron el punto de corte en Legacy son solo levemente resistentes.

69 FLUDIOXONIL Precosecha Temprana, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-71A 0,024 E1-71B 0,019 0,02 E1-71C 0,025 E1-72A 0,039 E1-72B 0,021 0,03 E1-72C 0,024 E1-73A 0,025 E1-73B 0,032 0,03 E1-73C 0,027 E1-74A 0,024 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FREC: 0% LEGACY E1-74B 0,024 E1-74C 0,023 E1-75A 0,012 E1-75B 0,020 E1-75C 0,014 E1-76A 0,025 E1-76B 0,025 E1-76C 0,023 E1-77A 0,023 E1-77B 0,014 E1-77C 0,022 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-78A 0,019 E1-78B 0,018 0,01 E1-78C 0,006 E1-79A 0,023 E1-79B 0,023 0,02 E1-79C 0,022 E1-80A 0,023 E1-80B 0,023 0,02 E1-80C 0,010 E1-81A 0,022 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FREC: 0% BRIGITTA E1-81B 0,022 E1-81C 0,024 E1-82A 0,018 E1-82B 0,015 E1-82C 0,022 E1-83A 0,016 E1-83B 0,022 E1-83C 0,020 E1-84A 0,003 E1-84B 0,011 E1-84C 0,022 0,02 0,02 0,02 0,01 0,02 Se mantiene absoluta sensibilidad a Fludioxonil en ambas variedades.

70 IPRODIONE Precosecha Temprana, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-71A 0,67 E1-71B 0,64 0,63 E1-71C 0,60 E1-72A 5,78 E1-72B 0,85 4,27 E1-72C 6,17 E1-73A 1,33 E1-73B 3,08 3,26 E1-73C 5,37 FUNDO VISTA E1-74A 0,65 HERMOSA E1-74B 0,82 0,73 LEGACY IR: 4,77 E1-74C 0,73 FR: 38,09% E1-75A 2,56 E1-75B 0,85 1,34 E1-75C 0,60 E1-76A 0,68 E1-76B 1,71 1,40 E1-76C 1,82 E1-77A 0,86 E1-77B 0,73 E1-77C 0,78 0,79 1,78 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-78A 0,78 E1-78B 0,74 1,08 E1-78C 1,74 E1-79A 1,41 E1-79B 3,49 2,72 E1-79C 3,26 E1-80A 4,06 E1-80B 3,90 2,88 E1-80C 0,68 FUNDO VISTA E1-81A 0,87 HERMOSA E1-81B 1,05 0,92 BRIGITTA IR: 3,81 E1-81C 0,86 FR: 48% E1-82A 3,33 E1-82B 3,54 3,31 E1-82C 3,06 E1-83A 0,42 E1-83B 0,72 E1-83C 0,92 E1-84A 0,67 E1-84B 0,88 E1-84C 0,79 0,69 0,78 1,77 En esta época se incrementó el valor de todos los parámetros de resistencia en las dos poblaciones analizadas ( >, IR y FR). El mayor incremento se presentó particularmente en Brigitta en la frecuencia de resistencia detectada respecto de lo obtenido en la época anterior, en donde de 19% de aislados resistentes sube a 48%, valor muy cercano al crítico en este parámetro.

71 Consideraciones generales: Las poblaciones de Botrytis cinerea se enfrentan a condiciones más extremas y por lo tanto mayor es el riesgo de pérdida de sensibilidad a las distintas moléculas fungicidas. Poblaciones recuperadas desde cv. Legacy se comportan como más resistentes a fenhexamid que las recuperadas desde Brigitta. En iprodione se detectaron incrementos en los niveles de pérdida de sensibilidad de las poblaciones analizadas de las dos variedades, siendo un poco más crítica en el caso de Brigitta que de Legacy (> fr). Se mantiene un alto nivel de sensibilidad a fludioxonil como a la mezcla cyprodinil & fludioxonil (Switch). FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,90 0,03 27,93 18,83 79% fludioxonil 0,02 0,003 0,039 0,00 0% Switch 0,04 0,01 0,13 3,66 5% iprodione 1,78 0,42 6,17 4,24 43%

72 NIVELES DE INFECCIÓN PRECOSECHA TARDÍA ZONA 3: RÍO BUENO ZONA SUR (VISTA HERMOSA)

73 INFECCIÓN RÍO BUENO PRECOSECHA TARDÍA SEGÚN VARIEDADES Legacy > Brigitta

74

75 FENHEXAMID Precosecha Tardía, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-113A 0,25 E1-113B 0,20 0,11 E1-113C 0,06 E1-114A 0,07 E1-114B 0,17 0,31 E1-114C 0,38 E1-115A 0,36 E1-115B 0,17 0,54 E1-115C 0,21 FUNDO VISTA E1-116A 1,24 HERMOSA LEGACY E1-116B 0,10 IR: 6,26 FR: 52% E1-116C 0,08 0,07 E1-117A 0,03 E1-117B 0,05 0,04 E1-117C 0,05 E1-118A 0,03 E1-118B 0,16 0,10 E1-118C 0,03 E1-119A 0,12 E1-119B 0,04 0,04 E1-119C 0,03 0,17 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-120A 0,03 E1-120B 0,16 0,07 E1-120C 0,02 E1-121A 0,05 E1-121B 0,05 0,06 E1-121C 0,08 E1-122A 0,20 E1-122B 0,05 0,14 E1-122C 0,17 FUNDO VISTA E1-123A 0,02 HERMOSA E1-123B 0,02 0,88 BRIGITTA IR: 13,07 E1-123C 2,61 FR: 29% E1-124A 0,05 E1-124B 0,20 0,10 E1-124C 0,05 E1-125A 0,08 E1-125B 0,05 0,05 E1-125C 0,02 E1-126A 0,04 E1-126B 0,05 0,05 E1-126C 0,05 0,19 En esta época respecto de época anterior (precosecha temprana), se detectan incrementos en los niveles de sensibilidad en las poblaciones analizadas de las dos variedades (< ); incrementos que son mayores en Legacy que en Brigitta (1,56 µg/ml a 0,17 µg ml y de 0,23 µg/ml a 0,19µg/mL). Pero, también, es importante señalar que se detectó disminución de la frecuencia de los aislados resistentes en las dos poblaciones analizadas respecto de precosecha temprana.

76 FLUDIOXONIL Precosecha Tardía, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-113A 0,012 E1-113B 0,013 0,02 E1-113C 0,017 E1-114A 0,022 E1-114B 0,010 0,02 E1-114C 0,019 E1-115A 0,023 E1-115B 0,022 0,02 E1-115C 0,019 E1-116A 0,015 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FR: 0% LEGACY E1-116B 0,014 E1-116C 0,023 E1-117A 0,023 E1-117B 0,023 E1-117C 0,010 E1-118A 0,016 E1-118B 0,041 E1-118C 0,023 E1-119A 0,075 E1-119B 0,017 E1-119C 0,018 0,02 0,02 0,05 0,02 0,02 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-120A 0,017 E1-120B 0,057 0,03 E1-120C 0,018 E1-121A 0,037 E1-121B 0,021 0,03 E1-121C 0,022 E1-122A 0,039 E1-122B 0,020 0,02 E1-122C 0,014 E1-123A 0,019 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 0 FR: 0% BRIGITTA E1-123B 0,013 E1-123C 0,021 E1-124A 0,031 E1-124B 0,021 E1-124C 0,033 E1-125A 0,048 E1-125B 0,019 E1-125C 0,024 E1-126A 0,018 E1-126B 0,020 E1-126C 0,043 0,02 0,03 0,03 0,03 0,03 Se mantiene UNA ABSOLUTA sensibilidad a fludioxonil, ninguno de los aislados analizados en ambas variedades superaron el punto de corte establecido para la molécula ( < 0,1µg ml).

77 SWITCH Precosecha tardía, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-113A 0,04 E1-113B 0,02 0,03 E1-113C 0,02 E1-114A 0,05 E1-114B 0,07 0,06 E1-114C 0,05 E1-115A 0,09 E1-115B 0,06 0,10 E1-115C 0,15 FUNDO VISTA E1-116A 0,03 HERMOSA E1-116B 0,08 0,07 LEGACY IR: 3,79 E1-116C 0,09 FR: 19% E1-117A 0,08 E1-117B 0,09 0,08 E1-117C 0,07 E1-118A 0,06 E1-118B 0,33 0,16 E1-118C 0,07 E1-119A 0,30 E1-119B 0,15 0,17 E1-119C 0,06 0,09 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-120A 0,08 E1-120B 0,43 0,19 E1-120C 0,07 E1-121A 0,20 E1-121B 0,09 0,14 E1-121C 0,13 E1-122A 0,20 E1-122B 0,04 0,10 E1-122C 0,07 E1-123A 0,08 E1-123B 0,10 0,07 FUNDO VISTA HERMOSA IR: 3,10 FR: 33% BRIGITTA E1-123C 0,03 E1-124A 0,13 E1-124B 0,04 E1-124C 0,06 E1-125A 0,16 E1-125B 0,09 E1-125C 0,05 E1-126A 0,09 E1-126B 0,05 E1-126C 0,05 En ambas variedades se detectaron incrementos en los parámetros de resistencia respecto de la época de precosecha temprana; en Legacy el valor promedio subió levemente (0,04 a 0,09 µg ml) manteniéndose bajo el punto crítico de sensibilidad considerado para la mezcla ( <0,1); lo mismo ocurrió con el IR (3,32 a 3,79), pero la frecuencia de resistencia subió de 9,5% a 19%. En Brigitta también se detectaron incrementos pero estos fueron notoriamente mayores que en Legacy (de 0,03 a 0,11 0µg ml; 0 a 3,1; y 0 a 33%, valores, IR y FR, Prec.Temprana v/s Prec. Tardía, respectivamente). 0,08 0,10 0,06 0,11

78 IPRODIONE Precosecha Tardía, Río Bueno vars. Legacy y Brigitta PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-113A 0,48 E1-113B 0,36 0,42 E1-113C 0,41 E1-114A 0,38 E1-114B 0,28 0,40 E1-114C 0,55 E1-115A 0,41 E1-115B 0,69 2,00 E1-115C 4,92 FUNDO VISTA E1-116A 0,41 HERMOSA E1-116B 0,35 0,38 LEGACY IR: 11,12 E1-116C 0,38 FR: 19% E1-117A 0,35 E1-117B 0,40 0,39 E1-117C 0,42 E1-118A 5,88 E1-118B 0,48 2,23 E1-118C 0,31 E1-119A 2,66 E1-119B 4,86 2,62 E1-119C 0,36 1,21 PREDIO CULTIVAR MUESTRA E1-120A 0,61 E1-120B 5,42 2,30 E1-120C 0,87 E1-121A 1,87 E1-121B 0,74 1,20 E1-121C 0,99 E1-122A 3,01 E1-122B 0,79 1,50 E1-122C 0,70 FUNDO VISTA E1-123A 0,70 HERMOSA E1-123B 0,68 1,71 BRIGITTA IR: 4,17 E1-123C 3,75 FR: 52% E1-124A 2,48 E1-124B 0,61 1,45 E1-124C 1,25 E1-125A 2,26 E1-125B 5,73 2,94 E1-125C 0,83 E1-126A 5,20 E1-126B 1,06 2,90 E1-126C 2,44 2,00 En las dos variedades los valores superan el punto de corte de sensibilidad establecido para la molécula ( = 1µg/mL), y son mayores a los detectados en la época de precosecha temprana. En Legacy el incremento del valor se debe a mayores valores de en un menor número de aislados (<FR), en cambio en Brigitta es consecuencia de un mayor número de aislados que superan el punto de corte (> FR).

79 Consideraciones generales: En esta época se detectan incrementos en los niveles de sensibilidad a fenhexamid en las dos variedades (< ) respecto de época anterior (precosecha temprana); mayor en Legacy que en Brigitta (1,56 µg/ml a 0,17 µg ml y de 0,23 µg/ml a 0,19µg/mL). También se detectó una disminución de la frecuencia de los aislados resistentes, respecto de la época anterior. Aunque los parámetros de resistencia calculados no sugieren un riesgo elevado de pérdida de eficacia a nivel de campo, se sugiere proteger la actividad del fungicida, no utilizándolo al inicio de la temporada. Se mantiene un nivel absoluto de sensibilidad a fludioxonil en las 2 poblaciones de B. cinerea analizadas. En el caso de Switch, si bien los resultados indican que no existe riesgo alguno de pérdida de eficacia a nivel de campo, a través de la temporada se observó un leve incremento en el número de aislados que superaban el punto de corte de sensibilidad considerado para la mezcla, y por ello se sugiere evaluar el comportamiento de las poblaciones al menos durante dos temporadas consecutivas con el fin de detectar posibles cambios en éstas a través del tiempo. En relación a iprodione en general salvo leves incrementos en frecuencia y valores EC50 promedios detectados en Brigitta y Legacy, respectivamente, la situación de sensibilidad al fungicida se mantiene en un nivel de resistencia leve. FUNGICIDA MIN MAX IR FR fenhexamid 0,19 0,02 2,61 8,73 41% fludioxonil 0,02 0,08 0,01 0 0% Switch 0,10 0,02 0,43 3,36 26% iprodione 1,51 0,28 5,88 6,55 36%

80 (Valores no definitivos basados en el análisis de n= 77 aislados)

81 Composición genotípica Cultivo del Arándano (N= 77) 100% 80% 60% 71% 40% 20% 0% 17% 12% 0% vacuma transposa boty flipper

82 Nº Composición genotípica en cultivo de Arándano según variedad (N= 77 aislados) 29 vacuma transposa boty flipper Legacy Brigitta

83 (Nº) Composición Genotípica Cultivo del Arándano por Región Talca Los Ángeles Río Bueno vacuma transposa boty flipper

84 Y actualmente por iniciarse Proyecto de interés público de INNOVACHILE de CORFO recientemente adjudicado: Objetivo general: Implementar plataforma online de sensibilidad a botryticidas en 3 Regiones Obtener un mayor conocimiento de las poblaciones de Botrytis predominantes en el cultivo del Arándano

85 Posibilidad de determinar los periodos críticos de infección mediante aislados de botrytis marcados mediante estudio adicional (TESIS DE GRADO)

86 Gracias