RepublicofEcuador EDICTOFGOVERNMENT± Inordertopromotepubliceducationandpublicsafety,equaljusticeforal, abeterinformedcitizenry,theruleoflaw,worldtradeandworldpeace, thislegaldocumentisherebymadeavailableonanoncommercialbasis,asit istherightofalhumanstoknowandspeakthelawsthatgovernthem. NTE INEN 0781 (1985) (Spanish): Carne y productos cárnicos. Determinación del nitrógeno
CDU: 637.5 AL 03.02-305 Norma Técnica Ecuatoriana CARNE Y PRODUCTOS CARNICOS. DETERMINACION DEL NITRÓGENO. INEN 781 1985-05 1. OBJETO Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN Casilla 17-01-3999 Baquerizo Moreno E8-29 y Almagro Quito-Ecuador Prohibida la reproducción 1.1 Esta norma establece el método para determinar el contenido de nitrógeno en carne y productos cárnicos. 2. ALCANCE 2.1 Este método incluye el nitrógeno proveniente de compuestos no proteicos; por lo tanto, si se desea calcular el contenido de proteína a partir del contenido de nitrógeno, debe indicarse el factor utilizado. 3. TERMINOLOGIA 3.1 Contenido de nitrógeno. Es la cantidad de nitrógeno correspondiente al amoníaco producido y determinado bajo las condiciones del ensayo descrito en la presente norma. 4. RESUMEN 4.1 Digerir la muestra con ácido sulfúrico concentrado, usando un catalizador para convertir el nitrógeno orgánico en iones amonio; adición de un álcali, destilar el amoníaco liberado, recogerlo en un exceso de solución de ácido bórico. Valorar con ácido clorhídrico para determinar el amoníaco retenido por el ácido bórico y calcular el contenido de nitrógeno de la muestra a partir de la cantidad de amoníaco producido. 5. INSTRUMENTAL 5.1 Picadora mecánica de carne (molino). Tipo de laboratorio, provisto de una placa cribada con orificios de un diámetro mínimo de 4 mm u otro equipo que produzca una pasta homogénea. 5.2 Papel parafinado, en trozos de aproximadamente 9 cm x 6 cm 5.3 Bureta, de 50 cm 3, con divisiones de 0,1 cm 3 5.4 Matraz kjeldahl, de capacidad no mayor de 500 cm 3 5.5 Aparato de destilación kjeldahl, por arrastre de vapor o de destilación común. (Continúa) -1-
NTE INEN 781 1985-05 5.6 Fuente calórico, apropiada para calentar el contenido del matraz kjeldahl. 5.7 Extractor de vapores, para eliminar los vapores de ácido sulfúrico desprendidos durante la digestión. 5.8 Balanza analítica, sensible a 1 mg 5.9 Matraz Erlenmeyer, de 500 cm 3 5.10 Núcleos de ebullición, para la digestión: perlas de vidrio, carburo de silicio o porcelana dura, otro sitios recién calcinados de piedra pómez. 5.11 Papel de tornasol rojo 5.12 Probeta graduada de 50 cm 3. 6. REACTIVOS 6.1 Sulfato de cobre Il, penta hidratado (Cu SO 4 5H 20) exento de nitrógeno, reactivo para análisis. 6.2 Sulfato de potasio anhidro, (K 2 SO 4), reactivo para análisis, exento de nitrógeno. 6.3 Acido sulfúrico concentrado, (H 2 SO 4) (densidad 1,84 g/cm 3 a 20 C), exento de nitrógeno. 6.4 Solución concentrada de hidróxido de sodio, libre de nitrógeno y carbonatos, Disolver entre 450 g a 500 g de hidróxido de sodio sólido en agua destilada, enfriar y diluir a 1 000 cm 3. La densidad relativa de esta solución deberá ser mínimo 1,36 a 25 C. 6.5 Solución de ácido bórico. Disolver 40 g de ácido bórico (H 3 BO 3) en agua destilada caliente y diluir a 1 000 cm 3. 6.6 Solución 0.1 N de ácido clorhídrico. Debidamente estandarizada. 6.7 Solución indicadora de rojo de metilo y azul de metileno. Disolver 2 g de rojo de metilo y 1g de azul de metileno en 1 000 cm 3 de etanol al 95% (V/V); el cambio de color de esta solución indicadora se produce a un ph 5.4. Se debe guardar en un frasco color ámbar y en un lugar oscuro y fresco. 6.8 Parafina sólida 6.9 Agua destilada -2-
NTE INEN 781 1985-05 7. PREPARACION DE LA MUESTRA 7.1 La preparación de la muestra se realizará de acuerdo con el Anexo A, de la Norma INEN 776. 8. PROCEDIMIENTO 8.1 La determinación debe efectuarse por duplicado sobre la misma muestra preparada y en un lugar libre de vapores de amoníaco. 8.2 Colocar en el matraz kjeldahl varios núcleos de ebullición, luego 15 g de sulfato de potasio anhidro y 0,5 g de sulfato de cobre. 8.3 Pesar con aproximación al 1 mg,2 g de la muestra preparada, sobre un pedazo de papel parafina. (Si la muestra es rica en grasa solamente pesar 1,5g) y colocar el papel con la muestra en el matraz kjeldahl. 8.4 Agregar 25 cm 3 de ácido sulfúrico concentrado y mezclar cuidadosamente el contenido, añadir un trocito de parafina para reducir la formación de espuma durante la digestión. 8.5 Colocar el matraz kjeldahl en posición inclinada (aproximadamente con un ángulo de 40 respecto a la posición vertical) sobre la fuente calórico. 8.6 Calentar el matraz lentamente hasta que la espuma formada haya cesado y el contenido sea completamente líquido. 8.7 Luego hervir por algún tiempo, rotando ocasionalmente el matraz, hasta que el líquido se torne completamente claro y de color azul-verdoso. Continuar la ebullición durante una hora y media, cuidando que no escurra líquido condensado al exterior del matraz y previniendo el escape excesivo de ácido sulfúrico causado por sobrecalentamiento durante la digestión. (El tiempo total de digestión no debe ser menor de dos horas). 8.8 Luego, enfriar hasta aproximadamente 40 C y agrega r cuidadosamente 50 cm 3 de agua destilada; mezclar y dejar enfriar. 8.9 Colocar en el matraz Erlenmeyer (5.9), 50 cm 3 de la solución de ácido bórico, se agrega 4 gotas de la solución indicadora, mezclar; colocar el matraz Erlenmeyer bajo el refrigerante del aparato de destilación, de manera que el extremo quede sumergido en el líquido. 8.10 Se destila el contenido del matraz kjeldahl empleando una de las formas siguientes: a) Destilación con vapor. Transferir el contenido del matraz kjeldahl al aparato de destilación y enjuagar con agua dos o tres veces en tal forma que el volumen total de agua de lavado sea de unos 50 cm 3 ; los lavados se agregan al matraz del aparato de destilación. Verter cuidadosamente 100 cm 3 de solución de hidróxido de sodio a lo largo del cuello del matraz, colocando en posición inclinada, con el fin de que se formen dos capas. Si fuera necesario, se agrega un mayor volumen de solución de hidróxido de sodio -3-
NTE INEN 781 1985-05 para alcanzar fuerte alcalinidad. Conectar el matraz al condensador del aparato de destilación, se calienta hasta ebullición el líquido alcalino pasando vapor a través de él; hervir durante 20 minutos al inicio, se calienta poco a poco para reducir la espuma. El volumen de destilado recogido deberá ser mínimo de 150 cm 3 en un tiempo de 20 min, aproximadamente. Luego continuar como se indica en 8.11. b) Destilación ordinaria. Diluir con cuidado el contenido del matraz kjeldahl con aproximadamente 200 cm 3 de agua destilada, agitar, dejar en reposo durante 15 minutos y luego añadir 100 cm 3 de la solución de hidróxido de sodio, cuidadosamente a lo largo del cuello del matraz, colocado en posición inclinada con el fin de que se formen dos capas. Conectar el matraz al condensador del aparato de destilación, colocar la fuente de calor, dar al matraz movimientos de rotación y mezclar cuidadosamente su contenido; calentar hasta ebullición y destilar por lo menos 150 cm 3 de líquido, en un tiempo de 20 minutos aproximadamente. Continuar la destilación hasta que la mezcla comience a proyectarse o hasta que se hayan recogido 250 cm 3 de destilado. Se debe asegurar que el destilado es efectivamente enfriado y evitar que la solución de ácido bórico se caliente. 8.11 En cualquiera de las dos formas de destilación, sin desconectar la fuente de calor, se saca el Erlenmeyer justamente antes de que termine la destilación, de manera que el orificio de salida del condensador esté por arriba del nivel del líquido. Se lava el extremo del condensador interna y externamente, empleando poca agua, la cual se recoge en el Erlenmeyer. 8.12 Verificar la finalización de la destilación de amoníaco con un papel de tornasol rojo mojado con agua destilada; su color no deberá ser afectado por el líquido que sigue fluyendo del condensador. Si este es el caso, se interrumpe la destilación desconectando la fuente de calor. 8.13 Si se comprueba que la destilación es incompleta, se lleva a cabo una nueva determinación, siguiendo cuidadosamente las instrucciones. 8.14 Titular el contenido del matraz Erlenmeyer con la solución 0,1 N de ácido clorhídrico hasta viraje a color malva; registrar el volumen de solución utilizado con una aproximación a 0,05 cm 3. 8.15 Debe efectuarse un ensayo en blanco, utilizando tan sólo un trozo de papel parafinado y 2 g de parafina, siguiendo el mismo procedimiento descrito a partir de 8.2. 9. CALCULOS 9.1 El contenido de nitrógeno en carne y productos cárnicos se determina mediante la ecuación siguiente: N =,0 014(V m 1 Vo ) N x 100-4-
NTE INEN 781 1985-05 Siendo: N = contenido de nitrógeno, en porcentaje de masa. V 1 = volumen de la solución 0,1 N de ácido clorhídrico utilizado en la muestra. V o = volumen de la solución 0,1 N de ácido clorhídrico gastado en el ensayo en blanco, en cm 3. N = normalidad de la solución 0,1 N de ácido clorhídrico. m = masa de la muestra en g. 10. ERRORES DE METODO 10.1 La diferencia entre los resultados de dos determinaciones efectuadas por duplicado no debe exceder de 0,10 g de nitrógeno por 100 g de muestra. En caso contrario debe repetirse la determinación. 11. INFORME DE RESULTADOS 11.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmética de los dos resultados de la determinación. 11.2 En el informe de resultados, debe indicarse el método usado y el resultado obtenido. Debe mencionarse, además, cualquier condición no especificada en esta norma, o considerada como opcional, así como cualquier circunstancia que pueda haber influido sobre el resultado. 11.3 Deben incluirse todos los detalles para la completa identificación de la muestra. -5-
NTE INEN 781 1985-05 APENDICE Z Z.1 NORMAS A CONSULTAR INEN 776 Carne y productos cárnicos. Muestreo. Z.2 BASES DE ESTUDIO Norma Cubana NC 79-06. Productos cárnicos. Carne y productos cárnicos. Métodos de ensayo. Determinación de proteínas. Comité Estatal de Normalización, Nivel Central. Habana, 1982. Manual de laboratorio de la industria cárnica. CITECA. Centro de Investigación y Tecnología de carnes. INTI. Buenos Aires. 1982. Norma Peruana ITINTEC 201.015. Carne y productos cárnicos. Determinación del contenido de grasa total. Instituto de Investigación Tecnológica Industrial y de Normas Técnicas, Lima,1980. Norma Venezolana COVENIN 1218-77. Carne y productos cárnicos. Determinación de nitrógeno. Caracas 1977. Norma Centroamericana ICAITI 34125 h 2. Carne y productos cárnicos. Determinación del contenido de nitrógeno, Instituto Centroamericano de Investigación y Tecnología Industrial. Guatemala, 1977. Proyecto de Norma COPANT 7: 13-002. Carne y sus productos. Determinación del contenido de nitrógeno. Método de referencia. Comisión Panamericana de Normas Técnicas. Buenos Aires, 1976. Norma Francesa NF V 04407. Viandes et products a base de viande. Dosage de /'azote total. Association Francaise de Normalisation (AFNOR). París, 1972. Recomendación ISO R 937. Meat and meat products. Determination of nitrogen content. International Organization for Standardization. Ginebra, 1969. Norma Británica BS 4401: Part 2. Meat and meat products. Determination of nitrogen content. British Standards Institution. Londres, 1969. Norma Sanitaria Panamericana OFSANPAN-IALUTZ A008. Norma Técnica general de métodos físicos y químicos para análisis de alimentos Oficina Panamericana. Washington, 1968. -6-
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA 1984-01-26