Caracterización del comportamiento reproductivo de nuevos cultivares cítricos Proyecto ANII FMV-6997 Facultad de Agronomía-INIA
Contexto internacional Variedades patentadas Consorcios comercializadores Restricciones de superficie, plantas o exportación Requerimiento específico de calidad: semillas
Situación nacional Plan estratégico de la Citricultura Recambio varietal Introducción de variedades Prospección de materiales locales Programa de Mejoramiento genético (INIA-Facultad de Agronomía) Ingreso Mercado Estados Unidos
Objetivos Determinar el tipo de compatibilidad de nuevos cultivares de cítricos Analizar características reproductivas: - capacidad germinativa del polen - viabilidad de polen y óvulos - presencia de semillas en condiciones de polinización abierta y dirigida
Materiales en estudio Introducido Mandarina Tango Prospección nacional a) Naranjas Valencia Victoria Late Paylate b) Limón INIA-Ana Claudia
Programa de Mejoramiento genético a) Híbridos Ellendale x Satsuma M9 (seedling) B30 b) Híbridos Ellendale x Page F2P4 F6P8
Métodos Aislamiento de ramas o árboles con mallas antiabejas Ramas similares o árboles en polinización abierta Conteo de flores y frutos cuajados con y sin malla Análisis de germinación de polen in vitro e in vivo Análisis de viabilidad de polen y óvulos Cuantificación de semillas en frutos cosechados
Métodos Germinación de polen in vitro: colecta estambres, 24 horas en silica gel, siembra en medio Brewbaker y Kwack, 25 C, 5 repeticiones, 48-72 horas Viabilidad de polen: test de tetrazolio, 3 repeticiones, promedio de granos contados por cultivar: 3000 Germinación in vivo: marcado y embolsado de flores en estado 59 (Escala BBCH). Cada 3 días, colecta y preparación de flores para análisis de germinación en estigma, en microscopio de fluorescencia
Métodos Polinizaciones manuales con variedades comerciales, autopolinización, emasculación Evaluación de presencia de semillas
Limón INIA-Ana Claudia, Azucitrus
Valencia Paylate, Sandupay
Victoria Late, INIA SG
F2P4, San Antonio FAGRO
Mandarina Tango, INIA SG
Resultados
Testigo polinización abierta Mandarina Tango Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) 88 12 9,5 2,2 0,3 Enmallado 100 0 - - - Semillas/fruto: 0,15 Germinación de polen in vitro: 0,18% Germinación de polen in vivo: 0% Viabilidad de óvulos (9 DPA): 97%
Mandarina M9 Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) >3 semillas ( %) Testigo polinización abierta 80,4 19,6 8,9 5,4 5,3 Enmallado 98 2 0 2 0 Semillas/fruto: 0,57 PA 0,04 Malla Germinación de polen in vitro: 4,2% Germinación de polen in vivo: 5,6% (15 DPA) Viabilidad de óvulos (12 DPA): 23%
Viabilidad: 38% Test de viabilidad de polen en M9
Frutos de M9 en condiciones de polinización abierta M 9 Testigo
Frutos de M9 en condiciones de autopolinización M 9 Malla A1R1
Mandarina híbrida B30 Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) 6 semillas (%) 16 84 4 12 32 36 Enmallado 100 0 - - - - Semillas /fruto: 6,4 PA Germinación de polen in vitro: 0,4% Germinación de polen in vivo: 0 Viabilidad de óvulos (12 DPA): 34%
Frutos de B30 en condiciones de autopolinización
Frutos de B30 en condiciones de polinización abierta
Victoria Late Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) 96 4 4 0 0 Enmallado 100 0 - - - Semillas/fruto: 0,04 Germinación de polen in vitro: 0,01% Germinación de polen in vivo: 0 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 77%
Test de viabilidad de polen en naranja Victoria % de viabilidad: 0
Crecimiento del tubo polínico en estigma de flores de M9
Valencia Paylate Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-8 semillas ( %) Testigo polinización abierta 77 23 4 4 15 Enmallado 100 0 - - - Semillas/fruto: 1 Germinación de polen in vitro: 0,5% Germinación de polen in vivo: 0 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 59%
Limón INIA-Ana Claudia Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Cosecha Junio Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) >3 semillas ( %) 63 37 22,6 11,3 3,1 Enmallado 76 24 16,1 2,5 5,4 Semillas/fruto: 0,4 PA - 0,5 Malla Germinación de polen in vitro: 1,9% Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 35%
Limón INIA-Ana Claudia Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 %
Cuajado de frutos en condiciones de autopolinización y polinización abierta Cultivar Cuajado (%) M9 Autopolinización Polinización abierta B30 Autopolinización Polinización abierta Victoria Autopolinización Polinización abierta Paylate Autopolinización Polinización abierta 3,8 3,0 2,7 3,5 3,3 2,8 1,3 1,6
Número promedio de frutos por planta en autopolinización y polinización abierta (mandarina Tango y limón Ana Claudia) Cultivar Tango Autopolinización Polinización abierta Ana Claudia Autopolinización Polinización abierta N de frutos por planta 652 676 61 97
Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas Variedad/polinizador Afourer Limón Criollo Valencia CV 64 Autopolinizado Tango 10 24 31 0 M9 33-0 0 B30 100 67 100 0 Victoria 62,5-0 0
Conclusiones M9, B30, Paylate y Victoria, son autoincompatibles, mientras que Inia-Ana Claudia, es autocompatible Tango es autoincompatible, pero no presenta esterilidad absoluta, alcanzando 12% de frutos con semillas en libre polinización En similares condiciones, M9 y Victoria presentan un muy bajo número de frutos con semillas, similar al de Tango, siendo las más promisorias en ese aspecto Tango, B30, Victoria y Paylate presentaron mínima capacidad de germinación de polen in vitro y nula in vivo
Conclusiones Tango, M9 y Victoria, presentan alta habilidad partenocárpica, cuajando en forma similar en condiciones de autopolinización que en polinización abierta B30 resultó la variedad con mayor presencia de semillas en polinización abierta y manual Las tres variedades polinizadoras utilizadas indujeron la formación de semillas en la mayoría de las situaciones estudiadas Tango presentó semillas con los tres polinizadores utilizados
Agradecimientos Carlo Roggero (Caputto) Pablo Rodríguez (Azucitrus) Personal de campo INIA-SG
Equipo de Trabajo Facultad de Agronomía Ing.Agr. (Dra.) Giuliana Gambetta Ing.Agr. Ana Paula Mautone Ing.Agr. Beatriz Vignale (asesora en selección de materiales a evaluar) Ing.Agr. Florencia Rey Ing.Agr. Carolina Fasiolo Ing.Agr. Virginia Pereira das Neves Bach. Natalia Guimaraes INIA Ing.Agr. (Dr.) Fernando Rivas (asesor en selección de materiales a evaluar)
Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas Viabilidad polen /Polinizador Afourer Limón Valencia Porcentaje 8 18 11 Viabilidad polen/polinizador M9 B30 Tango Victoria Porcentaje 38 19 0 0