Estandarización de un biobanco de DNA de tumores del sistema nervioso central

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Transcripción:

Cir Cir 22;8:327-332. Estandarización de un biobanco de DNA de tumores del sistema nervioso central Diego Méndez-Rosito,* Edgar Rangel-López,** María Lucinda Aguirre-Cruz** Resumen Introducción: los tumores cerebrales figuran entre las primeras causas de cáncer en el mundo; en el Instituto Nacional de Neurología constituyen la primera causa de morbilidad y mortalidad. Objetivo: estandarizar la toma de biopsia, recolección, procesamiento y almacenamiento de muestras biológicas para estudios moleculares. Material y métodos: previo consentimiento informado, se obtuvieron biopsias de tumores cerebrales y sangre de 34 pacientes. Se extrajo el DNA de los tumores y de las células sanguíneas, se elaboró una base de datos con el registro de los datos generales y clínicos de los pacientes, con base en estándares internacionales para la creación de biobancos (aspectos éticos, técnicos y legales). Se estandarizó el procedimiento de obtención de material biológico en coordinación con el equipo del quirófano y laboratorio, a fin de contar con material biológico óptimo. Resultados: se estandarizó la toma de biopsia, recolección, procesamiento y almacenamiento de las muestras. Se incluyeron 34 pacientes (67 hombres y 67 mujeres) con edad promedio de 46.28 años (rango 5-8). El tumor más frecuente fue el meningioma (42%). La integridad del material obtenido se determinó mediante análisis electroforético en geles de agarosa al %. Conclusión: el biobanco del Instituto Nacional de Neurología cuenta con un sistema estandarizado para la obtención de muestras biológicas de óptima calidad para realizar estudios moleculares. Palabras clave: biobanco, tumor cerebral, biopsia. Abstract Background: brain tumors are one of the leading cancers worldwide; in the National Institute of Neurology and Neurosurgery (INNN) these tumors are the leading cause of morbimortality. Objective: Standardize biopsies, colletion, processing and storage biologic material of molecular studies. Methods: with a previously signed surgical consent, a tumor and blood biopsy was done to 34 patients. Their DNA was extracted and a database was filled considering technical, ethical and legal aspects. In order to have optimal biologic material the procedure was standardized between the surgical and research laboratory teams. Results: The biopsy, transportation, processing and storage were standardized. 34 patients were included (67 male and 67 female) with an average age of 46.28 years (range 5-8). The most frequently biopsied tumor was the meningioma (42%). The integrity of the obtained material was determined by agarose gel electrophoretic analysis. Conclusion: the INNN biobank has a standardized system that biopsies, processes and stores optimum quality biologic material that will be the basis of future molecular studies. Key words: biobank, cerebral tumor, biopsy Introducción - Correspondencia: : Recibido para publicación: Aceptado para publicación: - - - - - Volumen 8, No. 4, Julio-Agosto 22 327

Méndez-Rosito D et al. - - Material y métodos - - - - - - - - - - - Figura. Procedimiento de recolección de tumores del sistema nervioso central. Las muestras se depositan en un frasco con 3 cc de paraformaldehído al 2% y en un criotubo transportado en un tanque con nitrógeno líquido; se procesan para congelarse y almacenarse. 328 Cirugía y Cirujanos

Estandarización de un biobanco de tumores cerebrales Figura 2. ADN de las células sanguíneas control. - - - - - - - - Resultados - - - - - - - - Figura 3. Análisis de la extracción del DNA de los 34 controles de células sanguíneas corridas electroforéticamente en geles de agarosa al %. Volumen 8, No. 4, Julio-Agosto 22 329

Méndez-Rosito D et al. Cuadro I. Distribución de las biopsias almacenadas en el biobanco INNN según el origen de los tumores Neuroepiteliales Astrocitos Oligodendrocitos Ependimocitos Mixtos Plexo Coroides Neuronal Pineales Embrionarios 32 25 3 Nervios espinales y craneales 7 Figura 4. Análisis de la extracción del DNA de las 34 muestras tumorales corridas electroforéticamente en geles de agarosa al %. Discusión - - - - - - Meninges Células Meningoteliales Meningiomas Atípicos Anaplásicos Células Mesenquimales Benignos Malignos Melanocitos Histogénesis desconocida - - - - 55 5 2 Hematopoyéticos o linfomas Células germinales Quistes tumorales 4 Selares 23 Regionales con extensión local Metástasis 9 33 Cirugía y Cirujanos

Estandarización de un biobanco de tumores cerebrales - - - - - - - - - - - - - - - Conclusiones - - Agradecimiento - Referencias. - Volumen 8, No. 4, Julio-Agosto 22 33

Méndez-Rosito D et al. - - - - - - - - - - - - - - - - - 332 Cirugía y Cirujanos