Productos Reinnervate. Alvetex Scaffold Alvetex Strata

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Ana María Aguilera Barbero
hace 8 años
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1 Productos Reinnervate Alvetex Scaffold Alvetex Strata

2 Reinnervate es una compañía inglesa líder en el creciente mercado de los cultivos celulares en 3D. Los productos de la familia Alvetex para el cultivo en 3D proporcionan una plataforma flexible que permite a los científicos de las diversas áreas de las ciencias de la vida desarrollar mejores ensayos in vitro de forma más rápida y sencilla, y también modelos que imitan mejor el crecimiento in vivo de las células. Cultivos en 3D El objetivo de los cultivos tridimensionales (3D) es eliminar el estrés y las respuestas artificiales que las células experimentan como resultado de su adaptación a las superficies planas de crecimiento en 2D y crear unas condiciones óptimas en el entorno para un crecimiento, diferenciación y función celular óptimos. Los cultivos en 3D genuinos permiten a las células individuales mantener su forma tridimensional normal y su estructura con un soporte exógeno e interferencias mínimos. De esta forma, las células son libres de establecer interacciones complejas con las células adyacentes e intercambiar señales, consiguiendo un entorno más natural para fomentar la creación de la arquitectura natural que se encuentra en los tejidos. Efectos de cambiar el medio de crecimiento Ambiente 3D In vivo: las células mantienen una estructura y organización 3D elipsoidal. Célula MEC Tejido Ambiente 2D In vitro: las células adoptan una morfología aplastada en mono-capa. La célula detecta: La célula responde: La célula se adapta: la MEC, proteínas de membrana y citoesqueleto reaccionan a cambios en el ambiente. se desencadenan cambios en la expresión génica y hay una subsecuente remodelación del citoesqueleto. la célula cambia de forma, se pierden las interacciones celulares y hay cambio en la función celular.

3 Cultivo Tradicional 2D Cultivo Alvetex 3D Ambiente Normal In Vitro µm µm Baja Apariencia de la morfología celular Aplastada Forma 3D Forma 3D Potencial para interacciones tridimensionales célula a célula Muy bajo Habilidad para formar estructuras celulares tridimensionales complejas Muy baja Grado de estrés celular sobre la estructura Cambios en la expresión de genes y proteínas Al menos 50 % 0-50 % Cambios que suceden en la forma de la célula Necesidad de remodelación de la arquitectura citoesquelética Desviación de la morfología normal in vivo Área de superficie celular en contacto con el plástico Al menos 50 % 0-50 % Oportunidad para mejorar la funcionalidad celular in vitro Baja Ventajas de los cultivos en 3D vs. 2D Dimensiones generales y diferencias físicas Distancia máxima de la célula a la fuente de nutrientes Semejanza al ambiente celular in vivo Fase de la siembra inicial de las células en el soporte de plástico Área de superficie celular en contacto con el plástico Fase de post-siembra Comparación de la morfología celular 2D vs 3D 2D top Alvetex top 2D lateral Alvetex lateral Estructura celular: Las células que crecen en Alvetex mantienen su forma natural y su organización 3D: La microscopía fluorescente confocal demuestra la verdadera estructura 3D de las células cultivadas en Alvetex. Cultivo 3D de células ips humanas en Alvetex. Cultivo 3D de hepatocitos que han crecido en Alvetex. Laboratorios Conda

4 Propiedades Características Alvetex Beneficios de usar Alvetex para cultivos celulares en 3D Mismo poliestireno que existe en los plásticos usados en cultivo celular Sencillo cambio de protocolos 2D a 3D. Inerte: sin efecto en el crecimiento o función celular. Sin nuevas variables experimentales. Estable: no se degrada ni cambia durante estudios a largo plazo. Puede ser pre-cubierto con proteínas de MEC. Estructura consistente:variabilidad lote a lote extremadamente baja (ISO Certified) Reproducible, resultados consistentes y baja variabilidad lote a lote. Homogéneo y genuino crecimiento celular 3D. La estructura entera tiene tan solo 200 µm de grosor Ninguna célula está a más de 100um de los gases y nutrientes: mimetiza las condiciones que se dan in vivo. Las células pueden nutrirse y excretar desechos por difusión pasiva: mimetiza las condiciones que se dan in vivo. >90% Porosidad Las células pueden penetrar fácilmente la estructura y establecer MEC para recrear las condiciones in vivo. Las células y el medio se mueven libremente por la matriz. Los nutrientes y desechos se intercambian por difusión pasiva. Es posible una extracción parcial de células. Las dimensiones de los huecos son µm Hasta 75 células pueden ocupar un único hueco. Aplicaciones Invasión de células cancerígenas Modelo epitelial multicapa Alvetex visto por microscopio electrónico de barrido: resalta su estructura porosa. Imagen A Un soporte de poliestireno de 200 µm de grosor. Imagen B Porosidad de Alvetex (>90%). Imagen C Vista cercana de los poros con dimensiones aproximadas de µm de diámetro e interconexiones de aproximadamente µm de diámetro. Ensayos de crecimiento/viabilidad celular (mediciones de citotoxicidad). Ensayos de migración e invasión. Cultivo y diferenciación (osteoblastos/adipocitos/células neurales). Reconstrucción de estructuras de tejidos (hígado, modelos epiteliales, hueso, etc). Cultivo mejorado de células primarias. Co-cultivos (células glía + neuronas, queratinocitos + fibroblastos, hepatocitos + células endoteliales).

5 Resultados con A través del mantenimiento de la forma y estructura de las células y los altos niveles de interacción celular obtenidos gracias a Alvetex, se consigue un conocimiento más profundo del funcionamiento de las células in vivo. Se ha demostrado que factores como la viabilidad celular y sensibilidad son mejorados cuando se hace crecer las células en Alvetex en comparación con cultivos de monocapa en 2D. 2D 3D Viabilidad celular de hepatocitos primarios de rata, determinada por la cuantificación de hepatocitos vivos/muertos teñidos, mantenidos durante 24 horas en un plástico de 2D o en Alvetex. Las células mostraron más de un 74% de viabilidad al crecer en Alvetex cuando se compara con un cultivo en monocapa 2D. CYP -1A2 CYP -281 CYP -3A4 2D 3D Función y Sensibilidad: Valoración de células HepG2 cultivadas en sustratos 2D y 3D. La viabilidad celular se determinó usando un ensayo MTT y mostró un mayor número de células HepG2 viables en Alvetex que en sustratos 2D. Igualmente, la secrección de albúmina de células HepG2 en 3D fue mayor en comparación con cultivos 2D standard. En ambos casos, estos datos han sido normalizados al total de proteínas por pocillo para tener en cuenta las diferencias en el número de células. Por tanto, estos resultados indican el superior funcionamiento de las células HepG2 al ser cultivadas en 3D respecto a su equivalente en 2D. Las respuestas metabólicas a modelos de toxicidad fueron mejoradas de forma significativa usando Alvetex. Se cultivaron hepatocitos primarios de rata durante 3 días en cultivos 2D o 3D. La expresión del citocromo p450 fue inducida en las células usando un cóctel de modelos de sustancias tóxicas. Productos (Diámetro del poro de la membrana: 40 µm) Formatos de placa multipocillo Formatos de insertos para placas Soporte de inserto Placa de perfusión* *(La bomba peristáltica y los tubos no están incluidos.) (Diámetro del poro de la membrana: 14 µm) La característica particular de Alvetex Strata es que debido a su menor tamaño de poro, las células crecen en la parte superior de la membrana porosa. Se forman diversas capas en la superficie creando un cultivo en 3D. Laboratorios Conda

6 Tabla de Productos Producto Presentación Referencia Producto Presentación Referencia AVP AVP AVP Starter pack de placas con Alvetex Scaffold 1 placa 12 pocillos 1 placa 24 pocillos 1 placa 96 pocillos AVP-KIT-1 Insertos Alvetex Scaffold para placas de 6 pocillos 96 insertos Starter Pack de insertos Alvetex Scaffold 6 insertos para placas 6 pocillos 6 insertos para placas 12 pocillos 1 soporte para inserto en placa de Petri profunda AVP-KIT-1 Insertos para placas de 12 pocillos 96 insertos AVP AVP AVP AVP002-2 AVP AVP AVP Soporte de Inserto de Alvetex Scaffold y placa de Petri profunda 2 unidades 10 unidades AVP015-2 AVP Placa 12 pocillos Placa de perfusión* (con Luer locks ) 2 unidades 10 unidades AVP011-2 AVP Placa 24 pocillos AVP006-2 AVP AVP AVP de perfusión para placas 6 pocillos AVP-KIT-3 5 placas de perfusión para placas 6 pocillos AVP-KIT-5 Placa 96 pocillos AVP009-2 AVP AVP AVP de perfusión para placas 12 pocillos AVP-KIT-4 AVP010-2 AVP AVP AVP placas de perfusión para placas 12 pocillos AVP-KIT-6 Placa 384 pocillos Producto Presentación Referencia Insertos Alvetex Strata para placas de 6 pocillos STP STP Insertos Alvetex Strata para placas de 12 pocillos STP STP STP STP Placa de perfusión* (con Luer locks ) e Insertos con Alvetex Scaffold para placas de 6 pocillos Placa de perfusión* (con Luer locks ) e Insertos para placas de 12 pocillos Nota: Todos los artículos están empaquetados en blísters de forma estéril. C M Nota: Todos los artículos están empaquetados en blísters de forma estéril. Y CM MY Distribución en España por: CY CMY K C/ La Forja, Torrejón de Ardoz, Madrid - ESPAÑA Phone Fax For more information comercial@condalab.com. tech@condalab.com. Laboratorios Conda

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