Mycobacterium tuberculosis IgM ELISA
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- Inmaculada Lara Blázquez
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1 Instrucciones de Uso Mycobacterium tuberculosis IgM ELISA Inmunoensayo enzimático para la determinación cualitativa y cuantitativa de anticuerpos IgM contra el Mycobacterium tuberculosis en suero y plasma humanos. RE C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)
2 1. USO PROPUESTO Inmunoensayo enzimático para la determinación cualitativa y cuantitativa de anticuerpos IgM contra el Mycobacterium tuberculosis en suero y plasma humanos. 2. IMPLICACIONES CLÍNICAS Las micobacteriosis (tuberculosis, lepra, micobacterias atípicas, paratuberculosis y, tal vez, la enfermedad de Crohn) son las enfermedades infecciosas de hombres y animales más diseminadas en el planeta. Los agentes infecciosos de la tuberculosis son bacterias resistentes al ácido, en forma de bastón, de la familia de las Mycobacteriaceae, género Mycobacterium. El germen fue detectado por Robert Koch en Debido al elevado poder infeccioso de las micobacterias patógenas, el diagnóstico precoz es esencial para evitar la propagación de la enfermedad. Se requiere una combinación de distintos enfoques para controlar las micobacteriosis, ya que las reacciones inmunitarias y la descamación bacteriana varían durante la enfermedad. Sin embargo, los procedimientos de diagnóstico habituales no fueron satisfactorios hasta el momento y no permitieron distinguir entre las diferentes especies de micobacterias. Generalmente, la enfermedad se transmite a través de pequeñas gotas de saliva de las personas infectadas. La infección ataca, principalmente, los pulmones, pero también puede afectar a otros órganos, como el cerebro, el tubo digestivo, los huesos, los ganglios linfáticos y los riñones. La tuberculosis no sólo se encuentra en los países en desarrollo, con 8 millones de nuevas infecciones por año, sino también en las civilizaciones industrializadas, como una enfermedad real que presenta algunos miles de casos al año. Sin tratamiento, la enfermedad produce la muerte en el 50 % de los casos en menos de dos años. Los síntomas clínicos son fatiga, pérdida de peso, falta de apetito, fiebre leve, sudoración nocturna y dolor en el pecho. Especialmente los pacientes con HIV se ven amenazados por la tuberculosis, debido a que su sistema inmunitario se encuentra deteriorado. Se puede recurrir a la vacuna con bacteria atenuada viva (BCG = Bacille Calmette Guérin). Esto se hace mayormente con los recién nacidos y los niños pequeños. Con los pacientes más grandes, antes de realizar la vacunación, suele efectuarse la prueba de la tuberculina (Pirquet o Mantoux), mediante la cual se inyecta una pequeña cantidad de turberculina bajo la piel. Si da positivo, existen anticuerpos contra las micobacterias y no es necesaria la vacunación. Hasta hace poco, no existía ningún método serológico para detectar los anticuerpos de la tuberculosis en suero. El único procedimiento disponible, además de la prueba de tuberculina en la piel, era la identificación directa por microscopio de las bacterias teñidas en el esputo. Mientras tanto, se han preparado antígenos específicos, ya sea por purificación de la materia natural o por métodos recombinantes. Este kit ELISA para la determinación de anticuerpos IgG usa un cóctel de proteínas extremadamente puras, a fin de poder determinar una respuesta inmunitaria contra las bacterias en suero humano. Puede diagnosticarse una infección reciente o activa de manera crónica mediante los análisis de IgA e IgM, que también están disponibles. 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El inmunoensayo enzimático sobre fase sólida (ELISA) está basado en el principio del sandwich. Los pocillos están recubiertos con un antígeno. Los anticuerpos específicos de la muestra que se unen a los pocillos recubiertos con el antígeno son detectados por un conjugado enzimático del segundo anticuerpo (E-Ab) específico para el antígeno humano IgM. La intensidad del color desarrollado por la reacción del substrato es proporcional a la cantidad de anticuerpos específicos IgM detectados. Los resultados de las muestras se pueden determinar directamente usando la curva estándar. 4. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Sólo para uso en diagnóstico in-vitro. Sólo para uso profesional. 2. Antes de comenzar el ensayo lea las instrucciones completa y cuidadosamente. Use la versión válida del prospecto que se ofrece con el juego de reactivos. Asegúrese de entenderlo todo. 3. En caso de daño severo del estuche del juego de reactivos, contacte por favor a IBL o a su suministrador en forma escrita antes de transcurrida una semana de la recepción. No utilice los componentes dañados en los ensayos pero guárdelos en forma segura para la reclamación. 4. Tome en cuenta el número de lote y la fecha de caducidad. No mezcle reactivos de diferentes lotes. No use reactivos vencidos. 5. Cumpla con las buenas prácticas de laboratorio y las pautas de seguridad. Use bata de laboratorio, guantes de látex desechables y gafas de protección cuando sea necesario. Version / 6
3 6. Los reactivos de este juego que contienen materiales peligrosos pueden causar irritación ocular y cutánea. Vea MATERIAL SUMINISTRADO y las etiquetas para los detalles. Las Hojas de Datos de Seguridad de los materiales para este producto están disponibles en la página de internet de IBL o mediante solicitud directa a IBL. 7. Los reactivos químicos y los reactivos preparados o usados deben ser tratados como desechos peligrosos de acuerdo con las regulaciones nacionales sobre bioseguridad y pautas de seguridad. 8. El personal de limpieza debe ser capacitado por profesionales para el manejo de residuos peligrosos. 9. Evite el contacto con la Solución de Parada. Puede causar irritaciones y quemaduras en la piel. 10. Algunos reactivos contienen azida de sodio (NaN 3) como preservativo. En caso de contacto con los ojos o la piel, lávese inmediatamente con agua. La NaN 3 puede reaccionar con el plomo o el cobre de las cañerías formando azidas metálicas explosivas. Cuando elimine los reactivos y para evitar acumulaciones, lave con gran cantidad de agua. 11. Todos los reactivos de este juego que contienen suero o plasma humano han sido ensayados y encontrados negativos para anti-hiv I/II, HBsAg and anti-hcv. Sin embargo, la presencia de estos u otros agentes infecciosos no puede ser excluída en forma absoluta, por lo que estos reactivos deben ser tratados como potencialmente biopeligrosos a los efectos de su manipulación y eliminación. 5. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El juego de reactivos es enviado a temperatura ambiente y debe ser almacenado a 2-8 C. Manteniéndose alejado del calor o de la luz solar directa. El almacenamiento y estabilidad de muestras y reactivos preparados se detalla en los capítulos correspondientes. Los reactivos no abiertos son estables hasta la fecha de caducidad indicada. El juego de reactivos es estable hasta 3 meses después de la primera abertura si se almacena la placa de microtitulación herméticamente cerrada en un bolso y los viales cerrados con sus tapas (de cierre) a 2-8 C. 6. TOMA Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS Suero, Plasma (EDTA, Heparina) Se deben observar las precauciones usuales para la venipuntura. Es importante preservar la integridad química de la muestra de sangre desde el momento de su toma hasta el ensayo. No emplee muestras fuertemente hemolizadas, lipémicas o ictéricas. Las muestras que presenten turbidez deben centrifugarse antes de ensayar para eliminar cualquier material particulado. Almacenamiento: 2-8 C -20 C Manténgase alejado del calor o de la luz solar directa. Estabilidad: 7 dias > 7 dias Evite congelar y descongelar repetidamente. 7. MATERIALES SUMINISTRADOS Cantidad Símbolo Componente 1 x 12 x 8 MTP 1 x 15 ml ENZCONJ IgM 1 x 4 x 2 ml CAL A-D 1 x 60 ml DILBUF 1 x 60 ml WASHBUF CONC 1 x 15 ml TMB SUBS 1 x 15 ml TMB STOP 2 x FOIL 1 x BAG Placa de Microtitulación Tiras separables. Revestido con antígenos específicos. Conjugado Enzimático IgM Coloreado en rojo. Listo para usar. Contenido: anti humano IgM, conjugado con peroxidasa (conejo), solución buffer proteica, 0.01 % Metilisotiazolinona, 0.01 % Bromonitrodioxane y 5 mg/l ProClin. Estándar A-D 1; 10; 30; 100 U/mL. Listo para usar. Estándar A = Control Negativo Estándar B = Control Cut-Off Estándar C = Control positivo débil Estándar D = Control Positivo Contenido: Suero humano con IgM anticuerpos contra Mycobacterium tuberculosis, PBS, 0.01 % Metilisotiazolinona y 0.01 % Bromonitrodioxane. Solución Buffer de Dilución Listo para usar. Contenido: PBS Solución buffer, BSA, < 0.1 % NaN3. Solución Buffer de Lavado, Concentrado (10x) Contenido: PBS Solución buffer, Tween 20. Solución de Substrato TMB Listo para usar. Contenido: TMB. Solución de Parada TMB Listo para usar. 0.5 M H2SO4. Folio Adhesivo Para cubrir la Placa de Microtitulación durante la incubación. Bolsa de plástico Resellable. Para el almacenamiento de tiras no usadas. Version / 6
4 8. MATERIALES REQUIRIDOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Reactivo de absorbancia RF (puede ser ordenado en forma separada a IBL con el número de catálogo REF KIRF561) 2. Micropipetas (Multipette Eppendorf o aparatos similares, < 3 % CV). Volumenes: 5; 50; 100; 500 µl 3. Cilindros calibrados 4. Tubos (1 ml) para la dilución de muestras. 5. Micropipeta de 8 canales con depósito para reactivos 6. Botella para la solución de lavado, sistema de lavado de placas de microtitulación automático o semiautomático 7. Fotómetro para placas de microtitulación capaz de leer absorbancias a 450 nm (longitud de onda de referencia nm) 8. Agua bidestilada o desionizada 9. Toallas de papel, puntas de pipetas y cronómetro 9. INDICACIONES PARA EL PROCEDIMIENTO 1. Cualquier manipulación inadecuada de las muestras o modificación del procedimiento de ensayo puede alterar los resultados. Los volúmenes a pipetear, los tiempos de incubación, las temperaturas y etapas de pretratamientos tienen que ser efectuados estrictamente siguiendo las instrucciones. Use sólo pipetas u otros dispositivos calibrados. 2. Una vez comenzado el ensayo, se deben completar todas las etapas sin interrupción. Asegúrese de que los reactivos, materiales y dispositivos necesarios estén listos en el momento adecuado. Permita que todos los reactivos y muestras alcancen la temperatura ambiente (18-25 C) y agite suavemente por rotación cada vial de reactivo líquido o muestra antes del uso. Evite la formación de espuma. 3. Evite la contaminación de los reactivos, pipetas pocillos y/o tubos. Emplee una punta desechable nueva para cada reactivo, estándar o muestra. No intercambie las tapas. Tape siempre los viales que no estén en uso. No reutilice los pocillos, tubos o reactivos. 4. Use un esquema de pipeteo apropiado según las dimensiones de la placa. 5. El tiempo de incubación afecta los resultados. Todos los pocillos deben ser manipulados en el mismo orden y secuencia de tiempo. Para el pipeteo de soluciones en los pocillos se recomienda una pipeta de 8 canales. 6. El lavado de la placa de microtitulación es un paso importante. Los pocillos insuficientemente lavados conllevan a resultados erróneos. Se recomienda emplear una pipeta multicanal o un sistema automático de lavado. No deje secar los pocillos entre incubaciones. Cuide de no dañar el recubrimiento de las placas durante el enjuague y/o la aspiración. Enjuague y agregue los reactivos cuidadosamente. Al enjuagar cerciórese que todos los pocillos estén completamente llenos con la Solución Buffer de Lavado y que no haya residuos en ellos. 7. La humedad afecta los pocillos y tubos recubiertos. No abra la bolsa hasta que alcance la temperatura ambiente. Los pocillos o tubos que no se empleen deben guardarse inmediatamente en la bolsa resellada con desecante. 10. INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIÓN DEL ENSAYO Con el fin de evitar interferencias específicas de IgG y factores reumatoides, la muestra del paciente debe ser tratada con absorbente FR (REF KIRF561) Preparación de Componentes El contenido del kit para 96 determinaciones puede ser dividido en 3 ensayos separados. Los volúmenes declarados más abajo son para un ensayo con 4 tiras (32 determinaciones). Diluya / disuelva Componente Diluyente Relación Notas Almacenamiento Estabilidad 20 ml WASHBUF CONC 180 ml agua bidest. 1:10 Para disolver los cristales, temple hasta 37 C. Mezcle vigorosamente. 2-8 C 8 semanas 1 ml Absorbente de FR 20 ml DILBUF 1:21 Incube 1 min. 2-8 C 8 semanas Version / 6
5 10.2. Dilución de Muestras Muestra para ser diluído con Relación Notas Suero / Plasma generalmente DILBUF (+ Absorbente de FR) 1:101 p.e. 5 µl µl DILBUF Las muestras cuyas concentraciones son mayores a la del mayor estándar deben ser diluidas. Muestras con absorbente FR: No incube > 20 min para evitar la adsorción de anticuerpos específicos. Muestras pre tratadas pueden presentar turbidez. 11. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 1. Pipetee 100 µl de cada Estándar y muestra diluída en cada pocillo respectivo de la Placa de Microtitulación. En el ensayo cualitativo solo se utiliza el Estándar B. 2. Cubra la placa con un folio adhesivo. Incube 60 min a C. 3. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solución de incubación. Lave la placa 3 x con 300 µl de Solución Buffer de Lavado diluída. Remueva el exceso de solución golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel. 4. Pipetee 100 µl de Conjugado Enzimático en cada pocillo. 5. Cubra la placa con un nuevo folio adhesivo. Incube 30 min a C. 6. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solución de incubación. Lave la placa 3 x con 300 µl de Solución Buffer de Lavado diluída. Remueva el exceso de solución golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel. 7. Para la adición del substrato y solución de parada utilice, de ser posible, una pipeta de 8 canales. La adición de substrato y solución de parada debe llevarse a cabo en intervalos de tiempo iguales. Evite la formación de burbujas pipeteando con sobrevolumen. 8. Pipetee 100 µl de Solución de Substrato TMB en cada pocillo. 9. Incube 20 min a C en la oscuridad (sin el folio adhesivo). 10. Detenga la reacción del substrato añadiendo 100 µl de Solución de Parada TMB en cada pocillo. Mezcle el contenido brevemente agitando cuidadosamente la placa. El color cambia de azul a amarillo. 11. Mida la densidad óptica con un fotómetro a 450 nm (Longitud de onda de referencia: nm) dentro de los 60 min de haber agregado la Solución de Parada. 12. CONTROL DE CALIDAD Los resultados son válidos solamente si el ensayo ha sido realizado de acuerdo a las intrucciones. Además el usuario debe atenerse a las Prácticas de Buen Laboratorio (GLP) u otras normas o leyes comparables. Para la determinación del diagnóstico, el usuario y/o el laboratorio deben de tener un sistema validado de acuerdo con las Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP). Todos los estándares/controles del juego de reactivos deben encontrarse en los rangos de aceptación indicados en el Certificado de Control de Calidad. Si este criterio no se cumple, el ensayo no es válido y debe repetirse. Cada laboratorio debe emplear muestras conocidas como controles adicionales. Se recomienda participar en los programas de aseguramiento de la calidad adecuados. En caso de detectarse alguna desviación, se debe verificar lo siguiente: Fecha de vencimiento de los reactivos, condiciones de almacenamiento, pipetas, dispositivos, condiciones de incubación y método de lavado. Version / 6
6 13. CÁLCULO DE RESULTADOS La evaluación de la prueba se puede realizar ya sea cuantitativa o cualitativa Evaluación Cualitativa El Valor de Corte está dado por la densidad óptica (DO) del Estándar B (Nivel de Corte). El Indice de Corte (COI) se calcula a partir de la media de densidad óptica de la muestra y el Valor de Corte. Si la densidad óptica de la muestra está dentro de un rango de 20% de todo el Valor de Corte (Zona gris) la muestra tiene que ser considerada como límite. Las muestras con mayor DOs son positivas, las muestras con menos DOs son negativas. El Índice de Corte de las muestras puede ser calculado de la siguiente manera: COI = DO Muestra DO Estándar B Evaluación Cuantitativa La DO de los estándares (eje-y, lineal) se plotean contra su concentración (eje-x, logarítmico) ya sea en papel semi-logarítmico o empleando un método automático. En caso de usar un programa de computadora para el cálculo, se recomienda los algoritmos Cubic-Spline y Punto a punto, ya que presentan la mayor exactitud en comparación con otros métodos. Para el cálculo de la curva estándar, use las mediciones obtenidas de los estándares (es aconsejable no emplear valores duplicados). La concentración de las muestras se puede leer directamente de la curva estándar. Al momento de leer los resultados en el gráfico, tome en cuenta la dilución inicial. Los resultados de muestras diluídas con un factor mayor al inicial, deben ser multiplicados por el factor correspondiente. Las muestras que presenten una señal mayor a la del estándar mayor tienen que ser diluidas según se describe en INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIÓN DEL ENSAYO y analizadas nuevamente. Curva de Calibración Típica (Ejemplo. No usar para el cálculo!) Estándar U/mL OD Medio A B C D INTERPRETACION DE RESULTADOS Método Intervalo Interpretación < 8 U/mL negativo Cuantitativa 8 12 U/mL dudoso (Curva de Calibración) > 12 U/mL positivo Cualitativa (Índice de corte, COI) < 0.8 negativo dudoso > 1.2 positivo Los resultados por si solos no deben ser la única razón para un tratamiento terapéutico, sino que deben correlacionarse con observaciones clínicas y ensayos de diagnóstico. 15. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La toma de la muestra y almcenamiento tiene un efecto importante en los resultados. Vea TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO para mayores detalles. Para reactividad cruzada, vea PRUEBAS FUNCIONALES. La azida y el timerosal en concentraciones > 0.1 % interfieren en este ensayo y pueden conducir a falsos resultados. Los siguientes componentes sanguíneos no tienen un efecto Hemoglobina 8.0 mg/ml significativo (+/- 20% del esperado) en los resultados del ensayo Bilirrubina 0.3 mg/ml en las concentraciones indicadas a continuación. Triglicéridos 5.0 mg/ml Version / 6
7 16. PRUEBAS FUNCIONALES Intra-Ensayo Precisión 7.9 % Inter-Ensayo Precisión 7.4 % Inter-Lote Precisión % Sensibilidad Analítica 1.22 U/mL Recuperación % Linearidad % Reactividad Cruzada Especificidad clínica 100 % Sensibilidad clínica 100 % 17. REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO No se hallaron reactividades cruzadas con: Helicobacter pylori y Bordetella pertussis 1. Abebe F, Holm-Hansen C, Wiker HG, Bjune G, Progress in Serodiagnosis of Mycobacterium tuberculosis Infection, Scand J Immunol 66: (2007) 2. Barnes PF, Lee HQ, Davidson PT, Tuberculosis in patients with HIV infection, Medical clinics of North America 77(6): (1993) 3. Bloom BR, Murray CJL, Tuberculosis: commentary on a re-emergent killer, Science 257: (1992) 4. Karamat KA, Rafi S, Abbasi SA, Drug Resistance in Mycobacterium Tuberculosis: A Four Years Experience, JPMA: (1999) 5. Kochi A, Global tuberculosis situation and the control strategy of the WHO, Tubercle 72: 1-6 (1991) 6. Marks LG, Genetics of tuberculosis, Medical clinics of North America 77(6): (1993) 7. Mustafa AS, Shaban FA, Abal AT, Al-Attiyah R, Wiker HG, Lundin KEA, Oftung F, Huygen K, Identification and HLA Restriction of Naturally Derived Th1-Cell Epitopes from the Secreted Mycobacterium tuberculosis Antigen 85B Recognized by Antigen-Specific Human CD4 +T-Cell Lines, Infect Immun 68(7): (2000) 8. Raja A, Uma Devi KR, Ramalingam B, Brennan PJ, Immunoglobulin G, A, and M responses in serum and circulating immune complexes elicited by the 16-kilodalton antigen of Mycobacterium tuberculosis, Clin Diagn Lab Immunol 9(2): (2002) 9. Raja A, Uma Devi KR, Ramalingam B, Improved diagnosis of pulmonary tuberculosis by detection of antibodies against multiple Mycobacterium tuberculosis antigens, Diagn Microbiol Infect Dis 60(4): (2008) 10. Silva VMC, Sardella IG, Luiz RR, Cunha AJLA, Cavalcanti AH, Mahavir S, Barreto MM, Rodrigues RS, Carvalho TF, Saad MHF, Immunoreactivity of five antigens of Mycobacterium tuberculosis in patients attending a public health care facility in an area with high endemicity for TB, Microbiol Immunol 52: (2008) 11. Snider DE Jr, La Montagne JR, The neglected global tuberculosis problem: a report of the 1992 World Congress on tuberculosis, J Infect Dis 169: (1994) 12. Toman K. Tuberculosis case-finding and chemotherapy. Questions and answers. Geneva, World Health Organization, 3-74 (1979) 13. Tuberculosis control as an integral part of primary health care. Geneva, World Health Organization (1988) 14. Uma Devi KR, Ramalingam B, Brennan PJ, Narayanan PR, Raja A, Specific and early detection of IgG, IgA and IgM antibodies to Mycobacterium tuberculosis 38 kda antigen in pulmonary tuberculosis, Tuberculosis 81(3): (2001) Version / 6
8 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύμβολα REF LOT CONC LYO IVD Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθμός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθμός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιμοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθμός εξετάσεων: Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συμπύκνωμα Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασμένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται μακριά από θερμότητα και άμεση επαφή με το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύμβολα των συστατικών του κιτ συμβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. COMPLAINTS: Complaints may be submitted initially written or vocal. Subsequently they need to be filed including the test performance and results in writing in case of analytical reasons. WARRANTY: The product is warranted to be free from material defects within the specific shelf life and to comply with product specifications delivered with the product. The product must be used according to the Intended use, all instructions given in the instructions for use and within the product specific shelf life. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. LIMITATION OF LIABILITY: IN ALL CIRCUMSTANCES THE EXTENT OF MANUFACTURER S LIABILITY IS LIMITED TO THE PURCHASE PRICE OF THE KIT(S) IN QUESTION. IN NO EVENT SHALL MANUFACTURER BE LIABLE FOR ANY INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING DAMAGES FOR LOST PROFITS, LOST SALES, INJURY TO PERSON OR PROPERTY OR ANY OTHER INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL LOSS. IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Symbols Version 4.5 /
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