Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales a la ivermectina en un sistema de invernada bovina.

Transcripción

1 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales a la ivermectina en un sistema de invernada bovina. Dynamics of the gastrointestinal nematode resistance to ivermectin in a fattening cattle system. Descarga, Carlos; Urbani, Liliana; Kloster, Andrés. INTA EEA Marcos Juárez Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez Centro Regional Córdoba

2 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales ISSN Informe de investigación Nº 7 Marzo de 2012 Director EEA Marcos Juárez: Ing. Agr. Tolchinsky, Marcelo Comisión de Publicaciones: Coordinador: del Pino, Andrés / Miembros: Kloster, Andrés; Soldini, Diego; Cazorla, Cristian; Descarga, Carlos; Gadbán, Laura; Mariani, Silvana; Preda, Graciela; Ghida Daza, Carlos; Gudelj, Olga; Ghione, Celina. Autor: Descarga, Carlos - cdescarga@mjuarez.inta.gov.ar Urbani, Liliana Kloster, Andres Diseño y diagramación: De Angelis, Alejandro Callegari, Olga Circulación y Venta: Callegari, Olga. Biblioteca Int. 107, bibjua@mjuarez.inta.gov.ar oamigone@mjuarez.inta.gov.ar Impreso en la EEA Marcos Juárez INTA EEA Marcos Juárez CC Marcos Juárez - Córdoba - Argentina Tel.:- fax ( ) mtolchinsky@mjuarez.inta.gov.ar dirjua@mjuarez.inta.gov.ar

3 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales Resumen La resistencia del nematode Cooperia spp. a los antihelmínticos del grupo de las lactonas macrocíclicas está ampliamente difundida en el país. Con el propósito de mejorar esta condición de resistencia en una invernada, se implementó un planteo de control basado en aspectos de manejo general y específico antiparasitario. El objetivo fue caracterizar la evolución del estado de resistencia del rodeo luego de 7 años de control. El estudio se realizó entre 2003 y 2010 en una invernada del INTA Marcos Juárez. En 2003, se comprobó que la ivermectina tenía una eficacia inferior al 80 % para reducir los recuentos de huevos de nematodes en heces (hpg) e inició un planteo de control basado en: a) exclusión del uso de avermectinas; b) reducción de un tercio en la cantidad de aplicaciones de antihelmínticos con restricción de su uso entre fines de la primavera y del verano; c) evaluación de eficacia antiparasitaria previa al ingreso de terneros al sistema; d) ampliación de dos a cuatro años del período de utilización de las pasturas. En el invierno/primavera de 2003, 2006, 2009 y 2010, se evaluó la eficacia antiparasitaria mediante el test de reducción del conteo de huevos de nematodes (TRCH). Los grupos evaluados fueron: LVM (levamisol 7.5 mg/kg, Ripercol ), FBZ (febendazole 5 mg/kg, Axilur ), IVM (ivermectina 0.2 mg/kg, Ivomec ) y Testigo (no tratado). Los valores mínimos y máximos de oviposición de los grupos Testigo al inicio de cada TRCH fueron 154 ± 77 a 469 ± 347 hpg, con los siguientes extremos de participación de Cooperia spp. (28-81 %), Ostertagia spp. (8-42 %) y Haemonchus spp. (9-38 %). En todas las evaluaciones hubo alta eficacia antihelmíntica con FBZ (2003: 100 %; 2006: 97.1 %; 2009: 99.3 %; 2010: 98.6 %) y LVM (2003: 96.4 %; 2006: 98.2 %; 2009: 98 %; 2010: 97.7 %). Entre 2003 y 2009, la eficacia del grupo IVM tuvo una tendencia ascendente (2003: 76.7 %; 2006: 84.1 %; 2009: 92.4 %) con un leve descenso en 2010 (89.7 %). En IVM postratamiento predominó Cooperia spp. (2003: 85 %; 2006: 67 %; 2009: 100 %; 2010: 100 %). El nivel de eficacia de alrededor del 90 % obtenido es significativo pero deben tenerse en cuenta las limitaciones del TRCH para hacer consideraciones definitivas sobre diferencias de baja magnitud. A pesar de las dificultades para estimar el eventual tiempo de recuperación de la susceptibilidad, la tendencia de aumento de la eficacia es alentadora y necesita ser evaluada en un plazo mayor. Palabras clave: parasitosis gastrointestinal, resistencia antihelmíntica, control, bovinos. Summary The resistance of the nematode Cooperia spp. to macrocyclic lactone anthelmintic group is widely spread in Argentine. A control plan based on aspects of general and specific antiparasitic management was implemented in a herd going to diminish this condition. The objective of study was characterize the development of antiparasitic resistance after 7 years of control. The study was carried out from 2003 to 2010 in a cattle beef herd at the Marcos Juárez Experiment Station of INTA. In 2003, it was demonstrated an efficacy below 80 % to reduce the fecal egg counts (epg) by ivermectin and began control plan based on: a) avermectins were no longer used; b) reducing 1/3 number anthelmintic applications with restriction of treatments between ends of spring and summer; c) evaluation of anthelmintic efficacy before the introduction of weaned calves; d) pasture utilization was extend from 2 to 4 years. Resistance was determined in winter/spring of 2003, 2006, 2009 and 2010 by a fecal egg count reduction test (FCRT). The groups evaluated were LVM (levamisole 7.5 mg/kg. Ripercol ), FBZ (febendazole 5 mg/kg. Axilur ), IVM (ivermectin 0.2 mg/kg. Ivomec ) and Control (untreated). The minimun and maximun values of epg of Control group in pre-treatment were 154 ± 77 to 469 ± 347. Cooperia spp. (28-81 %), Ostertagia spp. (8-42 %) and Haemonchus spp. (9-38 %) were the predominant nematodes. In all FCRT anthelmintic efficacy was high for FBZ (2003: 100 %; 2006: 97.1 %; 2009: 99.3 %; 2010: 98.6 %) and LVM (2003: 96.4 %; 2006: 98.2 %; 2009: 98 %; 2010: 97.7 %). The efficacy of IVM group showed an ascendent tendence from 2003 to 2009 (2003: 76.7 %; 2006: 84.1 %; 2009: 92.4 %) with a mild drop in 2010 (89.7 %). Cooperia spp. was the predominant post-treatment genus of IVM group (2003: 85 %; 2006: 67 %; 2009: 100 %; 2010: 100 %). The efficacy levels obtained of around 90 % is significant but must be taken into account the limitations of FCRT to making ultimate considerations about low levels of differences. Despite the difficulties to estimate the possible susceptibility recuperation time, the tendency to efficacy is encouraging and needs to be further evaluated. Key words: gastrointestinal parasitism, anthelmintic resistance, control, cattle. 3

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5 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales Introducción La resistencia de los nematodes del género Cooperia a los antihelmínticos lactonas macrocíclicas está ampliamente difundida en el país. Luego de los primeros diagnósticos efectuados por Anziani et al. (2001) y Fiel et al. (2001) en la región pampeana, otras comprobaciones han contribuido a reconocer que la asociación avermectinas-cooperia spp. es el principal componente involucrado (Mejía et al., 2003; Entrocasso y Manazza, 2004; Caracostantógolo et al., 2005; Suárez y Cristel, 2007). El hecho que el umbral máximo de eficacia de la ivermectina contra nematodes adultos de Cooperia spp. sea sólo del 95 % (Benz et. al., 1989), la posiciona como género dosis limitante y en la primera línea de probabilidad para la presentación de resistencia (Coles, 2002). Esta característica, junto a la alta prevalencia y amplia difusión del género en la región pampeana (Suárez, 1994), ha llevado a la revalorización de su trascendencia patológica. En efecto, recientemente Fiel et al (2011 b) han comprobado deterioros de alrededor del 40 % en la evolución del peso vivo en sistemas con resistencia mayoritariamente basada en el género Cooperia. Una vez diagnosticada la condición de resistencia, es necesario implementar medidas de manejo general y antiparasitario para mejorar los niveles de eficacia del grupo químico comprometido y evitar o postergar su presentación con otros antihelmínticos (Anziani y Fiel, 2004). Inicialmente, se recomienda el monitoreo de la eficacia y prescindir de las drogas con resistencia (Coles, 2002). La trascendencia productiva de la parasitosis gastrointestinal en la región pampeana central (Suárez, 1994; Descarga, 2001), el control basado casi exclusivamente en los antihelmínticos (Anziani y Fiel, 2004) y las escasa generación de nuevas moléculas antiparasitarias en las últimas décadas (Waller, 2003), convierten a los antihelmínticos en insumos críticos y evidencian la importancia de mantener su eficacia. Las experiencias nacionales sobre recuperación del estatus de susceptibilidad antihelmíntica en bovinos son sumamente escasas y están en desarrollo (Fiel et al., 2011a; Anziani et al., 2011). No se conoce suficientemente ni la importancia particular de las medidas de control a tomar, ni el tiempo requerido para recuperar parcial o totalmente la susceptibilidad. De todos modos, a partir del conocimiento disponible se asume que una medida de remediación importante es aumentar la magnitud de las poblaciones parasitarias en refugio (Van Wyk, 2001). En 2003, en la Unidad Demostrativa Agrícola Ganadera de la EEA Marcos Juárez se comprobó que la ivermectina tenía una eficacia antihelmíntica inferior al 80 %. A partir de ello, se implementó un planteo progresivo de control principalmente basado en el aumento de las poblaciones parasitarias susceptibles en las pasturas (refugio). El objetivo del estudio fue caracterizar la evolución del estado de resistencia de los nematodes gastrointestinales en el rodeo luego de 7 años de control. 5

6 Dynamics of the gastrointestinal nematode resistance to ivermectin in a fattening cattle system. Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales Materiales y métodos Se utilizó la invernada de base pastoril (30 ha) del subsistema ganadero integrado al componente agrícola (60 ha) de la Unidad Demostrativa Agrícola Ganadera de la Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez (Cba). En la Unidad, cada año se engordan animales de biotipo británico (A. Angus/Hereford) y británicoxcontinental (AAXCharolais) hasta pesos aproximados de kg según sexo y biotipo. La base de alimentación está dada por la utilización de pasturas de alfalfa, festuca y cebadilla bajo pastoreo directo; en tanto que, entre abril y noviembre, los animales reciben maíz quebrado (0.5 % p.v/cab). La carga media es de 1134 kg p.v/ha con una productividad de 765 kg/ha ganadera (Amigone et al., 2010). El estudio se hizo entre setiembre de 2003 y octubre de En el primer año, sin antecedentes de parasitosis clínica, se comprobó que la lactona macrocíclica ivermectina tenía una eficacia inferior al 80 % para reducir la eliminación fecal de huevos de nematodes (hpg). Tomando en cuenta este resultado, a partir de octubre de 2003 se hizo el siguiente planteo de control: a) reemplazo de las lactonas macrocíclicas por antihelmínticos del tipo bencimidazoles e imidazotiazoles; b) reducción de un tercio en la cantidad de aplicaciones de antihelmínticos con restricción de su uso entre fines de la primavera y del verano; c) desde 2008 se amplió de dos a cuatro años el período de utilización de las pasturas; d) desde 2008, año en que el sistema se convierte en invernada pura y mayoritariamente incorpora terneros de origen externo, se evalúa la eficacia de los antiparasitarios utilizados antes de ingresar los animales al circuito de engorde. El procedimiento consiste en determinar el promedio de hpg de 20 terneros al momento de desparasitar (T1) y repetir el muestreo para hpg sobre los mismos animales (T2) a los 7 (imidazotiazoles) o 15 (bencimidazoles) días posteriores, según la droga usada. La fórmula utilizada es 100 (1-[T2/T1]) (McKenna, 2006) y el umbral de eficacia requerido es del 95 %. En setiembre de 2003 y 2009, agosto de 2006 y octubre de 2010, se evaluó el estado de resistencia mediante el test de reducción del conteo de huevos de nematodes en heces (TRCH) según protocolo de la Asociación Mundial para el Desarrollo de la Parasitología Veterinaria (Coles et al., 1992) y recomendaciones de la Asociación Argentina de Parasitología Veterinaria (Fiel et al., 2001). En cada test se utilizaron cuatro grupos de 15 bovinos cada uno, con niveles de hpg superiores a 100, distribuidos en un arreglo balanceado por niveles oviposición. Los grupos evaluados fueron: LVM (levamisol 7.5 mg/kg, Ripercol ), FBZ (febendazole 5 mg/kg, Axilur ), IVM (ivermectina 0.2 mg/kg, Ivomec ) y Testigo sin tratamiento. El plazo de evaluación postratamiento fue de 15 (levamisol, febendazole, control) y 20 días (ivermectina). La resistencia se confirmó cuando el porcentaje de reducción del promedio aritmético de hpg en la evaluación postratamiento fue inferior a 90 (100(1-[Tratado/Testigo])) o cuando los límites superior o inferior para el intervalo de confianza del 95 % fueron 6

7 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales menores a 90. El recuento de huevos en heces se realizó mediante la técnica de Mc Master modificada (Roberts y O'Sullivan, 1949) y los géneros de nematodes se identificaron mediante cultivos de pooles por grupo según la metodología de Henriksen y Korsholm (1983). Resultados Los valores mínimos y máximos de participación de los principales géneros parasitarios en los grupos Testigo previo al tratamiento fueron los siguientes: Cooperia spp. (28-81 %), Ostertagia spp. (8-42 %) y Haemonchus spp. (9-38 %). En los Testigos postratamiento, el componente Cooperia spp. estuvo dado por una participación declinante de Cooperia oncophora (2003: 96 %; 2006: 56 %; 2009: 37 %; 2010: 39 %) y un comportamiento inverso de Cooperia punctata/pectinata (2003: 4 %; 2006: 44 %; 2009: 63 %; 2010: 61 %). En todas las evaluaciones, el test de reducción de huevos fecales tuvo altos porcentajes de eficacia con los antiparasitarios febendazole (2003: 100 %; 2006: 97.1 %; 2009: 99.3 %; 2010: 98.6 %) y levamisol (2003: 96.4 %; 2006: 98.2 %; 2009: 98 %; 2010: 97.7 %). Ostertagia spp. predominó en los cultivos postratamiento de los grupos LVM (2003: 97 %; 2006:75 %; 2009: 92 %; 2010: 100 %) y FBZ (2003: 80 %; 2006: 19%; 2009: 100 %; 2010: 92 %). Entre 2003 y 2010, el grupo ivermectina (IVM) tuvo una recuperación superior al 10 % en los niveles de eficacia. En los cultivos postratamiento predominó Cooperia spp. ( %). Cooperia oncophora fue la especie con mayor participación en este género (2003: 98 %; 2006: 99 %; 2009: 50 %; 2010: 58 %), en tanto que C. punctata/pectinata incrementó su presencia en los últimos años (2003: 2 %; 2006: 1 %; 2009: 50 %; 2010: 42 %). Cuadro % Cuadro1. Promedios de hpg, géneros de los grupos testigo e ivermectina y eficacia antiparasitaria.

8 Dynamics of the gastrointestinal nematode resistance to ivermectin in a fattening cattle system. Discusión La disminución de la eficacia para reducir la oviposición del género Cooperia coincide con los antecedentes de la región pampeana (Anziani et al., 2001; Fiel et al., 2001; Mejía et al., 2003; Entrocasso y Manazza, 2004; Caracostantógolo et al., 2005; Descarga et al., 2005; Suárez y Cristel, 2007). De igual manera, la participación total de las especies oncophora y punctata/pectinata se corresponde con el perfil epidemiológico del sudeste de Córdoba (Descarga, 2001). En tanto, la prevalencia decreciente de C. oncophora y el aumento progresivo de C. punctata/pectinata, podrían estar asociados con que desde 2008 hubo mayor participación de destetes procedentes del noreste del país, donde prevalecen estas especies (Bonazzi et al., 1980). Como en los estudios de Descarga et al. (2005) y Suárez y Cristel (2007), las participaciones de Ostertagia spp., Haemonchus spp. y Trichostrongylus spp. en los cultivos IVM postratamiento de 2003 y 2006, no es posible asignarlas a poblaciones resistentes. La evolución de los grupos ivermectina postratamiento hacia la exclusiva recuperación de Cooperia spp. en 2009 y 2010, no sustenta la asignación a resistencia. De cualquier manera, debe ser atendida su eventual reiteración dado que en el país se ha comprobado la extensión de resistencia hacia los géneros Haemonchus (Anziani et al., 2004), Trichostrongylus y Nematodirus (Fiel et al., 2009). La alta eficacia del test de reducción de hpg con fenbendazole y levamisol coincide con los valores que se registran en el país en poblaciones parasitarias sin resistencia. De igual modo, la alta prevalencia de nematodes del género Ostertagia en las evaluaciones postratamiento concuerda con otros estudios donde es la especie predominante (Descarga et al., 2005; Fiel et al., 2011; Suárez y Cristel, 2007). En términos generales, el porcentaje de eficacia de la ivermectina en 2003 se corresponde con resultados obtenidos en diversas zonas de la región pampeana (Caracostantógolo et al., 2005; Suárez y Cristel, 2007), mayoritariamente asociado a presentaciones subclínicas; en cambio, difiere de la presentación sintomática comprobada por Anziani et al. (2004). La relativamente baja a mediana capacidad patogénica del género Cooperia (Herlich, 1965; Henriksen, 1981) sumada a porcentajes de eficacia antiparasitaria del 70-80% explica la falta de manifestación clínica en el primer caso, en tanto que ineficacias de más del 50 % se corresponden con síntomas. Claramente, el nuevo escenario de la resistencia exige aumentar el conocimiento de la interacción Cooperia spp.- productividad, como por ejemplo la comprobación de significativos efectos de los residuos de resistencia sobre la evolución del peso vivo en engordes pastoriles (Fiel et al., 2011b). Aunque el efecto total y/o parcial de las medidas de ampliación del refugio implementadas no es despejable, su valoración potencial como principal 8

9 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales determinante de la resistencia (Van Wick, 2001; Coles 2002), permite estimar algún grado de contribución. En particular, de la reducción de la frecuencia de tratamientos (Van Wyk, 2001) y del incremento de la población helmíntica refugiada a medida que aumenta la antigüedad de la pastura (Descarga, 2001), factores que hasta 2003 habrían contribuido a generar resistencia en el sistema en estudio por excesiva intervención con antiparasitarios y uso de pasturas durante sólo dos años. Mayor incertidumbre hay sobre el aporte del control de eficacia de los tratamientos antihelmínticos al ingreso de los destetes, aunque se reconoce que es imprescindible para no importar resistencia (Coles, 2002). Los resultados de eficacia comprobados corresponden a un test considerado un estimador de resistencia por sus limitaciones (Coles et al., 1992; Taylor et al., 2002), aunque se reconoce como la mejor alternativa práctica disponible (Anziani y Fiel, 2004). La baja correlación entre los registros de hpg y la carga de nematodes adultos es la principal objeción de la metodología (Coles et. al., 1992; Taylor et al., 2002), a la que se suman las advertencias de que la interacción géneros-inmunidad puede incidir sobre la homogeneidad de contribución de los primeros (Suárez y Cristel, 2007) y que cambios significativos en los promedios de hpg entre las fechas de evaluación afectan la confiabilidad de los resultados (Suárez y Cristel, 2007). La interacción géneros-inmunidad no habría afectado negativamente el estudio porque los perfiles de los principales géneros evaluados fueron bastante homogéneos y coincidieron con los antecedentes regionales (Descarga, 2001). Por su parte, la duplicación de los niveles de hpg del Testigo en 2006 no afectó la confiabilidad del valor de 84.1 % obtenido ya que su chequeo con la metodología recomendada por Dash et al. (1988) para corregir este desvío dio una diferencia despreciable (83.6 %). La tendencia de aumento de la eficacia de la ivermectina es un indicador auspicioso, aunque su evolución futura debe ser puesta en un contexto de cautela. La experiencia de Fiel et al. (2011a) revela una marcada inestabilidad de la dinámica de los resultados del TRCH con dificultades para consolidar significativos avances en la reversión de todos los géneros parasitarios involucrados y para traspolar los resultados del TRCH a los obtenidos mediante el recuento de nematodes adultos por necropsias. Asimismo, aunque con valores de eficacia mucho más críticos que en el presente estudio, el aumento del nivel de ineficacia de la ivermectina luego de 5 años de control comprobado por Anziani et al. (2011), evidencia las limitaciones de corrección de la problemática. Estos antecedentes no necesariamente se correlacionan con el presente estudio, hay heterogéneas condiciones de sistema y manejo que en cada caso podrían ser determinantes para la evolución de la resistencia. Conclusiones El nivel de eficacia de alrededor del 90 % obtenido es significativo pero deben tenerse en cuenta las limitaciones de la metodología de evaluación para hacer consideraciones definitivas sobre diferencias de baja magnitud. 9

10 Dynamics of the gastrointestinal nematode resistance to ivermectin in a fattening cattle system. El relativamente homogéneo y representativo perfil helmíntico del período estudiado es un importante respaldo para los resultados. A pesar de las dificultades para estimar el eventual tiempo de recuperación de la susceptibilidad, la tendencia de aumento de la eficacia de la ivermectina es alentadora y abre la necesidad de continuar el estudio para consolidar información que requiere mayor tiempo de evaluación. Las complicaciones operativas inmediatas que implica adquirir resistencia deberían hacer reconsiderar el tipo de control que prevalece en el país, carente de un monitoreo mínimo que sustente la necesidad de intervención con drogas antiparasitarias y evite los excesos e inoportunidades de su uso. Agradecimientos Al personal de campo del Area de Producción Animal de la EEA por su disposición y valioso aporte para la realización del estudio. Bibliografía AMIGONE, M.A.; KLOSTER, A.; PERETTI, M.; DESCARGA, C.O.; URQUIZA, B.; SALARIS, M Unidad Demostrativa Agrícola Ganadera. Resultados del período 2008/2009..EEA Marcos Juárez. Inf. para Extensión Nº p. ANZIANI, O.S.; FIEL, C.A Resistencia de los nematodes gastrointestinales a los antihelmínticos: un problema emergente y relevante para la producción bovina nacional. Documento de trabajo Serie Cs. Agropecuarias. Fac. Cs. Agropecuarias Univ. Católica Córdoba. 19 p. ANZIANI, O.S.; PAGGI, P.; BURGOS, G.; FERREIRA, M.; GALARZA, R Macrocyclic lactones and Cooperia spp. in cattle in Argentina. Persistance of status of resistance after five years without the use of these drugs. Proceedings 23º International Conference for the Advancement of Veterinary Parasitology March, Buenos Aires. ANZIANI, O.S.; SUAREZ, V.; GUGLIELMONE, A.; WARNKE, O.; GRANDE, H.; COLES, G.C Resistance to benzimidazole and macrocyclic lactone anthelmintics in cattle nematodes in Argentina. Vet. Parasitol., 122(4): ANZIANI, O.S.; ZIMMERMANN, G.; GUGLIELMONE, A.; VASQUEZ, R.; SUAREZ, V Avermectin resistance in Cooperia pectinata in cattle in Argentina. Vet. Rec., 149: BENZ, G.W.; RONCALLI, R.A.; GROSS, S.J Use of ivermectin in cattle, sheeps, gotas and swine. In: Campbell W.C. (ed) Ivermectin and Abamectin. Pp Springer-Verlag. New York. BONAZZI, E.; IVANCOVICH, J.; EDDI, C.; GOMEZ, B.; LUCIANI, C.; TOLEDO, H.; LUKOVICH, T.; NIEC, R Parasitismo gastrointestinal de los bovinos en el Centro-Este de la Provincia de Formosa (República Argentina). Rev. Inv. Agrop., 15(4):

11 Dinámica de la resistencia de los nematodes gastrointestinales CARACOSTANTOGOLO, J.; CASTANO, R.; CUTULLE, C.; CETRA, B.; LAMBERTI, R.; OLAECHEA, F.; PLORUTTI, F.; RUIZ, M.; SCHAPIRO, J.; MARTINEZ, M.; BALBIANI, G.; CASTRO, M.; MORICI, G Resistencia a los parásitos internos en Argentina. FAO, Serie Producción y Sanidad Animal. pp COLES, G.C Cattle nematodes resistant to anthelmintics. Why so few cases? Vet. Res., 33(5): COLES, G.C.; BAUER, F.H.M.; BORGSTEEDE, S.; GEERST, T.; KLEI, T.R.; TAYLOR, M.A.; WALLER, P.J World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP). Methods for detection of anthelmintic resistance in nematodes of veterinary importance. Vet. Parasitol., 44: DASH, K.; HALL, K.; BARGER, I.A The role of arithmetic and geometric worms eggs counts in faecal egg count reduction test test and in monitoring strategic drenching programs in sheep. Aust. Vet. J. 65: DESCARGA, C.O Efectos epidemiológicos y productivos de una estrategia antihelmíntica durante tres ciclos de invernada pastoril. Rev. Med. Vet., 82(3): DESCARGA, C.O.; PISCITELLI, H.G., ZIELINSKI, G.C.; URBANI, L. A Resistencia de los parásitos gastrointestinales bovinos a los antihelmínticos en la Pcia. de Córdoba. Informe para Extensión Nº 93. EEA INTA Marcos Juárez, 6 p. ENTROCASSO, C.M.; MANAZZA, J Avances en el estudio de resistencia a drogas antiparasitarias de rumiantes en el sudeste de la provincia de Buenos Aires. Proceedings XIX Congreso Panamericano Cs. Veterinarias. Octubre, Bs. As. FIEL, C.A.; ANZIANI, O.; SUAREZ, V.; VAZQUEZ, R.; EDDI, C.; ROMERO, J.; CARACOSTANTOGOLO, J.; SAUMELL, C.; COSTA, J.; STEFFAN, P Resistencia antihelmíntica en bovinos: causas, diagnóstico y profilaxis. Vet. Arg., 18(171): FIEL, C.A.; GUZMAN, M.; STEFFAN, P.; RIVA, E a. The control of multiple anthelmintic resistance in grazing cattle of Argentina: results on the use of a rational progamme during seven years. Proceedings 23º International Conference for the Advancement of Veterinary Parasitology March, Buenos Aires. FIEL, C. A.; GUZMAN, M.; RODRIGUEZ, E. M.; SAUMELL, C. A.; FUSE, L.; STEFFAN, P. E Resistencia a ivermectina de los géneros intestinales Cooperia, Trichostrongylus y Nematodirus en bovinos lecheros de recría. Rev. Med. Vet., 90(5/6): FIEL, C.A.; GUZMAN, M.; STEFFAN, P.; RIVA, E.; RODRIGUEZ, E b. Cattle worms resistance to Ivermectin treatments: effects on production. Proceedings 23º International Conference for the Advancement of Veterinary Parasitology March, Buenos Aires. 11

12 Dynamics of the gastrointestinal nematode resistance to ivermectin in a fattening cattle system. FIEL, C.A.; SAUMELL, C.A.; STEFFAN, P.E.; RODRIGUEZ, E.M Resistance of Cooperia to ivermectin treatment in grazing cattle of the Humid Pampa, Argentina. Vet. Parasitol., 97: HENRIKSEN, SV. A.A Infection with Cooperia oncophora in calves. In Nansen, P.; Jorgensen, R.J.; Soulsby, E.J. (Eds). Control of Nematodiasis in Cattle. Copenhagen, Martinus Nijhoff. Pp HENRIKSEN, SV. A.A. ; KORSHOLM, H A method for culture and recovery of gastrointestinal strongyle larvae. Nord. Vet. Med., 35: HERLICH, H The effects of the intestinal worms, Cooperia pectinata and Cooperia oncophora, on experimentally infected calves. Am. J. Vet. Res., 26(114): McKENNA, P.B Further comparison of fecal egg count reduction test procedures: sensitivity and specificity. New Zealand Vet. J., 48: MEJIA, M.E.; FERNANDEZ IGARTUA, B.; SCHMIDT, E.E.; CABARET, J Multispecies and múltiple anthelmintic resístanse in cattle nematodes in a farm in Argentina: the beginning of high resistance? Vet. Res., 34:1-7. ROBERTS, F. H.; O' SULLIVAN, P.J Methods for eggs counts and larval cultures for strongyles infesting the gastrointestinal tract of cattle. Aust. J. Agric. Res., 1: SUAREZ, V.H Epidemiología de los nematodes gastrointestinales en la pampa húmeda. En: Enfermedades Parasitarias de Importancia Económica en Bovinos. Ed. Hemisferio Sur. Pp SUAREZ, V.H.; CRISTEL, S.L Anthelmintic resistance in cattle nematode in the western Pampeana Region of Argentina. Vet. Parasitol., 144: TAYLOR, M. A.; HUNT, K. R.; GOODYEAR, K.L Anthelmintic resistance detection methods: a review. Vet. Parasitol., 103: VAN WYK, J.A Refugia-overlooked as perhaps the most potent factor concerning the development of anthelmintic resistance. Ond. J. Vet. Res., 68: WALLER, P. J The future of anthelmintics in sustainable parasite control programs for livestock. Helminthologia, 2: