Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Cátedra II de Histología y Embriología

Transcripción

1 1 Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Cátedra II de Histología y Embriología Prof. Tit. Dra. Ofelia Z. de Gorodner GUÍA ACTIVIDAD SANGRE TEJIDOS CARTILAGINOSO Y ÓSEO SANGRE. TEJIDO SANGUÍNEO La sangre se puede considerar un tejido conectivo fluido. Está constituido por células (glóbulos rojos o eritrocitos, glóbulos blancos o leucocitos, y elementos anucleados, las plaquetas) y una sustancia intercelular liquida llamada plasma sanguíneo. La sangre circula por el organismo dentro de los vasos sanguíneos. Las células nombradas se denominan en conjunto elementos figurados de la sangre. Los eritrocitos y las plaquetas desempeñan sus funciones dentro del sistema de vasos sanguíneos, solamente. Por el contrario los leucocitos se encuentran en la sangre en forma transitoria, se demostró mediante métodos de marcado que abandonan el torrente sanguíneo a través de las paredes de los capilares y vénulas poscapilares. Luego se establecen en el tejido conectivo y los órganos linfoides, tras lo cual algunos regresan, mientras que la mayor parte finaliza allí su existencia. En la sangre circulante, normalmente, la cantidad de eritrocitos es de aproximadamente 5 millones por mm3, la de plaquetas, de unos por mm3, y la de leucocitos 7000 por mm3. Morfología de las células sanguíneas en extendidos coloreados. El estudio con el microscopio óptico de extendidos sanguíneos fijados y teñidos tiene gran importancia para el diagnóstico de numerosas enfermedades de la sangre. Los extendidos sanguíneos se preparan extendiendo una gota de sangre sobre un portaobjetos en una capa muy delgada. Luego del secado al aire se fija y se colorea, generalmente con el método de May- Grünwald-Giemsa, que contiene la combinación de eosina y azul de metileno. Las denominaciones eosinofilia y basofilia tienen para esta coloración el mismo significado que en la tinción con Hematoxilina Eosina. Preparado Nº 3: CÉLULAS DE LA SANGRE. EXTENDIDO DE SANGRE. MAY-GRÜNWALD GIEMSA Aumento 4x: Visualizamos que en el preparado predominan los componentes de la serie roja (glóbulos rojos); entre éstos es posible observar la presencia de células nucleadas. Para identificar los tipos celulares pasamos al próximo aumento.

2 Aumento 10 y 40x: 2 Observamos los detalles de las células sanguíneas. A este aumento vamos a identificar: Granulocitos Neutrófilos: son los leucocitos más numerosos pues constituyen del 55% al 65% del total. Miden um aproximadamente; estas células se tiñen débilmente. Se las reconoce por su núcleo multilobulado, poseen de tres a cinco lóbulos dependiendo de la edad de la célula. Linfocitos: son los leucocitos más numerosos después de los neutrófilos, y constituyen del 20 al 35% de las células blancas circulantes. En los extendidos sanguíneos aparecen como células pequeñas, fuertemente teñidas, con un núcleo ligeramente deprimido y un ribete fino de citoplasma de color azul claro. Granulocitos Eosinófilos: representan el 1 al 3% de la población total de leucocitos; presentan un citoplasma eosinófilo, que le da el nombre. El núcleo es bilobulado, sus lóbulos están unidos por un puente de cromatina. Esta característica le da al núcleo el aspecto de un anteojo. Monocitos: constituyen el 3% del total de leucocitos; miden de 9 a 12um de diámetro, su citoplasma tiende a ser azul grisáceo, el núcleo es excéntrico, oval o reniforme (forma de riñón); puede haber uno o más nucléolos. Granulocitos Basófilos: corresponden al 0,5% del total de glóbulos blancos; como su nombre lo indica, estas células se reconocen por su tinción basófila, miden alrededor de 10 um. Su núcleo está a menudo doblado en forma de U o de J pero también puede ser bilobulado. Serie anucleada o hematíes: disco bicóncavo de diámetro de 7 um. Cuya vida media es de 120 días, se tiñen eosina.

3 TEJIDOS CARTILAGINOSO Y ÓSEO 3 El tejido cartilaginoso junto con el óseo constituyen formas especializadas de tejido conjuntivo. El cartílago está constituido por células llamadas condrocitos, y fibras extracelulares embebidas en una matriz con aspecto de gel. Los componentes intercelulares predominan sobre las células, las cuales están aisladas en pequeñas cavidades virtuales labradas en la matriz, denominadas condroplastos. A diferencia de otros tejidos conjuntivos, el cartílago carece de nervios y de vasos sanguíneos propios. Las propiedades coloidales de su matriz son, por ello, muy importantes para la nutrición de sus células y son en gran medida responsables también de su dureza y elasticidad. La capacidad que tiene el cartílago de crecer rápidamente, mientras mantiene un grado muy considerable de firmeza, lo hace un material particularmente favorable para el esqueleto del embrión. La mayor parte del esqueleto axial y de las extremidades se forma primero sobre modelos cartilaginosos, que más tarde son sustituidos por hueso. En la vida posnatal, el cartílago está menos ampliamente repartido, sin embargo continúa jugando un papel fundamental en el crecimiento de los huesos largos del individuo joven y persiste en el adulto en las superficies articulares de los huesos largos. El cartílago está envuelto en un tejido conjuntivo fibroso denso llamado pericondrio, a excepción de las superficies articulares donde está ausente. Sobre la base de la cantidad de matriz extracelular y de la relativa abundancia de las fibras colágenas y elásticas, se distinguen tres tipos de cartílago: hialino, elástico y fibrocartílago. El tejido cartilaginoso desempeña varias funciones: Sirve de soporte y sostén a otros tejidos Permite la permanencia de la luz de ciertos conductos (fosas nasales, laringe, tráquea y bronquios) Reviste ciertas superficies óseas que entran en contacto con otras, como las articulares Constituye el soporte esquelético en el embrión y el feto Es el modelo a partir del cual se origina el tejido óseo El hueso, se diferencia de otros tejidos porque sus componentes extracelulares están calcificados y lo convierten en un material duro, firme e idealmente adecuado para su función de soporte y protección. Proporciona apoyo interno al cuerpo y ofrece lugares de inserción a los músculos y tendones, que son esenciales para el movimiento. Protege los órganos vitales de las cavidades craneal y torácica, envuelve a los elementos formadores de la sangre de la médula ósea. Además de estas funciones mecánicas desempeña una función metabólica importante como depósito de calcio movilizable, que puede ser tomado o depositado a medida que lo exige la regulación homeostática de la concentración de calcio en la sangre y en los otros líquidos del cuerpo. Siempre se desarrolla embriológicamente en lugares en los que el tejido mesenquimatoso ha dado lugar con anterioridad a un tejido conjuntivo menos especializado: láminas conjuntivas densas o tejido cartilaginoso. Este reemplazo de un tejido conjuntivo por otro que posee mayor especialización y diferenciación confirma la calidad plástica que poseen los tejidos conjuntivos o de sostén. Existen dos tipos de osificación: a) la membranosa o conjuntiva, y b) la cartilaginosa o endocondral. La primera forma tejido óseo a partir de láminas o membranas conjuntivas, mientras que la segunda lo origina con base en un molde cartilaginoso de forma similar, aunque más pequeña, al hueso en proceso de formación. Por lo regular, los huesos planos (temporal, parietal, etc.) se forman por la osificación conjuntiva o membranosa y los huesos largos, cortos e irregulares por la osificación endocondral o cartilaginosa. Cualquiera de los dos procesos de osificación da lugar a los dos tipos de tejido óseo conocidos: hueso esponjoso o trabecular (espículas o trabéculas óseas) y hueso denso o compacto (sistemas de Havers). El hueso tiene una notable combinación de propiedades físicas: alta resistencia a la tracción y a la compresión, mientras que al mismo tiempo tiene cierta elasticidad y la ventaja de ser un material relativamente ligero de peso. A pesar de su fuerza y dureza, el hueso es un material vivo y dinámico, que está siendo renovado continuamente y que experimenta una permanente

4 reconstrucción durante la vida del individuo. El hueso responde también de modo sorprendente a las influencias metabólicas, nutritivas y endocrinas. La falta de movimiento es seguida de atrofia y pérdida de sustancia ósea; su uso aumentado se acompaña de hipertrofia, con incremento de la masa ósea. PREPARADO Nº 1: CARTÍLAGO HIALINO. TRÁQUEA. H/E La tráquea es un tubo flexible de unos 11 cm de largo y 2 cm de diámetro; es la primera porción de la vía aérea o conductora del aparato respiratorio. Está recubierto por epitelio cilíndrico seudoestratificado ciliado con una lámina basal anormalmente gruesa. El epitelio contiene muchas células caliciformes diseminadas. Aumento 4x: Se observa la imagen panorámica del órgano; ya a este aumento se distingue el cartílago hialino por su coloración basófila y su forma en herradura. Si miramos a mayor aumento desde la luz hacia la zona más externa, veremos que la pared del órgano está constituida por un epitelio, tejido conjuntivo, cartílago hialino. Aumento 10 y 40x: Ubicándonos en la placa de cartílago observamos los detalles de sus componentes. Rodeando al cartílago se encuentra el pericondrio del cual podemos distinguir dos zonas; una externa llamada zona fibrovascular, eosinófila en la que predominan fibras colágenas, fibroblastos, fibrocitos, vasos y nervios; y la zona interna o condrógena formada por células planas, basófilas denominadas condroblastos y que representan a un estadío indiferenciado de los condrocitos. Los condrocitos son células esféricas u ovoides, con citoplasma basófilo, núcleo esférico y central, ubicados en sus lagunas; son los encargados de sintetizar y secretar la matriz cartilaginosa del cartílago adulto. Los mismos se hallan aislados o formando grupos isógenos (iso= igual; geno= generación) reciben este nombre porque las células que constituyen estos grupos se originan de la división de una célula, cuando las células se disponen formando una cadena o un "trencito" reciben el nombre de grupo isógeno axil o axial, en cambio cuando se disponen en círculos se denominan grupos isógenos coronarios. Cada célula o grupo isógeno está rodeado por una sustancia que se tiñe fuertemente basófila y que recibe el nombre de matriz territorial, la cual presenta una mayor concentración de proteoglucanos sulfatados. Mientras que la sustancia cartilaginosa que se encuentra entre los grupos se denomina matriz interterritorial. 4

5 PREPARADO Nº 2: OSIFICACIÓN ENDOCONDRAL. 5 En las regiones del organismo donde se forma hueso mediante este procedimiento, primero se crean moldes cartilaginosos que prefiguran las formas que tendrán los huesos (cortos, irregulares y largos). Cada molde cartilaginoso está rodeado de pericondrio; los condroblastos y condrocitos generan matriz cartilaginosa de manera continua. En los huesos largos, cerca de los extremos, se forman dos centros cartilaginosos de osificación; las zonas se denominan metáfisis y la osificación es gradual hacia las áreas centrales del hueso. Aumento 4x: Se observa las diferentes estructuras que componen el preparado. A este aumento podemos distinguir al tejido cartilaginoso por su coloración basófila, y rodeado por tejido conjuntivo. Aumento 10 y 40x: Este aumento nos permite reconocer las distintas zonas que caracterizan a la osificación endocondral, para ello nos ubicamos en el extremo epifisiario y desde allí vamos descendiendo a lo largo del molde cartilaginoso. Las transformaciones que se producen en el cartílago de crecimiento guardan relación con las zonas que pueden diferenciarse al microscopio; Zona de reposo o de reserva, en ella se sitúan los condrocitos aislados. Zona de proliferación o de cartílago seriado: los condrocitos se multiplican activamente y se colocan unos después de otros, formando pilas o columnas de células; entre estas últimas se encuentra la matriz cartilaginosa, que inicia un proceso de condensación. Zona de cartílago hipertrófico: la difusión de un mayor aporte de sustancias nutritivas y de oxígeno a través de la matriz cartilaginosa, elementos que proceden de la sangre y que son transportados por los capilares sanguíneos situados en la zona de osificación de la diáfisis, favorece el crecimiento y vacuolización de los condrocitos (mayor almacenamiento de glucógeno y lípidos), la síntesis de fosfatasa alcalina, el aumento de las lagunas cartilaginosas y una mayor condensación de la matriz. Zona de erosión y calcificación: la cercanía de capilares sanguíneos causa la aparente destrucción de los condrocitos, aumento de la condensación de la matriz cartilaginosa y el consiguiente depósito de sales de calcio. Zona de osificación: mediante un proceso de diferenciación, las células mesenquimatosas transportadas junto con los vasos sanguíneos se transforman en osteoblastos; éstos, a su vez, secretan osteoide y la impregnan de sales de calcio, con lo cual crean laminillas óseas y luego trabéculas o espículas óseas. El resto de las células mesenquimatosas se convierte en células de la médula ósea hematopoyética.

6 6 PREPARADO Nº 3: OSIFICACIÓN INTRAMEMBRANOSA. Este tipo de osificación se inicia en el interior de una membrana conjuntiva constituida por: a) numerosas células mesenquimatosas en el proceso de diferenciación celular para transformarse en células osteógenas u osteoprogenitoras; b) abundantes vasos sanguíneos, responsables de provocar, en el lugar de la osificación, un incremento del nivel de oxígeno en el territorio tisular; c) cantidades variables de matriz ósea amorfa (glucosaminoglicanos, proteoglicanos y glucoproteínas), y d) algunas fibras colágenas inmaduras (colágeno tipo I). Las células osteógenas proliferan activamente, sintetizan y secretan las sustancias antes mencionadas. Al proseguir la diferenciación celular, las células osteógenas adoptan una forma poligonal cuboidea o ligeramente cilíndrica, con un citoplasma basófilo y núcleo excéntrico, y se transforman en osteoblastos. Estos se disponen al principio en forma irregular alrededor de la zona de producción de matriz ósea orgánica, pero poco después se alinean en la superficie de la lámina conjuntiva primaria que ellos mismos secretan, poco después los osteoblastos emiten delgadas prolongaciones citoplasmáticas que se ponen en contacto con otros osteoblastos y con el endotelio de los vasos sanguíneos. Conforme las células osteógenas se transforman en nuevos osteoblastos y estos crean laminillas óseas adicionales, los osteoblastos anteriores quedan atrapados entre las laminillas óseas y ocupan espacios conocidos como lagunas óseas. Cuando las células alcanzan esta fase se transforman en osteocitos. Aumento 4x: Se observan estructuras con forma de trabéculas fuertemente teñidas con hematoxilina, rodeadas por tejido que presenta una tenue eosinofilia. Antes de pasar al próximo aumento nos ubicamos en una de las estructuras antes mencionadas. Aumento 10x: Notamos que estas estructuras trabeculares son zonas donde se ha comenzado a formar tejido óseo. Ya a este aumento se puede visualizar en el interior de estas espículas óseas a las lagunas donde se encuentran los osteocitos. Aumento 40x: Se visualiza que cada espícula ósea se encuentra rodeada por células que se encuentran próximas unas de otras, de citoplasma basófilo y núcleo excéntrico. Corresponden a los

7 osteoblastos que producen un complejo orgánico llamado osteoide, en el cual se depositarán sales de calcio para la formación de nuevas laminillas óseas. El osteoide se caracteriza por su coloración eosinófila pálida y refringente y se encuentra entre el tejido óseo en formación y los osteoblastos. 7 PREPARADO Nº 4: HUESO POR DESCALCIFICACIÓN. H/E Aumento 4x: Se observan espículas óseas que corresponden al hueso esponjoso, rodeadas por médula ósea. Aumento 10 y 40x: Al igual que el compacto el hueso esponjoso está formado por laminillas de matriz ósea; sin embargo este último se diferencia por la ausencia de sistemas haversianos. Esta forma de tejido constituye un retículo tridimensional de trabéculas ramificadas que delimitan un sistema laberíntico de espacios intercomunicados, ocupados por la médula ósea. Observamos la presencia de lagunas en las cuales se encuentran los osteocitos.

8 PREPARADO Nº 5: HUESO POR DESGASTE. 8 La técnica histológica utilizada para la observación de este preparado es distinta de la habitual. Se toma un trozo de hueso, previamente desecado, luego se lo raspa contra una piedra de afilar especial, hasta que el grosor sea tal que pueda ser atravesado por el haz de luz del microscopio (10 a 40 um), se lo lava y se lo deja secar. Este preparado no se colorea, se coloca la lámina ósea directamente sobre el portaobjeto, y luego se agrega bálsamo de Canadá y el cubreobjeto. Para su mejor observación e identificación adecuada, se debe bajar el condensador del microscopio. En este preparado, debido a la desecación, no se observan células ni elementos orgánicos, únicamente se aprecian elementos inorgánicos y cavidades. Aumento: 4 x Se observa un trozo de tejido de color amarillento en el cual las osteonas aparecen como pequeños círculos concéntricos a un conducto central (de Havers) y los conductos de Volkmann como líneas delgadas transversales. No se aprecian los detalles de las lagunas ni de la matriz. Aumento: 10 x La histoarquitectura del hueso compacto aparece mucho más claramente definida. Identificamos osteonas con sus correspondientes conductos de Havers, laminillas del sistema intersticial y conductos de Volkmann. En las osteonas identificamos una estructura central, el conducto de Havers, alrededor del cual se ven laminillas óseas dispuestas en forma concéntrica a dicho conducto. Cada una de ellas presenta espacios ovoideos de bordes irregulares, dispuestos uno al lado del otro, son las lagunas óseas que estaban ocupadas por osteocitos. Una línea oscura y delgada delimita la periferia del sistema de Havers, es la línea de cemento. El sistema intersticial consta de una serie de laminillas que se disponen en forma paralela unas con otras, y que ocupan los sistemas de Havers, pero sin formar parte de éstos (en ellas también identifican lagunas). Los conductos de Volkmann se observan como líneas gruesas, grises, que conectan los conductos de Havers entre sí. Como no se incluye en el preparado ni el periostio, ni el endostio, no pueden identificarse las conexiones de dichos conductos con estas estructuras. Aumento: 40 x Si observamos en detalles las lagunas veremos que las mismas presentan prolongaciones delgadas e irregulares que se conectan con las lagunas vecinas, son los canalículos calcóforos, que en el hueso vivo contienen prolongaciones de osteocitos, que se unen entre sí. La matriz ósea inorgánica se observa de un tono gris amarillento irregular. Pueden observarse mejor los canalículos si movemos el micrométrico (pero muy poco) durante la exploración de la exploración del preparado.

9 9 PREPARADO Nº 6: ARTICULACIÓN. EXTREMIDAD FETAL HUMANA. H/E La articulación que veremos consta de las siguientes partes: Superficies articulares. Cavidad articular. Cápsula articular. Fibrocartílago articular. Aumento: 4 x Al recorrer el preparado a este aumento se podrá observar: Superficies articulares: son zonas basófilas de cartílago hialino en las cuales se distinguen como un suave punteado a los condrocitos en sus lagunas. Cápsula articular: acidófila y de estructura fibrosa que se encuentra rodeando a la articulación. Por dentro de la misma, se ubica la membrana sinovial pero no se distinguen detalles con este aumento. Cavidad articular: espacio vacío que se encuentra entre ambas superficies articulares. Fibrocartílago (menisco articular): está ubicado entre las superficies articulares y unido por unos de sus lados a la cápsula articular, presenta una basofilia pálida y su aspecto es muy celular. Aumento: 10 x Superficies articulares: si partimos de la cavidad articular veremos que la zona más superficial se tiñe basófilamente pálida y pertenece a lo que siempre será el cartílago articular (hialino), éste recubre a las superficies articulares y carece de pericondrio, por lo cual se lo llama cartílago desnudo. Más hacia el interior se puede observar a los condrocitos algo retraídos en sus lagunas. Cápsula articular: en la capa fibrosa se distinguen haces de fibras colágenas, fibroblastos y fibrocitos. Del lado interno y mirando a la cavidad articular se ubica la membrana sinovial que es muy delgada. Fibrocartílago: aquí se pueden ver núcleos basófilos y ovoides, rodeados por abundantes fibras.

10 10 Aumento: 40 x Superficies articulares: a nivel de la superficie articular los condrocitos adyacentes al borde adoptan una forma ovoide o alargada, en tanto que los situados más profundamente tienen una forma esférica. Cápsula articular: por dentro de ella se observa la membrana sinovial, constituída por tejido conectivo laxo, rico en vasos sanguíneos y delimitada hacia adentro por una línea celular de sinoviocitos aplanados. Fibrocartílago: al no estar completamente maduro es muy celular, con algunas fibras eosinófilas entremezcladas.