INSTITUTO DOMINICANO DE INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS Y FORESTALES

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Rodrigo Soriano Blanco
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INSTITUTO DOMINICANO DE INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS Y FORESTALES Sociedad

SODIAF Aislamiento de cepas nativas de Trichoderma spp.

PROYECTO CONIAF-IDIAF IDIAF/23-08/RN Juan de Dios Moya, Pedro Núñez, Socorro García,

1 INSTITUTO DOMINICANO DE INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS Y FORESTALES Sociedad Dominicana de Investigadores Agropecuarios y Forestales (SODIAF) Sexto Congreso de la SODIAF Aislamiento de cepas nativas de Trichoderma spp. de suelos, sustratos y raíces de plantas en invernaderos en República Dominicana PROYECTO CONIAF-IDIAF IDIAF/23-08/RN Juan de Dios Moya, Pedro Núñez, Socorro García, Elpidio Avilés, Feliciano Andújar. jmoya@idiaf.gov.do, Juan Dolio, San Pedro de Macorís, República Dominicana. 25 de octubre de 2013

2 CONTENIDO 1. Introducción 2. Objetivo 3. Metodología 4. Resultados 5. Conclusiones 6. Recomendaciones 7. Agradecimientos 8. Referencias

3 INTRODUCCIÓN La producción de vegetales en invernaderos es una actividad de importancia económica en República Dominicana. Año Superficie Producción Exportación Divisas generadas (miles m2) (millones de lb) (millones de lb) (millones US$) Fuente: Ministerio de Agricultura. PROMEFRÍN

4 INTRODUCCIÓN En los invernaderos los cultivos presentan problemas de enfermedades radiculares causadas por hongos de suelo

5 INTRODUCCIÓN

6 INTRODUCCIÓN

7 INTRODUCCIÓN

8 INTRODUCCIÓN La mayoría de los productores manejan estos problemas principalmente con: Prácticas culturales Plaguicidas químico-sintéticos Estos plaguicidas pueden provocar: Resistencia de la plaga Resurgencia de la plaga Contaminación ambiental Toxicidad Residuos en los frutos Rechazo de exportaciones

9 INTRODUCCIÓN Por esta razón, es necesario implementar el Manejo Integrado de Plagas, en el cual se consideran otras alternativas de control, entre ellas, el Control Biológico Dentro del Control Biológico se considera el uso de Trichoderma spp.

10 INTRODUCCIÓN Trichoderma spp. son hongos que se encuentran en la mayoría de los suelos, especialmente donde hay materia orgánica o material vegetal en descomposición.

11 INTRODUCCIÓN Actúan como antagonistas de hongos fitopatógenos, mediante: Antibiosis, Competencia, Parasitismo, Inducción de resistencia en las plantas.

12 INTRODUCCIÓN Se considera que los organismos nativos (residentes) están mejor adaptados que los introducidos a las condiciones agroecológicas locales El uso de Trichoderma spp. nativos puede: Hacer más eficiente el manejo de los fitopatógenos Promover la industria nacional Ahorro de divisas

13 OBJETIVO Aislar cepas nativas de Trichoderma de suelos, sustratos y raíces de plantas en invernaderos, con potencial antagonista en el control de hongos fitopatógenos radiculares del suelo.

14 METODOLOGÍA Muestreo exploratorio no probabilístico Suelos Raíces Sustratos Período: julio-septiembre del año 2010

15 METODOLOGÍA Invernaderos muestreados según zona Zona Número de invernaderos (Unid.) Constanza 7 Jarabacoa 7 Moca Villa Trina 5 Juan López 2 San José de Ocoa 7 La Vega (Parte Baja) 7 Total 35

16 METODOLOGÍA Criterios de selección de los invernaderos: Accesibilidad Disponibilidad al momento de la visita Permiso concedido por el propietario.

17 METODOLOGÍA Entrevista a encargados de invernaderos

18 METODOLOGÍA En cada invernadero: Toma de muestras Una muestra de suelo Una muestra de sustrato (si lo tiene) Aprox. 800 cm 3 (10 sub-muestras) Profundidad: 0-20 cm Una muestra de raíz: una planta por cultivo, una o dos de maleza

19 METODOLOGÍA Esquema distribución sub-muestras en invernadero x x x x x x x x x x

20 METODOLOGÍA Muestras tomadas por zona y según tipo de muestra. Valores en unidades (Unid.) Tipo de muestra Zona Raíz Raíz Suelo Sustrato cultivo maleza Total Constanza Jarabacoa Moca Villa Trina Juan López S. José O La Vega (zona baja) Total

21 METODOLOGÍA Palín (10 x 25 cm) Barreno helicoidal (6.5 x 20 cm)

22 METODOLOGÍA Recolección de suelo: uso del barreno

23 METODOLOGÍA Recolección de suelo: uso del palín

24 METODOLOGÍA Recolección de sustrato

25 METODOLOGÍA Recolección de raíz Planta sana

26 METODOLOGÍA Mantenimiento en frío para transporte al laboratorio

27 METODOLOGÍA Procesamiento de las muestras Estación Experimental Mata Larga, del (IDIAF), en San Francisco de Macorís, Provincia Duarte Utilización del Protocolo Acuña y Peña (2005), modificado: PDA (papa dextrosa agar) 200 mg/l de estreptomicina 30 gotas/l de ácido láctico.

28 METODOLOGÍA Procesamiento de las muestras Suelos y sustratos Homogenización y tamizado (4 mm) Pesada: 10 g Dilución madre: 10 g en 90 ml agua

29 METODOLOGÍA Procesamiento de las muestras Raíz Corte cm 2-10 g en 150 ml agua 20 minutos en agitador horizontal

30 METODOLOGÍA Procesamiento de las muestras Diluciones seriadas 10-2 y ml/plato Petri Dos platos por dilución Incubación: 8 días a ºC.

31 METODOLOGÍA Variable evaluada: cantidad de colonias de Trichoderma En base a sus características morfológicas: Color verde o amarillo verdoso Crecimiento rápido y Abundante esporulación

32 METODOLOGÍA Reaislamiento y Purificación en PDA Conservación: Papel filtro estéril (0.5 cm x 3.0 cm) Microtubos de 2 ml Temperatura de 5 ºC

33 RESULTADOS Aislados de Trichoderma según zona Zona Número de colonias (Unid.) Total Nativas Introducidas Constanza Jarabacoa Moca Villa Trina Juan López San José de Ocoa La Vega (Parte Baja)

34 Número de colonias (Unid.) RESULTADOS Introducidos Nativos Constanza Jarabacoa Villa Trina Juan López S. José O. La vega Aislados de Trichoderma según localidad

35 RESULTADOS Aislados de Trichoderma según localidad y tipo de muestra Valores en unidades (Unid.) Zona Suelo Sustrato Raíz cultivo Raíz maleza Total Constanza N.A. 9 Jarabacoa N.A. 20 Moca Villa Trina N.A. 23 Juan López N.A. 8 S. José O N.A. 27 La Vega (zona baja) Total N.A. = No aplica

36 Número de colonias (Unid.) RESULTADOS Introducidos Nativos Suelo Sustrato Raíz Aislados de Trichoderma según tipo de muestra

37 CONCLUSIONES Se aislaron 56 colonias de Trichoderma provenientes de cepas nativas con potencial antagonista de hongos fitopatógenos radiculares. La mayor cantidad de aislados nativos se obtuvo en invernaderos de San José de Ocoa (20) y Villa Trina (14). La mayor cantidad de aislados nativos se obtuvo en las muestras de raíz (29)

38 RECOMENDACIONES Probar en laboratorio e invernadero el antagonismo de los aislados frente a hongos fitopatógenos radiculares; Identificar (morfológica y molecularmente) los aislados de Trichoderma; Continuar con las exploraciones en suelos, sustratos y raíces en otras localidades.

39 AGRADECIMIENTOS Al CONIAF por el financiamiento de la investigación y por permitir la presentación de los resultados en este evento A los técnicos de laboratorio de la Estación Mata Larga por su dedicación en el procesamiento de las muestras

40 REFERENCIAS Acuña O; Peña W Determinación de poblaciones de microorganismos en el suelo mediante técnicas de recuento directo. En: Protocolos de metodologías para análisis de indicadores microbiológicos. Proyecto Innovaciones tecnológicas para el manejo y mejoramiento de la calidad y salud de suelos bananeros en América Latina y el Caribe. Eds. Imbap, Universidad de Costa Rica, Fontagro. p Cook, R.J.; Baker, K:F The nature and practice of biological control of plant pathogens. Eds APS. US. p 33, , Cummings, J. A., Miles, C. A., and du Toit, L. J Greenhouse evaluation of seed and drench treatments for organic management of soilborne pathogens of spinach. Plant Dis. 93: Ferrucci, F La importancia del Mercado en la investigación agraria para el desarrollo alternativo. Orientación de la investigación agraria hacia el desarrollo alternativo. Proyecto IICA-GTZ. p Series de publicaciones misceláneas. ISSN Lima, Perú. García, R.; Riera, R.; Zambrano, C.; Gutiérrez, L Desarrollo de un fungicida biológico a base de una cepa del hongo Trichoderma harzianum proveniente de la región Andina Venezolana. Fitosanidad, vol, 10, no. 2, junio pp Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, La Habana, Cuba. Harman, G.E Myths and Dogmas of Biocontrol. Changes in Perception derived from Research on Trichoderma harzianum T-22. Plant Disease. Vol., 84,nº 4, pp Programa de Mercados, Frigoríficos e Invernaderos (Promefrín) Avances de la agroplasticultura en la República Dominicana al cierre del año Estadísticas (En línea). Consultado em fecha 06 de mayo Disponible en: Samuels, G Trichoderma: a guide to identification and biology. United States Department of Agriculture. Agricultural Research Service. Systematic Botany and Mycology Laboratory. Beltsville, USA. 40 p. Stefanova, M Introducción y eficacia técnica del biocontrol de fitopatógenos con Trichoderma spp. en Cuba. Fitosanidad, vol. 11, núm. 3. pp Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, Ciudad de La Habana, Cuba.

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