IDENTIFICACIÒN DE RIZOBACTERIAS Y DETERMINACIÓN DE LA CALIDAD DEL COMPOST PARA LA PRODUCCIÓN ECOLÓGICA DE CULTIVOS EN LA REGIÓN INTERANDINA

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1 IDENTIFICACIÒN DE RIZOBACTERIAS Y DETERMINACIÓN DE LA CALIDAD DEL COMPOST PARA LA PRODUCCIÓN ECOLÓGICA DE CULTIVOS EN LA REGIÓN INTERANDINA William Viera Ing. Agr. Gustavo Bernal Ph. D.

2 INTRODUCCIÓN Importancia de la papa, arveja y otros en áreas peri-urbanas de la región Interandina. Rendimientos bajos como resultado de factores abióticos y bióticos. OBJETIVO Identificar PGPR s. Evaluar la calidad del compost, en comunidades de Cañar y Tabacundo.

3 I ETAPA OBJETIVO: Obtener especies bacterianas eficientes en promover el crecimiento vegetal.

4 METODOLOGÍA - Recolección de muestras de suelo en 5 agroecosistemas en los sitios piloto. - Análisis físico-químico. -Aislamiento e identificación.

5 Pasos de dispersión y separación de células desde los agregados del suelo. Secado al aire Tamizado Agitación en solución tampón Contaje y purificación Incubación Dilución y plaqueo Vibración

6 Identificación por espectrometría de masas (MALDI-ToF) (Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation - Tine of Flight) - Suspensión bacteriana (o proteolisis-fragmentos peptídicos) -Matriz(ciano-hydroxycinnaminic acid) (tampón del rayo láser. Previene fragmentación indeseada de biomoleculas) - Rayo laser (desorption). - Aceleración de moléculas en campo eléctrico - Separación de moléculas ionizadas (tubo de vuelo) - Detector Espectro - Identificación de la proteína - Identificación del microorganismo

7 El rayo láser alcanza la muestra. Espectrómetro de masas Fingerprints de Bacillus Dirección del láser. Producción de iones.

8 Dendograma de Bacillus. Los aislamientos desconocidos fueron identificados como B. subtilis.

9 RESULTADOS

10 Ecuadorian Bacillus Counts b b b a a 0 Potato Plots with Low Inputs Paramo Paramo Potato Plots with High Inputs Field Border with High Inputs

11 Ecuadorian Bacillus Isolates 40 Percentage Occurance B. subtilis B. cereus B. thuringiensis B. licheniformis B. sphaericus B. amyloliquefaciens Bacillus Species B. megaterium

12 Ecuadorian Pseudomonas Counts c c CFU per ml b Potato Plots with Low Inputs a a Paramo Paramo Potato Plots with High Inputs Field Border with High Inputs

13 Carrasco Pseudomonas Counts (Bolivia) d cd CFU per ml bc ab a 0 Potato Crop, High Inputs Potato Crop, Low Inputs Border of Potato, Low Inputs Border of Potato, High Inputs Pajonal Carrasco

14 Ecuadorian Pseudomonas Isolates Percentage Occurance P. fluorescens P. putidia P. oleovorans P. syringae P. agarici Pseudomonas Species

15 Estudios en ejecución - Pruebas de antagonismo (INIAP) - Identificación de cepas PGPR s (U. de Irlanda) - Método de inoculación (U. de Angers)

16 OBJETIVO: II ETAPA Desarrollar un sistema de compostaje basado en el manejo de residuos orgánicos en dos sitios piloto: Chaupiloma (Tabacundo) y Virgen de la Nube (Cañar). Determinar la calidad del compost.

17 CALIDAD DEL COMPOST: - Recolección de muestras - Análisis físico-químico - Grupos funcionales - Porcentaje de germinación - Inocuidad

18 RESULTADOS

19 Analisis quimico Compost Cañar Tabacundo Comercial N (ppm) P (ppm) K (meq/100ml) Mg (meq/100 ml) M.O. (%) C/N ph

20 Promedio cfu/g de suelo 7,5 7 6,5 6 Bacterias heterótrofas totales a ab b Comercial Tabacundo Cañar Compost

21 Actinomicetes totales Prom edio cfu/g de suelo 8 7,5 7 6,5 a a b Tabacundo Cañar Comercial Compost

22 Solubilizadores de Fósforo Promedio cfu/g de suelo 6,6 6,4 6,2 6 5,8 5,6 a b b Tabacundo Cañar Comercial Compost

23 Hongos Totales Promedio cfu/g de suelo 5,4 5,2 5 4,8 4,6 4,4 4,2 4 a a b Comercial Cañar Tabacundo Compost

24 Celulolíticos totales Prom edio cfu/g de suelo 6,55 6,5 6,45 6,4 6,35 6,51 6,51 6,42 Cañar Comercial Tabacundo Compost

25 Pseudomonas sp. Promedio cfu/g de suelo 7 6,5 6 5,5 6,74 6,07 5,98 Comercial Tabacundo Cañar Compost

26 Promedio cfu/g de suelo 5,8 5,6 5,4 5,2 5 Agrobacterium sp. 5,73 5,53 5,26 Cañar Tabacundo Comercial Compost

27 Fijadores de Nitrógeno Promedio cfu/g de suelo ,32 5,41 4,98 Cañar Tabacundo Comercial Compost

28 G e rm in a c ió n % Suelo estéril Papel filtro Cañar Comerci al Tabacun do Porcentaje de Germ inación 84,67 82,67 74,24 68,25 53,6 Tratamientos

29

30 CONCLUSIONES

31 La población de microorganismos en las muestras de compost producido en Cañar y Tabacundo es buena en comparación con el control. En el compost producido en Cañar se registraron las poblaciones más altas de organismos Fijadores de nitrógeno y Celulolíticos.

32 En el compost producido en Tabacundo se registraron las poblaciones más altas de Actinomicetes y organismos Solubilizadores de Fósforo. Identificación defusarium sp.

33 RECOMENDACIONES

34 Realizar pruebas adicionales incluyendo nuevos substratos de calidad dando énfasis a leguminosas y estiércoles. Formar una colección de microorganismos promotores de crecimiento vegetal para combinarlos con el compost.

35 III ETAPA ELABORACIÓN DE COMPOST PARA EL CULTIVO DE PAPA (LICTO CHIMBORAZO)

36 Poblaciones microbianas del suelo de Licto. Grupos Microbianos Bacterias Totales Hongos Totales Actinomicetes Medio de Cultivo Agar Nutritivo Rosa de Bengala Agar Caseina CFU/g 3 x x x 10 6

37 Sustratos utilizados en la elaboración de las camas de compost. Sustratos Cascarilla de arroz Alfalfa Gallinaza Estiércol bovino Suelo de páramo Producto acelerador de descomposición Tamaño de la cama Dosis (kg)/cama g 4 x 1 m

38 Combinación Sustratos Evaluados Cascarrilla de arroz + gallinaza+ suelo de páramo + acelerador de descomposición Cascarrilla de arroz + gallinaza+ suelo de páramo Cascarrilla de arroz + estiércol bovino+ suelo de páramo + acelerador de descomposición Cascarrilla de arroz + estiércol bovino+ suelo de páramo Alfalfa + gallinaza+ suelo de páramo + acelerador de descomposición Alfalfa + gallinaza+ suelo de páramo Alfalfa + estiércol bovino+ suelo de páramo + acelerador de descomposición 8 Alfalfa + estiércol bovino+ suelo de páramo

39 Análisis Microbiológico de los sustratos Grupos Microbianos Suelo Páramo (CFU/g) Estiércol Bovino (CFU/g) Gallinaza (CFU/g) Producto Acelerador (CFU/g) Bacterias totales 2 x x x x 10 6 Hongos totales 2 x x x x 10 4 Actinomicetes 1.15 x x x x 10 6

40 UFC/gr compost Muestras Hongos Actinomicetes Bacterias Totales Muestras ph C/N M.O. (%)

41 4 Porcentaje Muestras N P K Ca Mg S 250 ppm B Zn Cu Muestras

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