10 Doctores. 7 Becarios Pre-Doctorales 2 Técnicos de Laboratorio GRUPO SYM PERSONAL. 7 PDI 3 Contratados. SYM - Señal y Medida en Química

Transcripción

1 SYM - Señal y Medida en Química IQMA - Departamento de Química Universidad Politécnica de Valencia PERSONAL 10 Doctores 7 PDI 3 Contratados 7 Becarios Pre-Doctorales 2 Técnicos de Laboratorio

2 - Presentación Desde 1991 el grupo está desarrollando investigaciones en el área inmunoanalítica relacionadas con problemáticas medioambientales, agrícolas y alimentarias Además, desarrolla otros proyectos de investigación menores relacionados con la calidad de las aguas y del suelo, y sobre la revalorización de residuos Todas las actividades están financiadas por diferentes programas de investigación competitivos (españoles y europeos) y por la Universidad Politécnica de Valencia Finalmente, colabora con diferentes empresas españolas en la solución y desarrollo de aspectos de interés común

3 Líneas de investigación Inmunoanálisis Síntesis de haptenos Desarrollo de ELISAs Desarrollo de Tiras reactivas Biosensores Inmunosensores en flujo Sistemas basados en Micromatrices BIOMEMS Derivatización superficies poliméricas Sistemas basados en Discos Compactos GRUPO SYM Áreas de aplicación Agricultura Alimentos Medioambiente Resultados científicos (5 últimos años) Proyectos > 15 -Investigación CICYT,DGES,GV,UPV, EU -Transferencia Tecnol. PETRI, PROFIT, Publicaciones > 50 Patentes 3 Internacionales 3 Nacionales Tesis Doctorales 5 Defendidas 7 En realización Congresos > 40

4 Proyectos de Investigación Título del proyecto Estudio de formatos homogéneos-heterogéneos aplicados a sistemas inmunosensores Desarrollo de inmunoensayos multirresiduo en soportes interactivos para el screening de plaguicidas en el medio acuático Nuevos formatos de inmunoensayo para la determinación de drogas con actividad farmacológica en alimentos Ultrahigh sensitivity spot-waveguide biosensor on a highly integrated chip for simultaneous diagnosis of multiple diseases. SABIO Desarrollo de tiras reactivas para el screening de plaguicidas organofosforados en vegetales Organismo y referencia del proyecto MCYT Ref. BQU MCYT Ref. BQU MEC BIO European Union FP IST-4 FECOAM

5 Síntesis de inmunorreactivos Desarrollo de ensayos (ELISA) Residuos de contaminantes Síntesis de haptenos Inmunización Obtención anticuerpos policlonales Síntesis de trazadores y otros inmunorreactivos Puesta a punto de ensayos tipo ELISA Caracterización ensayos LÍNEAS DE TRABAJO Diseño o de haptenos Molécula pequeña Diseño o de competidores Varias estructuras propuestas Unión n a proteínas INMUNÓGENOS (conjugados para tapizado y trazadores) Síntesis Obtención n de sueros Purificación n de anticuerpos

6 Inmunorreactivos Plaguicidas: Atrazina, Carbaril, 3,5,6-tricloro-2-piridinol, Irgarol, Organofosforados: Diazinón, Fentión, Malatión, Clorpirifos Cloroacetanilidas: Alacloro, Acetocloro, Metolacloro Fenoxiácidos: 2,4-D, 2,4,5-TP, 2,4-DB, MCPA Triclosán Clorofenoles: Pentaclorofenol, 1-naftol Trihalometanos Ésteres ftálicos Antibióticos Tetraciclinas - Oxitetraciclina, clortetraciclina, tetraciclina Sulfonamidas - STZ, SSZ, SMX

7 LÍNEAS DE TRABAJO Desarrollo de Biosensores Desarrollo de nuevos formatos de ensayo Desarrollo de inmunosensores ópticos automatizados Residuos herbicidas y sulfonamidas Desarrollo de tiras reactivas Residuos organofosforados Control Atrazina Carbaril a) b) c) d) e) f) Desarrollo Micromatrices multianalito en soportes interactivos tipo CD μelisas Ensayos de SNPs y expresión génica Ensayos para Proteómica

8 SISTEMA SENSOR S S S S PS SP SP Luminiscencia (u.e.) tiempo ETAPAS 1. Competición 2. Captura 3. Lavado 4. Revelado 5. Regeneración A B H C G D F E B C D E A H G F

9 SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOSENSORES (µg/l) Analito I 50 Límite de detección Rango dinámico Carbaryl 0,12 0,016 0,04-0,85 Atrazina 0,05 0,007 0,01-0,23 Irgarol ,05 0,010 0,02-0,16 3,5,6-Tricloro-2-piridinol 0,13 0,021 0,04-0,50 Glifosato 0,18 0,021 0,05-1,00 Pentaclorofenol 19,0 1,3 3,7-82,0 Sulfatiazol 3,2 0,11 0,4-24,0

10 Analito Carbaryl APLICACIÓN DE LOS INMUNOSENSORES Matriz Agua Nivel de adición 1 µg/l Recuperación media (%) 104 Miel 0,5 mg/kg 113 Atrazina Agua rio 12 µg/l 98 Irgarol 1051 Agua mar 0,5 µg/l 104 3,5,6-Tricloro-2-piridinol Agua lago 0,5 µg/l 95 Agua mar 0,5 µg/l Glifosato Agua Suelo 0,75 µg/l 60 µg/kg Pentaclorofenol Agua 50 µg/l 109 Sulfatiazol Agua 50 µg/l 103

11 Aumento de la capacidad de trabajo de los sensores ACTUALMENTE: min/ensayo REDUCCIÓN DE TIEMPOS DE ENSAYO (1-5 min/ensayo) Aspectos a resolver Regeneración del inmunosensor Marcaje de haptenos con fluoróforos Nuevo formato de ensayo Homogéneo-Heterogéneo Materiales de acceso restringido (RAM) Procedimiento general de marcaje Hapteno-COOH + H 2 N-TGCAGACACAACTA-F* Hapteno Oligonucleótido marcado (fluoróforo)

12 MICROMATRICES MULTIANALITO EN SOPORTES INTERACTIVOS PARA ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS

13 4. Resultado GRUPO SYM CD Conjugados de hapteno Anticuerpos específicos MICRO-ELISA ARRAY Analitos Trazador 1. Ordenación espacial conjugados 2. Adición muestra y anticuerpos específicos 3. Lavado y adición del trazador Resultado Testigo Blanco 200 µm 100 µm

14 LÍNEAS DE TRABAJO Derivatización química de superficies como soportes para anclaje de bio-receptores BIOMEMS Modificación química superficial de polimetilmetacrilato (PMMA) Ultrahigh sensitivity SlotwAveguide BIOsensor (SABIO) on a highly integrated chip for simultaneous diagnosis of multiple diseases Modificación química superficial de policarbonato (PC) Anclaje covalente de proteínas y oligonucleótidos sobre superficies poliméricas modificadas Modificación química superficial de óxido de silicio y nitruro de silicio para anclaje covalente de proteínas SLOT-WAVEGUIDE Variación del índice de refracción 3 veces mayor que en las ondas guiadas convencionales UPV (NTC-SYM)

15 Universidad Politécnica de Valencia Camino de Vera s/n, Valencia. C.P ciqma@upv.es