APÉNDICE B. INSTRUCTIVO DE RECOLECCIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA LOS LABORATO- RIOS DE APOYO A VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA.

Transcripción

1 APÉNDICE B. INSTRUCTIVO DE RECOLECCIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA LOS LABORATO- RIOS DE APOYO A VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA. La selección, la recolección y el transporte apropiados de especimenes al laboratorio es una parte esencial del aseguramiento de la calidad de un laboratorio de referencia. Una colección inapropiada no sólo conduce al mal uso de recursos sino que también puede ocasionar un diagnóstico incorrecto. A continuación se listan los procedimientos estándar para la recolección, manejo y transporte de las muestras. 1. ESPUTO Indique al paciente que enjuague su boca con agua. Tras una expectoración profunda, preferentemente matinal, el paciente debe obtener un volumen mínimo de 2 ml de esputo libre de saliva; la muestra se deposita en un frasco de plástico estéril de boca ancha y tapón hermético de unos 40 ml de capacidad. De no producirse la expectoración espontánea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiológico estéril (de no ser esto posible, puede utilizar nebulizaciones de agua) Observe que la muestra sea muco-purulenta y libre de saliva. Envíe al laboratorio dentro de las siguientes 2 horas; si esto no es posible, conserve en el refrigerador a 4-8 C hasta su envío. Envíe la muestra conservada en refrigerantes y procure que llegue dentro de las siguientes 24 horas desde su recolección. 2. EXUDADO FARÍNGEO Pida al paciente que se siente e incline su cabeza hacia atrás; con un abatelenguas empuje la lengua hacia abajo para facilitar el acceso a la parte posterior de la faringe e, iluminando bien la cavidad orofaríngea, con un hisopo de algodón haga un raspado de las áreas hiperhémicas, purulentas o necróticas. Evite tocar la lengua o los labios para no diluir o contaminar la muestra. Inmediatamente, según el caso, sumerja en solución fisiológica estéril o siembre en medio de transporte. a. En el caso de investigación virológica, utilice un hisopo de nylon con mango de plástico. Introduzca el hisopo en un tubo de tapón de rosca hermético con unos 2 ml de solución Hanks estéril (provisto por el Laboratorio). Rompa la varita del hisopo a la altura de la boca del tubo, y tápelo herméticamente. Envíe la muestra conservada en refrigerante procurando que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas. b. En el caso de investigación bacteriológica, el hisopo se introduce en un tubo con tapón de rosca hermético con medio de Amies o Stuart. Rompa la varita del hisopo a la altura de la boca del tubo y tápelo Página 1 de 6

2 herméticamente. Envíe la muestra sin refrigerar procurando que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas. 3. EXUDADO NASOFARÍNGEO Pida al paciente que se siente e incline su cabeza hacia atrás; Introduzca un hisopo de alginato de calcio, dacrón o nylon (nunca de algodón, si se presume Bordetella) por las fosas nasales hasta la nasofaringe, sin tocar los cornetes y tratando de provocar un acceso de tos. Mantenga el hisopo en ese sitio de 10 a 15 segundos durante el acceso de tos después de lo cual retírelo rápidamente. a. En el caso de investigación virológica, el hisopo se introduce en un tubo de tapón de rosca hermético con unos 2 ml de solución fisiológica estéril. Rompa la varita del hisopo a la altura de la boca del tubo, y tápelo herméticamente. Envíe la muestra conservada en refrigerante procurando que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas b. En el caso de investigación bacteriológica, el hisopo se introduce a un tubo con tapón de rosca hermético con medio de Amies o Stuart. Rompa la varita del hisopo a la altura de la boca del tubo, y tápelo herméticamente. Envíe la muestra sin refrigerar procurando que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas 4. EXUDADO URETRAL Se recomienda al paciente que no orine desde por lo menos una hora antes de recoger la muestra. a. En casos de gonorrea, presione ligeramente la uretra para provocar la salida del exudado. Recoja éste con un hisopo de alginato estéril. Deposítelo en un tubo con un medio de transporte. La muestra sin refrigerar se envía lo antes posible de modo que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas. 5. EXUDADO VAGINAL Y ENDOCERVICAL Se utiliza el espejo vaginal para acceder al cervix; a. En caso de gonorrea no se hace ningún tipo de limpieza y se recoge una muestra del exudado con la ayuda de un hisopo de algodón. La muestra debe sembrarse de inmediato en un medio de transporte. Envíe la muestra sin refrigerar lo antes posible de modo que llegue al laboratorio dentro de las siguientes veinticuatro horas. Página 2 de 6

3 6. GOTA GRUESA Limpie bien con alcohol la piel de la parte externa de la yema del dedo en el que se pretenda hacer la punción (puede utilizar también el lóbulo de la oreja.) Puncione con una lanceta desechable. Limpie cuidadosamente la primera gota de sangre con un pedazo de gasa o de algodón secos. Presione el dedo hasta obtener una segunda gota de sangre. Sin tocar la piel, recoja esta gota en una de las superficies de un portaobjetos limpio y desengrasado. Coloque el portaobjetos sobre una superficie plana y utilizando la arista de un segundo portaobjetos, extienda la sangre hasta formar un cuadrado de más o menos 1 cm 2. Deje secar al ambiente. Proteja las laminillas individualmente, de preferencia con cartón. Empáquelas cuidadosamente en un sobre de fondo doble para evitar roturas, y envíelas al laboratorio lo antes posible. No es necesario refrigerar pero proteja de la humedad y de la luz solar. 7. HEMOCULTIVO Limpie la región donde se hará la punción primero con tintura de yodo y después con alcohol al 70%. Puncione la vena y tome 10 ml de sangre. Bajo condiciones de estricta asepsia, introduzca la sangre en los medios de cultivo, a través de los tapones de goma. Nunca refrigere ni congele la muestra. Envíe lo antes posible en un paquete de doble fondo a temperatura ambiente. 8. HISOPO RECTAL La muestra se toma introduciendo en el recto la punta de un hisopo de algodón humedecido con solución fisiológica. Recoja materia fecal haciendo girar el hisopo ligeramente. Una vez recolectada la muestra, deposite el hisopo en el fondo de un tubo con medio de transporte Cary-Blair. Envíe inmediatamente, sin refrigerar y asegurándose de que la muestra llegue al laboratorio en las siguientes 24 horas. 9. LAVADO GÁSTRICO La muestra debe ser recolectada por personal médico entrenado. La muestra, unos 10 ml contenidos en un frasco acompañado de refrigerantes, se envía inmediatamente al Laboratorio. De no ser posible esto neutralice la muestra con 1 mg de Na 2 CO 3 por cada ml de muestra y además asegúrese de que llegue al Laboratorio dentro de las 6 horas siguientes a su recolección de la muestra. Página 3 de 6

4 10. LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO La obtención de la muestra es responsabilidad exclusiva del médico. Deben recuperarse unos 5 ml del líquido, los cuales se depositan en un tubo de vidrio estéril con tapón de rosca hermético. a. Para estudios virológicos e inmunológicos, la muestra debe enviarse refrigerada b. Para estudios bacteriológicos, la muestra no debe refrigerarse. En ambos casos, la muestra debe llegar al laboratorio dentro de las siguientes 24 horas de su recolección. 11. LÍQUIDO DE DERRAME PLEURAL y LAVADO BRONQUIAL La obtención de la muestra es responsabilidad exclusiva del médico. Deben recuperarse unos 5 ml del líquido, los cuales se depositan en tubos de vidrio estériles con tapón de rosca hermético. La muestra, acompañada de refrigerantes, debe llegar al laboratorio dentro de las siguientes 24 horas de su recolección. 12. MATERIA FECAL La muestra puede ser obtenida en un recipiente limpio de plástico, de boca ancha y con tapa hermética que permita su fácil transporte. No son satisfactorias las muestras tomadas del suelo, del excusado o del pañal, debido a que pueden contaminarse con material extraño. a. Para la determinación de coproantígenos, se envía una muestra de 5 g de heces o, si son líquidas, de unos 5 ml. No añada conservadores. b. Para estudios parasitológicos, homogenice unos 5 g de muestra con 5 ml de formol al 10% v/v. El envío se hace a temperatura ambiente. c. Para estudios parasitoscópicos en fresco, envié tres muestras consecutivas de diferente día de 5g cada una. El envío se hace a temperatura ambiente. d. Para estudios bacteriológicos, mediante un hisopo con punta de algodón, inocule una pequeña cantidad de materia fecal en un medio de Cary-Blair. Envíe el tubo a temperatura ambiente. 13. ORINA a. Para estudios de PCR se instruye al paciente a tomar de 10 a 50 ml de la primera micción de la mañana SIN PREVIOS LAVADOS DE NINGUNA ESPECIE. Enviar refrigerada lo antes posible. b. Para estudios bacteriológicos, se instruye al paciente para que, después de una cuidadosa limpieza con agua y jabón de sus genitales, deseche la primera parte de la micción y después, sin interrumpir, reco- Página 4 de 6

5 lecte unos 100 ml de orina en un frasco estéril de boca ancha y tapa de rosca. Enviar refrigerada lo antes posible. c. Para cultivo de micobacterias, se instruye al paciente para que, después de limpieza de sus genitales, recoja el total de orina de la primera micción de la mañana en un envase limpio. Debe entregar tres muestras de tres días consecutivos. La primera muestra sólo se recibirá de lunes a miércoles. Enviar dentro de las 2 horas siguientes a su recolección acompañada de refrigerantes. 14. SANGRE TOTAL Se entiende sangre anticoagulada. Recolecte por lo menos 1 ml de sangre en tubos estériles con EDTA (Vacutainer tapón lila) Transpórtelos a temperatura ambiente. NO REFRIGERE. NO CONGELE. 15. SUERO Envíe 1.5 ml de muestra, sin coágulo en un tubo empacado en un recipiente de doble fondo cerrado herméticamente. Conserve las muestras en refrigeración pero no las guarde por más de 5 días. 16. CEPAS BACTERIOLÓGICAS Envíe las cepas sembradas por estría en medio inclinado de base de agar sangre en tubos sellados con tapón de hule o Parafilm. Las cepas de M. tuberculosis deben enviarse en un tubo de medio Lowenstein- Jensen perfectamente sellado. 17. PLASMA Recolecte sangre en tubos estériles con EDTA (Vacutainer tapón lila) o en tubos PPT (Plasma Preparation Tube) con gel separador de plasma (Vacutainer tapón blanco) Resulta absolutamente inapropiada la sangre anticoagulada con heparina. En caso de recolectar especimenes en tubos vacutainer tapón lila, mantenga la sangre a temperatura ambiente y centrifugue y separe el plasma dentro de las siguientes 6 horas a la recolección del espécimen. Transfiera el plasma a viales de polipropileno estériles con tapón de rosca. Si tiene previsto que el plasma llegue al laboratorio dentro de las siguientes 6 horas, transpórtelos a temperatura ambiente, en caso contrario envíelos congelados a 20 C. En caso de especimenes recolectados en tubos PPT, gracias a su gel separador basta que centrifugue sin necesidad de transferir a tubos de polipropileno; puede congelar y transportar en los tubos originales. Página 5 de 6

6 18. SANGRE EN PAPEL FILTRO o Antes que nada, complete el formulario del Programa para la Prevención y Control de Defectos al Nacimiento que acompaña a la tarjeta de Guthrie (S&S 903) o Obtenga la muestra del talón de neonatos de 3 a 5 días de nacidos. Asegúrese de que el pie quede por debajo de la altura del corazón y espere a que la sangre se acumule por gravedad. Para que la acumulación sea mayor, la temperatura debe ser razonablemente caliente; se puede colocar una toalla limpia humedecida en agua tibia. o Limpie el área únicamente con alcohol. No use ninguna otra solución antiséptica. Seque con torunda o gasa estéril y deje evaporar el alcohol. o Puncione con una lanceta la parte más lateral de la superficie plantar del talón. Nunca en la zona central, para evitar lesionar nervios, tendones o cartílagos. Puncione con un solo movimiento en dirección casi perpendicular a la superficie del talón. o No exprima el área vecina ya que se producirá hemólisis y además la muestra se contaminará con líquido intersticial. o Con la superficie plantar hacia abajo, espere que se forme una gota colgando de la piel. o Ponga en contacto la superficie de la tarjeta Guthrie (papel filtro Schleicher & Schuell 903) con la gota de sangre (no con la piel) y deje que por capilaridad se impregne por completo él círculo impreso en la tarjeta. La gota debe ser lo suficiente grande para saturar el círculo completo e impregnar hasta la cara posterior de la tarjeta. o Repita lo anterior hasta colectar un total de cuatro gotas que llenen los 4 círculos impresos. o Deje que sequen las gotas de la tarjeta, dejándolas a temperatura ambiente por 2 o 3 horas, evitando la exposición a la luz directa antes de ponerlas en sus sobres. Nunca coloque una tarjeta encima de otra, ni toque su superficie. En ninguna circunstancia use horno de microondas, secadora de pelo o autoclave para secar las muestras. o Transporte las tarjetas a temperatura ambiente. Si tiene previsto que la muestra llegue 24 horas después de recolectada, colóquela en bolsa de plástico para evitar la humedad y transpórtelas en hielera con refrigerante. Página 6 de 6