Seroprevalencia de leptospirosis en perros callejeros y personas de alto riesgo ocupacional en la ciudad de Tunja

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1 33 Seroprevalencia de leptospirosis en perros callejeros y personas de alto riesgo ocupacional en la ciudad de Tunja Seroprevalence of leptospirosis in stray dogs and people of high occupational risk in the city of Tunja Jenny Hernández Niño 1, Angie Hernández Molano 2 y Vivian Tello Castro 3 Resumen El siguiente artículo es el resultado de un estudio que buscó determinar la seroprevalencia de leptospirosis en personas de alto riesgo ocupacional y en perros callejeros de la ciudad de Tunja (Boyacá), en el periodo comprendido entre marzo a mayo de 2007, y correlacionar los distintos serotipos detectados serológicamente tanto en personas, como en perros, con el fin de definir si se está presentando la enfermedad como zoonosis. Se estudió la prevalencia en 82 personas de riesgo ocupacional, y en 51 perros callejeros que se encontraban deambulando por las calles y fueron recogidos al azar por la Secretaria de Protección Social, con el fin de encontrar leptospirosis e identificar los serovares implicados. Es un estudio descriptivo en el cual se hallaron variables epidemiológicas y la seroprevalencia. El serovar encontrado con mayor frecuencia en los sueros analizados fue Icterohaemorrhagiae Conclusiones: La seroprevalencia de infección es representativa tanto en personas como en perros. Existe un riego considerable para la salud pública en la ciudad de Tunja. Palabras clave: Leptospirosis, seroprevalencia, serovares, MAT, Tunja, perros callejeros, personas en alto riesgo. Abstract The following article is the result of a study of the seroprevalence of leptospirosis in people at high risk occupational and stray dogs in the city of Tunja in the period between March to May 2007 and to correlate the different serotypes serologically detected both people and dogs in order to define whether it is presenting the disease as zoonosis. We studied the prevalence of occupational risk 82 people and 51 stray dogs were roaming the streets and were picked at random by the secretary of social protection in order to find and identify leptospirosis serovars involved. It is a study which found epidemiological variables and seroprevalence. The serovar most found in the sera was Icterohaemorrhagiae Conclusions: The seroprevalence of infection is representative both in humans and dogs, there is a considerable irrigation for public health in the city of Tunja. Key words: Leptospirosis, seroprevalence, serovars, MAT, Tunja, stray dogs, people in high risk. 1. M.Sc. Microbiología. Pontificia Universidad Javeriana. Colombia Bacterióloga. Universidad de Boyacá. Colombia Bacterióloga. Universidad de Boyacá. Colombia, jehernandez7@areandina.edu.co

2 34 Jenny Hernández Niño, Angie Hernández Molano y Vivian Tello Castro INTRODUCCIÓN En Tunja y en Colombia, en general, se tienen pocos datos de la epidemiología de leptospirosis en ambientes urbanos. La leptospirosis es una enfermedad transmisible, que forma parte del grupo de enfermedades bacterianas zoonóticas. (Rodríguez, Gómez, Pérez & Cruz, 2001; Rodríguez, Ferro, Varona & Santafé, 2004). Es una enfermedad infecciosa letal que puede causar grandes epidemias. Aunque es curable, debido a la inespecificidad de los síntomas se puede confundir con patologías que presentan la misma sintomatología, lo cual permite que la enfermedad evolucione hasta llegar a graves complicaciones como el daño renal y hepático, que acarrean secuelas irreversibles en el organismo (Rodríguez, et al). Desafortunadamente, y debido a su ciclo de transmisión, el cual se realiza a través de orina contaminada de estos mamíferos, la población en riesgo de contraer leptospirosis es aquella que se encuentra en contacto permanente con animales domésticos susceptibles a la infección, que no han sido vacunados, tales como perros, vacas, cerdos, caballos y gatos (Rodríguez et al., 2001). La rata o ratón de alcantarilla (Rattus norvergicus) y el ratón negro o ratón del techo (Rattus rattus) son considerados reservorios ecológicos de la leptospirosis, aunque no desarrollan síntomas de esta zoonosis (Carneiro, Giacomini & Costa, 2004). Las condiciones ambientales que influyen en la supervivencia del organismo fuera del huésped son: la humedad, suelos con ph alcalino y la temperatura baja (10ºC). Las infecciones en animales o en el hombre ocurren de forma directa, mediante el contacto con orina de animales infectados, o indirecta por el contacto con agua contaminada (Rivera, de la Peña, Roa & Ordoñez, 1999). La infección está vinculada con actividades ocupacionales y afecta principalmente a médicos veterinarios, estudiantes de medicina veterinaria, personal de clínicas veterinarias, trabajadores recolectores de basura, arroceros, agricultores y carniceros, debido a su alto riesgo de exposición (Nájera, Alvia, Babilonia, Álvarez & Máttar, 2005). El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia en personas que se encuentran en alto riesgo ocupacional, y en perros callejeros de la ciudad de Tunja, por medio de la técnica de Microaglutibación (MAT). MATERIALES Y MÉTODOS Población canina callejera Se realizó un estudio descriptivo en 51 perros callejeros de distintos barrios de la ciudad de Tunja. Estos perros se encontraron deambulando en la ciudad y fueron recogidos al azar durante los meses de marzo y mayo de 2007, por la Secretaria de Protección Social, entidad encargada del programa de salud animal. Población humana de alto riesgo ocupacional Se realizó, en el periodo de marzo y mayo de 2007, un estudio descriptivo en 82 personas en alto riesgo por su ocupación. De estas, 48 (59%) fueron funcionarios de clínicas veterinarias, 26 (31%) recolectores de basura y 8 (10%) trabajadores del relleno sanitario. En cuanto a las clínicas veterinarias, la mayoría de la muestra está ubicada en la ciudad de Tunja. Las que no aparecen en el estudio fue porque no quisieron participar en este o no disponían de tiempo. Por otro lado, los recolectores de basura y trabajadores del relleno sanitario pertenecen a la empresa Servigenerales S.A., que es la encargada del servicio de recolección de basuras, rellenos sanitarios y aseo, en general, de la ciudad. A todas las personas que participaron se les informó y pidió consentimiento para la toma de muestra y realización de una encuesta, para determinar los factores de riesgo, sintomatología, entre otras. Sueros de personas y perros Se obtuvieron 5 ml. de sangre en tubos sin anticoagulante, con jeringa y vacutainer por venopunción. El suero se separó por centrifugación a 1500 rpm. durante 10 minutos, y se conservó a -20ºC hasta su procesamiento. Las muestras de sueros se analizaron en el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA) CESISA mediante la técnica de microaglutinación (MAT), como se describe a continuación. Prueba serológica: Microaglutinacion (MAT) Para la detección de anticuerpos, como prueba de referencia (gold estándar), se usa la prueba de microaglutinación (MAT), que se efectúa durante el estadio agudo de la enfermedad (Acosta, Moreno y Viáfara, 1994; Borman, 2003 y Acha & Szyfres, 2003). En esta investigación se realizó utilizando el método convencional, con una batería de 6 Serovares de leptospira como antígenos vivos. Los serovares utilizados fueron: Hardjo, Pomona, Icterohaemorrhagiae,

3 Seroprevalencia de leptospirosis en perros callejeros y personas de alto riesgo 35 Gripptyphos, Canicola, Bratislava, que fueron aisladas por el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA) CEISA. La prueba se hizo en microplacas, a las que se les agregó 50 μl de cada antígeno a 50 μl de suero diluido 1:50, con solución salina amortiguada con fosfatos (SAF). Las placas se incubaron por dos horas a una temperatura de 28 a 30ºC; posteriormente, se observó al microscopio. La aglutinación se observó e interpretó en microscopio de campo oscuro, con objetivo de 10X. Los sueros que demostraron por lo menos una aglutinación del 50%, con uno o más serovares, se les realizó diluciones seriadas. Los títulos menores a 1:100 se consideran negativos, y títulos mayores o iguales a 1:100 son considerados positivos (Rodríguez et al., 2004 & Brandão, Camargo, Da Silva, Silva & Abrão, 1998). Análisis estadístico Se realizó un análisis descriptivo de la población y se determinó la prevalencia de leptospirosis en perros callejeros y personas de alto riesgo por su ocupación. RESULTADOS Población canina Estudio serológico: De 51 muestras de perros hubo una seroprevalencia de 29% (15/57). Aglutinaron contra uno o más serovares de leptospira en los sueros procesados. El serovar más encontrado en los sueros analizados fue Canicola 60%, seguido de Gryppotyphosa 46.6%, Icterohaemorrhagiae 33.3%. Hubo presencia de coaglutinación (anticuerpos contra uno o más serovares) en un 42.8% (6/14). Todos presentaron aglutinación contra dos serovares el cual fue Canicola y Gryppotyphosa. Los títulos encontrados estuvieron entre 1:100, que indica posible infección, y 1:3600, que es infección activa. Es un título bastante alto identificado en el serovar canicola. Variables epidemiológicas: De los 51 perros 53% (27/51) eran machos y 47% (24/51) hembras. En cuanto a la edad la mayoría 86% (44/51) fueron adultos y 13.7% (7/51) cachorros. En la tabla 1 se demuestra la distribución por barrios y su respectiva prevalencia. Tabla 1. Distribución y seroprevalencia de perros por barrio BARRIO NÚMERO PREVALENCIA Cooservicios % Villa Bachue % Las nieves 6 40% Centro % El Bosque % Suamox % Unza % Total de casos 15

4 36 Jenny Hernández Niño, Angie Hernández Molano y Vivian Tello Castro Población humana: Estudio serológico: De 82 sueros de trabajadores de clínicas veterinarias, trabajadores en relleno sanitario y recolectores de basura, se obtuvo una seroprevalencia del 11% (9/82), el cual aglutinó contra un serovar de leptospira. En la tabla 2 se muestran los seropositivos y la prevalencia según la ocupación. El serovar más encontrado en los sueros analizados fue Icterohaemorrhagiae, con una prevalencia del 88.5%, seguido de Pomona y Canicola, con una prevalencia de11.1%, iguales para ambos. En cuanto a los títulos se obtuvo 1:100, que indica posible infección, hasta 1:400, que indica infección activa. Tabla 2. Ocupaciones con mayor prevalencia de Leptospirosis en población humana OCUPACIÓN Ayudante de recolección Operario de relleno sanitario Servicios generales Estudiante Auxiliar de veterinaria Total de casos NÚMERO PREVALENCIA 44.4% 11.1% 22.2% 11.1% 11.1% Variables epidemiológicas: La distribución según la ocupación fue así: 31% (26/82) recolectores de basura, seguida de auxiliares de veterinaria 18% (15/82), médicos veterinarios y estudiantes de veterinaria en practica clínica con el mismo porcentaje 15% (12/82), aseadoras de clínicas veterinarias 11% (9/82), y ayudante de relleno sanitario 10% (8/82). De las 82 personas la distribución según el género fue: 70.8% (58/82) para el género masculino, y 29.2% (24/82) para el género femenino. La edad media fue de 28 años (19-55 años). DISCUSIÓN En la ciudad de Tunja, capital del departamento de Boyacá, y en el resto del país se conocen pocos datos de la leptospirosis. Esto se debe al difícil diagnóstico y producción de cepas (Rodríguez et al., 2004). El estudio demostró una seroprevalencia humana ocupacional del 11%, compatible con otras investigaciones realizadas en Colombia. Uno de estas fue hecha en el caribe colombiano sobre leptospirosis ocupacional en trabajadores agrícolas, recolectores de basura y carniceros, que demostró una prevalencia de 13.1%, y otra en Don Matías (Antioquia) con una tasa de ataque de 6.4 y 22.38% (Nájera et al., 2005). En nuestro estudio la prevalencia de leptospirosis fue mayor en recolectores de basura, con un 44.4%, seguido por los aseadores de las clínicas veterinarias con un 22.2%. Este dato es similar a un estudio realizado en Brasil (Rió Grande do Sul), en una clínica veterinaria, donde hubo un brote previo. Allí se demostró que el personal en el que más se evidenció prevalencia de leptospirosis fue en el encargado del aseo, debido a la falta de información sobre las formas de transmisión de la infección. En esta investigación se llegó a una conclusión similar, ya que al momento de preguntar si tenían conocimiento de la enfermedad, el 68% dijo que no. Es por eso que es importante educar a todo el personal de una clínica veterinaria. Estos resultados demuestran que la leptospirosis es de carácter ocupacional (Nájera et al., 2005).

5 Seroprevalencia de leptospirosis en perros callejeros y personas de alto riesgo 37 En el primer caso de leptospirosis humana en Colombia, se aisló el serovar canicola (Acosta et al., 1994). La seroprevalencia según la edad fue más marcada en hombres que en mujeres. Este dato es igual a lo encontrado en fuentes bibliográficas, especialmente, por la ocupación que desempeñan (Rodríguez et al., 2004 & Carneiro et al., 2004). Los recolectores de basura fueron los que tuvieron una prevalencia más alta; aunque ellos utilizan todos los implementos de protección que les suministra la empresa, se especula que esto se debe al contacto con todo tipo de material contaminante. Por ejemplo, perros y ratas marcan territorio con la orina, en las bolsas de basura. Lo anterior hace que este grupo ocupacional tenga una mayor predisposición a la infección. Es importante recalcar la importancia de una educación continua para prevenir la enfermedad, no solo en este grupo ocupacional sino también en todos aquellos que están en riesgo (Rodríguez et al., 2004). En cuanto a los antecedentes de los síntomas, ningún estudio revisado demostró asociación con la infección. La mayoría de los casos de leptospirosis demuestra una sintomatología inespecífica. Esto se correlaciona en estudios donde hay una alta prevalencia con sintomatología inespecífica (Nájera et al., 2005 & Johnson, et al., 2004). En los resultados de los perros callejeros se obtuvo una prevalencia de 29%. Algunos estudios realizados en Colombia sobre leptospirosis demuestran una prevalencia de 41.1% en 197 perros callejeros en la zona urbana de Cali; y otro en Montería, con una prevalencia de 27.3%. Otros estudios en ambientes suburbanos se ha encontrado una positividad de 57% (Argentina), 62% (Barbados) y 38.51% (México). El serovar de mayor prevalencia en este estudio fue canicola, con un título máximo de 1:3600, seguido de grippotyphosa (Jiménez, 2005). En otros estudios la prevalencia de los serovares fue así: Icterohaemorrhagiae (Cali- en perros callejeros), Castellonis (México- en perros callejeros), Pirogenes, Canicola (Gran Buenos Aires), Canicola (México). La prevalencia de estos serovares depende del contacto con otros animales salvajes o de cambios climáticos en cada zona; por esta razón no son iguales los serovares. Los climas calurosos y lluviosos favorecen la supervivencia (Carneiro et al., 2004). El contacto con la calle es el factor de riesgo más importante para la población canina. Rubel y su equipo de investigación sugieren que el serotipo Canicola es el más frecuente en áreas urbanas (Rubel, 1997 & Borman, 2003). Este dato se correlaciona con lo obtenido en los resultados de esta investigación. La edad y el género más frecuente fueron adulto y macho. Esto se debe a que deambulan más por las calles que las hembras y los cachorros. Por eso tienen más contacto con otros animales. También es importante el comportamiento del macho, el cual marca territorio por donde pasa, y es así como puede dejar leptospiras y contribuir al ciclo de transmisión (Brandão et al., 1998). El serovar Icterohaemorrhagiae y Canicola se encontraron tanto en personas como en perros. Esta puede ser una fuente de infección perro-persona y se podría afirmar que la leptospirosis no solo se transmite por agua contaminada, inhalación de orina, contaminación de herida o ingreso por piel, sino también se trata de una zoonosis presente en la ciudad de Tunja. AGRADECIMIENTOS Universidad de Boyacá, Programa de Bacteriología y Laboratorio Clínico, Instituto Colombiano Agropecuario (CEISA) seccional Bogotá, Secretaría de la Protección social de Tunja, Clínica de pequeños y grandes animales de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia UPTC. REFERENCIAS Acha & Szyfres, P. N. Boris, S. (2003). Zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales. Organización Panamericana de la Salud. Washington, D.C. Tercera Edición. Publicación científica y técnica Nº 580. Acosta, H., Moreno, C. H. & Viáfara, D. (1994). Leptospirosis. Colombia Médica. Borman, J.N. (2003). Recent Advances in Canine Infectious Diseases. Department of Population Medicine and Diagnostic Science, Diagnostic Laboratory, College of Veterinary Medicine, Cornell University, Ithaca, New York, USA. Brandão, A. P., Camargo, E.D., Da Silva, E. D.; Silva, M. V. & Abrão, R.V. (1998). Macroscopic agglutination test for diagnostic of human leptospirosis. En: Journal of clinical microbiology, Vol. 36, No. 11, pp

6 38 Jenny Hernández Niño, Angie Hernández Molano y Vivian Tello Castro Carneiro, M., Giacomini, D. & Costa, M. (2004). Leptospirosis outbreak relate to occupational exposure: Clinical and epidemiological study. Chicago, 21(4): Johnson, M., Smith, H., Joseph, P., Gilman, R.H., Céspedes, M., Klatsky, P., Vidal, C.; Terry, H., Calderón, M. M., Coral, C., Cabrera, L., Parmar, P. S. & Vinetz, J. M. (2004). Environmental exposure and leptospirosis. Perú. Emerg Infect. Nájera, S., Alvia, N., Babilonia, D., Álvarez, L. & Máttar, S. (2005). Leptospirosis ocupacional en una Región del Caribe Colombiano. Revista Salud Pública de México, 86. Rivera, A., De la peña, A., Roa, M. de los Á. Ordoñez, M.L.(1999). Seroprevalencia de leptospirosis en perros callejeros del norte de la ciudad de México. Veterinaria México, enero- marzo, Vol. 30, No. 001.Universidad Nacional Autónoma de México. Rodríguez, A. L.; Ferro, B.E., Varona, M. X. & Santafé, M. (2004). Evidencia de exposición a Leptospira en perros callejeros de Cali. Biomédica, 24:291. Rodríguez, B., Gómez, H. J., Pérez, B.; & Cruz, R. (2001). Diagnóstico y tratamiento de la leptospirosis humana. Revista Cubana de Medicina General Integral, Rubel, D., Seijo, A., Cernigoi, B., Viale, A. & Wisnivesky-Colli, C. (1997). Leptospira interrogans en una población canina del Gran Buenos Aires: variables asociadas con la seropositividad. En: Revista Panamericana de Salud Pública, Vol.2, No.2. Valverde, M., Brenes, R. & Sequeiro-Soto, J. (2005). Leptospirosis humana y animal. Consideraciones epidemiológicas, clínicas y de laboratorio. RIACA Laboratorios, p. 300.