UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS, TECNOLOGIA E INGENIERIA CURSO DE BIOLOGIA TUTORA: Yamile.cortes@unad.edu.co Cortes.yamile@gmail.com OBJETIVOS: Manejar correctamente los materiales y reactivos específicos de la práctica. Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular Relacionar cada cambio presente en las células meristemáticas, con las diferentes fases de la mitosis. Reconocer los procesos de la meiosis con base en el material suministrado. MATERIALES: Bulbo de cebolla Allium cepa Palillos grandes Pinzas Tijeras Papel de filtro Portaobjetos Cubreobjetos Lanceta esteril Esmalte transparente Bisturí Aceto orceina Eosina Metanol Acido acético Alcohol para mechero

2 2 INSTRUMENTOS Vaso de precipitado o vaso desechable Pipeta pasteur Mechero de alcohol Vidrio de reloj EQUIPOS Microscopio PROCEDIMIENTO: Para el desarrollo de esta práctica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones con la raíz de material fijado y teñido, una vez obtenidos los extendidos de células obsérvelos al microscopio óptico. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o rosácea del bulbo de cebolla y lave con abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas para inhibir o retardar la germinación de las raicillas. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. Póngalo a germinar a 25 C o a temperatura ambiente durante 3 días, al cabo de estos aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar con agua cada 24 horas. Cuando las raíces tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raíz de aproximadamente 2 3 mm a partir del ápice. Colóquelas en un vidrio de reloj. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o eosina. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues. Con las pinzas tomar uno de los ápices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos, dejar actuar durante 1 minuto. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con ayuda del borrador de un lapiz, de unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raíz quede extendida.

3 3 Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presión, evitando que él cubre objetos resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice. Poner el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice. Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para evitar que se seque y de esta manera conservar la preparación durante varios días. Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e identifique las células. Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas en color rosáceo morado. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones anotando las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interfase y células en división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de lo observado. Observaciones: Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e identifique las células. Escriba alguna anotación importante Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas en color rosáceo morado. Dibujélos Escriba alguna anotación importante

4 4 Ubique el objetivo de 100 x y anote las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interfase y células en división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de las fases que distinga, tenga en cuenta la posición de los cromosomas para identificar las fases.

5 5 OBSERVACION DE LA CELULA. OBJETIVOS Describir las diferentes formas y tamaños de las células. Señalar las diferencias fundamentales entre una célula animal y una célula vegetal. Reconocer a la célula como unidad básica de los seres vivos. MATERIALES Microscopio Agua de florero Cebolla cabezona Hojas de elodea o espinaca Sangre de pollo (5 ml aprox.) Agua Agua estancada Muestra de semen Lugol Palillo plano Portaobjetos o láminas Cubreobjetos o laminillas Bisturí Alfileres Copitos Colorante Wright Objetos de aseo personal Bata de laboratorio Azul de metileno Yogurt Papa Guantes Carne PROCEDIMIENTO A. UNICELULARES PROTISTAS 1. Tome una gota de yogurt 2. Póngala en la lamina portaobjetos 3. Agréguele una gota de lugol 4. Coloque la lamina cubreobjetos B. UNICELULARES ACUATICOS 1. De la muestra de agua estancada, tome una gota y colóquela en una lámina portaobjetos, cubra con una laminilla. 2. Retire el exceso de agua por los bordes utilizando papel absorbente. 3. Observe el montaje realizado al microscopio en 4X, 10X y 40X. 4. Dibuje sus observaciones anotando el aumento utilizado. C. CELULA VEGETAL CEBOLLA 1. Retire cuidadosamente la capa más delgada y transparente de la cebolla cabezona (epidermis). 2. Con el bisturí corte una pequeña parte de esta capa y colóquela extendida sobre el portaobjetos. 3. Repita la operación y obtenga entonces dos extendidos.

6 6 4. Agregue una gota de agua y cúbrala con el cubreobjetos o laminilla de tal manera que no queden burbujas de aire o dobleces en la capa de cebolla. 5. A la otra muestra, colóquele una gota de lugol. Deje actuar el Lugol durante 5 minutos. 6. Acerque una laminilla, en posición oblicua, y apoyando una arista sobre la lámina al lado de la gota, déjela caer suavemente sobre la gota. 7. Observe al microscopio la muestra, inicialmente con el objetivo de menor aumento y luego con el objetivo de mayor aumento. 8. Registre sus observaciones. D. CELULA VEGETAL - ELODEA 1. Coloque una hoja de elodea con el envés hacia arriba o una capa delgada de la hoja de espinaca en el portaobjetos. 2. Agréguele una gota de agua, cuidando que no queden burbujas de aire. 3. Observe al microscopio esta muestra E. TEJIDO PARENQUIMATOSO DE UN CORTE TRANSVERSAL DE PAPA 1. Tome el bisturí y haga un corte transversal muy fino (casi transparente) de la papa. 2. Enjuague el corte con suficiente agua para retirar el exceso de almidón, contenido en las células de los tejidos de la papa. 3. Extienda dos muestras del tejido de la papa sobre una lámina portaobjetos, en una de las muestras adicione Lugol y en la otra agua. Deje actuar el Lugol durante 5 minutos 4. Observe con el objetivo de 10 X y luego con el objetivo de 40 X. 5. Registre sus observaciones F. CELULA ANIMAL - CELULA EPITELIAL 1. Limpie suavemente la mejilla interna con el palillo plano, deseche esta muestra y vuelva a raspar la mejilla interna con otro palillo o copito. 2. Extienda esta muestra sobre el portaobjetos y agréguele una gota de solución salina y una gota de azul de metileno o safranina. 3. Espere 5 (cinco) minutos a que el colorante tiña las células. 4. Coloque el cubreobjetos sobre la preparación y retire con un papel secante el exceso de agua y colorante. 5. Observe esta muestra en el microscopio como se ha indicado con anticipación. 6. Identifique las células de forma irregular. G. CÉLULA ANIMAL TEJIDO MUSCULAR 1. Tome un pequeño trozo de carne tejido muscular Extiéndalo suavemente sobre la lámina portaobjetos. 3. Agregue una gota de azul de metileno y una de agua. 4. Coloque el cubreobjetos. 5. Lleve al microscopio 6. Observe las fibras musculares. 7. Identifique las estrías 8. Dibuje.

7 7 H. CELULA ANIMAL TEJIDO SANGUINEO 1. Desinfecte con un algodón humedecido en alcohol, la punta del dedo anular o índice, deje secar el alcohol y con una aguja estéril, realice una punción en la yema del dedo. 2. Sobre un portaobjetos limpio y seco coloque una gota de sangre. 3. Utilice un cubreobjetos para extender sobre la placa la gota de sangre. Colóquelo en ángulo agudo sobre la gota, deslice suavemente y en forma continua la gota de sangre hasta formar una capa delgada. 4. Deje secar la muestra. 5. Una vez seca la muestra aplique sobre ella una gota de colorante Wrigh y déjelo actuar durante cuatro minutos. Con este procedimiento el colorante fijará la preparación. 6. Lave el exceso de colorante con agua de la llave y deje secar la lámina verticalmente. 7. Observe al microscopio como se le ha indicado, primero con el objetivo de menor aumento y luego va cambiando al de mayor aumento. 8. Identifique los glóbulos rojos, leucocitos y plaquetas. I. CÉLULA ANIMAL ESPERMATOZOIDES 1. Tome la muestra de semen. 2. Extraiga una gota y colóquela en una placa portaobjetos 3. Coloque la lámina cubreobjetos 4. Observe al microscopio 5. Fíjese en el movimiento 6. Dibuje e identifique la mayor cantidad de estructuras. ILUSTRE Y REGISTRE CADA UNA DE LAS OBSERVACIONES REALIZADAS AL MICROSCOPIO, INDICANDO EL OBJETIVO UTILIZADO (por ejemplo 10X, 40X). INDIQUE LAS PARTES DE CADA ORGANISMO OBSERVADO. Al finalizar el trabajo, deje el microscopio en su correcta posición, limpie los objetivos, colóquele la funda y guárdelo en su respectivo puesto. INFORME DE LABORATORIO El informe de laboratorio debe incluir: 1. Encabezado (Universidad, Escuela, Programa, Integrantes, Código) 2. Objetivos de cada práctica. 3. Introducción 4. Materiales y métodos (los realmente empleados en la práctica) 5. Resultados y análisis: Presentar de forma ordenada los resultados obtenidos por cada práctica y realizar una discusión sobre los resultados obtenidos. Se deben realizar los dibujos de todas y cada una de las observaciones realizadas. 6. Conclusiones 7. Bibliografía

8 8 BIBLIOGRAFIA Audersirk, T. y Audersirk, G Biología: La vida en la tierra. Cuarta Edición. Prentice Hall Hispanoamericana, S. A. México. 945 p. Barrera, N.; Ortiz, A.; Manzano, M.; Velázquez, E. y Ramírez, H Biología General. Guías de Laboratorio y de Campo. Universidad Nacional de Colombia. Sede Palmira. 45 p. Biggs A., Kapicka C., Lundgren L., Biología La dinámica de la vida Editorial McGraw Hill. Pág Castro, F.; Vélez, M.C.; González, I.A. y Rondón, F Manual de prácticas y talleres en Biología General. Universidad del Valle. Facultad de Ciencias. Departamento de Biología. 65 pp. Cooper, G.M La Célula. Editorial Marban. Curtis H., Barnes S. Biología Editorial Médica Panamericana p. Gray, P The enciclopedia of microscopy and microtechnique. Van Nostrand. Reinhold Co. N.Y. Toronto. Salazar, Y Guías para prácticas de Biología General. UNAD. 41 p. Roberts, M.B.V Biology for life. Segunda edición. España. 403 p.