Evolución de las pruebas para el diagnóstico de la infección por VIH

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Alfonso Martínez Ramírez
hace 6 años
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1 Evolución de las pruebas para el diagnóstico de la infección por VIH Q. C Ramón Hernández Juan Centro de Investigación de Enfermedades Infecciosas Laboratorio de Diagnóstico Virológico INER. Hospital General México, CDMX 3 de Junio de 2017.

2 ria Investigación 1985 HTLV III. Mayo de 1986, clasificado como Human Inmunodeficiency Virus HIV-1. Desarrollo 2 de marzo 1985 FDA, ensayo de diagnóstico para VIH. ABBOTT, como monitoreo a donadores. Algoritmo de diagnóstico. Laboratorio Ensayos de 1, 2,3, 4, 5.. generación. Pruebas rápidas Ensayos de Ácidos nucleico

3 ria natural

4 era Generación: 1985 LISA INDIRECTO HTLVIII - VIH-1 Uso Falsos Positivos Prueba confirmatoria Señal D.O Anti-IgG VIH-1 Tamizaje Donadores de Sangre Individuos bajo riesgo IFA (HTLVII IgG VIH-1 HTLV III Periodo de ventana de 8-10 semanas Embarazo Western Blot

5 ritmo ELISA IgG VIH-1 Prueba ELISA IgG VIH-1 Positivo Resultado Positivo Western blot Confirmación IFA (HTLV III)

6 nda generación ELISA INDIRECTO VIH-1, 2 Usos Falsos Positivos Prueba Confirmator Donadores de sangre Embarazo Wester Blot Anti-IgG VIH-1 Anti-IgG VIH-2 Diagnóstico Otras infecciones: autoinmunes Reducción Ventana 4-6 semanas. IgG VIH-1 IgG VIH-2 Proteínas Virales VIH-1 y Grupo O Proteínas Virales VIH-2

7 ritmo LISA VIH- 1/VIH-2 Positivo en duplicado Western blot Reportar como VIH + LISA VIH- 1/VIH-2 Positivo/Negativo Indeterminado Ensayo VIH-2 LISA VIH- 2 Positivo en duplicado Pruebas HIV-2, WB Seguimiento

8 era generación ELISA sándwich VIH-1, 2 IgG e IgM señal Usos Falsos Positivos Prueba confirmatoria Diagnóstico Individuos bajo riesgo. Enfermedades autoinmunes Western Blot. les Ac s IgG Ac s IgM Periodo de ventana 3 semanas Embarazo HIV PCR: < 18 meses. Alto costo. Poco accesibles. les Antígenos recombinantes

9 ritmo

10 ta generación: finales de los 90 s sándwich VIH-1, 2 IgG e IgM + Antígeno p24 señal señal 2010 FDA Sensibilidad vs Especificidad. BIORAD HIV-1 COMBO Ac-Ag Especificidad 100 % Sensibilidad % Ventana días Pruebas Confirma Western Blot. Ac s IgG Ac s IgM p24 ARCHITEC ABBOTT, COMBO (QUIMIOLUMINISCENCIA) Especificidad % Sensibilidad 99.5 % Ventana de días. Ensayos de Ácidos nu NAT s. HIV-1 RNA qualitative assay

11 ritmo

12 ta generación: 2015 LISA sándwich VIH-1, 2 IgG e IgM + Antígeno p24 Aprobación FDA 2015 Sensibilidad vs Especificidad. Pruebas Confirmato BIO-RAD Bioplex 2200 HIV Ag/Ab. 100 % sensibilidad y 99.5 % especificidad. Westren Blot señal señal señal Detecta Antígeno y Anticuerpos de VIH-1 por separado. Ventana: 11 días NAT s IgG p24 IgM

13 bas rápidas ala de urgencias, salas de idad de cuidados tensivos, UTI. iseño aplicado en tarjetas fase solida. angre completa, suero y idos orales probado FDA. 3 generación 4 generación 4.5 generación

14 ritmos con pruebas rápidas on et al. / Journal of rology 52S (2011)

15 tinuación. iagnóstico de HIV-1 y IV-2. ecomendado en los lgoritmos de CDC, para iagnóstico diferencial de fección por VIH-1 o VIH-. ensibilidad del 100 %. specificidad del 96 % ournal of Clinical Virology 52S (2011) S41 S44

16 yos de ácidos nucleicos. NAT países desarrollados a principios de 2000 s. 33 países para HIV países para HBV. Altamente sensible y especifico para ácidos nucleicos virales. RNA DNA Reduce el periodo de ventana: HBV días. HCV 1.34 días. HIV 2.93 días.» Resolver FALSOS POSITIVOS (donadores)

17 continuación ecnología especializada y costosa. nfraestructura especializada y en condiciones controladas. ersonal calificado. Evaluación de la incidencia y prevalencia en la población donadora. Mejores resultados cuando se suma a la pruebas de serología.

18 n IgG, lisado virales HTLV II IgG HIV-1/HIV-2 IgG/IgM, HIV-2, Grupo O IgG/IgM/Grupo O, Ag p24 IgG/IgM/Grupo O/Ag p24 Año eración 1st 2nd 3rd 4th 5th ntana manas) rueba irmatoria Western blot, IFA HIV-1 WB, HIV-2 ELISA y WB HIV-1 WB, HIV-2 ELISA y WB HIV 1-2 diferencias, HIV-1 RNA qpcr NAT s E=95 % S=99 % E=> 99 % S=> 99.5 % E = >99.5% S = >99.5 % E= 99.5% S= > 99.8 % E= 99.5 % S= 100%

19 tro de Investigación en Enfermedades cciosas: Catalogo de pruebas Laboratorio de Diagnóstico Virológico: 1. SEROLOGIA: VIH, HBV, HCV, TOXO, CM 2. PCR EN TIEMPO REAL: VIH, CMV, EBV, JC/BK, B19, HHV8. 3. GENOTIPO: VIH, HCV y HBV, VPH. 4. PCR PUNTO FINAL: HERPES FAMILY VIRUS 5. CITOMETRIA DE FLUJO: CD4/CD3/CD8/CD GENEXPERT: MTB/RIF, MRSA, INFLUEN (A,HINI2009,B).

20 -010 Prevención y control de la infección por el VIH. 1. Pruebas de tamizaje: presencia de anticuerpos contra el VIH en el suero o plasma, demostrad guno de los siguientes métodos: 1.1. Ensayo Inmunoenzimático (ELISA) Aglutinación pasiva. 2. Pruebas suplementarias: presencia de anticuerpos contra el VIH en el suero o plasm strada por alguna de las pruebas siguientes: 2.1. Inmunoelectrotransferencia (Prueba de Western blot) Inmunofluorescencia, o 2.3. Radioinmunoprecipitación (RIPA), o 3. Pruebas específicas: determinan la presencia del virus o algún componente del mismo, como son 3.1. Cultivo de virus Determinación de antígeno viral Reacción en cadena de la polimerasa, para determinar el ARN viral o ADN proviral.

21 o principios: OMS onsentimiento informado. onfidencialidad. acilitación de orientación (o asesoramiento). arantía de que los resultados de la prueba son orrectos. inculación con la asistencia, el tratamiento y otros ervicios.

22 LABORATORIO DE SEROLOGÍA OLOGÍA EVOLIS BIO-RAD:,LI28,LI29,LI35 SEROLOGÍA VIDAS BIOMERIEUX: LI34,LI37,LI17,L28,LI49,LI50,LI34

23 ta generación combo Ac-Ag DISEÑADO PARA SU USO EN TODO EL MUNDO. VIH-1 GRUPO M(A,B,C,D,E,F,G,H) GRUPO O. GRUPO N. VIH-2

24 ta generación combo Ac-Ag Determinación combinada de a HIV-1 (groups M and O) y anti- 2 + Antígeno p24 de VIH-1. Lectura o señal de Ag y Ab. Alta sensibilida para Ag p24. Fácil de usar.

25 TERN BLOT LI35,LI52,LI12

26 I, Laboratorio de Diagnóstico Virológico. ELISA 4 generación VIH- 1 combo Ac-Ag 2 plataformas diferentes VIDAS - EVOLIS - VIDAS + EVOLIS + Prueba confirmatoria: Western blot NEGATIVO POSITIVO 2 ENV + 2 GAG + 2 POL NOTIFICACIÓN PACIENTE POSITIVO SEGUIMIENTO CV-CD4. TRATAMIENTO ARV.

27 ritmo de seguimiento VIH- 1 combo Ac-Ag VIDAS Positivo EVOLIS Positivo VIDAS Positivo o Negativo EVOLIS Positivo o Negativo INDETERMINADO 1 GAG + 1 POL NEGATIVO PCR VIH-1 CUALITATIVO PCR VIH-1 CUALITATIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO SEGUIMIENTO CV-CD4. TRATAMIENTO ARV NOTIFICACION RESULTADO. SEGUIMIENTO ESTRECHO. SEGUIMIENTO CV-CD4. TRATAMIENTO ARV NOTIFICACION PACIENTE

28 racias..

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