REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE BIOANÁLISIS

Transcripción

1 REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE BIOANÁLISIS

2 A N T Í G E N O S. DEFINICIÓN: Sustancia extraña que inducen respuesta inmunitaria específica y son dianas de tales respuesta. Sustancia que es capaz de unirse específicamente a un anticuerpo ó a un receptor de la célula T.

3 . ANTÍGENOS DE DIFERENTES GRUPOS SANGUÍNEOS QUE INCLUYE PROTEÍNAS, GLICOPROTEÍNAS, GLICOLÍPIDOS Y OLIGOSACÁRIDOS ALGUNOS DE ELLOS SON PRODUCTOS GÉNICOS OTROS SON COMPLEJOS DE SUSTANCIAS PRECURSORAS Ej: Sustancia P Sustancia H (ABH) OTROS SISTEMAS DE ANTIGENOS SON PRODUCTOS PROTEICOS PLASMÁTICOS ADSORBIDOS SOBRE CÉLULAS ROJAS

4 Estructuras de antígenos de membrana eritrocitaria con función de grupos sanguíneos

5 A N T I C U E R P O S. DEFINICIÓN:. Son proteínas plasmáticas producidas en respuesta a la presencia de un antígeno extraño y tienen la propiedad de combinarse específicamente con la sustancia que provocó su formación (antígeno).

6 M O N O M E R O ANTICUERPOS MgSc Ana Ruiz

7 CLASES DE ANTICUERPOS ANTICUERPOS MgSc Ana Ruiz

8 ALGUNAS CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES DE LOS ANTICUERPOS DE GRUPOS SANGUÍNEOS IgG IgM LONGITUD 250 Aº 1000Aº PM Aº ATRAVIEZA BARRERA SI NO PLACENTARIA TEMPERATURA 37ºC 22 24ºC DE REACCIÓN (ACS CALIENTES) (ACS FRÍOS) ACTIVA COMPLEMENTO SI (2 IgG) SI (VÍA CLÁSICA) DENOMINADOS INCOMPLETOS COMPLETOS

9 ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO POR IgG o IgM

10 Sistemas de Grupos Sanguíneos (IBST) Sistema Genes Estructura y loc. Cromosómica Posible Función ABO ABO Carbohidratos 9q Glicocálix MNS GPA,GPB Sialoglicoprot. 4q Glicocálix P P Carbohidratos 22q Desconocida Receptor de PB19 Rh RHD,RHCE PROTEINAS POLITÓPICAS 1p36 Transportador NH 4 + Canal de O 2 /CO 2 Lutheran Kell LU KEL Glicoproteínas Ig like 19q Enzima 7q Adhesina Receptor de Laminina Endopeptidasa Endotelina 3 Lewis Duffy Kidd Diego Yt Xg Scianna Dombrock Landsteiner-Wiener FUT3 FY SLC 14A1 SLC4AE1 ACHE XG,MIC2 ERMAP DQ LW Carbohidratos 19p Proteína G 1q Glicoproteína Politopica 18q Glicoproteína politópica 17q Enzima 7q Sialiglicoproteínas Xp Glicoproteínas Ig like Enzima Glicop. 12p Glicoproteínas Ig like 19p Descoconocida Receptor Quimokina Transportador de Úrea Transporte de aniones Canal de O 2 /CO 2 Citoe Acetilcolinesterasa Receptor Adhesina 1p ADP-ribosiltransfer. Adhesina-receptor, integrina

11 Sistemas de Grupos Sanguíneos (IBST) Sistema Genes Estructura y loc. Cromosómica Posible Función Cotton AQP1 Glicoproteína Politópica 7p Canal de Agua Chido/Rogers C4A,C4B Proteína 6p Complemento Comp. C4 del complemento H FUT1 Carbohidratos 19q Glicocálix Kx XK Proteína Politópica Xp Neurotransmisor Transportador Gerbich GYPC Sialoglicoproteínas 2q Anclaje al citoesq. Cromer DAF Regulador del C` 1q Inactivación del complemento Control del C 1q Receptor-inactivación C Knopps CR1 Indian CD44 Glicoproteína 11p Adhesina une hialuronatos Ok CD147 Glicoproteínas Ig like Adhesina/Receptor Raph CD151 Tetraspanina Complejos-Integr. JMH SEMA7A Semaforina Adhesina/Receptor I GCNT2 CHO Glicocálix Globósido B3GALT3 CHO Desconocida Gill AQP3 Glicoproteína Pol. Canal Agua/glicerol

12 .. SISTEMA SANGUÍNEO ABO.

13 SISTEMA SANGUÏNEO Rh

14 PRINCIPIOS GENERALES DE LA REACCIÓN ANTÍGENO - ANTICUERPO 1.- ESPECIFICIDAD 2.- REACCIONAN MOLÉCULAS ENTERAS 3.- UNIÓN FIRME, PERO REVERSIBLE 4.- FENÓMENO DE SUPERFICIE 5.- LOS AGS Y ACS SE COMBINAN EN PROPORCIONES VARIABLES 6.- TIEMPO DE REACCIÓN VARIABLE

15 CONDICIONES DE LA REACCIÓN ANTÍGENO - ANTICUERPO CONCENTRACIÓN: Suspensión al 2-5 % (Para evitar el fenómeno de Prozona) TEMPERATURA: 37ºC (18 37ºC) ó 4ºC (20 24ºC) PH: 6,5 7,5 INCUBACIÓN: min

16 CONDICIONES DE LA REACCIÓN ANTÍGENO - ANTICUERPO MEDIOS DE REACCIÓN: * SSF, * Albúmina Bovina, * Enzimas proteolíticas (Tripsina,papaína, Bromelina,Ficina) * Sol de Fuerza iónica baja (Sol NaCl 0,2% + glucosa 7% ó glicina 0,3M)

17 SISTEMA SANGUÍNEO ABO Descubierto por Landsteiner en 1900 Sistema clínicamente más importante La información genética se localiza en el cromosoma 9 y se heredan según leyes Mendelianas. Constituido por los antígenos A, B y H, localizados en la superficie externa del glob. Rojo y en otros tejidos (Se) derivados de una sustancia precursora P Lansteiner 1900 Ags. Asociados a Banda 3 y transportador de glucosa. Protegen a la membrana del daño mecánico y microbiano. Muy inmunogénico. Genes para A y B son dominantes

18 Vías bioquímicas de la síntesis de los antígenos A,B,H Gal( 1-4) GlcNac Cadena Tipo II. O Gal( 1-3) GlcNac Cadena Tipo I B Transferasa Gal( 1-3 o 4) GlcNac + Fucosa H A Transferasa Gal( 1-3) Gal( 1-3 o 4)GlcNac + Fucosa B GalNac( 1-3) Gal( 1-3 o 4)GlcNac + Fucosa A

19 SISTEMA SANGUÍNEO ABO Fenotipo Genotipo Antígenos Anticuerpos O OO H Anti A Anti B A AO/AA A Anti B B BO/BB B Anti A AB AB A+B Ninguno

20 TIPOS DE REACCIÓN AGLUTINACIÓN ABSORCIÓN RADIOINMUNOENSAYO HEMÓLISIS PRECIPITACIÓN FLUORESCENCIA INHIBICIÓN FIJACIÓN DE COPLEMENTO ENZIMA INMUNOENSAYO

21 PRUEBAS EN REVERSA A B AB A B ANTIGENOS DEL GR ANTICUERPO ANTICUERPO COMERCIAL GR CONOCIDO MEZCLAR CADA UNO CENTRIFUGAR a rpm x 2 MEZCLAR Y OBSERVAR EN LÁMPARA DE WIENER

22 INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA EN REVERSA A B AB ANTÍGENO A' B' ANTICUERPO A - + B B + - A AB O + + A,B

23 INTERPRETACIÓN ABO

24 ALTERACIÓN DE LOS HEMATÍES.- Fenómeno de Rouleaux (mieloma,drogas medicamentosas, aumento fibrinógeno, proteínas anormales).- Poliaglutinación (defecto genético o ags ocultos).- Panaglutinación (aglutinación bacteriólogica).- Doble población de hematíes DISCREPANCIAS MgScAna Ruiz

25 ALTERACIÓN DE LOS HEMATÍES.- Antígenos A y B débiles.- Por causa Adquiridas: Leucemias Carcinoma de colón.- Por infección de gérmenes gram negativos en personas grupo A: B adquirido.- Sensibilización de eritrocitos DISCREPANCIAS MgScAna Ruiz

26 ALTERACIÓN EN EL SUERO.- Hipogammaglobulinemia.- Ausencia o descenso de Anti A y Anti B ( Inmunodeficiencia, recién nacidos ).- Anticuerpos irregulares.- Autoanticuerpos contra otros antígenos ( Anti Le, M, I) DISCREPANCIAS MgScAna Ruiz

27 SISTEMA SANGUÍNEO Rh Segundo sistema de grupo sanguíneo más importante luego del ABO en medicina transfusional. Exclusivo del glób. Rojo. Codificado por 2 genes RHD (Ag. Dd) y RHCE (Ag. Cc y Ee) Se heredan como haplotipos, siendo el D detectado de rutina por ser muy inmunogénico. Término Rh + indica presencia de D (85 % en caucásicos) y Rh ausencia D (15 % caucásicos) Generar Reacción Hemolítica Postransfusional (RHP).

28 SISTEMA SANGUÍNEO Rh Término Rh + indica presencia de D (85 % en caucásicos) y Rh ausencia D (15 % caucásicos) No tiene Anticuerpos naturales y los inmunes son responsables de RHP y Anemia Hemolítica del recién nacido (AHRN). Anti E y anti c pueden ser naturales (IgM)y provocar AHRN Existe una variante D débil (antes Du) de alta frecuencia en Negros (3-4 %) y un D parcial que son Rh +. Individuos Rh nulo presentan glóbulos rojos frágiles (estomatocito) con alteración de la integridad de la membrana celular. Tienen función de transportadores de Amonio y canal de intercambio O2/CO2.

29 SISTEMA RH GR 5% LAVADOS MEZCLAR ` Tº AMB X 2 ANTISUERO RH CENTRIFUGAR a rpm x 2 MEZCLAR Y OBSERVAR EN LÁMPARA DE WIENER NEGATIVO INCUBAR 37 C x 30 LAVAR 4 VECES SUERO DE COOMBS CENTRIFUGAR A x 2 MEZCLAR Y OBSERVAR EN LÁMPARA DE WIENER

30 COOMBS DIRECTO GR + ACS HUM ACS DE CONEJO ANTI-HUMANOS AGLUTINACIÓN

31 COOMBS INDIRECTO ACS HUM GR GRUPO O COMPLEJO Ag-Ac ACS DE CONEJO ANTI-HUMANOS AGLUTINACIÓN

32 PRUEBA DE COOMBS CAUSAS DE ERROR FALSOS NEGATIVOS 1.- Lavado incorrecto 2.- Contaminación de células y reactivos 3.- Lavado no continúo 4.- Suspensión celular inadecuada 5.- Células o suero envejecido 6.- Poca centrifugación 7.- Tiempo de incubación inadecuado 8.- Reactivo de COOMBS mal preparado.

33 PRUEBA DE COOMBS CAUSAS DE ERROR FALSOS POSITIVOS 1.- Exceso de centrifugación 2.- Contaminación bacteriana de muestras o reactivos 3.- Contaminación de SSF con silice coloidal 4.- Reactivos de COOMBS mal preparados 5.- Material de vidrio mal lavado

34 USO DE LA PRUEBA DE COOMBS COOMBS DIRECTO 1.- Diagnóstico de la Eritroblastosis Fetal 2.- Diagnóstico de la AHA 3.- Investigación de reacciones Transfusionales 4.- Diagnóstico de la AH por sensibilización de de los GR inducidos por drogas (Ej: Penicilina, Cefalotina, Alfa metil Dopa)

35 USO DE LA PRUEBA DE COOMBS COOMBS INDIRECTO 1.- Prueba de Compatibilidad 2.- Detección e Identificación de Acs Atípicos 3.- Detección de Antígenos como: Du, Duffy, Kidd 4.- Estudios de Investigación tales como: Acs antileucocitarios y antiplaquetarios

36 Protegen a la membrana del daño mecánico y microbiano. En transfusión. Predecir descendencia Descartar paternidad Tienen función de transportadores de Amonio y canal de intercambio O2/CO2.

37 FENÓMENO LE RUPTURA DE MEMBRANA CELULAR ( PERLAS) + FACTOR LE (IgG ANTI ADN) NÚCLEO ATRACCIÓN + CUERPO HIALINO NEUTRÓFILOS MONOCITOS CUERPO HIALINO FAGOCITOSIS ROSETA CÉLULA LE

38 Gracias