TOMA Y ENVÍO DE LA MUESTRA A SER ANALIZADA EN EL ÁREA DE HEMATOLOGÍA

Transcripción

1 PROTOCOLO 1 PARA EL MÉDICO DE CONSULTORIO TOMA Y ENVÍO DE LA MUESTRA A SER ANALIZADA EN EL ÁREA DE HEMATOLOGÍA Las muestras destinadas al área de hematología, podrán ser básicamente de 2 tipos: 1. Sangre completa (citratada, con EDTA o con fluoruro de sodio) 2. Sangre coagulada Pudiendo ser necesario, si el caso y el análisis lo ameritan, el envío de: 3. Frotis de sangre periférica 4. PAAF de ganglio linfático 5. Punción de médula ósea 1. Sangre completa Muestra destinada a preservar el plasma y elementos figurados en óptimas condiciones para su análisis. Se denomina sangre completa a la muestra de sangre venosa obtenida de un paciente y que se le agrega cualquier tipo de anticoagulante, de tal manera que se mantengan las características morfológicas de los elementos figurados y no haya transformación del fibrinógeno a fibrina. La muestra puede ser tomada de la vena a elección, de acuerdo a las habilidades del médico. Debiéndose enviar siempre a BioPet la cantidad mínima de 1,5 cc (tubo pediátrico), siendo 3 cc, la cantidad óptima. 1

2 Se recomienda que si la cantidad de sangre extraída es inferior a 2 cc, utilizar siempre los tubos pediátricos para que no haya exceso de anticoagulante en la muestra. Con la sangre completa BioPet procede a realizar los siguientes análisis: - Tubo tapa lila (con EDTA): hemograma, RAE, morfología de sangre periférica, pudiendo sí ser realizadas algunas pruebas bioquímicas con plasma, dependiendo del método analítico específico; pero en cuando a precisión y exactitud, siempre en estos casos se prefiere utilizar suero sanguíneo. - Tubo tapa celeste (citratado): Tiempo de protrombina (TP), Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPa), dosaje de fibrinógeno. - Tubo tapa gris (fluoruro de sodio + EDTA): glicemia Correcta toma de la muestra: 1. Elegir el sitio de venopunción. De acuerdo al tamaño del animal y condiciones de sujeción, para asegurar la continuidad del fluido. 2. Utilizar alcohol para desinfección del área y provocar mayor visibilidad de la vena elegida. De no revelarse, se pueden dar golpecitos suaves y secos con el dedo índice (o con el índice y el medio si el animal es muy grande) sobre el área donde anatómicamente se debería encontrar la vena. 3. Colocar el torniquete. Considerando un tiempo óptimo de presión de 15 segundos, y no debe ser mantenido por más de 30 segundos, debido a que la muestra ya no será representativa del paciente sino de la hemoconcentración causada en el sitio. Si se interrumpe la continuidad en la salida de sangre se recomienda utilizar otra jeringa y no seguir intentando la extracción en la misma jeringa que ya tenga cierto contenido sanguíneo, ya que en este contenido ya habrá iniciado la hemostasia. 4. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba y proceder a la extracción. 5. Destapar el tubo tapa lila, celeste o gris, dependiendo del estudio a solicitar (proporcionados por BioPet) y verter por las paredes y lentamente el contenido de la jeringa, previa separación de la aguja. 2

3 Para impedir la hemólisis, nunca se debe llenar el tubo con la aguja aún acoplada a la jeringa, ni expulsar el contenido bruscamente. Este paso debe ser lo más rápido posible, ya que apenas la sangre toca la jeringa se inicia la hemostasia. 6. Homogenizar el tubo de tal manera que se asegure la debida mezcla de la sangre con el anticoagulante. Los movimientos deben ser suaves y aleatorios, combinando la inclinación con la rotación. Si no se asegura este paso, la muestra queda expuesta a la formación de coágulos visibles, o microcoágulos, no siendo apta para ingresar a la fase analítica. 7. Rotular el tubo con el nombre del paciente y la inicial del apellido del médico o su código si ya lo tuviese. 8. Preservar en refrigeración (no congelación), hasta la llegada del vehículo de transporte. Se recomienda que la muestra ya en el tubo tenga el menor movimiento posible y sólo podrá mantenerse fuera de refrigeración si el transporte la retirase dentro de las 2 horas posteriores a la extracción y especificando siempre en la orden médica (en el espacio destinado a observaciones) que fue mantenida al ambiente. El mismo procedimiento planteado se debe seguir si se pretende el análisis de ciertos electrolitos. Ante cualquier procedimiento de sueroterapia, siempre deberá realizarse primero la extracción sanguínea para prevenir resultados erróneos. Se recomienda siempre valorar físicamente la muestra a ser entregada a BioPet : presencia o no de hemólisis, coágulos, ictericia o plasma lipémico. 2. Sangre coagulada Muestra destinada a preservar el suero sanguíneo. 3

4 Se denomina sangre coagulada a la muestra de sangre venosa obtenida de un paciente y que es tratada de tal manera que se fomente la formación del coágulo de fibrina y al ser enviada a BioPet se procede a la separación del suero para su análisis. Correcta toma de la muestra: 1. Elegir el sitio de venopunción. De acuerdo al tamaño del animal y condiciones de sujeción, para asegurar la continuidad del fluido. 2. Utilizar alcohol para desinfección del área y provocar mayor visibilidad de la vena elegida. De no revelarse, se pueden dar golpecitos suaves y secos con el dedo índice (o con el índice y el medio si el animal es muy grande) sobre el área donde anatómicamente se debería encontrar la vena. 3. Colocar el torniquete y proceder a la extracción, obteniendo como cantidad óptima 5 cc. 4. Destapar el tubo tapa roja, proporcionado por BioPet teniendo en cuenta que este siempre será de vidrio para asegurar la adecuada formación del coágulo. (de un buen coágulo depende la obtención de un suero sanguíneo óptimo para el análisis) 5. Previa separación de la aguja, verter el contenido de la jeringa por las paredes del tubo, previniendo cualquier movimiento brusco. 6. Rotular el tubo con el nombre del paciente y la inicial del apellido del médico o su código si ya lo tuviese. 7. Dejar reposar al ambiente el tubo de manera vertical durante 30 minutos o 1 hora aproximadamente, tiempo durante el cual se dará el proceso de hemostasia. Este lapso de tiempo puede variar de acuerdo a la bioquímica sanguínea del paciente. Se recomienda valorar visualmente la formación del coágulo antes del siguiente paso. 8. Refrigerar hasta la llegada del vehículo de BioPet. Si se requiere enviar a BioPet las dos muestras de un mismo paciente, se recomienda realizar una sola venopunción por bienestar del animal, siempre teniendo a mano los dos o más tubos a ser llenados. Vertiendo primero la sangre en el de tapa lila y luego en el de tapa roja, inhibiendo así al máximo la hemostasia en el tubo con anticoagulante. 4

5 Ante cualquier procedimiento de sueroterapia, siempre deberá realizarse primero la extracción sanguínea para prevenir resultados erróneos. Se recomienda siempre valorar físicamente la muestra a ser entregada a BioPet: presencia o no de hemólisis, la correcta formación del coágulo, suero lipémico o ictérico. 3. Frotis de sangre periférica Muestra destinada a la valoración morfológica de elementos figurados. El frotis de sangre periférica puede ser realizado a partir de una punción con lanceta de cualquier capilar superficial o de la muestra obtenida por venopunción, pero con el cuidado de que no tenga contacto alguno con anticoagulante, sino directamente de la jeringa (sin aguja). Este frotis es recomendado cuando no se requiere de la realización de todo el hemograma sino únicamente de la valoración cualitativa de la morfología y sus alteraciones celulares en sangre periférica. Como ejemplo de las alteraciones más comunes: - La presencia de Mycoplasma haemofelis o M. haemocanis, los cuales son desprendidos de la membrana del eritrocito cuando entra en contacto con las sales del EDTA. - Determinación de patrones de toxicidad en neutrófilos. - Corpúsculos de Heinz, Howell Jolly. Cuerpos de inclusión por Moquillo. - Hemoparásitos como Babesia spp. - Cuerpos morulares como Ehrlichia spp. - Entre otros. Teniendo siempre presente que todas estas alteraciones serán valoradas en el frotis que realiza BioPet en el análisis del hemograma. 5

6 Siendo sí importante la elaboración del frotis a partir de sangre fresca (sin anticoagulante) para la determinación de Mycoplasmas eritrocitarios. Correcta elaboración del frotis hematológico: 1. Tener previamente ya dispuestos sobre la mesada dos portaobjetos limpios y desengrasados, de preferencia no usados con anterioridad. Y un portaobjetos extensor. 2. Colocar la cantidad inferior a una gota en un extremo del portaobjetos, para asegurar que la extensión sea fina. 3. Inmediatamente, el extensor se coloca delante de la gota, y se lo retrocede de tal manera que el líquido se deslice en todo el borde del extensor. 4. Con un movimiento firme y continuado se desliza el extensor hacia adelante provocando un barrido del material. 5. Dejar secar al ambiente de manera horizontal. 6. Proceder de igual manera con el segundo portaobjetos. 7. Colocar el nombre del paciente y las iniciales del médico o su código en el extremo libre del porta. 8. Colocar en los extremos de uno de los vidrios, en la cara donde se realizó el barrido dos rollitos de cinta scoth y sobreponer el segundo vidrio, siempre cara con cara. 9. Envolverlos en papel bond, rotulando igualmente en la parte posterior. Se deben enviar mínimo dos vidrios a BioPet para su análisis. Siempre valorar físicamente su frotis, confirmando que sea óptimo para la tinción y lectura: debe ser una extensión fina y notarse las alas de gallina que aseguran la formación de la monocapa. 4. PAAF de ganglio linfático Muestra destinada a la valoración de elementos ganglionares para ser analizados en conjunto con el hemograma y / o medulograma. 6

7 La Punción y Aspiración con Aguja Fina es una técnica de muestreo que permite la obtención de material necesario para realizar un análisis citológico de cualquier órgano. En este caso la valoración citológica de un ganglio linfático será necesaria cuando exista alguna sospecha clínica o mediante algún análisis previo de laboratorio de patologías sanguíneas. Procediéndose de igual manera para el muestreo en el caso de linfoadenopatías, neoplasias linfáticas, sospechas de metástasis. El ganglio a punzar depende únicamente de la elección del médico y las sospechas clínicas que él desee despejar. BioPet recomienda que para la valoración hematológica sea punzado un ganglio poplíteo. Correcta toma de la muestra: 1. Una vez escogido el ganglio a punzar, desinfectar el área con alcohol de uso médico. 2. Con una jeringa de 5 cc, aguja 18 o 20G, proceder a realizar las debidas aspiraciones: se recomienda siempre introducir la aguja en el centro de la masa ganglionar y realizar las aspiraciones en 3 tiempos y en 3 direcciones, sin sacar la aguja del ganglio obviamente. 3. Desacoplar la aguja y llenar de aire la jeringa. 4. Volver a acoplar la aguja. 5. Descargar el contenido en portaobjetos debidamente desengrasados y limpios, de preferencia nuevos. 6. Realizar los frotis por confrontación suave para prevenir la destrucción sobre todo de los linfocitos. 7. Dejarlos secar al ambiente y en posición horizontal. 8. Rotular con el nombre del paciente y del médico. 9. Una vez secos proceder a empacarlos colocándoles el rollito de cinta scotch en las esquinas y acomodándolos siempre cara con cara. 10. Envolverlos en papel bond y rotular el exterior del empaque. Siempre se debe indicar el ganglio que fue punzado y las características físicas de este, por ejemplo, si estaba inflamado, con alguna masa o neoformación, turgente o flácido, etc. 7

8 No escatimar en el número de frotis que se envían a BioPet, siendo la cantidad mínima 4 vidrios. Y, se recuerda que todo estudio citológico es el correspondiente a la muestra tomada de un solo sitio. Escogiéndose en BioPet el vidrio mejor teñido, o varios de ser necesario. BioPet no se responsabiliza por vidrios preparados a partir de varias punciones en diferentes sitios de la economía del animal, ya sea por confusiones involuntarias en el momento de rotularlas en el consultorio o por actos voluntarios. El personal que realizará la PAAF deberá ser debidamente capacitado y bajo responsabilidad del Médico del Consultorio. De ser necesario BioPet presta el servicio de toma de muestras citológicas, siempre bajo solicitud previa del Médico responsable, e indicaciones de éste. Manteniendo el contacto único con el médico tratante de la mascota, más nunca con el propietario. Este servicio tendrá un valor agregado al estudio citológico, pudiendo ser aprovechada la oportunidad para capacitar al personal indicado para que en una futura oportunidad lo puedan realizar solos. 5. Punción de médula ósea Muestra destinada para valorar citología de médula ósea. La muestra puede ser remitida a BioPet de dos maneras: 5.1 Frotis ya elaborado y secado al ambiente. Se recomienda cuando el médico tiene ya experiencia previa en su realización, ya que el vidrio debe llegar a BioPet con un contenido excelente para ser procesado. Para esto, se debe realizar la punción de médula ósea, siguiendo todos los procedimientos técnicos adecuados. Una vez elaborados los vidrios, únicamente por barrido suave, dejarlos secar al ambiente en posición horizontal. No escatimar en el 8

9 número de vidrios a elaborar. Se recomienda que por lo menos sean 6 preparados. Rotular individualmente y empaquetar con la cinta scotch entre porta y porta y cara con cara, envolver con papel bond y rotular por fuera del paquete. Si se desea una interpretación completa, es decir medulograma, y no solamente la valoración citológica, BioPet debe contar con el hemograma practicado el mismo día que la punción de médula ósea y datos clínicos del paciente. Las muestras deben ser remitidas a BioPet a la brevedad posible, de preferencia dentro de las 3 horas siguientes a la toma de la muestra para evitar la maduración de los elementos. Sólo debe ser realizada si el operario está bien capacitado en la práctica, siendo responsabilidad única del Médico del Consultorio la calidad de la muestra. 5.2 Muestra completa en tubo tapa lila. Se recomienda cuando el operario no es muy experto en la realización de los frotis medulares, y se haya obtenido un volumen superior a los 2cc de muestra. Para esto se recomienda realizar una punción esternal. Una vez extraído el contenido, verterlo lentamente y por las paredes del tubo, previo desacople de la aguja. Homogenizar suavemente para asegurar la mezcla del EDTA con la muestra. Rotular y mantener en refrigeración hasta la llegada del vehículo de BioPet. Se recuerda que en el mismo día sebe ser tomada la muestra para el hemograma correspondiente. Y que estas deben ser remitidas a BioPet a la brevedad posible, de preferencia dentro de las 3 horas siguientes a la toma de la muestra para evitar la maduración de los elementos. 9

10 La muestra que llega a BioPet en forma de frotis, es más adecuada, ya que se mantiene mejor la morfología celular. BioPet ofrece el servicio de toma de muestra por punción medular, previa solicitud del Médico del Consultorio, y con el valor agregado al costo real del análisis de laboratorio y anticipadamente establecido. 10