UNIVERSIDAD AUTONOMA DE TAMAULIPAS

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1 R-RS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE TAMAULIPAS UNIDAD ACADÉMICA MULTIDISCIPLINARIA REYNOSA-AZTLAN NOMBRE DEL PROGRAMA QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO NOMBRE DE LA ASIGNATURA LABORATORIO DE MICOLOGÍA BÁSICA PROGRAMA DE LA ASIGNATURA LUGAR Y FECHA CD. REYNOSA, TAM., ENERO 2012 Modelo 2005 Laboratorio de Micología Básica U.A.M. Reynosa-Aztlan Universidad Autónoma de Tamaulipas 1

2 DATOS REFERENCIALES NUCLEO DE PERIODO CLAVE CREDITOS CARGA H O R A S FORMACION HORARIA CONDUCIDAS POR PROFESOR DE TRABAJO INDEPENDIENTES DEL ALUMNO DISCIPLINARIA VI CS ASIGNATURAS ANTECEDENTE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL CONSECUENTE NINGUNA DESCRIPCION GENERAL DE LA ASIGNATURA En el Laboratorio de Micología Básica, se identifican los hongos filamentosos basándose en las características macroscópicas y microscópicas de las colonias. La observación de la morfología del micelio y sobre todo el tipo o tipos de esporas asexuales (coccidios) presentes en el cultivo permite su correcta identificación, para hacer la identificación de los hongos filamentosos se realiza a partir de especímenes clínicos de importancia médica, como muestras cutáneas (piel, pelo, uñas), secreción de heridas, orina, exudado de mucosas, así como la preparación de reactivos y medios de cultivo empleados en el laboratorio. La asignatura corresponde la formación disciplinaria, donde el alumno debe tener conocimientos sobre biología, microbiología, habilidad y manjeo de pruebas en el laboratorio para comprender los conceptos básicos de la micología. Comprenderá generalidades de preparación de reactivos y medio de cultivos empleados en micología, estudio morfológico de hongos filamentosos y levaduras, pruebas fisiológicas de identificación de levaduras, resolución de casos clínicos, micosis superficial, cutánea, subcutánea, sistémica y oportunista. INTENCION EDUCATIVA Un apoyo básico en el reconocimiento la importancia de los hongos y los procesos patológicos que producen lo cual origina alteraciones en la salud debido a los hongos en el Laboratorio de Análisis Clínicos. La intención de esta asignatura es el preparar al personal profesional en el reconocimiento e identificación de la presencia de estos seres vivos en los distintos materiales biológicos que le son proporcionados para la evaluación diagnostica. OBJETIVO(S) GENERAL (ES) - Conocer la metodología en la obtención y proceso de muestras. - Dominar la identificación en exámenes directos a las estructuras micóticas y actinomicéticas. - Conocer e identificar las características de cultivo y microcultivo de los hongos y actinomicetos. 2

3 MEDIDAS DE SEGURIDAD La peligrosidad de un agente está directamente relacionada con el tipo de microorganismo y la manipulación a la que es sometido. Por ello es básico: 1. Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio. 2. Conocer la metodología de trabajo del laboratorio. 3. Conocer el equipamiento del laboratorio. 4. Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia. 5. Conocer las leyes relacionadas con la seguridad biológica. 6. Respetar y hacer cumplir todo lo anterior. MEDIDAS GENERALES Las siguientes medidas son de obligado cumplimiento en cualquier área del laboratorio: El acceso al laboratorio estará limitado al personal autorizado. No deben entrar en el mismo familiares ni amigos. El personal del laboratorio debe implicarse en el cumplimiento de las normas de seguridad. Todas las áreas estarán debidamente marcadas con la señal de riesgo biológico y su nivel de contención. Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas para mantener la adecuada contención biológica. Todas las superficies de trabajo se limpiarán y desinfectarán diariamente y siempre que se produzca un derrame. Los residuos y muestras peligrosas que van a ser incinerados fuera del laboratorio deben ser transportados en contenedores cerrados, resistentes e impermeables siguiendo las normas específicas para cada tipo de residuo. El laboratorio debe permanecer limpio y ordenado y no es aconsejable utilizar los pasillos como almacén. Siempre debe quedar un espacio libre no inferior a 120 cm para poder evacuar el laboratorio en caso de emergencia. El transporte de las muestras dentro o entre laboratorios se realizará de tal manera que, en caso de caída, no se produzcan salpicaduras. Lo recomendable es hacerlo en cajas herméticas o neveras transportables. Estas cajas o neveras deberán ser rígidas y resistentes a los golpes, contar con materiales absorbentes en su interior y de fácil desinfección. Se etiquetarán o identificarán de forma oportuna y no podrán ser utilizadas para otros fines. Bajo ningún concepto se deben transportar las muestras a mano. La ropa protectora, fácilmente ajustable y confortable, así como guantes, gafas, etc. debe estar disponible en todo momento. La ropa protectora de las áreas con nivel de contención 3 (batas) nunca debe ser usada fuera del área de trabajo y si se quita debe de ser desechada automáticamente en una bolsa de material contaminado. Jamás debe volver a ser usada. Todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes cuando se manipulen muestras o cultivos que contengan posibles patógenos. Los guantes siempre serán desechados antes de salir del área de trabajo. Jamás se saldrá de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se cogerá el teléfono, se tocarán las hojas de examen, maniguetas de las puertas, etc. Tras quitarse los guantes, se realizará un lavado de manos. Se usarán gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o aerosoles. Se pondrá extremo cuidado en minimizar el riesgo de autoinoculación y de generación de aerosoles. Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al Supervisor y al Jefe del Laboratorio y hacerse constar por escrito. 3

4 Nadie podrá trabajar en el área de tuberculosis con una prueba de Tuberculina negativa. Está rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realizará pipeteo automático con material adecuado y cada trabajador será instruido para manejarlo debidamente. En la zona de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el papel contaminado es de muy difícil esterilización. No deberán usarse lentes de contacto. El personal con el cabello largo debe llevarlo recogido. Comer, beber, fumar y aplicarse cosméticos esta formalmente prohibido en el área de trabajo del laboratorio, así como el almacenamiento de comida o bebida. El personal debe lavarse las manos frecuentemente durante las actividades rutinarias, tras acabar la jornada laboral y siempre antes de abandonar el laboratorio (almorzar). Se usará un jabón antiséptico y el secado se realizará con papel. Las heridas y cortes en las manos, si se han producido en el Laboratorio, serán comunicados al responsable de la Sección correspondiente, así como al Supervisor de Bioseguridad que lo registrará haciendo constar todas las circunstancias. Las heridas y cortes deben ser convenientemente vendados y después es imprescindible ponerse guantes. 4

5 SALUD OCUPACIONAL - Es obligación del estudiante de Químico Farmacéutico Biólogo el seguimiento estricto de las Normas de Bioseguridad a fin de garantizar un trabajo seguro. Entre las causas más frecuentes de infecciones en el personal de laboratorio se encuentran: accidentes de trabajo, negligencia y de no observar los reglamentos al manipular agentes infecciosos, no disponer de los medios adecuados de protección y personal inadecuadamente entrenado. Por tanto, la seguridad del estudiante depende sobre todo de su propia conducta, lo cual está condicionado a un acto voluntario por educación y motivación. Estos conceptos adquieren mas significado, cuando tomamos en cuenta que la mayoría de las labores en el laboratorio clínico implican un trabajo en grupo y las fallas de una persona pueden afectar a sus propios compañeros y a los bienes de la institución. - Todos los laboratoristas son responsables de cumplir con las Normas de Bioseguridad, uso de equipo protector y notificar a su jefe inmediato cualquiera circunstancia que pudiera provocar un accidente. - Las enfermedades infecciosas tienen mucha más importancia para el personal de los servicios de sanidad que para cualquier otra categoría profesional. En los hospitales y laboratorios la "bioseguridad" resulta especialmente importante, debido al riesgo evidente de que los enfermos transmitan infecciones al personal y viceversa como: Tuberculosis, Hepatitis, Rubéola, Síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), Citomegalovirus (CMV) y otras enfermedades transmisibles - Riesgos químicos en los laboratorios se usan una amplia variedad de productos químicos como, por ejemplo, antisépticos, medicamentos y reactivos citostáticos o de laboratorio. Algunos de estos productos químicos son altamente reactivos biológicamente. Todos estos agentes químicos pueden producir una gran diversidad de efectos irritantes alérgicos, tóxicos e incluso cancerígenos. - Riesgos Físicos que corre el personal sanitario figuran las radiaciones ionizantes, los ruidos, la temperatura y la electricidad. Además, debe prestarse atención a los aspectos ergonómicos del trabajo, sobre todo en los casos de trabajo manual. - Parte del programa de Salud Ocupacional es el refuerzo que deben recibir los estudiantes para evitar el desarrollo de algunas enfermedades que pueden prevenirse por inmunizaciones. Algunas de éstas son: 1. Vacuna contra la Hepatitis B: Es la más importante inmunización para los empleados del laboratorio clínico y todo el personal de salud. Esta vacuna debe ser considerada de obligatoriedad 2. Vacuna BCG : Es muy recomendable especialmente para el personal que está en contacto con muestras que puedan contener Mycobacterium sp. 3. Vacuna contra Pneumococo: Recomendada para personal inmunosuprimido, diabéticos y con anemia falciforme. 4. Vacuna contra Tifoidea: No es recomendada de rutina, pero puede ofrecerse a personal inmunosuprimido y personal que maneja muestras de heces. 5. Examen de laboratorio clínicos periódicos 5

6 DISPOSICIÓN DE DESECHOS QUIMICOS, FISICOS Y BIOLÓGICOS 1. Los desechos o residuos químicos y biológicos (sólidos y líquidos) generados durante la realización de prácticas del laboratorio, deberán colectarse en los recipientes indicados para cada tipo de sustancia, de acuerdo con la clasificación que ha establecido las normas de Residuos de Productos Biológicos Infecciosos (RPBI). Por lo cual queda estrictamente prohibido arrojarlas o depositarlas en otros medios no autorizados. 2. Queda estrictamente prohibido que sean vertidos en el drenaje sustancias o residuos químicos, cultivos de microorganismos o muestras biológicas. No debe ser depositado directamente en la basura y/o el drenaje cualquier desecho que cause algún daño al ambiente. 3. Antes de la disposición final de los desechos o residuos químicos y biológicos, se deberá proceder a su recuperación, destrucción, inactivación o minimización, con el fin de reducir la cantidad inicial y el riesgo potencial. 4. Los cultivos microbiológicos (instrumental contaminado, placas de Petri, extractos líquidos, etcétera), sangre y hemoderivados en forma líquida, residuos de animales infecciosos, residuos anatómicos, residuos cortantes y punzantes (hojas de bisturí, agujas) y material de vidrio contaminado o roto (pipetas, portaobjetos, cubreobjetos, etcétera) deberán manejarse como material biopeligroso; por lo que debe evitarse el contacto directo con estos materiales y para su manipulación es necesario utilizar la ropa de protección adecuada. 5. El material contaminado como pipetas, jeringas, agujas, cánulas, tubos para muestra y otros instrumentos u objetos afilados, deberá colocarse en un recipiente metálico o de plástico rígido; posteriormente, antes de ser reutilizado o desechado, se deberá desinfectar o esterilizar mediante los métodos químicos o físicos adecuados. NOTA: Estos lineamientos son aplicables de manera total o parcial a los laboratorios de la unidad; sin embargo, cada laboratorio requerirá de lineamientos más específicos dependiendo de las características y las necesidades particulares de funcionamiento. Cada espacio deberá elaborar y establecer sus propios lineamientos sin entrar en contradicción con los lineamientos generales anteriormente expuesto. 6

7 UNIDADES CONTENIDOS TEMATICOS OBJETIVOS PARTICULARES Practica I Practica II Preparación en Fresco con Solución Salina Montaje húmedo con azul de algodón de lactofenol Observar numerosas colonias de diferentes especies de levaduras, anotar los resultados y compararlos con los descritos en la bibliografía de levaduras de importancia clínica. Poner de manifiesto las principales características microscópicas de las levaduras, tales como: aspecto y disposición de las blastosporas, presencia y tipo y características del micelio, presencia de artosporas, presencia de clamidosporas. Practica III Practica IV Practica V Preparación en fresco con hidróxido de potasio Tincion de Blanco de Calcofluor Tincion de Ascas y Ascosporas Aprender a determinar las características macro y microscópicas sobresalientes de algunos grupos Eumycetos (mohos y levaduras) y comprobar su alta distribución en el ambiente Realizar las diferentes técnicas de la toma de productos para el diagnóstico micológico. Observar el hongo en las muestras biológicas de donde se pueden aislar los agentes etiológicos de las micosis humanas. Aislar el hongo de las muestras biológicas en los medios adecuados. Practica VI Aislamiento e identificación de hongos contaminantes Conocer los fundamentos de las técnicas de microcultivo y de cinta adhesiva, para la observación microscópica de hongos filamentosos. Practica VII Aislamiento e identificación de dermatofitos Reconocer género y especie de los dermatofitos más frecuentes en México. Reconocer la morfología macroscópica y microscópica de los principales agentes etiológicos de estas micosis. Observar el dimorfismo fúngico en preparaciones fijas. 7

8 UNIDADES Practica I Practica II Practica III ESTRATEGIAS DE APRENDIZAJE EN EL TRABAJO CONDUCIDO POR EL PROFESOR Se realizan en los laboratorios del Microbiología y con ellas se pretende familiarizar al alumno con el material, instrumentos etc, así como desarrollar el programa de prácticas establecido y afianzar los conocimientos adquiridos en las clases de teoría. Cada sesión de prácticas constará de : - Presentación por parte de la profesora de los conceptos básicos necesarios para la compresión de la actividad a realizar y del método a seguir, con los datos concretos y particulares de cada sesión. ESTRATEGIAS DE APRENDIZAJE EN EL TRABAJO INDEPENDIENTE DEL ALUMNO Para cada sesión de prácticas el alumno debe: Investigación documental Diagrama de flujo de la práctica Estudiar previamente el experimento a efectuar, con el propósito de comprender su objetivo y los principios en que se funda; en algunos casos es necesario consultar libros de texto para aclarar ciertos conocimiento. Practica IV - Realización de la práctica por parte de los alumnos. - Discusión de los resultados: Consiste en cumplimentar el guión de prácticas, suministrada previamente al alumno. Con los datos experimentales obtenidos y su comentario. Observar con atención la demostración del experimento que efectúa el instructor del laboratorio. Registrar los datos experimentales inmediatamente después de efectuarlos. Practica V El alumno debe aprender a comunicar, con suficiente claridad y exactitud, el proceso y resultados de la práctica realizada. Exposición y debate: Practica VI Se dedicaran determinado número de horas, en función del desarrollo del programa, a la exposición de trabajos asignados a los alumnos, que podrán ser comentados en el aula. Tutorías especializadas: Practica VII En el transcurso de las mismas, se atiende a un grupo determinado de alumnos, a fin de tratar con ellos el desarrollo de sus estudios, ayudándoles a superar las dificultades del aprendizaje y recomendándole las lecturas, experiencias y trabajos que se consideren necesarios. 8

9 PERFIL DOCENTE. En el perfil del docente debe ser considerado el que cuente con una licenciatura en Químico Biológicas, demuestre algún estudio de posgrado (especialidad, maestría o doctorado) en el área de Micología, Microbiología o ciencias de la salud, y que ejerce su profesión en dicha área. SECUENCIA ESTRATEGIAS DE EVALUACION B I B L I O G R A F I A BASICA COMPLEMETARIA Todas las Unidades Examen Practico 30% Examen Teórico 30% Reportes 20% Asistencia 10% Participación 10% Manual de Microbiología 3ª. Edición Carlos Gamazo, Ignacio López-Goñi, Ramón Díaz Editorial MASSON Micología Medica Procedimientos para el diagnostico de laboratorio. 1ª edición. Rubén López y colaboradores. Editorial Trillas Micología Medica Básica Alexandro Bonifaz Editorial Méndez Cervantes Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. Geo F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse. Editorial Manual Moderno, 18a. Edición Microbiología Médica. Patrick R. Murria, Ken S. Rosenthal, George S. Kobayashi, Michael a. Pfaller. Editorial MMII Mosby, Inc Impreso en Elsevier. 4ª. Edición Microbiología de Zinsser. Joklik, Willett, Amos, Wilfert. Editorial médica Panamericana. 20ª. Edición. COMISION ELABORADORA ACADEMIA DE QUIMICA AVANZADA NOMBRE FACULTAD O UNIDAD DE ADSCRIPCION ACADEMIA DE MICROBIOLOGÍA DRA. Rosa Issel Acosta González MAC. Sanjuanita Ortiz Solís MAC. María del Carmen Rodríguez Salazar MAC. Esperanza Milagros García Oropesa MAC. María Cristina Hernández Jiménez UNIDAD ACADEMICA MULTIDISCIPLINARIA REYNOSA-AZTLÁN 9