II Curso Avanzado WHO Global Salmonella Surveillance (WHO-GSS) 1er Taller WHO-GSS / PulseNet. Buenos Aires, 27 al 31 de mayo de 2008

Documentos relacionados
II Curso Avanzado WHO Global Salmonella Surveillance (WHO-GSS) 1er Taller WHO-GSS / PulseNet. Buenos Aires, 27 al 31 de mayo de 2008

Estudio de los antibióticos

Estud u io o de d e los o ant n ibióticos o

Estudio de los antibióticos

Novedades 2007 CLSI. Servicio Antimicrobianos, INEI ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán"

Antibacterianos. Prof. Héctor Cisternas R.

TRABAJOS PRÁCTICOS Cronograma de las Actividades en el Laboratorio de Bacteriología

Antibióticos: Mecanismos de acción Gerardo Andrés Libreros. MSc

Diagnóstico Microbiológico de infección gastrointestinal por Campylobacter spp.

Categorización de antibióticos en veterinaria

Generalidades sobre antimicrobianos MECANISMOS DE ACCIÓN DE LOS ANTIBIÓTICOS. Condiciones que requieren los antibióticos

DATOS RESISTENCIA BACTERIANA ECUADOR

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Resumen Antimicrobianos

Selección de Antimicrobianos para los Estudios de Sensibilidad In Vitro.

mecanismos de acción de lo antimicrobianos. microorganismos frente a los antimicrobianos

CUÁN ÚTIL ES EL ANTIBIOGRAMA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA?

ESTUDIO DE LA UE EN RESISTENCIAS ANTIMICROBIANAS Decisión 2013/652/UE

CURSO TRIENAL DE INFECTOLOGÍA


Tipo de animales de granja. Nombre del medicamento

RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

del antibiograma (en enterobacterias).

Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana

Bayer continúa promoviendo el uso responsable de antibióticos. R. Vázquez 11.12

Capacidad Nacional Regulatoria y Normativa en Resistencia Antimicrobiana en México

Aspectos epidemiológicos de la Campilobacteriosis. Dr. Roberto del Aguila V OPS/OMS Chile

Mecanismos de Resistencia a los Antibióticos

SITUACIÓN DE LA RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS Y RIESGOS PARA LAS POBLACIONES HUMANAS

HOSPITAL REGIONAL DOCENTE MEDICO QUIRÚRGICO DANIEL ALCIDES CARRIÓN MAPA MICROBIOLÓGICO

DETERMINACION DE BLEE Muestra 2 / 2015 Bacteriología

Desescalamiento e interpretación razonada del antibiograma. Dra. Núria Borrell S. Microbiología Clínica HSD

MECANISMOS DE ACCIÓN Y RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS

GUÍA DE TRATAMIENTO ANTIMICROBIANO EMPÍRICO DE MICROORGANISMOS MULTIRRESISTENTES

PLAN NACIONAL FRENTE A LA RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS

Manual de Antibióticos en Pediatría. 2ª edición Editorial Médica Panamericana.

Programa Nacional de Monitorización de Resistencias Antimicrobianas en animales sanos. FIGAN, 18 marzo 2015

RESISTENCIA ANTIMICROBIANA DESAFÍOS DE HOY Y EL FUTURO

El reto de la producción porcina bajo la limitación del uso de antibióticos

Resistencia antibiótica en Hospital Son Dureta en Enrique Ruiz de Gopegui Bordes 29 de marzo de 2.007

MICROBIOLOGÍA. INFORME DE RESISTENCIA ANTIMICROBIANA EN ENTEROBACTERIAS 2013 Página 1 de 10

Nuevos ensayos sobre contaminación seminal

Cátedra de Microbiología, Virología y Parasitología Facultad de Ciencias Médicas UNR

3 Organización Pamericana de la Salud. Informe Regional de SIREVA II, 2009: Washington, DC

LISTA DE AGENTES ANTIMICROBIANOS IMPORTANTES PARA LA MEDICINA VETERINARIA

CLSI 2014 XIII Curso de Microbiología Clínica

PRINCIPIOS DE LA QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA. Dr. Adolfo Peña Velázquez

ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS

Bacteriemia por Campylobacter jejuni. Ana Lorenzo Amat R2 Pediatría HGUA Sección: Lactantes Tutora: Mª Carmen Vicent 5 de Febrero 2015

MECANISMOS GENERALES DE RESISTENCIA

MAPA DE SENSIBILIDAD BACTERIANA 2017 HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO LOZANO BLESA SECTOR III ZARAGOZA

NOVEDADES 2014 CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE (CLSI)

Protocolo Red Whonet Año 2019 Sistemas automatizados

Este artículo médico salió de la página web de: Médicos de El Salvador.

Alerta. Detección de enterobacterias con carbapenemasas de lactamasa IMP en Costa Rica. Centro Nacional de Referencia de Bacteriología

Uso racional de antimicrobianos Cómo hacerlo en la práctica? Lorenzo Fraile Profesor Agregado UdL

Guía de Terapia Empírica

UNIDAD IV Seminario no 2

Puntos de corte para definir sensibilidad a los antimicrobianos

Recomendaciones para la selección de antimicrobianos en el estudio de sensibilidad in vitro con sistemas automáticos y semiautomáticos

Mapas de Sensibilidad Antimicrobiana Área Sanitaria de Málaga, 2014

DETECCIÓN DE RESISTENCIA EN BACILOS GRAM NEGATIVOS

Guía de Terapia Empírica

Prevalencia de bacterias resistentes a los antibióticos. Dra. Angélica Beirana Palencia

EMERGENCIA DE AISLAMIENTOS CLÍNICOS DE HAEMOPHILUS SPP. CON SENSIBILIDAD REDUCIDA A FLUORQUINOLONAS

A Antibiograma Antibiótico Antimicrobiano B Bactericida Bacteriostático Beta lactamasas Prueba de beta-lactamasa Prueba de beta lactamasa positiva

PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD IN VITRO A LOS ANTIMICROBIANOS ANTIBIOGRAMA De Bauer & Kirby

MECANISMOS DE RESISTENCIA EN ESTAFILOCOCOS. QFB Ana María del R. Hernández DueñasQFB

CURSO DE MICROBIOLOGÍA BÁSICA

Clasificación de Agentes Antibacterianos según el sitio de acción

Discos de antibiograma Oxoid de Thermo Scientific. AST manual. simple y flexible

IX. Anexos. Anexo 1. Lista de Acrónimos

Agencia Española de Medicamentos y Productos Sanitarios (AEMPS) Calle Campezo, 1, Edificio 8 E Madrid

Manual de Procedimientos

Antibióticos bactericida bacteriostático

Informe de la sensibilidad antibiótica de los microorganismos más comunes en la comunidad.

Sensibilitat als antimicrobians dels bacteris aïllats durant. l any 2003 en el Laboratori de Microbiologia de l Hospital. de la Santa Creu i Sant Pau

Puesta al día en el estudio de susceptibilidad de Streptococcus pneumoniae

El manejo ATB Del paciente Alérgico y/o Embarazada

Antimicrobianos. Agentes físicos, asepsia y esterilidad

CIM. Concepto de Sensibilidad [ATB] CIM= Gold Standard. Concepto de Sensibilidad y Resistencia. Definición de sensibilidad WHO

Nuevos antibióticos para gérmenes resistentes

Pres encia de inhibidores en leche. G onzalo Fuentes G onzález Veterinario PULEVA FOOD, S.L.

CAPITULO 3 SENSIBILIDAD DE LAS CEPAS BACTERIANAS MÁS FRECUENTES, AISLADAS EN 2014 AUTORES: F. Acosta González; R.

Mapas de Sensibilidad Antimicrobiana Área Sanitaria de Málaga, 2013

Informe de la sensibilidad antibiótica de los microorganismos más comunes en la comunidad. Año 2006

APORTES DEL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA EN EL USO ADECUADO DE LOS ANTIBIÓTICOS

El dilema de la multirresistencia

Inhibido Inhi res bido res síntesis proteica síntesis Macrólidos

EVOLUCIÓN DE LA RESISTENCIA BACTERIANA A LOS ANTIMICROBIANOS (PERIODO )

MONITOREO DE LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA DE Campylobacter spp. EN CUATRO HOSPITALES DE LA CIUDAD DE LA PAZ BOLIVIA

Antibiótico (ATB) Antitoxinas Antisépticos Desinfectantes. son agentes quimioterápicos:

TEMA XXXI: TERAPÉUTICA ANTIMICROBIANA

SEMINARIO MICROBIOLOGÍA DRA. MONTSERRAT RUIZ GARCÍA. MICROBIOLOGÍA. HOSPITAL GENERAL UNIVERSITARIO DE ELCHE de febrero de 2013

Lección 42 Fármacos Antimicrobianos. Consideraciones generales

Históricamente, la clasificación mas común se ha basado sobre la estructura química y el mecanismo de acción propuesto, del modo siguiente:

BETALACTAMICOS. Dra Maria Angélica Hidalgo

resistencia a antimicrobianos: implicaciones en Europa sobre la salud pública y la veterinaria (I)

Sistema de vigilancia de resistencias

Mª Teresa Fernández Fernández Laboratorio de Salud Pública de Lugo

Transcripción:

II Curso Avanzado WHO Global Salmonella Surveillance (WHO-GSS) 1er Taller WHO-GSS / PulseNet Buenos Aires, 27 al 31 de mayo de 2008 Resistencia a los Antimicrobianos en Campylobacter spp. Bqca. María Celeste Lucero Servicio Antimicrobianos INEI - ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán

GENERO CAMPYLOBACTER Especies termófilas C. jejuni C. coli C. lari Otras especies Sp. termotolerantes C. upsaliensis C. hyointestinalis C. fetus Principal causa de gastroenteritis en el mundo entero C. helvéticus C. mucosalis C. curvus C. showae C. rectus C. sputorum C. gracilis Bacteroides urealyticus Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Zoonosis CAMPYLOBACTERIOSIS Principales reservorios: animales de granja, que se infectan en los primeros años a de vida y la mayoría a de ellos permanecen como portadores. Principales vías v de infección: n: ingestión n de carnes mal cocidas (principalmente aves de corral, pero también n cerdo, ganado bovino, etc.), leche no pasteurizada agua u otros alimentos contaminados con excretas de animales infectados contacto con mascotas. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CUADROS CLINICOS Enteritis Fiebre Dolor abdominal Vómitos Diarrea con o sin sangre y leucocitos fecales Generalmente autolimitada Complicaciones Locales: pancreatitis, colesistitis,, peritonitis Extraintestinales: bacteriemia, aborto, meningitis, endocarditis, osteomielitis, etc. Atritis Reactiva Sme.. De Guillain-Barr Barrè TRATAMIENTO REHIDRATACIÓN N ORAL Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CUÁNDO ADMINISTRAR ANTIBIOTICOS? Infecciones agudas que no presentan mejoría al momento del diagnóstico bacteriológico Infección severa o complicada Infección sistémica Paceintes que viven en instituciones cerradas o donde el riesgo de diseminación n es alto Embarazo Pacientes inmunocomprometidos o con enfermedad predisponente Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

TRATAMIENTO REHIDRATACIÓN N ORAL DROGAS DE PRIMERA ELECCION ERITROMICINA CIPROFLOXACINA OTRAS OPCIONES TETRACICLINA CLORANFENICOL NITROFURANTOINA INFECCIONES SISTEMICAS GENTAMICINA IMIPENEM AMOXICILINA / CLAVUL Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

EL TRATAMIENTO ANTIBIÓTICO TICO: Acorta la duración n de la diarrea (media de 2 días) d Acorta el tiempo de excreción n de Campylobacter en heces. Es más m s efectivo cuando se das más m s temprano en el curso de la enfermedad. Su efecto parece ser mayor en las infecciones por Campylobacter que por Salmonella.

RESISTENCIA NATURAL

RESISTENCIA NATURAL EN C. jejuni y C. coli Beta lactámicos (penicilinas y cefalosporinas de 1 a y 2 a generación) n) Trimetoprima Rifampicina Streptograminas B Polimixima B Vancomicina OTROS Campylobacter spp. Acido Nalidíxico: xico: C. lari, C. fetus, C. hyointestinalis No presentan resistencia cruzada a Ciprofloxacina Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Exterior PERMEABILIDAD en Campylobacter Espacio periplasmico Límite de exclusión E. coli 600 CARGA NETA : C. jejuni 360 C. coli 260 Cationes >>> aniones 10 : 1

PERMEABILIDAD Carga Antibiótico PM CIM N o 90 (µg/ml) cepas 0 (no iónico) 1+ 1- (zuiterión) 1- Furazolidona 225 < 1 530 Nitrofurantoina 238 < 1 152 Trimetoprima 290 > 32 353 Cloranfenicol 323 < 8 1103 Imipenem 299 < 1 211 Norfloxacina 319 < 8 646 Ciprofoxacina 330 < 1 273 Ampicilina 333 < 16 1243 Amoxicilina 365 < 16 411 Cefpirome 347 < 8 100 Cefaloridina 415 > 32 106 Ac. nalidixico 232 < 16 604 Penicilina G 334 > 32 580 Cefalotina 395 > 32 546 Cefuroxima 410 > 32 150 Cefoxitina 426 > 32 346 Cefotaxima 454 < 16 484 Cefoperazona 644 > 32 257 1+ 2- Ceftazidima 545 > 32 92 2- Carbenicilina 378 > 32 218 Ticarcilina 384 > 32 223 Ceftriaxona 552 > 32 52

EFLUJO Y RESISTENCIA INTRINSECA 1995 Charvalos y col. (AACh( 39:2019). Selecciona mutantes resistentes a antibióticos ticos no relacionados. Primera mención n de sistemas de flujo. 2000 Parkhill y col. (Nature( 403:665). Secuenciación n del genoma de C.jejuni, evidencia de varios sistemas de eflujo. 2002 Lin y col. (AACh( 46:2124). y Pumbwe y col. Caracterizan el sistema de eflujo cmeabc.

Eflujo cmeabc CIM CIP, TET, ERI, CTX y AMP CIM RIFA (100 a0.78ug/ml) Resitencia intrínseca a RIFA se debe en gran parte al eflujo. HIPERSENSIBILIDAD a sales biliares Gran contribución a la resistencia a la bilis, por lo que favorece la colonización y supervivencia del Campylobacter en el tracto intestinal. Rol activo del cmeabc en la resistencia intrínseca de C. jejuni a los antimicrobianos

Sensibilidad a los diferentes antimicrobianos de 2 Campylobacter WT y sus mutantes cmeb. (Lin et al AAC, July 2002 p2124)

RESISTENCIA ADQUIRIDA

MACROLIDOS ERITROMICINA: DROGA DE PRIMERA ELECCIÓN N PARA EL TRATAMIENTO DE INFECCIONES SEVERAS MECANISMO DE ACCION: UNION A SUBUNIDAD 50S (rrna 23S) bloqueo de la translocación del peptidil trna,, por interferencia estérica Inhibición n de la síntesis s proteica 3 UGA UAG UAA GCG GAUGUC GUC CCA UUU UUA UUU AAA AG TET UUU AUG AAA UAC MLS CMP - - - - - C AAU UGG UAG UGG AGG AAU 5 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

MECANISMO DE RESISTENCIA A MACROLIDOS ALTERACIÓN N DEL SITIO BLANCO SISTEMA DE EFLUJO Resistencia cruzada a Azitromicina, Lincosamidas A2074 A2075 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

TASAS DE RESISTENCIA: MACROLIDOS 0-11% en C. jejuni 0-68.4% en C. coli TYLOSINA: promotor de crecimiento en cerdos ERITRO EMERGENCIA DE RESISTENCIA EN HUMANOS!!! Servicio ANTIMICROBIANOS Gibreel and taylor, JAC (2006) 58:243 INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CONSECUENCIAS DE LA UTILIZACION DE ANTIBIOTICOS EN ANIMALES ATB ANIMALES RESIDUOS DE ANTIBIOTICOS EN ALIMENTO BACTERIAS RESISTENTES A LOS ANTIBIOTICOS PATOGENOS HUMANOS RESERVORIOS

EFLUJO cmeabc + PAßN 2004 Payot et al. C. coli ERI S e I (CIMs= <1-4ug/ml) c/paßn CIM 2-42 dils No tienen mutaciones en el rrna 23S RESISTENCIA INTRINSECA ERI LLR (CIMs= 8-16ug/ml) 8 c/paßn CIM 4-64 dils No tienen mutaciones en el rrna 23S RESISTENCIA ADQUIRIDA (posiblement( por sobreexpresión de cmeabc) ERI HLR (CIMs>256ug/ml) c/paßn CIM 1-21 dils Tienen la mutación n A2075G en el rrna 23S La ppal contribución n a la R es la mutación n ribosomal Mamelli et al. Idem en C.jejuni

Distribución n de las CIMs de Eritromicina (n=429) LLR HLR 5 10 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

ERITROMICINA vs AZITROMICINA

QUINOLONAS CIPROFLOXACINA: DROGA DE SEGUNDA ELECCIÓN PARA EL TRATAMIENTO DE INFECCIONES SERIAS O COMPLICADAS ACTIVIDAD BACTERICIDA MECANISMO DE ACCION: UNION AL SITIO ACTIVO DE LA DNA GYRASA CAMBIOS EN EL SUPER ENROLLAMIENTO DEL DNA Y FRAGMENTACIÓN N DEL DNA Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran Quinolo

MUTACIONES EN EL GEN DE LA gyra: GEN gyra QUINOLONAS : MECANISMO DE RESISTENCIA MECANISMO DE EFLUJO QRDR Codones más frecuentemente mutados Ala-70 Thr-86 Asp-90 Thr CIP 1-4ug/ml Ile CIP 16-64ug/ml Asn CIP 1-4ug/ml Tyr CIP 8-16ug/ml C. fetus Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CIPROFLOXACINA vs Ac.. NALIDIXICO TODAS LAS MUTACIONES CONFIEREN RESISTENCIA A AC. NALIDIXICO Y FLUORQUINOLONAS. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

QUINOLONAS TASAS DE RESISTENCIA: 29% en EEUU, 22% en UK, 57% en Taiwan, 84% en Tailandia, 88% en España UTILIZACIÓN DE ENROFLOXACINA EN VETERINARIA: EMERGENCIA DE RESISTENCIA EN HUMANOS!!! cipro Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Tendencias de la resistencia a FQ en aislamientos de C. jejuni y C. coli de origen humano. Quinolone and Macrolide Resistance in Campylobacter jejuni and C. coli: Resistance Mechanisms and Trends in Human Isolates. Jørgen Engberget al. EID Vol 7, No 1, Jun-Feb 2001

Factores de riesgo de infección n con Cam FQR: Viajes 50% FQ R pos viaje vs domésticas 9,9% FQ R) Depende del país s de destino Comer aves de corral (no pollo, ni pavo) Natación Duración n de la infección: n: Diferencia significativa para C. jejuni (FQ R 13.2d vs FQ S 10.3d) No hay diferencia para C. coli EID, Vol 10,No.6, June 2004: 1056-1063

Adquisición de Campylobacter resistentes a Fluorquinolonas provenientes de aves de corral. Iovine, N y Blaser M. EID Vol 10 No.6, June 2004: 1158

Grupo I Sin ATB CIM CIP: 0.064-0,12ug/ml CIM CIP: 0,12ug/ml Enrofloxacina 25 ppm CIM CIP: >32ug/ml Grupo II AAC, Jan 2003vol 47, No 1:390-4

Ventana de Selección de Mutantes Concentracion de droga en suero o tejido Ventana de Seleccion de Mutantes CPM CIM Tiempo post administración X. Zhao and K. Drlica, Clin. Infec. Dis. 2001, Vol. 33 Supl 3, S147 S156

ANTIBIOTICOS APROBADOS PARA USO EN VETERINARIA EN ARGENTINA ß-lactámicos Penicilina Amoxicilina Ampicilina Cefacetrilo Cefoperazona Ceftiofur Cefapirina Cloxacilina Dicloxacilina Ac. clavulanico Aminoglucósidos Gentamicina Kanamicina Neomicina Estreptomicina Dihidroestreptomicina Quinolonas Ac. nalidixico Ac. oxolinico Enrofloxacina Difloxacina Tetraciclinas Tetraciclina Oxitetraciclina Doxiciclina Macrólidos, lincosamidas y estreptograminas Lincomicina Eritromicina Tilosina Virginiamicina Nitrofuranos Furazolidona Nitrofurantoina Nitrofurazona Sulfonamidas Sulfaclorpiridazina Sulfadiazina Sulfadimetoxima Sulfadimidina Sulfadoxina Sulfaguanidina Sulfamerazina Sulfametacina Sulfamonometoxina Sulfanilamida Sulfaquinoxalina Sulfatiazol Sulfisoxazol Otros Cloranfenicol Florfenicol Monesina Salinomicina Bacitracina Carbadox Flumequina Novobiocina Pirilimicina Polimixina B Espectinomicina Espiramicina Tiamulina Veterinary Use of Antimicrobials in Agriculture in North America, Latin America and the Caribbean. United States Food and Drug Administration (FDA). 7500 Standish Place, Rockville, MD 20855 E.U

ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS COMO PROMOTORES DEL CRECIMIENTO Antimicrobiano Bacitracina Flavomicina Avoparcina Monesina Tipo de droga Bacitracina Flavofosfolipol Glicopéptido Ionóforo Salinomicina Espiramicina Macrólidos Tilosina Avilamicina Virginiamicina Carbadox Oligosacárido Estreptograminas Quinoxalina Olaquindox

TETRACICLINA MECANISMO DE ACCION: INHIBICION DE LA SINTESIS PROTEICA Unión al la subunidad 30S ribosomal ( 16SrRNA y proteinas ribosomales) Previene la unión del aa-trna al sitio A del ribosoma TASAS DE RESISTENCIA: 0-11% en Dinamarca 25% en España 48% en EEU 85-95% en Taiwan 3 UGA UAG UAA GCG GAUGUC GUC CCA UUU UUA UUU AAA AG TET UUU AUG AAA UAC - - - MLS CMP - - C AAU UGG UAG UGG AGG AAU 5 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

TETRACICLINA MECANISMO DE RESISTENCIA: PROTECCIÓN N RIBOSOMAL Gen tet O, codificado en un plásmido Derivado de cocos Gram + Proteina Tet O: homología a con factores de elongación Ef-Tu y Ef-G. Provoca la liberación n de la tetraciclina del ribosma y se reestablece la síntesis s proteica. SU UTILIDAD PARA EL TRATAMIENTO DEPENDE DE LA RESISTENCIA LOCAL Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CLORANFENICOL TASAS DE RESISTENCIA: 0.6% - 10% MECANISMO DE RESISTENCIA: INACTIVACION ENZIMATICA NO Resistencia plasmídica, mediada por la enzima Cloranfenicol Acetil Transferasa (CAT) Es constitutiva y se produce en grandes cantidades NO SE EMPLEA PARA EL TRATAMIENTO POR SU ALTA TOXICIDAD Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

β LACTAMICOS I ß-LACTAMASAS: 83-92% C. jejuni 68 % C. coli Fueron descriptas al menos cuatro enzimas distintas con pi: : 7.4, 8.3, 8.6, 8.8 Hidrolizan mejor Penicilinas (PEN?, AMP, AMOX, TIC) que Cefalosporinas Inhibición con Ac. Clavulánico: aumenta la actividad de AMP y AMOX > TIC, no se modifica la actividad de PEN ni PIP Mecanismo de resistencia poco eficiente: Estructura de la enzima Producción en pequeñas cantidades Ingreso muy eficiente de los sustratos a través de las porinas. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

β LACTAMICOS II AMINOPENICILINAS, IMP, FEP PENETRAN FACILMENTE POR CARGA DIPOLAR (Zuiteriones ( Zuiteriones) LOS β-lactámicos MÁS M S ACTIVOS SON IMP Y FEP, MIENTRAS QUE CTX ES MODERADAMENTE ACTIVO. NO SE UTILIZAN PARA EL TRATAMIENTO, EXCEPTO IMP O AMC EN INFECCIONES SISTÉMICAS. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Porcentajes de resistencia a los antimicrobianos (n=232). Año A o 2006 % Ressitencia 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 63 27 2,6 4,8 10,5 2,6 0,4 0 0 ERY CIP TET AZI NIT FOS AMP AMC GEN IMP Antimicrobianos

Porcentajes de resistencia a los antimicrobianos según n especie (n=215). Año o 2006 % Ressitencia 70 60 50 40 30 20 10 0 6,2 1,1 61,1 61,3 53,1 24,2 1,1 6,2 11,1 9,4 0 3,4 9,3 0,4 0 00 00 ERY CIP TET AZI NIT FOS AMP AMC GEN IMP C. jejuni C. coli Antimicrobianos

Y Y por que????? 2do agente etiológico de diarreas bacterianas Ineficacia de eritromicina frente a otros enteropatógenos Aumento de la resistencia a Ciprofloxacina Impotancia del diagnóstico de diarreas por Campylobacter spp. y de la vigilancia de la resistencia Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Campylobacter spp: PRUEBAS DE SENSIBILIDAD Concentración n Inhibitoria Mínima M (CIM) Método de dilución n en Agar Método de dilución n en Caldo E-test Método de Difusión n por disco Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

NCCLS 2003 CLSI 2006 Doc M100-S13: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: MIC testing. Tabla 3A. Acceptable Limits for Quality Control Strains Udsed to Monitor Accuracy of Minimal Inhibitory Concentrations (MICs( MICs) ) of Fastidious Organisms. Método de dilución n en Agar Agar MH enriq. con 5% de sangre de carnero desfib. Inóculo: suspención directa de colonia. 0.5 de Mc Farland Incubación: 24hs a 42ºC o 48hs a 36-37ºC en microaerofilia (10% CO 2, 5% O 2 y 85% N 2 ). Ciertos aislamientos de algunas especies Campylobacter (C. jejuni ssp. doylei, C. fetus y C. lari) pueden no crecer a 42 C por lo tanto la la temperatura de incubación de las pruebas de sensibilida debería ser 36ºC. Cepa control de calidad C. jejuni ATCC 33560. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CLSI 2005 CLSI 2005 Doc M100-S15: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: MIC testing. Tabla 16B. Límites aceptables para la cepas de control de calidad C. jejuni ATCC 33560 para el método de Dilución en agar. Antibiótico tico Ciprofloxacina (CIP) Doxiciclina (DOXI) Eritromicina (ERI) Gentamicina (GEN) Meropenem (MERO) 36-37 37ºC/ 48hs 0.12-1 0.5-2 1-8 0.5-2 0.004-0.015 0.015 42ºC/ 24hs 0.06 0.5 0.25-2 1-4 0.5-4 0.008-0.03 0.03

CLSI 2006 2007 DOC M45-A: A: Methods For Antimicrobial Dilution And Disck Susceptibility Testing Of Infrecuently Isolated Or Fastidious Bacteria. Tabla 4. Campylobacter jejuni / coli Information and Interpretative Criteria for Broth Microdilution Sucseptibility Testing. Método de dilución n en Caldo Caldo MH enriq. con sangre de caballo lisada 2-5% Inóculo: suspención directa de colonia. 0.5 de Mc Farland Incubación: 24hs a 42ºC o 48hs a 36-37ºC en microaerofilia (10% CO 2, 5% O 2 y 85% N 2 ). La incubación a menos de 36ºC o a más de 42ºC puede producir un pobre crecimiento. Se prefieren incubadores con recambio de gases, sin embargo, las jarras con generadores producen resultados aceptables. No se recomienda utilizar bolsas de plástico para generar la microaerofilia ya que no da resultados reproducibles. Cepa control de calidad C. jejuni ATCC 33560. Antibiótico tico Sensible Intermedio Resistente Eritromicina (ERI) 8 16 32 Ciprofloxacina (CIP) 1 2 4 Tetraciclina (TET) 4 8 16 Doxyciclina (DOXI) 2 4 8

CLSI 2006 Doc M45-A: Methods For Antimicrobial Dilutio And Disck Susceptibility Testing Of Infrecuently Isolated Or Fastidious Bacteria. Tabla 16B. Límites aceptables para la cepas de control de calidad C. jejuni ATCC 33560 para el método de Microdilución en Caldo. Antibiótico tico Azitromicina (AZI) Ciprofloxacina (CIP) Doxiciclina (DOXI) Eritromicina (ERI) Gentamicina (GEN) Levofloxacina (LEVO) Meropenem (MERO) Tetraciclina (TET) 36-37 37ºC/ 48hs 0.03-0.25 0.25 0.06-0.25 0.25 0.12-0.5 0.5 0.5-2 0.5-2 0.06-0.25 0.25 0.008-0.03 0.03 0.25-2 42ºC/ 24hs 0.03-0.12 0.12 0.03-0.12 0.12 0.12-0.5 0.5 0.25-2 0.25-2 0.03-0.25 0.25 0.008-0.03 0.03 0.25-1

Método de dilución en Agar

Dilución en Agar Preparación y colocación del inóculo 0.1 ml Cultivo Fresco de la Bacteria 0.5 de McFarland 0.9 ml de SF 400 µl Policubetas de inóculos del Replicador de Steers Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Método de dilución n en Agar Lectura de la CIM Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

CLSI 2006. Doc M45-A Método de Difusión n por disco MH enriq. con 5% de sgre. de carnero desfibr. Inóculo: suspención directa de la colonia. 0.5 de McFarland Incubación: a 42 C por 24 horas o a 36-37 C por 48 hs. en microaerofília (10 % CO2, 5% O2 y 85% N2). La incubación a menos de 36ºC o a más de 42ºC puede producir un pobre crecimiento. Se prefieren incubadores con recambio de gases, sin embargo, las jarras con generadores producen resultados aceptables. No se recomienda utilizar bolsas de plástico para generar la microaerofilia ya que no da resultados reproducibles. INTERPRETACION: Los ATB que no presentan zonas de inhibición correlacionan bien con CIMs de resistencia, por lo que deben interpretarse como R. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Campylobacter spp: spp: Comparacion de los metodos para evaluar la sensibilidad por Difusion por disco y Dilucion en agar. C. LUCERO 1, A. VICENTE 1, G. GALAN 1, N. LEARDINI 2, CAMPYLOBACTER GROUP AND M. GALAS 1. 1 Servicio Antimicrobianos, 2 Servicio Bacteriología a Especial. INEI ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán,, Buenos Aires, Argentina.ICAAC 2003 OBJETIVO Evaluar la correlación entre los métodos de difusión por disco y dilución en agar para evaluar la sensibilidad a los antimicrobianos en Campylobacter spp. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Puntos de corte Dilución n en Agar Antibiótico tico Sensible Intermedio Resistente Ciprofloxacina (CIP) 1 2 4 Eritromicina (ERI) 8 16 32 Tetraciclina (TET) 4 8 16 Fosfomicina (FOS) 64 128 256 Nitrofurantoina(NIT) 32 64 128 Gentamicina (GEN) 4 8 16 Cloranfenicol (CMP) 8 16 32 Azitromicina (AZI)* 2 4 8 Clindamicina (CLI) 0.5 1-2 4 Imipenem (IMP) 4 8 16 Amoxicilina/clav(AMC clav(amc) 8/4 16/8 32/16 Extraido de las Tablas 2A y 2C* del documento M100-S17 NCCLS 2007 Extraido de la Tabla 4 del documento M45-P NCCLS 2007 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Puntos de corte Difusión n por disco Antibiótico tico Resistente Intermedio Sensible Ciprofloxacina (CIP) 15 16-20 21 Eritromicina (ERI) 13 14-22 23 Tetraciclina (TET) 14 15-18 18 19 Nitrofurantoina (NIT) 14 15-16 16 17 Gentamicina (GEN) 12 13-14 14 15 Cloranfenicol (CMP) 12 13-17 17 18 Azitromicina (AZI) 13 14-17 17 18 Clindamicina (CLI) 13 14-17 17 18 Imipenem (IMP) 13 14-15 15 16 Amoxicilina/clav clav (AMC) 13 14-17 17 18 Extraido de las Tablas 2A y 2C del documento M100-S17 Enero 2007 de la NCCLS. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Resultados: Tipos de Error Tabla 3- Análisis de correlación. Categorización de errores (N=214) ATB ERI CIP TET AZI AMP NIT IMP CMP GEN AMC %ERROR MINOR 1.4 0 0 1.4 0 5.2 0 0 0 0 0 %ERROR MAYOR 0 0 0 0 0.5 0 0 0 0 0 %ERROR VERY MAYOR 0.94 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Correlación n entre difusión n por disco y dilución n en agar (CIM) n=211 R: -0.67 Erythromycin Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Correlación n entre difusión n por disco y dilución n en agar (CIM) Ciprofloxacin N= 213 R= -0.78 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Correlación n entre difusión n por disco y dilución n en agar (CIM) Tetracycline N= 212 R= -0.89 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Correlación n entre difusión n por disco y dilución n en agar (CIM) Ampicillin n= 139 R=-0.74 Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Conclusiones La difusión por disco es una técnica confiable,, simple y barata para evaluar la sensibilidad de Campylobacter spp. a: ERITROMICINA TETRACICLINA CIPROFLOXACINA AZITROMICINA Cloranfenicol nitrofurantoina gentamicina Imipenem Amoxicilina / clavulánico buena correlación, pero aún no contamos con cepas resistentes. Servicio ANTIMICROBIANOS INEI ANLIS Dr Carlos G. Malbran

Resumen pruebas de sensibilidad para Campy Metodología a estandarizada por CLSI: Dilución n en agar y microdilución en caldo Difusión n por discos ( método m de screening) Drogas a ensayar para cepas provenientes de diarreas: Mínimo: ciprofloxacina y eritromicina. Adicionales: nitrofurantoinas,, cloranfenicol y tetraciclina Drogas para infecciones sistémicas: amoxicilina/ac ac. clavulánico, imipenem, gentamicina.

M U C H A S G R A C I A S! ATB@ANLIS.GOV.AR

M U C H A S G R A C I A S! clucero@anlis.gov.ar