INJERTACION DEL PALTO

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2 GUÍA DE CAMPO, INJERTACION DEL PALTO l'elstll amuia1na Mili. CULTIVARHASS AUTORES: Jaime Salvo del Pedregal. Alejandro Guzmh Loz6n. Macareno Núñez Femández. MINISTERIO DE AGRICULTIJRA INSTITUTO DE INVESTIGAOONES AGROPECUARIAS- INIA CENTRO REGIONAL DE INVESTIGACIÓN - LA CRUZ REGIÓN DE VALPARAISO- CHILE DIRECTOR REGIONAL: Rabinson Yarvos Mesina. BOLETIN INIA Nº 113 ISSN Este boletln fue editado por Centro Regional de lnvedlgac16n La Cruz Instituto de lnvestigoáones Agropetuorios Ministllrio de Agrirnlturo hnnitida su reproducción parcial dtanda la luentu y los autom. CITA BIBLIOGRÁFICA CORRECTA: SalYO del P., J., Guzmán L., A. y Núñaz F., M. Gula de <11mpo lnjertalión del pollo. Perseo americana Mili. 84 p. Boletfn INIA Nº 273, Instituto de lnmtigaciones Agropecuarias, INIA La Cruz. Chile Diseño, Diagromaci6n e impresión:.aravena & Vega Impresos l.jda. Contidod de ejemplares: SOO La Cruz, Chile, 2013.

3 TABLA DE CONTENIDOS. Agradecimientos 2 Introducción 4 1. Herramientas y materiales de injertación Principios de la lnjertación Actividad del cambium Contacto zona cambia! Formación de callo Conexión vascular del injerto Cosecha de material vegetal Tipos de injertos Injerto de púa. 4.2 Injerto de yema Reinjertación Otros injertos Recomendaciones para el éxito de la 67 injertación. 6. Nuestra experiencia. 73 Glosario de términos. 77 Referencias bibliográficas. 82

4 Agradecimientos Agradecemos la participación en este proyecto a importantes entidades representantes de agricultores y productores de paltas de la Región de Valparaíso, tales como la Asociación de Agricultores de la Provincia de Quillota y Marga Marga y la Asociación Gremial de Productores de la Provincia de Petorca (AGROPETORCA). Del mismo modo, reconocemos el a poyo y colaboración de la Federación Nacional de Productores de Fruta (FEDEFRUTA) por su contribución en la divulgación de los resultados del proyecto FIC "Diseño de nuevas tecnologías de injertación de brotes y raíces de paltos para anticipar su proceso de recuperación del daño producido por heladas y sequías monitoreado en forma satelital N DVl-SNIT". Junto a esto, deseamos reconocer los aportes económicos y de recursos humanos destinados por el Fondo de Innovación para la Competitividad de la Región de Val paraíso y por

5 0 el Instituto de Investigaciones Agropecuarias - 1 N IA La Cruz para la realización de este proyecto. Agradecemos al Sr. Sergio Vilches quien contribuyó con su conocimiento y sus 25 años de experiencia como injertador autodidacta, aportando información práctica sobre esta tecnología, la cual también se encuentra ahora plasmada en este manual. Agradecemos a la Sra. Andrea Torres lng. Agr., extensionista INIA y a la Sra. Eliana San Martín, encargada de comunicaciones, por sus valiosos aportes en la revisión de esta publicación. Asimismo, damos las gracias a autoridades, empresarios, agricultores y personal del INIA La Cruz quienes nos dieron impulso, colaboración y ayuda para completar este manual. Especialmente destacamos la colaboración del Centro de Transferencia y Extensión del Palto y del Laboratorio de Toxicología de INIALa Cruz.

6 1 ntroducción La injertación es un tipo de reproducción vegetativa que consiste en unir dos o más partes de diferentes plantas; tales como yemas, brotes, troncos y raíces, con el propósito de que formen una nueva planta. Por lo que esta técnica se presenta como una forma adecuada para contribuir en la recuperación de paltos afectados porheladasysequíasen la Región devalparaíso. El trabajo de injertación del palto se inicia con la selección, preparación, recolección y almacenamiento del material vegetativo, púas o yemas, que se espera injertar. La labor se completa al efectuar la injertación en plantas jóvenes desarrolladas a partir de semilla en invernadero o en plantas adultas que crecen en los huertos. Para efectuar esta técnica de u na forma adecuada, rápida y segura, se requiere utilizar herramientas de buena calidad, que estén

7 afiladas y que sean fáciles de manipular. Del mismo modo se requiere emplear otros materiales, tales como cintas plásticas, sellantes, fungicidas, entre otros, que facilitan el prendimiento del injerto una vez instalado. Pero lo más importante es desarrollar las habilidades necesarias para injertar, mediante la práctica continua de las técnicas que se incluyen en esta guía.

8 1. Herramientas y materiales de lnjertacl6n Para realizar la labor de injertación en especies frutales como el palto, se recomienda contar con las herramientas y los materiales adecuados, de manera de disminuir los riesgos de accidentes y realizar un trabajo de buena calidad. A continuación se detallan los materiales y herramientas requeridos, incluyendo las recomendaciones para su uso y cuidados adecuados. Imagen 1.. Herramientas utilizadas para labor de injertación.

9 La tijera de punta fina sirve para recolectar las púas, su mecanismo de corte se conoce como cizalla o "Bypass", en el cual una lámina de metal afilada se desliza sobre otra lámina provocando el corte. Imagen 2. Tijera de punta fina. Es importante la mantención de las tijeras. Para lograr esto es requisito guardarlas limpias. Se deben lavar con agua añadiendo un detergente suave (procurando remover los restos de savia que quedan adheridos), utilizando una esponja o un cepillo, teniendo el cuidado de enjuagar con suficiente agua y secando bien antes de guardarlas para evitar oxidaciones. Para una

10 mayor protección, se puede aplicar en las hojas aceite anticorrosivo de baja viscosidad, aumentando su vida útil. Es recomendable desinfectar las tijeras, cada vez que se usan, para evitar la propagación de enfermedades entre un árbol y otro. Al término de la faena se debe sumergir por 2 a 3 minutos en hipoclorito de sodio al 5%. Cabe destacar que períodos más prolongados pueden provocar un deterioro de éstas por el alto poder de oxidación del cloro. Otro desinfectante es el yodo agrícola, su modo de acción activa los mecanismos de defensa de la planta, produciendo fitoalexinas que contrarrestan el ataque de los patógenos. Se recomienda usarlo antes de comenzar con la faena y aplicarlo de forma regular mientras se trabaja. El material recolectado se debe mantener a una temperatura baja y en buenas condiciones de humedad de manera de evitar la deshidratación,

11 es por esto que durante la recolección se debe contar con un contenedor térmico o cooler, y posteriormente deben ser mantenidos en un refrigerador convencional a una temperatura promedio de 5-7ºC. Las púas deben ser envueltasenpape/absorbentehúmedoylimpio. Imagen 3. Púas recolectadas y mantenidas en condiciones de humedad y temperatura. Existen múltiples marcas y modelos de navajas injertadoras. la más fácilmente identificable es la que posee una pequeña muesca en forma de semicírculo en la parte delantera superior de la hoja y una espátula de punta obtusa en el otro extremo, la cual sirve para separar la corteza del

12 @ portainjerto una vez hecho el corte y así facilitar la introducción en ella del material a injertar. Imagen 4. Navajas injertadoras. Al adquirir una navaja injertadora se debe considerar que existen normas de calidad en la fabricación de cuchillos. Se recomiendan cuchillos de acero inoxidable que tengan incorporados en su fabricación los tratamientos de HTemple" y "Revenido". Este proceso consiste en someter al metal a cambios de temperaturas controlados, de manera de uniformar la estructuración interna de la hoja, logrando una dureza óptima en el rango de 58 a 60 unidades Rockwell.

13 Otras herramientas de injertación: El mercado mundial ofrece diferente tipos de herramientas, que reemplazan y mejoran las alternativas en uso, manteniendo el principio básico de contar con un implemento afilado, para hacer calzar el injerto en el porta injerto. La herramienta Grafting tool "Omega scissor" de China realiza cortes con calce perfecto entre la púa y el portainjerto de un diámetro similar. La tijera Grafting Shears"' de Nueva Zelanda, facilita los cortes en bisel requeridos en la injertación de púas. Imagen 5. Tijera injertadora NOmega scissorº

14 @ Imagen 6. Tijera "Hand he/d grafting shears". Evaluaciones preliminares de INIA La Cruz, muestran que Grafting Shears tiene utilidad en brotes maduros no flexibles y que "Omega scissor" posibilita realizar cortes en púas lignificadas y poco lignificadas de diámetro no mayor a 8 mm, aun cuando presenta problemas de sujeción sólo con cinta. Imagen 7. Corte con ªOmega scissor"

15 Se utiliz.a una amarra o cinta para conseguir una buena sujeción del injerto. A través de la historia se han utlllzado distintos materiales. En la actualidad la tecnología nos permite disponer de materiales con alta calidad. Debe ser flexible, para que se ajuste mejor al material que se está injertando, evitando la oxidación y la pérdida de humedad en el sitio de unión. La cinta tipo film cumple con ese requisito, sujetando al injerto con la presión adecuada para evitar el estrangulamiento a medida que crece. Se remmienda usar 3 capas de film alrededor del brote injertado. lmag~n B. Cinta para Injertos tipo film.

16 @ El filo de la navaja debe ser recto y prolijo desde principio a fin, porque determina la calidad del corte. La mantención del filo de la navaja, requiere del uso de una piedra de asentar de grano fino, la cual se sumerge en agua por 5 minutos antes de usar y se enjuaga junto a la navaja constantemente. La navaja se desliza con un movimiento suave en la dirección opuesta a la que apunta el filo de la hoja, con un ángulo de elevación de 12-15º, lo que significa que una hoja de 10 mm de ancho se debe inclinar en 2-2,5 mm. Imagen 9. Afilado de navaja en piedra al agua

17 Luego de este procedimiento, se consigue un mejor acabado del afilado, con una lija fina al agua N 230, siguiendo la misma indicación. Para lograr que la cuchilla mantenga su trayectoria en línea sin producir cortes de tipo cóncavos, los cuales impiden una correcta unión entre las partes, se recomienda dar vuelta la hoja, apoyar el filo en la piedra y repetir el afilado en la cara opuesta de la hoja. Imagen 10. Piedra de asentar y lija al agua Nº 230.

18 @ La pasta sel/ante o cera. se utiliza para evitar la entrada de agua y de organismos patógenos entre el injerto y el portainjerto. Se utiliza principalmente en injertaciones en campo cuando los materiales a injertar son de distinto diámetro, después de un rebaje en una labor de reinjertación o de recuperación de huertos. La pasta comúnmente utilizada es una mezcla de 1 kg de pez castilla (destilado de una resina natural obtenida de coníferas) junto con 300 g de cera de abeja y 25 g de vaselina sólida. La mezcla se prepara en un recipiente metálico, sometido a una fuente de calor, esperando que los componentes se derritan y se genere una mezcla uniforme. Antes de aplicar sobre el injerto se deja enfriar hasta una temperatura aproximada de SOºC a SSºC, cuando la pasta adquiere una viscosidad característica que posibilita su aplicación en el injerto sin escurrimiento fuera del mismo. Esta condición se alcanza después de enfriar por20 minutos a temperatura ambiente.

19 m Imagen 11. Preparación de pasta sel/ante en terreno Existen pastas sellantes elaboradas con resinas artificiales, cuya ventaja es que no requieren tratamiento térmico. Debido a que no hay antecedentes sobre su uso en el desarrollo de los injertos, se recomienda el uso de pastas sellantes naturales

20 @ Consideraciones:./ El uso de tijeras y navajas de calidad ayuda a realizar cortes adecuados y con menor esfuerzo, disminuyendo los problemas de salud de los injertadores, por ejemplo, los que se asocian a tareas repetitivas, tales comotendinitis, o artritis en el largo plazo../ Es importante proteger las manos, con guantes o dedales, ya que se trabaja con herramientas con filo, de manera tal de evitar cortes y accidentes../ Es fundamental tener siempre a mano un botiquín con al menos los elementos básicos para entregar primeros auxilios frente a algún corte o lesión: antisépticos (jabón, agua oxigenada, alcohol y povidona) y material de protección (gasa, algodón, tijeras, guantes, amarra para torniquete, parches y cinta adhesiva).

21 ./ Para disminuir los riesgos asociados al utilizar herramientas con filo, que legalmente son consideradas armas blancas, es recomendable que se defina quién es el jefe a cargo de la operación y quién es el encargado de los materiales al iniciar la labor. El primero debe supervisar si los trabajadores se encuentran aptos física y mentalmente para realizar la injertación sin peligro, designar las tareas y supervisar el trabajo técnico. El segundo debe distribuir y luego colectar las herramientas que se usarán durante la jornada.

22 2.1 Actividad del cambium El cambium corresponde a una fina red de células que recubre la planta por debajo de los conductos floemáticos de la corteza y sobre los conductos xilemáticos unidos a la madera, siendo el encargado de generar nuevas células de floema y xi lema. Para que se produzca un buen prendimiento de los materiales injertados, se requiere contar con un material vegetal que presente su zona cambial activa. Esto se verifica al cortar una sección transversal y observar el cambium con una coloración translúcida. La actividad del cambium se ve favorecida por el aumento de temperatura y disminución del largo de las noches (fotoperíodo). Por lo que, en términos generales, el cambium de yemas dormidas se activa con la brotación al inicio de

23 primavera yse desactiva en otoño junto a la caída de hojas. En el palto, se puede mantener activo todo el año, dependiendo de las condiciones meteorológicas del lugar donde crece y si existe suficiente agua de riego. llustracl6n 1. Distintas capas de células que componen un tallo, corte transversa/ 1.- Médula 2.- Xilema Primario 3.- Xilema Secundario 4.- Cambium 5.- Floema Secundario 6.- Floema Primario 7.-Corteza 8. Epidennis

24 @ 2.2 Contacto zona cambial El contacto de las zonas cambiales del patrón e injerto es un complejo proceso bioquímico y estructural, que comienza con la alianza de dos partes cortadas que forman callo (cicatrización de la lesión) y termina con el establecimiento de un nuevo sistema vascular (Cookson, 2013). En esta etapa es donde el injertador puede influir positivamente a través de la correcta aplicación de la técnica de injertación y del buen uso de las herramientas. Imagen 12. Contacto entre patrón y púa.

25 Para evitar la oxidación de las partes en íntimo contacto se deben utilizar amarras y/o ceras (sellantes) en la forma correcta, como se indicó en capítulo l. Imagen 13. Amorres deficientes. (A} Amorro muy suelto. (B} Estrangulación del patrón con amarre muy tenso. (C} Amarre muy tenso, con posterior muerte de púa.

26 @ Para que el injerto sea exitoso, es suficiente que al menos por un lado de la unión las capas de cambium del patrón y de la púa coincidan, de esta manera las células de parénquima producidas por ambos, podrán entrelazarse. Imagen 14. Fracaso en la unión del injerto. (AJ Púa injertada muerta; (B} Púa ubicada al centro del portainjerto, no hay contacto entre las zonas cambia/es; (C) Verificación del injerto fallido.

27 2.3 Formación de callo La formación del ca 1 lo como tejido de cicatrización, es producto de un adecuado equilibrio entre flujos de reguladores de crecimiento que participan en la unión del injerto. La auxina estaría estimulando fuertemente la producción de callo en una herida, además de participar en la diferenciación del cambium. Investigadores, en el año 1966, descubrieron que si la relación entre la auxina y el ácido giberélico es alta, se forma más xilema a partir de la zona cambial, en cambio si esta relación es favorable al ácido giberélico se forma más floema. Estudios han mostrado que las plantas mantienen un equilibrio en las cantidades de reguladores de crecimiento, el cual se rompe cuando se injerta, recibiendo la púa una gran cantidad de citoquininas, que inducen un desarrollo vigoroso, lo que coincide con la

28 @ estimulación de brotes del tipo vigoroso siléptico en paltos. En el caso del palto, se ha demostrado que la aplicación de 1000 ppm de AIB (un tipo de auxina) produce una cicatrización de 50 % en 17 días y 85% en 45 días (Leal and Krezdorn, 1977). Un efecto positivo similar se observó en plantas de cacao con aplicaciones de AIB sobre el punto de unión al momento de injertar. El callo formado como respuesta a la herida producida por el corte, corresponde a células parenquimáticas que se originan de las capa de células expuestas del cambium, tanto del patrón como de la púa o yema injertada. Este nuevo tejido está conformado por células turgentes y de pared celular delgada, las que con facilidad pueden deshidratarse y morir, por lo que es importante mantener una humedad relativa alta, la cual se logra con un buen amarre. En el transcurso de dos a tres días estas células

29 penetran en la delgada capa necrótica (que se formó con la herida) llenando el espacio entre los componentes del injerto, enlazándose fntimamente, otorgando sostén mecánico y también permitiendo un paso limitado de agua y nutrientes. Imagen 15. Formación de callo. Actualmente hay evidencia de que una de las respuestas al corte es la activación de genes, la cual ocurre en las primeras 72 horas. Estos genes tienen por función la producción de sustancias reguladoras de crecimiento, la formación de nuevas proteínas y la movilización de nutrientes (ca lelo) en la formación de nuevo tejido.

30 @ Se puede evidenciar alrededor de 10 días después de la injertación, la caída de los peciolos. Esta caída ocurre, por la interrupción del flujo de citoquininas desde las raíces, al momento de la recolección, lo que gatilla la senescencia de las hojas (en este caso, sólo de los peciolos ligados a la púa injertada), el cual se completa si la púa logra ad herirse a 1 porta injerto y mantenerse viva. Imagen 16. Caída de peciolos, 10 días después de injertación.

31 2.4 Conexión vascular del injerto Para establecer la conexión del injerto se requiere lograr una comunicación celular a través de los plasmodesmos, que son canales especializados que atraviesan la membrana y la pared celular, facilitando el transporte de sustancias como agua, nutrientes y metabolitos entre las células vegetales. A pesar de que la formación de callo se considera como la respuesta a la herida producida en la injertación, investigaciones de Pina y Errea (2006) afirman que los plasmodesmos son estructuras dinámicas que tienen un importante rol en el reconocimiento celular entre patrón y púa. Es decir, los conectan y permiten una interacción, al difundir compuestos desde ambos tejidos, logrando una unión firme.

32 Plasmodesmos Plasmodesmos llustraci6n 2. Plasmodemos A partir del callo generado en la etapa anterior se produce nuevo cambium, que aparece en un lapso de 3 a 4 semanas, relacionándose con la activación de un grupo de genes que participan activamente en la formación de pared celular y tejido vascular (Cookon, 2013). Con esto, se logra que la púa y su región meristemática (la yema) reasuman con éxito su crecimiento, de manera que puedan obtener agua y nutrientes y

33 finalmente aprovisionen con fotosintatos al sistema radical. Cabe hacer notar que el tiempo de formación de tejido vascular puede ser diferente en cada especie frutal. Según pruebas realizadas en 1 N IA La Cruz, para el caso del palto, la formación de tejido vascular entre ambas partes se observa a los 60 días después de la injertación bajo condiciones controladas de temperatura y humedad. Del mismo modo, en el caso del castaño existen reportes de que el nuevo xilema y floema, se forma dos meses después de la injertación (Serdal eta l. 2005}.

34 3. Cosecha del material vegetal: Como material vegetal se entiende a una sección de un brote, púa, la cual es portadora de 2 a 3 yemas vegetativas. ~sta puede ser injertada directamente o puede ser utilizada para extraer una sola yema que será injertada sobre el patrón. El material a injertar debe ser elegido bajo dos condiciones fundamentales: debe ser un material sano. libre de enfermedades, de manera que la nueva planta que se produzca también lo sea, y debe presentar un buen tamaño de yemas para asegurar el óptimo crecimiento del nuevo brote. Para garantizar la obtención de púas con un buen tamaño de yemas, se recomienda extraerlas del lado del árbol que recibe la luz de la mañana (cara expuesta al norte y este). Otras consideraciones al momento de seleccionar el material vegetal son: que el desarrollo apical se encuentre detenido y que su

35 cambium se encuentre en actividad con una coloración translúcida. Además, se recomienda elegir material maduro, con yemas de buen tamaño y que no posea una yema apical de escaso grosor (puntiaguda); ya que si se trabaja con este tipo de púas hay una menor probabilidad de éxito en la injertación. Imagen 17. Púa con escaso desarrollo de yema terminal (uyema puntiaguda")

36 Además se recomienda elegir púas sin yemas florales, debido a que éstas representan una dificultad en el desarrollo de la nueva planta y obligan a retirar las flores una vez que la púa haya brotado. Imagen 18. De izquierda a derecha: púas 1 y 2: con escaso desarrollo de yemas, púas 3 y 4: con desarrollo adecuado para ínjertación, púa 5: con yemas florales no recomendable para Ja injertación.

37 Si se observa que las yemas presentan un escaso tamaño, se puede preparar la púa. Para esto, se cortan las yemas terminales una semana antes de la recolección, lográndose un mayor crecimiento de las laterales. Imagen 19. Despunte de púa seleccionada una semana antes a su recolección. Una vez que se cuenta con el material requerido, es el momento de recolectar las púas que serán injertadas. Esta labor se debe realizar preferentemente con bajas temperaturas y alta humedad relativa, debido al estado de hidratación en que se encuentran las púas.

38 En el proceso de recolección, se eliminan las hojas de la púa cosechada, dejando sólo los peciolos, de manera de disminuir la deshidratación. Luego, se envuelven las púas en papel absorbente húmedo y se mantienen en un contenedor con aislación térmica. Se recomienda no utilizar papel de periódico ya que puede contener elementos fitotóxicos. El material puede ser almacenado hasta por una semana antes de la injertación, si es mantenido en un refrigerador convencional. Se recomienda tener la precaución de lavar y desinfectar el material vegetal antes de iniciar el proceso de injertación, para esto se puede utilizar una solución de Hipoclorito de sodio al 1%. disminuyendo así, su carga microbiana.

39 Imagen 20. Secuencia de recolección de material. (AJ Selección del material a recolectar. (B} Púa recolectada. (C} Púa con peciolos recortados. (D} Púas envueltas en papel absorbente húmedo. Se recomienda antes de injertar, cortar 1 cm de la parte basal de la púa. La planta para absorber agua del suelo, trabaja a una presión negativa, que produce succión de una burbuja de aire en la base de la púa al momento de recolectarla. Si no se remueve este trozo de la púa antes de ser injertada, la burbuja de aire presente impedirá que se reestablezca el flujo de agua entre el injerto y el patrón.

40 4. Tipos de injertos A lo largo de la historia se han desarrollado y perfeccionado múltiples tipos de injertos, los cuales se eligen en base a la especie y a la época del año cuando se va a injertar. La principal clasificación de los injertos es sobre la base del tipo de material que se injerta: injerto de yema o de púa; y a la posición de éste en el patrón: injerto apical o lateral. Cuadro l. Injertos utilizados en frutales. Injerto de Injerto de lnjertlode yema pdaaplcal pila llllleral To escudete Hendidura apical Empalme de T invertida Empalme inglés costado Parche Empalme apical Muñón de Astilla Hendidura doble rama Cuña apical Aproximación Corona Puente En esta guía desarrollaremos con amplitud los injertos comúnmente usados en palto.

41 4.1 Injertos de púa lnierto de hendidura apical: Es el injerto de púa más utilizado en paltos, ya que se puede realizar en cualquier época del año. Se recomienda efectuarlo cuando el patrón y la púa tienen un diámetro similar. El procedimiento es el siguiente: 1 º Con una tijera se corta horizontalmente el patrón a una altura entre 10 a 15 cm desde la base. Luego, con un cuchillo injertador se hace un corte longitudinal de unos 6 cm de largo hacia abajo y por el centro del patrón. Imagen 21. Corte horizontal en patrón. Imagen 22. Corte longitudinal en el patrón.

42 2º Se elige una púa de cm de largo, que posea yemas y de un diámetro similar al portainjerto. Ésta se corta en la parte basal en un doble bisel con una extensión de 5 cm. 3º En la abertura longitudinal del patrón, se introduce la púa, procurando que coincida el cambium de la púa con el del portainjerto en, al menos, uno de los lados. Imagen 23. Púa con doble corte en bisel. Imagen 24. Púa introducida en patrón 4º Se ata la unión con cinta de injertar. Se recomienda dar como máximo 3 vueltas con la cinta, de manera que quede firme, pero con capacidad de expandirse a medida que el brote aumenta su diámetro.

43 Imagen 25. Inicio del amarre. Imagen 26. Amarra terminada. Injerto de Hendidura Apical corle longitudinal al patrón Doble Corte en bisel en la p6a Doble Corte en bisel íl fl inserción de la púa en el patrón

44 @ lnierto de hendidura doble: Se practica sobre troncos o ramas de árboles de hasta 10 cm de diámetro. Básicamente, es igual al injerto de hendidura, pero se preparan dos púas que son injertadas a cada lado de la rama o tronco, de manera de asegurar el contacto de la zona cambial. Aquí es importante tener presente que no se deben poner la púas en el centro del tronco o de la rama ya que no se producirá el contacto cambia l. Imagen 27. Púa mal insertada, no hay contacto entre el cambium de patrón y parte aérea. Imagen 28. Púa bien instalada en el patrón. Este tipo de injertos se realiza en primavera, cuando el árbol retoma su metabolismo.

45 Injerto de Hendidura Doble Corte Longitudinal en patrón Corte en doble bisel en la púa Abertura en la hendidura Inserción de dos púas en la hendidura

46 @ n jerto de empalme inglés o de lengüeta: Corresponde a un injerto apical que tiene la ventaja de entregar una mejor sujeción y más puntos de unión de las zonas cambiales, y la desventaja de requerir más tiempo y mayor precisión en la realización de los cortes. Para realizar este injerto en forma eficiente, tanto la púa como el patrón no deben tener un diámetro mayor a 1,Scm. El procedimientoeselsiguiente: 1 º En el patrón, a una altura entre 10 a 15 cm desde la base, realizar un corte en bisel de 5 a 6 cm de largo. Sobre este corte realizar otro en forma longitudinal obteniendo la lengüeta. 2º En la púa de 10 a 12 cm de largo, con 2 ó 3 yemas, realizar en su base el mismo procedimiento explicado para el patrón.

47 Imagen 29. Corte en bisel en el patrón. Imagen 30. Corte longitudinal formando la lengüeta. 3º Ensamblar la púa con el porta injerto por medio de las lengüetas, dejando en contacto el cambium de cada uno de éstos. 4!! Una vez terminado el ensamblaje, amarrar con cinta plástica, de la forma antes descrita. Imagen 31. Ensamblaje de la púa sobre el patrón. lmagen32. Amarra del injerto.

48 @ alme Inglés ii ~ ~ ~ carta en bisel 2! corta\ ~ an al patrón U Ensarnbi!'i8etas conlengu entrelazadas lúa:. corte en bisel en la base de la púa. ~ corte Amarre y encerado del injerto

49 4.1.4 Injerto de empalme de costado: Una de las ventajas de este tipo de injerto (lateral} es la posibilidad de volver a usar el patrón, ya que no es rebajado al momento de injertar. El procedimiento es el siguiente: 1 º En el costado del patrón realizar un corte inclinado de 4 a 5 cm, hasta una profundidad aproximada a la cuarta parte del grosor del tallo. Hacer un segundo corte hacia abajo de 2 cm, el cual se inicia en el último tercio del corte anterior, permitiendo remover una porción aguzada del costado del patrón y formar una lengüeta que apunta hacia arriba. Imagen 33. Corte inclinado en el patrón. Imagen 34. Segundo corte formando la lengüeta.

50 @ 2º Cortar la púa (con 2 ó 3 yemas y 10 cm de 2º Cortar la púa (con yemas y 10 cm de longitud) por un lado en bisel, de un largo que coincida con la superficie expuesta al costado del patrón, aproximadamente 4 a 5 cm. 3 Insertar la púa a un costado del patrón, procurando que al menos las zonas cambiales de un lado queden en contacto. 4º Atar firmemente con cinta y agregar cera (cuando se hace en campo) sellando todas las aberturas para proteger de la desecación. Imagen 35. Inserción de la púa en el patrón. Imagen 36. Amarra del injerto.

51 5º Al comprobar la cicatrización de la umon, cortar el patrón 5 cm aproximadamente arriba del injerto. Injerto de Empalme de Costado Remoción de Corteza Corte en bisel Inserción de la p(la Corte ) lr Corle del patrón por encima del injerto

52 4.2 lnjertodeyema A diferencia de los injertos de púas, en este tipo se usa sólo una yema de la variedad. Se requiere desprendimiento de corteza, es decir, que la planta se encuentre en crecimiento activo. No obstante, existe el injerto de astilla (utilizado ampliamente en frutales de hoja caduca, como manzano, peral, cerezo, etc.), que no requiere desprendimiento de corteza. En general los injertos de yema no son frecuentemente usados en paltos, dado que las técnicas de injertación mediante púas son más fáciles de implementar en árboles frutales de hoja perenne por un periodo de tiempo más largo durante el año.

53 4.2.1 Injerto de yema en To escudete: El primer nombre es por la forma del corte del patrón como letra "T", a su vez, el segundo nombre, es por la apariencia de "escudete" que posee la yema. Este tipo de injerto necesita que exista un cambium activo (desprendimiento de corteza). El procedimiento es el siguiente: 1 ºEl patrón, debe tener un diámetro mayor a 2,5 cm. Hacer superficialmente un corte vertical de 3 cm de longitud; luego otro horizontal, quedando el corte en forma de letra "T". Este corte se realiza a unos 10 a 25 cm del nivel del suelo. Imagen 31. Corte horizontal en el patrón. Imagen 38. Corte vertical.

54 2º Extraer la yema de la variedad con un corte horizontal a 1 cm por encima de la yema, y otro longitudinal hacia arriba que comienza 2 cm por debajo de ésta. Al trozo de yema sólo dejarle una sección de peciolo. 3º Desprender la corteza del patrón para abrir "dos aletas" e implantar el escudete entre los lados levantados, hasta que los cortes horizontales superiores calcen. Imagen 39. Yema en forma de escudete. lmagen40. Desprendimiento de la corteza en el patrón. 4º Atar fuertemente el injerto con cinta, dejando que quede a la vista el trozo de yema y su peciolo correspondiente.

55 lnferto Yema en "T" o Escudete Corte vertical Yema_ 06 Extración de la yema de la variedad T Inserción de la yema en el patrón Amarra

56 4.2.2 lnierto de parche: Es más lento y difícil que el injerto de yema en T, pero se usa ampliamente en especies de corteza gruesa, por eso se considera importante presentarlo. 1 º En el patrón, hacer dos cortes horizontales paralelos de una longitud de 3 cm, y luego dos cortes verticales paralelos de un ancho de 1,5 cm, con la finalidad de extraer un parche rectangular de corteza del porta injerto. 2º Extraer la yema de la variedad usando el mismo procedimiento descrito para el patrón, asegurando extraer un pequeño núcleo de madera con ella. 3º Reemplazar el parche del patrón por el parche de la variedad. 4º Atar con cinta injertadora.

57 Injerto de Parche Doble corte horizontal paralelo. Doble corte vertical fonnando una ventana. Extracción del parche. Inserción del parche con la yema y amarra. Navaja doble hoja.

58 4.3 Reinjertación El palto por su longevidad y vigor es especialmente apto para la reinjertación, se recupera con rapidez y vuelve a producir en un par de años. Se debe procurar reinjertar árboles vigorosos y sanos independiente de su edad (Razeto, 2008). Existen dos técnicas de reinjertación, pero ambas necesitan de un fuerte rebaje del árbol, a unos cm del suelo, conocido como rebaje "a tocón". La primera, consiste en injertar púas directamente sobre la madera (injerto de corona). En la segunda, se debe esperar que posterior al rebaje, el árbol emita nuevos brotes y sobre ellos injertar. Este procedimiento se realiza preferente en plena primavera (desde mediados de octubre a fines de noviembre). Es importante pintar la madera con pintura blanca al agua, de manera de protegerla del sol.

59 4.3.1 lnierto de corona: Se utilizan más de dos púas y el patrón puede tener hasta 50 cm de diámetro. El procedimiento para ejecutar este injerto es el siguiente: 1 º Las púas seleccionadas deben ser de 12 cm de longitud y tener 2 ó 3 yemas. A éstas, se les realiza un corte en bisel por un lado y uno más pequeño por el lado opuesto. 2º En la corteza del portainjerto, realizar cortes verticales de un largo apropiado para que entre la púa y procurar llegar hasta la madera. Repetir las veces que sea necesario en relación a las púas que se quieran injertar. 3º Insertar las púas por el lado biselado entre la corteza y la madera del patrón. 4º Atar y agregar cera a todo el injerto, incluyendo la parte superior de la púa.

60 ln erto de Corona Corte vertical en la corteza. Separación da la corteza dela madera Preparación de la púa Inserción de las púas en el patrón y encerado.

61 Observaciones: Los resultados del vigor de la reinjertación son diferentes si se hacen cercanos a la raíz, donde la producción de citoquininas promueve el desarrollo de brotes vigorosos, o bien si se hace más cercano al extremo terminal de las ramas madres, donde normalmente hay un contenido mayor de auxinas, que en el palto son producidas en abundancia en la yemas apicales. En el caso de árboles rebajados a tocón, se debe esperar un tiempo para lograr que disminuya el gran contenido de auxinas acumuladas por años en los troncos, antes de injertar. De forma similar, en el caso de paltos afectados por sequías, conviene esperar primero que se logre una recuperación de las raíces antes de injertar.

62 4.4. Otros injertos: lnierto de aproximación: Es usado con poca frecuencia en paltos, es una buena alternativa para recuperar aquellos que han perdido gran parte de sus raíces, o para conferir más vigor cuando presentan poco desarrollo en el diámetro basal del tronco. También puede ser usado como medida correctiva en caso de haber seleccionado un patrón no adecuado. Consiste en acoplar dos plantas diferentes, de un diámetro similar, las cuales deben estar plantadas cerca. Se puede dejar ambos sistemas radicales y así entregarle mayor vigor al nuevo árbol. El modo es el siguiente: 1 º En el punto en que se desea hacer la aproximación, remover unos centímetros de corteza con un poco de madera (de 2,5 a 5 cm de largo), en forma similar por el costado de ambas ramas o troncos que se espera unir.

63 2º Unir ambas caras expuestas tratando de encajar el cambium. Luego, amarrar ambos brotes o ramas con cinta de injertar y cubrir la zona todavía expuesta con cera. 3º En caso que se desee eliminar el patrón mal seleccionado, cortarlo por debajo del punto de unión, y la otra planta cortarla por encima del mismo, de manera de generar una nueva con otro sistema radical. ln erto de Aproximación Remoción de corteza Caso 1: Eliminación de patrón antiguo Amarra y encarado i Caso 2: Incorporación de nuevo sistema radical

64 @ Injerto nodriza: También es utilizado para aportar un nuevo sistema de raíces a un árbol que se encuentra con su sistema radical poco desarrollado. Para realizar este injerto se deben seguir los siguientes pasos: 1 ºPlantar a no más de 50 cm del árbol afectado la nueva planta. Se recomienda que el nuevo árbol se plante inclinado, de manera de hacer menos presión en la posterior unión. Imagen 4l. Plantación de planta nodriza. 2º En el árbol afectado, por sobre la línea de injertación, hacer un corte con forma de T invertida, realizando una incisión transversal de 3 cm y una longitudinal de 5 cm de largo.

65 3º En la nueva planta se debe calcular el largo apropiado del eje principal para hacer calzar el extremo terminal con la incisión realizada en el árbol afectado, y posterior a esto hacer un corte en bisel alargado de 5 cm de longitud para introducir este extremo en la T invertida. 4º Amarrar la unión y aplicar la cera. Imagen 42. Injerto nodriza instalado en campo.

66 Plantación inclinada de Planta nodriza. Realizaci6n de corte en Nodriza y árbol afec:lado. Nodriza Inserción da la Nodriza en la T invertida

67 4.4.3 Injerto de puente: Este injerto es usado para reparar la corteza lesionada de un tronco (sin daño radical) o para superar problemas de incompatibilidad entre dos plantas injertadas. Se realiza a inicio de primavera, cuando el árbol se encuentra en crecimiento activo y la corteza se desprende con facilidad. Para realizar este injerto se deben seguir los siguientes pasos: 1 º Recorta la herida del tronco hasta llegar a tejido sano. Arriba y abajo de la herida hacer incisiones (muesca) en la corteza del mismo diámetro que las púas a injertar, a intervalos de 7 cm. 2º Cortar en bisel las púas a cada extremo. 3º Insertar las púas en las muescas realizadas previamente, fijadas en sus dos extremos con clavos. Cubrir con cera para injerto. Cuando se introduce una tercera parte entre el patrón y la variedad, este componente también tiene importancia en el comportamiento fisiológico

68 y productivo de la combinación. Su influencia sobre el cultivar es variable, pero menor que la ejercida por el patrón, dependiendo en gran medida de la longitud de la parte intermedia injertada. Injerto de Puente Remoción del tejido dañado Realización de muescas en corteza. corte en bisel en cada extremo de la púa Inserción de las púas en las muescas

69 S. Recomendaciones para el éxito en la injertación Procurar seleccionar una variedad y un portainjerto compatibles entre sr. La compatibilidad se entiende como el reconocimiento entre dos partes de plantas distintas con la posibilidad de generar un nuevo individuo. Está altamente influenciada por las relaciones botánicas entre las especies, aumentando las probabilidades de éxito al injertar plantas que tengan un parentesco cercano. Existen casos en que esto no ocurre, por ejemplo al injertar palto (Perseo americana) sobre lingue (Perseo lingue), la unión final no se logra de forma exitosa.

70 Cuadro 2: Compatibilidad entre plantas del género Persea. Frolich et al. (1958). : compatible : incompatible D : no testeado

71 5.2. Mantener la higiene de herramientas y del material vegetal. Según descripción incluida en el primer capítulo Poseer una fuente de material vegetal exclusiva y controlada ("plantel madre"). Los "árboles madres" para propagación son un conjunto de plantas de origen, identidad genética y calidad fitosanitaria reconocidas, que se destinan a la obtención de púas y yemas para la reproducción Injertar cuando las condiciones climáticas sean favorables. Las condiciones de temperatura y humedad son fundamentales para lograr un buen prendimiento. Para el desarrollo de brotes del palto, las condiciones ideales de temperatura varían entre 16-26ºC, con una humedad relativa superior al 55%. Por lo que conviene injertar en una época del año cuando se den dichas condiciones ambientales, o bien implementar sistemas de control de temperatura y humedad en invernaderos.

72 S.S. Mantener la polaridad del injerto en relación al patrón. En caso contrario, es posible que la unión se mantenga viva por un tiempo, pero su tamaño inicial probablemente será menor y disminuirá el porcentaje de yemas brotadas Extremo Distal de la Púa Extremo proximal del Patrón Ilustración 3. Polaridad en un injerto de púa apical

73 5.6. Incluir un peñodo de aclimatación de las plantas injertadas. Si la injertación se realiza en un invernadero bajo condiciones ambientales controladas, se recomienda incluir una etapa intermedia antes de llevarlas a campo, de manera que enfrenten de mejor forma las posibles condiciones extremas. Para tales efectos, se utiliza malla tipo raschel o semi-sombra que impide el paso de la luz directa, y si hay riesgos de temperaturas bajo cero, se puede utilizar una malla anti heladas que disipe estos peligros Eliminar la amarra. Se debe realizar cuando el nuevo brote tenga alrededor de 10 cm de largo. Esta labor es fundamental para evitar estrangulamientos y deformaciones en el punto de unión, lo que puede provocar problemas en el desarrollo de la parte aérea, y en casos extremos, la muerte del injerto a pesar de haberse logrado un prendimiento exitoso.

74 5.8. Eliminar los brotes del portainjerto, ya que éstos compiten por fotoasimilados con el brote en desarrollo. Sin embargo, se considera beneficioso para la planta dejar un brote (que contenga una hoja} bajo el punto de unión de injertación, llamado tira-savia. Éste, como su nombre lo indica, es el responsable de movilizar azúcares hacia las regiones de baja presión de turgencia, en este caso, la yema en crecimiento Realizar el entutorado de la planta injertada, para asegurar un crecimiento adecuado una vez que ésta brote, y así impedir que se desgarre producto del viento o acción mecánica. Esta labor se debe hacer cuando el brote alcance una longitud de aproximadamente cm, procurando que la amarra no estrangule ni curve la planta.

75 6. Nuestra experiencia. En el mundo se sigue investigando sobre cómo lograr el éxito en la unión entre patrón y variedad, publicándose diversos estudios que indican nuevos factores que favorecen las técnicas de injertación. El Instituto de Investigaciones Agropecuarias, no ajeno a este interés y en el mareo del proyecto udiseño de nuevas tecnologías de injertación de brotes y raíces de paltos para anticipar su proceso de recuperación del daño producido por heladas y sequías monitoreado en forma satelital NDVl-SNIT", que busca diseñar tecnologías para la formación de nuevas raíces a partir de brotes que se originen de injertaciones en el tronco, de manera de aportar una nueva masa radical que potencie la recuperación de huertos afectados por heladas y/o sequías, ha realizado pruebas que compartimos a continuación:

76 @ 6.1. Las reservas en el material injertado tendrían una influencia positiva en el prendimiento. Diversos estudios se han realizado con aplicaciones de azúcares (sacarosa, melaza) evidenciando un aumento en el porcentaje de prendimiento. Los ensayos preliminares han mostrado un efecto positivo al aplicar sacarosa al 10% en los injertos realizados. Imagen 43. Injerto de palto cicatrizado al ser asperjado con 10% de sacarosa. IN/A La Cruz. Se ha observado un mayor porcentaje de prendimiento con púas de brotes silépticos vigorosos en comparación con brotes prolépticos, lo cual puede estar asociado a una mayor movilización de nutrientes hacia tejido nuevo en desmedro de la acumulación en tejido de reserva.

77 6.2. La activación de yemas dormidas en la parte inferior del tronco se logra mediante incisiones de 5 mm de profundidad en la corteza en forma horizontal, en una posición de 1 a 2 cm sobre las yemas que se pretenden activar; de esta forma se detiene el flujo de auxinas que mantiene a la yema impedida de iniciar su desarrollo. Esta tecnología se complementa con la aplicación de citoquininas que estimulan el desarrollo de yemas El desarrollo de brotes blancos, sin clorofila (etiolados) se logra si éstos se mantienen en condiciones de oscuridad desde el inicio de su desarrollo. Los tratamientos de oscuridad y uso de auxinas no logran activar in vitro procesos de pérdida del color verde, requerido para el posterior desarrollo de raíces, si se realizan con posterioridad al desarrollo del brote.

78 Imagen 44. Estado final del tratamiento de etiolación en un brote desde el comienzo de su crecimiento. Imagen 45. Estado final del tratamiento de etiolación en un brote ya desarrollado.

79 Glosario de términos Aclimatación: (plant acclimation) Proceso de adaptación de la planta frente a cambios ambientales. En el caso de los plantines de palto, corresponde a la fase intermedia entre el vivero y el asentamiento al aire libre, que comúnmente recibe el nombre de sombreadero. Apoplasto: (apoplast) Espacio intercelular sin vida ubicado entre las paredes y los espacios aéreos, que normalmente constituye tejido vascular de transporte de agua. Auxinas: (auxin) Grupo de reguladores de crecimiento que funcionan como fito-hormonas, pero sin tener una función específica, como en el caso de las hormonas del reino animal. Se producen en mayor abundancia en las yemas apicales de los brotes, desde donde se trasladan hacia la base inhibiendo el desarrollo de yemas laterales, lo que le da al palto la característica de fuerte dominancia apical, determinando

80 desarrollo típico de la parte aérea o dosel del palto. Callo: (plant callus) Grupo de células de tipo parénquima que se desarrollan sin características específicas o diferenciación, para contribuir a reparar cortes o heridas que se producen en cualquier parte de la planta. Cambium: (cambium) Grupo de células que se transformarán en xilema, para transportar agua y minerales, y en floema para transportar azúcares y reguladores de crecimiento. En la injertación, para que se logre el prendimiento y posterior brotación, es necesario poner en contacto el cambium de la púa con el cambium del porta injerto. Citoplasma: (eytoplasm) Espacio ubicado entre la membrana de la célula y su núcleo. Contiene importantes estructuras, como organelos, vesículas e inclusiones. Entre éstas, destacan las vacuolas, m itocondrias y cloroplastos,

81 encargados de percibir cambios ambientales exteriores. Compatibilidad: (compatibility) En injertación se entiende como la capacidad de dos plantas distintas, de formar mediante su unión, un nuevo ejemplar. Corteza: (cortex) Grupo de células, localizadas en la parte externa junto al cambium. Fitoalexinas: (phytoalexin) Compuestos antimicrobianos que se acumulan en plantas y que actúan como un método de defensa natural. Son sintetizados después de una infección microbiana. Fotosintatos: (photosynthate) Corresponden a los productos de la fotosíntesis, principalmente azúcares utilizados como fuentes de energía en el metabolismo de las células vegetales.

82 Gen: (gen) Corresponde a un segmento de ADN, que contiene la información de cómo producir proteínas con funciones específicas. Lignificación: (lignification) Acto de acumular lignina, componente celulósico de la madera, en las paredes de la célula, provocando un aumento de volumen y de rigidez en ésta. Parénquima: (parenchyma) Grupo de células complejas, poco diferenciadas y capaces de reanudar la actividad meristemática (formando nuevos tejidos vegetales). Plasmodesmo: (plasmodesmata) Unidades continuas de citoplasma que mantienen interconectadas las células, atravesando las paredes celulares. Portainjerto o patrón: (rootstock) Estructura vegetal que recibirá y acoplará a si misma el injerto (o parte aérea). Posee el sistema radical que dará sustento físico, proporcionará los

83 nutrientes y absorberá el agua desde el suelo a la planta. Proléptico: (proleptic) Brote que se origina desde una yema en reposo. Corresponde a un brote corto que cuando vuelve a brotar origina un nuevo brote proléptico. Se puede reconocer por elanillodeyemasen su base. Púa: (scion) Material vegetal herbáceo, semileñoso o leñoso, que contiene una o más yemas en su estructura, y que será usado como propágulo (material inicial de propagación). Siléptico: (sylleptic) Brote vigoroso que se genera en forma simultánea con el principal que lo origina, sin evidencia de formación previa yemas en reposo. Simplasto: (symplast) Espacio constituido por el citoplasma de las células vivas contiguas, que presenta continuidad a través de los plasmodesmos.

84 @ Referencias bibliográficas Aloni, B., Cohen, R., Karni, L., Aletas, H., & Edelstein, M. (2010). Hormonal signaling in rootstock-scion interactions. Scientia Horticulturae, 127(2), Calkins G. R Top-Grafting the Avocado Tree. California AvocadoAssociation Yearbook 17: Collado J.M El injerto de cítricos en campo. Revista de información técnica. Comun itat Valenciana Agraria. Nº 19. Cookson S., Moreno C., Hevin C., Mendome N., Delrot S., Trossat Magnin C., Ollat N Graft u nion formation in grapevine induces transcriptional changes related to cell wall modification, wounding, hormone slgnallng, and secondary metabollsm. Journal of Experimental Botany2013, May22. Digby, J. and P.F. Wareing The effect of applied growth hormones on cambial division a nd the differentiation of the cambial derivatives. Ann. Bot. 30 (3) Frollch E., Schroeder C., Zentmyer G Graft compatlblllty ln the genus Persea. california Avocado Society Yearbook 42: Gardiazabal, F. y Rosenberg, G El cultivo del palto. Quillota, Universidad Católica de Val paraíso, Facultad de Agronomía. 201 p. Geydan T., Melgarejo L Plasmodesmata: Structure and functlon. Acta Blológlca Colomblana. Septiembre 2006.

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