Proceso de Obtención de Plantas Madres Iniciales de Fresa

Transcripción

1 1. Introducción 2. Reglamento Técnico de Control y Certificación de Plantas de Viveros y Frutales. 3. Proceso de obtención de plantas madres iniciales 3.1. Selección material 3.2. Aislamiento y cultivo de meristemos 3.3. Aclimatación

2 Proceso de Obtención de Plantas Madres Iniciales de ffesa/ [Soria, C. et. al.]. Sevilla. Consejería de Agricultura, Pesca y Desarrollo Rural, Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera, p. Formato digital (e-book) - (Producción Agraria) Cultivo de meristemos - Fresa Planta certificada Planta comercial Este documento está bajo Licencia Creative Commons. Reconocimiento-No comercial-sin obra derivada. Edita JUNTA DE ANDALUCÍA. Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera. Consejería de Agricultura, Pesca y Desarrollo Rural. Sevilla, Abril de Autoría: Carmen Soria 1 Juan Jesús Medina Mínguez 2 Luis Miranda Enamorado 3 M. Teresa Ariza Fernández 1 Josefa Gálvez Farfán IFAPA Centro de Churriana 2 IFAPA Centro de Huelva 3 IFAPA Centro Las Torres-Tomejil 4 Técnicos contratados

3 1.- Introducción. Imagen 1. Vivero de plantas de fresa Imagen 2. Campo de producción de fresa El cultivo de la fresa en España esta soportado por dos grandes pilares profesional y geográficamente diferenciados. El cultivo propiamente dicho para la obtención de frutos para consumo en fresco en los mercados nacionales y europeos y la producción de plantas en los llamados viveros de altura. Los viveros de altura se sitúan en zonas elevadas, llanas, y arenosas de Castilla y León (40-42º de latitud Norte). En estos viveros se dan las condiciones agro-climáticas necesarias para la multiplicación vegetativa de las plantas de fresa que posteriormente serán cultivadas en las zonas de producción. En los viveros se garantiza una correcta madurez fisiológica del material que viene a significar una adecuada diferenciación a yemas de flor y una equilibrada entrada en producción en los campos de fructificación. Los campos de producción se sitúan mayoritariamente en Huelva, donde se realiza un cultivo intensivo en ciclo anual de plantas frescas de variedades de día corto procedente de viveros de altura. La plantación se realiza en otoño, sobre lomos con acolchado plástico opaco, en dos filas de plantas, con equipamiento de riego localizado y sistema de fertirrigación, bajo cubierta plástica tipo macro-túnel. 3/12

4 1.- Introducción. La planta mayormente comercializada por el sector productor de fresa es la de categoría 'Certificada'. El concepto de Certificación engloba un conjunto de operaciones de control que se realizan oficialmente para constatar que la producción de un material vegetal determinado cumple con los requisitos establecidos para una determinada categoría. El primer paso para la producción de este tipo de plantas es el desarrollo del material de partida. En este sentido, en este documento se explica la técnica que desde el IFAPA se ha puesto a punto para la obtención de plantas madres iniciales de fresa. Imagen 3. Plantas fresca a raíz desnuda de fresa arrancadas de vivero para su comercialización Este material inicial es el que se multiplicará en viveros, de acuerdo con el Reglamento Técnico de Control y Certificación de Plantas de Viveros de Frutales (Real Decreto 929/95 del 9 de junio de 1995) y se certificará por las autoridades competentes de la Comunidad Autónoma correspondiente. 4/12

5 2.- Reglamento Técnico de Control y Certificación de Plantas de Viveros y Frutales. Producción de planta de fresa certificada. El Reglamento Técnico de Control y Certificación de Plantas de Viveros de Frutales (Real Decreto 929/95 del 9 de junio de 1995), establece una importante normativa para el control de la producción de plantas de fresa y su proceso de certificación. Si bien, desde el Ministerio de Agricultura y Pesca, Alimentación y Medio Ambiente se está trabajando en la redacción de un protocolo común a nivel europeo, hasta la fecha, los pasos específicos para la producción de plantas de categoría certificada, que es la más utilizada en el sector productor de Huelva, son los siguientes: - Obtención de material inicial (Planta madre inicial, material de partida, o F0) Imagen 4. Planta de fresa con frutos - Obtención de material de base - Obtención de material certificado 5/12

6 3.- Proceso de obtención de plantas madres iniciales. A la hora de desarrollar plantas comerciales certificadas de una variedad de fresa determinada se ha de iniciar el proceso con la obtención de plantas madres iniciales de esa variedad. Este proceso de obtención de plantas madres iniciales tiene como objetivo el crecimiento de las mismas en condiciones óptimas, tanto desde el punto de vista sanitario como fisiológico. Las plantas madres deben estar exentas de virus y otros organismos patógenos. La técnica que se lleva a cabo en el IFAPA para la obtención de plantas madres iniciales de fresa consta de los siguientes pasos: Imagen 5. Planta de fresa estolonando - Selección de material (plantas candidatas) - Aislamiento y cultivo de meristemos - Aclimatación 6/12

7 3.1.- Selección del material. El primer paso a realizar es la selección de plantas candidatas de la variedad. De estas plantas candidatas, se toman estolones que serán el material de partida, para la obtención de plantas madres iniciales. Como fuente de explantos se utilizan meristemos apicales de los estolones de las plantas candidatas crecidas en invernadero o campo. Imagen 6. Planta con estolones En las variedades de día corto las diferentes fases de su desarrollo tienden a ser separadas: floración, fructificación y emisión de estolones, en esta secuencia. La producción de estolones se produce hasta que las horas de luz se acortan a 12/14 horas. 7/12

8 3.2.- Aislamiento y cultivo de meristemos. A este proceso se le conoce popularmente como meristemación. La metodología a seguir es la siguiente: - Desinfección: Desinfección se cortan puntas de estolones de 1-1,5 cm, se envuelven en gasa estéril y se someten a un proceso de desinfección superficial sumergiéndolas en una solución de hipoclorito sódico, al 0,5% durante 10 min. A continuación se lavan (5 min) tres veces con agua estéril. - Aislamiento del meristemo: meristemo con ayuda de pinzas y bisturí se procede a ir eliminando los primordios foliares, hasta visualizar y aislar el meristemo. Este proceso se realiza bajo microscopio binocular en cabina de flujo laminar en condiciones asépticas y con luz fría para impedir la deshidratación del meristemo. Los meristemos deben ser de pequeño tamaño (0,5 a 1 mm) para asegurar la ausencia de virus. Imagen 7 y 8. Aislamiento de meristemos 8/12

9 3.2.- Aislamiento y cultivo de meristemos. - Cultivo: Cultivo los meristemos aislados se transfieren, individualmente, a un tubo de cultivo con medio nutritivo. La siembra en el medio de cultivo debe ser inmediata para evitar la desecación. Esta fase tiene una duración de 5-6 semanas. Durante este periodo los tubos permanecen en incubación en cámara de cultivo, a 25ºC, con fotoperiodo de 18 horas luz / 6h oscuridad y con una intensidad lumínica de 40 µe m-2 s-1. Medio de cultivo: Micronutrientes y vitaminas MS (descritos en Murashine y Skoog, 1962) Sacarosa 20 gr/l Macronutrientes N30K (descritos en Margara, 1978): 0,1 mg/l BA (Benziladenina) 1 mg/l IBA (Ácido indolbutírico 0,1 mg/l GA3 (Ácido giberélico) 6 g/l Bacto-agar para solidificar el medio Imagen 9 y 10. Cultivo in vitro De cada meristemo se obtiene una única planta in vitro; no se realiza ninguna multiplicación del material. 9/12

10 3.3.- Aclimatación. Tras 5-6 semanas el material pasa a la fase de aclimatación. Preparación del sustrato para la aclimatación: se utiliza una combinación de turba enriquecida y perlita en proporción 1:1. Las plántulas se sacan de los tubos, se lavan con agua y se trasplantan a bandejas de semillero. Las bandejas se colocaban en bancadas, con perlita humedecida en la base, cubiertas con un túnel de polietileno trasparente, en un invernadero climatizado cerrado con malla anti-insectos (insectproof), donde se asegura una humedad relativa entorno al 90 %. Los túneles permanecen cerrados durante 2 semanas, durante las cuales se humedece periódicamente la perlita de la mesa para mantener la humedad. Transcurrido este periodo, el plástico de cubierta del túnel se va retirando poco a poco (día a día) hasta que el material esté totalmente aclimatado. Imagen 11 y 12. Plántulas en mesa de aclimatación 10/12

11 3.3.- Aclimatación. Transcurridas tres semanas en bancadas abiertas, las plantas se trasplantan a macetas y se mantienen dentro del invernadero (insect-proof). El sustrato utilizado es una combinación de turba, arena de río lavada y perlita (7:2:1). Las plantas madres iniciales deben estar exentas de virus y otros organismos patógenos. Si bien esta técnica fue desarrollada para asegurar la ausencia de virus, una vez aclimatas las plantas se realiza un muestreo aleatorio de plantas que son testadas (test ELISA) para confirmar el correcto estado fitosanitario. Como resultado de la aplicación del protocolo comentado se obtienen las plantas madres iniciales (F0) para su utilización. Imagen 13 y 14. Plantas madre (F0) El uso de estas plantas madres es el desarrollo, a partir de ellas, de planta comercial, fundamentalmente, certificada. 11/12

12 Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera Avenida de Grecia s/n Sevilla (Sevilla) España Teléfonos: / Fax: webmaster.ifapa@juntadeandalucia.es Este trabajo se ha desarrollado dentro del marco del proyecto TRA cofinanciado al 80% por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional, dentro del Programa Operativo de Andalucía