Maura Díaz, Raúl Romero, Luis González

Transcripción

1 Maura Díaz, Raúl Romero, Luis González

2 INTRODUCCIÓN La piña (Ananas comosus L. Merr.) es la especie más importante de la familia Bromeliaceae, originaria de Sudamérica; se encuentra en forma natural al sur de Brasil, norte de Argentina y Paraguay y en los bordes meridionales de Amazonia.

3 OBJETIVO GENERAL: OBJETIVOS Evaluar efectos de la bencilaminopurina y ácido indolbutírico sobre los meristemas apicales de piña (Ananas comosus L. Merr. en el establecimiento in vitro OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Determinar el porcentaje de oxidación de meristemas apicales Determinar el porcentaje de meristemas apicales contaminados. Determinar el porcentaje de sobrevivencia de meristemas apicales sembrados

4 METODOLOGÍA Los ensayos se llevaron a cabo en el Laboratorio del Área de Biología de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Asunción, San Lorenzo, Paraguay. Para el experimento se utilizó el Diseño en Bloques Completos al Azar (DCA), 20 meristemas por cada tratamiento, totalizando 80 unidades experimentales.

5 Medio de cultivo METODOLOGÍA Sales de Murashige & Skoog (MS) (1962) enriquecido con 30 g/l de sacarosa y 8 g/l de ágar con ph ajustado a 5,7. Los medios de cultivos fueron esterilizados en autoclave a una temperatura de 121 ºC a 1 atmósfera de presión durante 20 minutos. Procedimiento Selección del material y extracción de meristemas (80 meristemas provenientes de hijuelos de cm) Desinfección de los meristemas (alcohol etílico 70% por 5 minutos, luego hipoclorito de sodio (NaOCl) al 3% por 20 minutos) Establecimiento de los meristemas en el medio de cultivo (sembrados y puestos en condiciones de oscuridad durante 5 días a una temperatura constante de 25 C)

6 METODOLOGÍA Variables Tratamientos Porcentaje de oxidación (%) T1: testigo, (MS) Porcentaje de contaminación T2: MS + 2ppm de (%) bencilaminopurina (BAP) Porcentaje de sobrevivencia T3: MS + 0,5ppm de Ácido (%) indolbutírico (AIB) T4: MS + 2ppm de bencilaminopurina (BAP) + 0,5ppm de la hormona Ácido indolbutírico (AIB)

7 METODOLOGÍA La recolección de datos se realizó a los 15, 30 y 45 días posteriores a la siembra. El análisis estadístico utilizado para la evaluación de las variables fue el análisis de varianza ANAVA con un nivel de significancia del 5% y para detectar diferencias significativas entre los tratamientos, se realizó la comparación entre medias mediante el test de Tukey al 5% de probabilidad

8 RESULTADOS

9 Porcentaje de oxidación Oxidación de meristemas de piña, Ananas comosus (L.) Merr, sembradas in vitro. TRAT. MEDIA T1 MS 8 A T3 MS + 0,5 ppm AIB 8 A T4 MS + 2ppm BAP+ 0,5 ppm AIB 8 A T2 MS + 2ppm BAP 6,3333 A Error 0,4410 CV 10,07

10 Tratamientos MS + 2ppm BAP+ 0,5 MS + 0,5 ppm AIB MS + 2ppm BAP MS 45 Dias 30 Dias 15 Dias 0% 10% 20% 30% 40% 50% Porcentaje de oxidación de Ananas comosus (L.) Merr, sembrados in vitro.

11 Porcentaje de contaminación Contaminación de meristemas de piña, Ananas comosus (L.) Merr, sembradas in vitro. TRAT. MEDIA T3 MS + 0,5 ppm AIB 10,3333 A T1 MS 9,6667 A B T4 MS + 2ppm BAP+ 0,5 ppm AIB 9 A B T2 MS + 2ppm BAP 8 B Error 0,4615 CV 8,64 Medias con letras distintas difieren significativamente entre sí por la prueba de Tuckey al de 5% de probabilidad de error. Medias con letras comunes no difieren significativamente entre sí por la prueba de Tuckey al de 5% de probabilidad de error.

12 Tratamientos MS + 2ppm BAP+ 0,5 ppm AIB MS + 0,5 ppm AIB MS + 2ppm BAP 45 Dias 30 Dias 15 Dias MS 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% Porcentaje de contaminación de Ananas comosus (L.) Merr, sembrados in vitro. San Lorenzo, 2014.

13 Contaminación La contaminación fue principalmente de origen fúngico, los géneros Penicillum spp.y Aspergillus spp. fueron identificados en los mismos

14 Porcentaje de sobrevivencia Sobrevivencia de meristemas de piña, Ananas comosus (L.) Merr, sembradas in vitro. TRAT. MEDIA T2 MS + 2ppm BAP 5,6667 A T4 MS + 2ppm BAP+ 0,5 ppm AIB 3 A B T1 MS 2,3333 B T3 MS + 0,5 ppm AIB 1,6667 B Error 0,5693 CV 31,14 Medias con letras distintas difieren significativamente entre sí por la prueba de Tuckey al de 5% de probabilidad de error. Medias con letras comunes no difieren significativamente entre sí por la prueba de Tuckey al de 5% de probabilidad de error.

15 Tratamientos MS + 2ppm BAP+ 0,5 MS + 0,5 ppm AIB MS + 2ppm BAP MS 45 Dias 30 Dias 15 Dias 0% 10% 20% 30% 40% 50% Porcentaje de sobreviviencia de Ananas comosus (L.) Merr, sembrados in vitro.

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17 CONCLUSIONES En las condiciones del experimento se concluye que: Existió un alto nivel de contaminación por hongos de los géneros Aspergillus spp. y Penicillium spp. en todos los tratamientos que estuvo en el orden del 50% y 60%. Los porcentajes de oxidación en los explantes también fueron elevados y estuvieron en el orden del 35% 45% El protocolo de establecimiento obtuvo niveles de sobrevivencia de meristemas sembrados que fue de apenas de 5% en el T1 (MS) y 20% en el T2 (MS + 2ppm BAP). No pudieron observarse efectos en los tratamientos la utilización de las hormonas para el establecimiento de los meristemas

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19 CENTRO MULTIDISCIPLINARIO DE INVESTIGACIONES TECNOLÓGICAS (CEMIT - UNA). Agradecimientos