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1 Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Cátedra de Microbiología, Parasitología e Inmunología Area I: Microbiología e Inmunología

2 Estructura bacteriana

3 Constantes Flagelos Pili Nucleoide Ribosomas Variables Pared celular Membrana celular Nucleoide Ribososmas Mesosomas Membrana Pared cápsula Cápsula Flagelos Fimbrias Pili Esporas plasmática celular

4 Bicapa lipídica Separa el medio interno del externo Participa del intercambio de agua y nutrientes

5 Estructura rígida Otorga morfología a la bacteria Participa del intercambio nutrientes Está ausente en los Mycoplasmas Posee importantes estructuras con función antigénica y de adhesinas (Porinas, ácidos teicoicos, ácidos lipoteicoicos, lipopolisacárido, antígeno somático O)

6 Pared de Mureína Membrana celular

7 Membrana externa Periplasma Membrana celular

8 Invaginaciones de la membrana plasmática Participan de la fosforilación oxidativa Participan de la división celular Mantienen unido al ADN bacteriano Pared bacteriana Membrana celular Citoplasma Genoma bacteriano

9 Estructura proteica Otorgan movilidad a las bacterias Albergan al Antígeno H Puede ser uno solo o varios

10 Estructura proteica Permiten la adherencia a la célula del huésped Albergan al Antígeno F

11 Estructura proteica Permiten la transferencia de material genético entre bacterias Son receptores para bacteriófagos

12 Puede ser polisacárida o proteica Albergan al Antígeno K y otros Protege a la bacteria de la fagocitosis Permite la adherencia entre bacterias y a la célula del huésped

13 Son formas de resistencia presente sólo en algunas bacterias Se forman ante un ambiente adverso Perduran períodos extensos en el ambiente Se transforman en célula vegetativa (germinan) al restituirse las condiciones favorables

14

15 Genética bacteriana

16 GENOMA BACTERIANO ADN cromosómico - Sin membrana nuclear - Doble cadena circular - Superenrollada (Topoisomerasas) - Unida a mesosomas - Unida a proteínas no histonas

17 Funciones del ADN 1. Confiere a la bacteria todas sus características, codificadas en los genes. 2. Interviene en los mecanismos de transferencia genética de madre a hija. 3. Su duplicación trae aparejada la división celular. 4. Regula la síntesis proteica.

18 - GENOMA BACTERIANO ADN extracromosómico - Plásmidos - Autorreplicantes - Tamaño y número variable - Heredables y Transferibles - Codifican funciones no esenciales Factor F (Pili sexuales) Factores R (Resistencia a antibióticos) Plásmidos Col (Bacteriocinas) Plásmidos de virulencia (Toxinas, adhesinas,etc) Plásmidos metabólicos (Enzimas)

19 ARN BACTERIANO ARN mensajero (ARNm): tripletes ARN ribosómico (ARNr): 30S + 50S = 70S ARN de transferencia (ARNt)

20 Variaciones fenotípicas Cambios en las características de una bacteria sin que se altere su genoma Pueden ser Morfológicas: tamaño, forma, flagelos Cromógenas: producción o no de pigmentos Enzimáticas: producción de enzimas inducibles Patogénicas: capacidad de producir enfermedad

21 Variaciones genotípicas Ocurren al azar Baja frecuencia Heredables No siempre se expresan Mutaciones Sustitución de bases Adición de bases Pérdida de bases Alteración de muchos pares de bases Translocación

22 Variaciones genotípicas 5 -T A C A T G -5 Mutaciones Mutación Replicación normal A A C T T G T A G A T C T A T A T A T A C A T G Transcripción A A C U A G U A U U A C Asparagina Stop Tirosina Tirosina Translación Proteína Proteína Proteína Proteína defectuosa incompleta normal normal

23 Variaciones genotípicas Mutaciones Morfológicas: flagelos, cápsula, etc. Bioquímicas: cambios en el metabolismo. Patogénicas: alteraciones en la virulencia. Letales: determinan la muerte bacteriana. Sensibilidad: alteración del sitio de unión de bacteriófagos o antibióticos.

24 Transferencia de material genético Conjugación: Se realiza a través de los pili sexuales. Transformación: captación de ADN libre. Transducción: a través de un bacteriófago. Conversión: Incorporación del ADN del bacteriófago al ADN bacteriano.

25 Transferencia de material genético Conjugación Transducción Transformación

26 Reacción n en cadena de la polimerasa (PCR) Desnaturalización Hibridación Elongación Producto del 1 er ciclo Productos de n ciclos

27 Fisiología bacteriana

28 Nutrición n bacteriana Exigentes (Haemophilus, Neisseria) No exigentes (Pseudomonas, Escherichia) Energéticamente exigentes (Chlamydias) Nutrientes necesarios: Inorgánicos: H 2 O -C -N -S -Fe -P Orgánicos: Azúcares - Ácidos - Amino-ácidos - Purinas y Pirimidinas - Vitaminas

29 Absorción n de nutrientes Difusión pasiva o facilitada Difusión pasiva Difusión simple o facilitada Digestión previa Almidón: amilasas Proteínas: proteasas DNA: Desoxirribonucleasas Gelatina: gelatinasas Grasas. Lipasas, fosfolipasas

30 Requerimientos de O 2 y CO 2 Aerobios estrictos: 21% de oxígeno Pseudomonas, Mycobacterium Microaerófilos: 5% de oxígeno Campylobacter, Helicobacter Anaerobios obligados: 0% de oxígeno Fusobacterium, Clostridium Anaerobios aerotolerantes: 0,5% de oxígeno Actinomyces, Propionibacterium Anaerobios facultativos: crecen con o sin oxígeno Streptococcus, Enterobacteriaceae Capnófilos: necesitan o crecen mejor con 5-10% de CO 2 Neisseria, Haemophilus

31 Requerimientos de ph Neutrófilas = 5,5-8,0 Staphylococcus Acidófilas = 0,0-5,5 Lactobacillus Alcalófilas = 8,0-11,5 Vibrio

32 Requerimientos de temperatura Psicrófilas = 0-20ºC Pseudomonas, Listeria Mesófilas = 20-45ºC Staphylococcus, Streptococcus Termófilas = 55ºC o más No patógenas Estenotérmicos = 35-36ºC Neisseria Euritérmicos = 0-44ºC Enterococcus

33 Respiración n aeróbica Ocurre en presencia de oxígeno (Oxidación) Productos tóxicos: O 2 - y H 2 O 2 Bacterias aerobias y anaerobias facultativas en aerobiosis

34 Respiración n anaeróbica Ocurre en ausencia de oxígeno Aceptores finales de electrones: iones inorgánicos No se liberan productos tóxicos Bacterias anaerobias obligadas y anaerobias facultativas en anaerobiosis

35 Fermentación n anaeróbica Ocurre en ausencia de oxígeno Los aceptores de electrones son moléculas orgánicas Productos con alta energía: ácido láctico, propiónico, butírico, acético, alcohol etílico, etc. Bacterias anaerobias y anaerobias facultativas en anaerobiosis

36 División n Bacteriana

37 División n Bacteriana 1 Célula bacteriana 1 colonia Escherichia coli División: 20 minutos Colonias: 1 día Clostridium botulinum División: 35 minutos Colonias: 2 días Mycobacterium tuberculosis División: 12 horas Colonias: 30 días

38 Crecimiento y muerte bacterianos Número de bacterias vivas Latencia Exponencial Estacionaria Muerte Tiempo

39 Diagnóstico microbiológico

40 1er. postulado de Koch Los microorganismos deben estar presentes en todos los pacientes con la misma enfermedad

41 Diagnóstico Microbiológico Directo Observación microscópica Aislamiento del germen

42 Realizar un extendido y fijar a la llama Cubrir con Cristal Violeta Gramnegativas Decolorar con alcohol + acetona PMN Contracolorear con fucsina Grampositivas Observar al microscopio

43 Bacilos ácido alcohol resistentes Gran cantidad de lípidos en su pared Mycoplasmas Porque carecen de pared celular Treponemas, Chlamydias y Rickettsias Espesor menor a 0,2 µ

44 Realizar un extendido y fijar a la llama Cubrir con fucsina de Ziehl y calentar Decolorar con alcohol + HNO 3 al 3% Contracolorear con azul de metileno Observar al microscopio

45 Clasificación bacteriana Morfología Estructura Capacidad de tinción Metabolismo Relación G-C

46 Morfología Cocos Bacilos Cocobacilos Helicoidales Pleomórficos

47 Neisseria meningitidis

48 Streptococcus pyogenes

49 Escherichia coli

50 Lactobacillus sp.

51 Staphylococcus aureus

52 Actinomyces israelii

53 Clostridium tetani

54 2do. postulado de Koch Los microorganismos deben ser obtenidos en forma de cultivos puros a partir de la muestra del paciente

55 Aislamiento primario Muestras clínicas Medio de cultivo

56 Medios de Cultivo Conjunto de sustancias que permiten el crecimiento de los microorganismos bajo determinadas condiciones de incubación (Tiempo, temperatura y oxígeno)

57 Aislamiento primario Siembra por estrías Inicio de la siembra Incubar 24 hs a 37ºC Final de la siembra

58 Aislamiento primario Siembra por estrías Inicio de la siembra Final de la siembra

59 Diagnóstico Microbiológico Indirecto Detección de antígenos Detección de anticuerpos Detección de ácidos nucleicos

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