Programas de gestión de gametos en mamíferos domésticos y salvajes

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1 Programas de gestión de gametos en mamíferos domésticos y salvajes 1.- CONSERVACIÓN ANIMAL: Definiciones, estado y localización de los animales en peligro. 2.- Especies Salvajes: 3.- Especies Domésticas en España: 4.- BCRZ: Descripción del Programa GERMOBANK Estructura: Pantallas y Dynalist (análisis de datos) - Liks mas informativos.

2 IUCN: Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza LISTA ROJA DE LA IUCN: World Conservation Biology - Es el inventario reconocido mundialmente sobre el estado de amenaza de las especies. - Preparada por la Comisión de Supervivencia de Especies de la UICN, una red de más de especialistas de todo el mundo que trabaja por la conservación de especies a nivel mundial. _especies/sur_listaroja/ CITES (Convención sobre el Comercio Internacional de Especies Amenazadas de Fauna y Flora Silvestres): - Es un acuerdo internacional entre los gobiernos. - Su objetivo es asegurar que el comercio internacional de especímenes animales y plantas silvestres no amenace su supervivencia.

3 Map of 595 sites of imminent species extinction (reprinted from Ricketts et al. 2005). Yellow sites are either fully protected or partially contained within declared protected areas (n = 203 and 87, respectively) Red sites are completely unprotected or have unknown protection status (n = 257 and 48, respectively)

4 Very Low Impact (<2.4) Medium Impact ( ) High Impact ( ) Low Impact ( ) Med-High Impact (9-12) Very High Impact (>15) Global map of the cumulative human impact on marine ecosystems, based on 20 ecosystem types and 17 different human activities.

5 CATEGORÍAS DE LA LISTA ROJA IUCN EXTINTO (EX): Un taxón es Extinto cuando no hay ninguna duda que el último individuo murió. EXTINTO EN LIBERTAD (EL): Un taxón está Extinto en el hábitat natural cuando sólo sobrevive en cultivo, en cautiverio o como una población naturalizada. EN PELIGRO (EP): Un taxón está en Peligro cuando se considera en muy alto riesgo de extinción en el hábitat natural. VULNERABLE (VU): Un taxón es Vulnerable cuando se considera que afronta un alto riesgo de extinción en el hábitat natural. MENOR PROCUPACIÓN (LC): Un taxón es de Menor Preocupación (Interés) cuando ha sido evaluado frente a todos los criterios y no está en peligro Crítico.

6 CRITERIOS PARA ADJUDICACIÓN DE LAS CATEGORÍAS EN LA LISTA ROJA IUCN Reducción Poblacional Localización Individuos Vulnerable 50% < 10 < 10,000 En peligro 70% 5 2,500 En peligro Crítico 90% 1 < 250

7 IUCN Red List assessment for all 5,487 mammal species.

8 EX EW CR EN VU NT DD LC TOTAL CARNIVORA CETARTIODACTYLA PRIMATES Extinct (EX). Extinct in the Wild (EW). Critically Endangered (CR). Endangered (EN). Vulnerable (VU). Near Threatened (NT). Data Deficient (DD). Least Concern (LC).

9 EXTINT CRITICALLY ENDANGERED ENDANGERED VULNERABLE Carnivora Cetartiodactyla Chiroptera Diprotodontia Eulipotyphla Primates Rodentia

10 ESTUDIO DE PARÁMETROS SEMINALES Y CONSERVACIÓN DE ESPERMA EN ANIMALES SALVAJES INIA Lab. de Reproducción Asistida

11 OBJETIVO: Programas de reproducción en cautiverio de especies en peligro de extinción Instauración de políticas de manejo animal que mantengan el potencial de recrear una población salvaje sostenible (Eberhard, 1995).

12 HERRAMIENTAS para la reproducción en cautiverio: Conservación de semen germoplasma Bancos de Inseminación artificial Otras técnicas de reproducción asistida: Fertilización in vitro Transferencia de embriones

13 Caracterización de los parámetros seminales de 5 especies de ungulados salvajes Puesta a punto de técnicas de congelación de semen

14 Uro (Bos Primigenius) Bisonte europeo (Bison bonasus) IUCN: vulnerable Cabra hispánica (Capra pyrenaica hispanica) IUCN: en peligro Arrui (Ammotragus lervia) IUCN: vulnerable Sitatunga (Tragelaphus spekei gratus)

15 OBTENCIÓN DE SEMEN: 1.- Animales vivos: - Selección de machos a participar - Anestesia. Mediante cerbatana o rifle Uro y Bisonte: Xilacina (3,6 y 8,6 mg/100kg PV Arrui: Tiletamina+Zolazepan (2,5 + 2,5mg/Kg PV) Sitatunga y Cabra: Zoletil (5 mg/kg PV) - Inmovilización del animal

16 - Obtención del eyaculado: Lavado e higienización de la zona prepucial Vaciado de las heces de la ampolla rectal Sonda de 6 cm (Uro y Bisonte) ó 2,5 cm y 3 electrodos longitud inales

17 2.- Animales muertos: - Disección de testículos y epidídimos - Lavado retrógrado de la porción distal de la cola del epidídimo desde el conducto deferente - Cortes en la cola del epidídimo y dilución en el medio de congelación

18 PARÁMETROS SEMINALES: - Determinación de Volumen - Concentración espermática: recuento en cámara (hemocitometría) previa dilución (1:100, v:v) en glutaraldehído al 2%. - Movilidad masal: escala 0 a 5 - Movilidad individual: porcentaje de células móviles (0-100%) y calidad de movimiento

19 PARÁMETROS SEMINALES: - Grado de morfoanomalías: contraste de fases. Inclusión de la muestra en glutaraldehído al 2% y tinciones con Giemsa

20 PARÁMETROS SEMINALES: - Integridad acrosómica: contraste de fases Espz. con borde apical normal Espz. con acrosoma dañado Esperm. sin borde apical NAR DAR MAR

21 PARÁMETROS SEMINALES Test de endósmosis celular: 100 μl de semen en 1 ml de solución hipoosmótica (100 msosm/kg), 30 Fijación: Glutaraldehído al 2%

22 PARÁMETROS SEMINALES: - Viabilidad espermática: Tinción con Eosina/nigrosina Bisonte Sitatunga

23 EVALUACIÓN DE DILUYENTES PARA LA CONGELACIÓN: Control: TRILADYL Test: - TES-TRIS-glucosa, 20% yema de huevo - Leche descremada - Vesículas lipídicas vegetales (Bisonte y Delfin)

24 METODOLOGÍA DE CONGELACIÓN: Adición del diluyente (200 x 10 6 spz/ml) Vitrina a 5ºC, 4 horas (-0,22ºC/min) Envasado en pajuelas 0,25 ml Vapores de Nitrógeno líquido (5 cm, 10 min) Inmersión en Nitrógeno y trasvase al tanque de almacenamiento (-196ºC)

25 CAPACIDAD FECUNDANTE: Test fertilización heteróloga: vaca o hamster - Test de Hámster: Superovulación de hámster doradas: ecg y HCG Ovocitos denudados con hialuronidasa y tripsina Co-cultivo con espermatozoides en TC-199 con 10% de FCS durante 4-5 h a 37ºC en atmósfera de 5% de CO 2 Índice de penetración % de penetración

26 RESULTADOS

27 URO (Bos primigenius) - Nº animales: 1 - Ensayos: 13 - Volumen: 6.3 ± 3.0 ml - Spz totales: 5.8 ±4.0 x Dosis: 890 Parámetros seminales (X ± SD) Movilidad (%) 80.0 ± 8.9 Calidad de movimiento 3.9 ± 0.3 % Normales 90.4 ± 2.6 NAR (%) 79.5 ± 9.5 Endósmosis + (%) 87.9 ± 8.4 Viabilidad (%) 76.8 ± 6.5

28 BISONTE EUROPEO (Bison bonasus) - Nº Animales : 1 - Ensayos: 5 - Volumen: 8.6 ± 1.3 ml - Spz totales : 5.3 ±2.4 x Dosis: 481 Parámetros seminales (X ± SD) Movilidad (%) 83.0 ± 3.6 Calidad de movimiento 4.4 ± 0.1 % Normales 76.8 ± 2.6 NAR (%) 74.2 ± 8.6 Endósmosis + (%) 90.6 ± 8.2 Viabilidad (%) 71.4 ± 8.0

29 BISONTE EUROPEO (Bison bonasus)

30 CABRA HISPÁNICA (Cabra pyrenaica hispanica) - Nº Animales : 1 - Ensayos: 7 - Volumen: 0.33 ± 0.15 ml - Spz Totales : ±0.5 x Dosis: 72 Parámetros seminales (X ± SD) Movilidad (%) 80.0 ± 7.14 Calidad de movimiento 4.1 ± 0.31 % Normales 74.1 ± 16.9 NAR (%) 86.0 ± 8.29 Endósmosis + (%) 84.1 ± 8.37 Viabilidad (%) 86.1 ± 4.41

31 GUEPARDO (Acinonyx jubatus)

32 GORILA (gorilla gorilla gorilla)

33 PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca) - Muerto el 30 de abril de de prostatitis - Obtención a las 4 horas de la muerte del animal - Hipoplasia testicular unilateral de grado medio - Tes-Tris glucosa 20% yema y 6% glicerol - 37 x 10 6 spz/ml

34 PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca) Fresco Refrigerado Descongelado Movilidad (%) Calidad movimiento % normales % GCP % GCM % GCD NAR (%) Endósmosis + (%)

35 PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca) Resultados de la triple tinción Vivos Muertos NAR MAR NAR MAR

36 PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca) Resultados del test de hámster % Índice Penetración penetración

37 CONGELACIÓN DE SEMEN DE EPIDÍDIMO DE GACELA (Gazella dorcas neglecta) - Obtención a las 4 h de la muerte - Tes-Tris-Glucosa, 20% yema huevo y 6% glicerol - Volumen = 8 ml - Dosis = 31

38 GACELA (Gazella dorcas neglecta) Fresco Refrigerado Descong. Movilidad (%) Calidad movim % Normales NAR (%) Endósmosis + (%) Viabilidad (%) (-) (-) 46

39 ORYX (Oryx gazella) Fresco Refrig. Des Movilidad (%) Calidad Mov % Normales NAR (%) Endósmosis + (%) Viabilidad (%)

40 JIRAFA (Giraffa camelopardalis Rothschildi) Fresco Refrig. Descon Movilidad (%) Calidad Mov % Normales NAR (%) Endósmosis + (%) Viabilidad (%)

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