Phenylalanine (PKU) neonatal Screening Assay

Transcripción

1 Instrucciones de Uso Phenylalanine (PKU) neonatal Screening Assay Ensayo enzimático de diagnóstico in-vitro para la determinación cuantitativa de la L-fenilalanina en manchas de sangre humano del recién nacido. Para el cribado neonatal de fenilcetonuria. RE80015 / RE / C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)

2 1. USO PROPUESTO Ensayo enzimático de diagnóstico in-vitro para la determinación cuantitativa de la L-fenilalanina en manchas de sangre humano del recién nacido. Para el cribado neonatal de fenilcetonuria. 2. IMPLICACIONES CLÍNICAS Fenilcetonuria (PKU) es una de las enfermedades hereditarias más comunes que afecta el metabolismo de los aminoácidos. Es una afección que se transmite a los descendientes de manera autosómica recesiva con una incidencia de aproximadamente 1:2600 a 1:25000 según el grupo de población observado. La causa principal de esta enfermedad, entre 90% y 99% de todos los casos, es una disminución o ausencia de la actividad del complejo enzimático fenilalanina hidroxilasa que es el responsable de la transformación del aminoácido esencial fenilalanina en tirosina. Este último es un precursor de las catecolaminas, la melanina y las hormonas tiroideas. Como consecuencia de este bloqueo del metabolismo, la fenilalanina se transforma mediante un pasaje alternativo en fenilpiruvato y acetato, que son segregados por los riñones. La enfermedad se manifiesta mediante un retraso mental de los pacientes, que comienza en las primeras semanas de vida. La responsable de este desarrollo es la mielinización incorrecta de las neuronas en el cerebro, debido al cambio producido en el metabolismo de las proteínas. Otras señales de la fenilcetonuria son la falta de pigmentación de la dermis y su adnexis debido a la alteración en la síntesis de melanina y, por ende, su predisposición a enfermedades de la piel. Es importante diagnosticar la presencia de fenilcetonuria en los recién nacidos, ya que se puede prevenir el daño cerebral mediante una dieta con bajo contenido de fenilalanina. Por lo tanto, se debe realizar una prueba de detección de concentraciones elevadas de fenilalanina en sangre entre el 2do y el 5to día de vida del recién nacido. Si este resultado es positivo, se realizará otro ensayo confirmatorio para detectar las mutaciones especiales en el cromosoma 12. Se desarrollaron muchas pruebas de detección para monitorear a pacientes por fenilcetonuria. La primera llamada GUTHRIE, por el nombre de su inventor, se basa en la neutralización de un factor inhibidor del crecimiento de la bacteria Bacillus subtilis por altos niveles de fenilalanina. Debido a ciertas desventajas que presenta este método, se lo reemplaza por ensayos en los cuales la fenilalanina en la sangre de los pacientes participa de una reacción química que desarrolla una sustancia fluorescente o coloreada que puede medirse cuantitativamente. Los procedimientos se pueden usar de manera más conveniente, en comparación con el método más sofisticado y costoso de la HPLC (cromatografía líquida de alta eficacia). 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO La fenilalanina de las manchas de sangre se evalúa cuantitativamente con el ácido tricloracético (3%) del papel de celulosa. La fenilalanina luego es transformada por la enzima fenilalanina deshidrogenasa en fenilpiruvato. Se suma a esta reacción la reducción de la coenzima NAD+, que también está presente en la mezcla de la reacción. La NADH reducida transforma, en una reacción de reducción-oxidación, la sal de tetrazolio amarilla en substrato violeta de formazán. La cantidad de formazán que se desarrolla es proporcional a la concentración de fenilalanina en la muestra. El color del substrato se puede medir con un fotómetro en 570 nm. 4. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Sólo para uso en diagnóstico in-vitro. Sólo para uso profesional. 2. Antes de comenzar el ensayo lea las instrucciones completa y cuidadosamente. Use la versión válida del prospecto que se ofrece con el juego de reactivos. Asegúrese de entenderlo todo. 3. En caso de daño severo del estuche del juego de reactivos, contacte por favor a IBL o a su suministrador en forma escrita antes de transcurrida una semana de la recepción. No utilice los componentes dañados en los ensayos pero guárdelos en forma segura para la reclamación. 4. Tome en cuenta el número de lote y la fecha de caducidad. No mezcle reactivos de diferentes lotes. No use reactivos vencidos. 5. Cumpla con las buenas prácticas de laboratorio y las pautas de seguridad. Use bata de laboratorio, guantes de látex desechables y gafas de protección cuando sea necesario. Version / 8

3 6. Los reactivos de este juego que contienen materiales peligrosos pueden causar irritación ocular y cutánea. Vea MATERIAL SUMINISTRADO y las etiquetas para los detalles. Las Hojas de Datos de Seguridad de los materiales para este producto están disponibles en la página de internet de IBL o mediante solicitud directa a IBL. 7. Los reactivos químicos y los reactivos preparados o usados deben ser tratados como desechos peligrosos de acuerdo con las regulaciones nacionales sobre bioseguridad y pautas de seguridad. 8. El personal de limpieza debe ser capacitado por profesionales para el manejo de residuos peligrosos. 9. Todos los reactivos de este juego que contienen suero o plasma humano han sido ensayados y encontrados negativos para anti-hiv I/II, HBsAg and anti-hcv. Sin embargo, la presencia de estos u otros agentes infecciosos no puede ser excluída en forma absoluta, por lo que estos reactivos deben ser tratados como potencialmente biopeligrosos a los efectos de su manipulación y eliminación. 5. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El juego de reactivos es enviado a temperatura ambiente y debe ser almacenado a 2-8 C. Manteniéndose alejado del calor o de la luz solar directa. El almacenamiento y estabilidad de muestras y reactivos preparados se detalla en los capítulos correspondientes. 6. TOMA Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS Manchas de Sangre Se debe colectar la sangre del talón del neonato sólo de la sección media o lateral de la superficie plantar. Se observarán las precauciones usuales en la toma de muestra de sangre. Luego del pinchazo la primera gota de sangre se limpirá con una gasa estéril. Toque la tarjeta de colección con una gota grande y colgante y permita que una cantidad suficiente de sangre se absorba en el papel de filtro en un solo paso de manera que el círculo impreso se llene completamente. Repita el procedimiento para llenar los círculos requeridos en la tarjeta. Deje secar al aire las manchas de sangre durante 3 h a temperatura ambiente alejado de la luz solar directa. Como los estándares están basados en tarjetas de filtro de Schleicher & Schuell No. 903 y los resultados están muy influidos por el material del filtro de la tarjeta (vea LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO), se recomienda emplear estas tarjetas también para las muestras de pacientes. No presione el sitio de punción durante la toma de muestra pues esto causa hemólisis o dilución de la sangre con fluidos tisulares. No aplique gotas sucesivas al mismo círculo impreso. No toque las manchas de sangre. Asegúrese de que las manchas de sangre estén visualemente bien (por ejemplo. sin extensiones de sangre, sin coágulos, ni huellas digitales). El momento óptimo de la obtención es entre 48 y 72 horas después del nacimiento. No debe recolectarse la muestra de sangre antes de las 36 horas ni después de las 72 horas posteriores al nacimiento. En este margen de tiempo, toda obtención de muestra fallida se debe recuperar sin demora. En caso de alta o reubicación antes de las 36 horas posteriores al nacimiento, se debe tomar la primera muestra. Con un momento de determinación anterior a las 36 horas posteriores al nacimiento se corre el riesgo de arrojar resultados de diagnóstico falso negativos. En caso de alta antes de las 36 horas posteriores al nacimiento, se debe informar a los padres (beneficiario de la atención médica) sobre la exigencia de realizar una segunda determinación de laboratorio oportunamente. Extraído de German Child Direction (BAnz. Nr. 60). Se deben contemplar las pautas específicas a nivel local y nacional para el momento de obtención de las muestras. Almacenamiento: 2-8 C Manténgase alejado del calor o de la luz solar directa. Estabilidad: 6 mes Version / 8

4 7. MATERIALES SUMINISTRADOS RE80019 RE80015 Símbolo Componente 5 x 12 ml 1 x 12 ml ENZ LYO 1 x 220 ml 1 x 45 ml ENZDIL 1 x 260 ml 1 x 55 ml SUBS 5 x 5 1 x 5 CAL A-E 5 x 2 1 x 2 CONTROL1+2 1 x 8 ml 1 x 2 ml DYE CONC Enzima liofilizado Contenido: fenilalanina dehidrogenasa, Coenzimática NAD +, Solución buffer, estabilizadores. Diluyente enzimático Listo para usar. Contenido: dietanolamina, Solución buffer, 0.01 % NaN3. Substrato Listo para usar. Contenido: sal de tetrazodio, solución buffer cítrica. Estándar A-E ~1; ~3; ~5; ~9; ~13 mg/dl Calibrado con respecto al estándar CDC (Center for Disease Control and Prevention). Contenido: sangre humana. Schleicher & Schuell papel N Manchas de Sangre / carta. Por concentraciónes exactas vea las etiquetas o el certificado Control de Calidad. Control 1+2 Control 1: ~ mg/dl Control 2: ~ mg/dl Contenido: sangre humana. Schleicher & Schuell papel N Manchas de Sangre / carta. Para conocer las concentraciones /los rangos aceptables, vea las etiquetas o el certificado de CC. Solución de coloración Concentrado (51 x) Contenido: Acido Amarillo 23 (C.I ). 8. MATERIALES REQUIRIDOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Micropipetas (Multipette Eppendorf o dispositivos similares, < 3 % CV). Volúmenes: 25; 75; 100; 1000 µl 2. Tubos de ensayo de poliestireno de fondo redondo (12 x 75 mm) 3. Gradilla para tubos de ensayo 4. Agitador para tubos de ensayos 5. Acido tricloracético (3 %; w/v); de 99.5 % Acido tricloracético, p.a. cualidad (p.ej. Fluka, REF 91228) M solución NaOH; (p.ej. 1 N NaOH Titrisol Sol., Merck, REF 9956) 7. Tarjetas de Filtro (Schleicher & Schuell 903 recomendado) 8. Punzonadora para Manchas de Sangre (en inglés: Blood spot puncher), 5 mm (1/5 ) (p.ej. Sauer, Hannover, Germany) 9. Placa de Microtitulación (fondo plano) 10. Agitador para placas de microtitulación ( rpm; Amplitud mm) 11. Fotómetro para placas de microtitulación capaz de leer absorbancias a 570 nm (longitud de onda de referencia 690 nm) 12. Agua bidestilada o desionizada 13. Toallas de papel, puntas para las micropipetas y cronómetro Version / 8

5 9. INDICACIONES PARA EL PROCEDIMIENTO 1. Cualquier manipulación inadecuada de las muestras o modificación del procedimiento de ensayo puede alterar los resultados. Los volúmenes a pipetear, los tiempos de incubación, las temperaturas y etapas de pretratamientos tienen que ser efectuados estrictamente siguiendo las instrucciones. Use sólo pipetas u otros dispositivos calibrados. 2. Una vez comenzado el ensayo, se deben completar todas las etapas sin interrupción. Asegúrese de que los reactivos, materiales y dispositivos necesarios estén listos en el momento adecuado. Permita que todos los reactivos y muestras alcancen la temperatura ambiente (18-25 C) y agite suavemente por rotación cada vial de reactivo líquido o muestra antes del uso. Evite la formación de espuma. 3. Evite la contaminación de los reactivos, pipetas pocillos y/o tubos. Emplee una punta desechable nueva para cada reactivo, estándar o muestra. No intercambie las tapas. Tape siempre los viales que no estén en uso. No reutilice los pocillos, tubos o reactivos. 4. Tenga cuidado de que las manchas de sangre estén adecuadas visualmente (sin borrones, coágulos, ni huellas digitales). 5. Se recomienda ensayar las muestras por duplicado para poder identificar errores potenciales de pipeteo. 6. Emplee un esquema de pipeteo adecuado según las dimensiones de la placa. 7. El tiempo de incubación afecta los resultados. Todos los pozos deben manipularse en el mismo orden y respetando las secuencias de tiempo. Se recomienda el empleo de una micropipeta de 8 canales para pipetar las soluciones en los todos pozos. 10. INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIÓN DEL ENSAYO Preparación de Solución Madre de Enzima La Solución Madre se mantiene estable durante 5 días a una temperatura de 2 C a 8 C. Preparar sólo la cantidad de Solución de Enzima que se necesita para la serie real del análisis. Agregar con una pipeta 12 ml de agua bidestilada en el interior de la ampolla de la Enzima, tapar la ampolla y mezclar suavemente para disolver. Mezclar durante 2 minutos sin hacer espuma Preparación de Solución de Enzima Si se usan varias ampollas de la Solución Madre de Enzima, se recomienda mezclar la solución y establecer cuál es la Solución de Enzima lista para usar de este compuesto. La Solución de Enzima se mantiene estable durante 8 horas a una temperatura de 18ºC a 25ºC. No se puede prolongar la estabilidad almacenándola a una temperatura de 2 C a 8 C. Cantidad recomendada de Solución de Enzima lista para usar: Número de Placas de Microvaloración 1 / 3 2 / Solución Madre se mantiene (ml) Diluyente (ml) Diluir la Solución Madre de Enzima con Diluyente de Enzimas según se indica en la tabla. Mezclar durante 2 minutos cuidadosamente, sin hacer espuma Preparación de Acido Tricloracético (3%) Coloreado Diluir la Solución Madre de Coloración (51x) con Acido Tricloracético (3%) 1:51 (por ej. agregar 2 ml de Concentrado de Coloración a 100 ml de Acido tricloracético (3%)). La solución se mantiene estable hasta la fecha de vencimiento del kit, a una temperatura de 18 C a 25 C Elución de Manchas de Sangre Extraer Estándares de la Mancha de Sangre, Controles y muestras (cada 5 mm Ø = 1/5 ) y colocar cada disco dentro de uno de los tubos de poliestireno. Rotular todos los tubos. Agregar con una pipeta 100 µl de Acido Tricloroacético Coloreado (3%) dentro de cada tubo. Verificar que cada disco esté totalmente sumergido en el líquido. Incube min a TA (18 25 C) sobre un agitador orbital ( U/min.; Amplitud mm). Version / 8

6 11. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 1. Agregar con una pipeta 25 µl de 0.5 M NaOH en el interior de cada pocillo de la placa de microvaloración. 2. Agregar con una pipeta 75 µl de cada Estándar, Control y muestra de Eluido de la Mancha de Sangre en el interior de los correspondientes pocillos. Agitar brevemente la placa. 3. Pipetee 100 µl de Solución de Enzima recién preparada en cada pocillo. 4. Incube 30 min a TA (18 25 C). 5. Pipetee 100 µl de Substrato en cada pocillo. Sacuda brevemente 3 min en un agitador orbital ( rpm; Amplitud mm). 6. Mida la densidad óptica con un fotómetro a 570 nm (Longitud de onda de referencia: 690 nm) durante 3-5 min después de pipetear el Reactivo Substrato. 12. CONTROL DE CALIDAD Los resultados son válidos solamente si el ensayo ha sido realizado de acuerdo a las intrucciones. Además el usuario debe atenerse a las Prácticas de Buen Laboratorio (GLP) u otras normas o leyes comparables. Para la determinación del diagnóstico, el usuario y/o el laboratorio deben de tener un sistema validado de acuerdo con las Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP). Los valores de los controles del ensayo deben encontrarse dentro de los rangos de aceptación indicados en las etiquetas y el Certificado QC. Si este criterio no se cumple, el ensayo no es válido y debe repetirse. Cada laboratorio debe emplear muestras conocidas como controles adicionales. Se recomienda participar en los programas de aseguramiento de la calidad adecuados. En caso de detectarse alguna desviación, se debe verificar lo siguiente: Fecha de vencimiento de los reactivos, condiciones de almacenamiento, pipetas, dispositivos, condiciones de incubación y método de lavado. 13. CÁLCULO DE RESULTADOS Las DO de los estándares se plotean contra su concentración. Se calcula la curva estándar por una regresión lineal o una función de regresión lineal ponderada. Usando programas informáticos, la curva es mejor descrito por una regresión lineal a 2 puntos con ejes lineares. Para el cálculo de la curva de regresión, aplique cada señal de los estándares (si uno de los duplicados presenta un valor claramente diferente de lo esperado puede ser eliminado y ser utilizado en su lugar el valor más plausible). La concentración de las muestras se puede leer directamente de la función de regresión. Las muestras que presenten una señal mayor a la del estándar mayor tienen que ser confirmadas por en metódo de rereferencia Conversión: 1 mg/dl = 60.5 µmol/l Curva de Calibración Típica (Ejemplo. No usar para el cálculo!) 0.30 Phenylalanine Estándar fenilalanina (mg/dl) DOMedio A B C D E OD (570 nm/690 nm ref.) y = 0.017x R 2 = mg/dl Version / 8

7 14. INTERPRETACION DE RESULTADOS Basado en la suposición de que los valores esperados de fenilalanina siguen una distribución normal, las manchas de sangre con concentraciones de fenilalanina superiores a 2.5 mg/dl (percentil 98%) se considerarían en consecuencia presuntas positivas. La confirmación de los resultados requeriría una repetición del ensayo del 2% de la población estudiada. Si el resultado de la medición repetida (por duplicado) está por encima del umbral de 3.0 mg/dl, una nueva muestra debe ser recopilada y analizada aplicando un ensayo de confirmación. Basado en esquemas de clasificación, unos resultados de pruebas dentro de un intervalo de concentración de 2.5 mg/dl a 3.0 mg/dl podrían ser diagnosticados como potencialmente falso negativos y deben ser reconfirmados mediante una medición adicional. Varias sociedades para el screening neonatal recomiendan diferentes valores de índice de corte para la repitición de la medición y la aplicación de pruebas confirmatorias. Dependiendo de la aplicación de muestras de diferentes poblaciones de recíen nacidos se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de valores normales y que esta distribución de valores esté alineada con las recomendaciones de la sociedad responsable de la región geográfica en particular. Los resultados en sí mismos no deben ser la única razón para las consecuencias terapéuticas. Éstas deben correlacionarse con otras observaciones clínicas y pruebas de diagnóstico. 15. VALORES ESPERADOS Distribución de la concentración de fenilamina en muestras de sangre de recien nacidos. _ x = 1.6 mg/dl DS = 0.48 mg/dl n = 6693 Población = Polonia percentil mg/dl 90% % % % 1.45 Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de valores normales. 16. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La toma de la muestra y almcenamiento tiene un efecto importante en los resultados. Vea TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO para mayores detalles. Cualquier resultado con una concentración elevada debe ser indicado como presunto positivo y debe ser confirmado con tomas y ensayos posteriores. Un falso negativo en este ensayo no puede ser excluído con total certeza. Cualquier indicación anamnéstica o clínical de Fenilcetonuria debe conllevar a la repetición del ensayo. La influencia directa de drogas aplicadas en los pacientes en los resultados de la medición de la fenilalanina no puede ser excluída. Por lo tanto, se recomienda la revisión incluso de los valores normales de fenilalanina a través de un ensayo de confirmación si existiesen signos anamnésticos o clínicos de Fenilcetonuria en el paciente. Se recomienda el uso de papel de filtro S&& 903 para las muestras de sangre. Un factor de corrección debe tenerse en cuenta cuando se usan otros papeles de filtro. Por ejemplo, los resultados con papeles de filtro 2992 difieren alrededor de un 20% : Estándares (2992) = 1.20 x (S&S 903) ; r = 0.996; n = 349 Para reactividad cruzada, vea PRUEBAS FUNCIONALES. Los siguientes componentes sanguíneos no tienen un efecto significativo en los resultados del ensayo en las concentraciones indicadas a continuación Hemoglobina Bilirrubina Triglicéridos 400 mg/dl 50 mg/dl 3000 mg/dl Version / 8

8 17. PRUEBAS FUNCIONALES Especificidad Analítica (Reactividad Cruzada) No se encontró reactividad cruzada con las sustancias típicas ensayadas. Sensibilidad Funcional (Límite de Detección) 1.55 mg/dl Sensibilidad Funcional, 20%; y = x R 2 = 0.82 Precisión Intervalo (mg/dl) CV (%) Intra-Ensayo Inter-Ensayo Las muestras que presentan concentraciones mayores al estándar mas alto deben ser confirmadas mediante un método de referencia. No se recomienda una dilución Linearidad de la muestra porque la sangre presenta una concentración endógena de fenilalanina y no se pueden excluir los efectos de la matriz para otras sustancias. Recuperación Medio (%) Intervalo (%) % Recuperación después del enriquecimiento Comparación del Método versus otro ensayo Ensayo IBL = 0.88 x Otro ensayo 0.21 r = 0.95; n = 98 Version / 8

9 18. REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO 1 Richtlinien des Bundesausschusses der Ärzte und Krankenkassen über die Früherkennung von Krankheiten bei Kindern bis zur Vollendung des 6. Lebensjahres ( Kinder-Richtlinien ) BAnz. Nr. 60 (2005) 2 Rouse, B. et al. Maternal phenylketonuria syndrome: congenital heart defects, microcephaly and developmental outcomes. J. Pediat. 136: (2000) 3 Benit, P. et al. The mutant genotype is the main determinant of the metabolic phenotype in Phenylalanine hydroxylase deficiency. Molec. Genet. Metab. 68: (1999) 4 Kaufmann, S. A model of human Phenylalanine metabolism in normal subjects and in phenylketonuric patients. Proc. Nat. Acad. Scr. 96: (1999) 5 Sarkissian, C. N. et al. A different approach to treatment of phenylketonuria: Phenylalanine degradation with recombinant Phenylalanine ammonia lyase. Proc. Nat. Acad. Sci. 96: (1999) 6 Weglage, J. et al. Regression of neuropsychological deficits in early-treated phenylketonurics during adolescence. J. Inherit. Metab. Dis. 22: (1999) 7 Carter, K. C. et al. Mutation at the Phenylalanine hadroxylase gene (PAH) and its use to document population genetic variation: the Quebec experience. Europ. J. Hum. Genet. 6: (1998) 8 Guldberg, P. et al. A European multicenter study of Phenylalanine hydroxylase deficiency: classification of 105 mutations and a general system for genotype-based prediction of metabolic phenotype. Am. J. Hum. Genet. 63: (1998) 9 Van Spronsen, F. J. et al. Phenylketonuria: the in vivo hydroxylation rate of Phenylalanine into tyrosine is decreased. J. Clin. Invest. 101: (1998) 10 Rouse, B. et al. Maternal phenylketonuria collaborative study (MPKUCS) offspring: facial anomalies, malformations and early neurological sequelae. Am. J. Med. Genet. 69: (1997) 11 Guthrie, R. The introduction of newborn screening for phenylketonuria: a personal history. Europ. J. Pediat. 155 (suppl. 1): 4 5 (1996) Version / 8

10 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύμβολα REF LOT CONC LYO IVD Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθμός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθμός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιμοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθμός εξετάσεων: Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συμπύκνωμα Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασμένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται μακριά από θερμότητα και άμεση επαφή με το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύμβολα των συστατικών του κιτ συμβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. COMPLAINTS: Complaints may be submitted initially written or vocal. Subsequently they need to be filed including the test performance and results in writing in case of analytical reasons. WARRANTY: The product is warranted to be free from material defects within the specific shelf life and to comply with product specifications delivered with the product. The product must be used according to the Intended use, all instructions given in the instructions for use and within the product specific shelf life. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. LIMITATION OF LIABILITY: IN ALL CIRCUMSTANCES THE EXTENT OF MANUFACTURER S LIABILITY IS LIMITED TO THE PURCHASE PRICE OF THE KIT(S) IN QUESTION. IN NO EVENT SHALL MANUFACTURER BE LIABLE FOR ANY INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING DAMAGES FOR LOST PROFITS, LOST SALES, INJURY TO PERSON OR PROPERTY OR ANY OTHER INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL LOSS. IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Symbols Version 4.5 /