SOLUCIONES DE CONSUMIBLES PARA BIOANÁLISIS. Soluciones de preparación de muestras y cromatografía líquida para operaciones cuantitativas de
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- Trinidad San Segundo Rivas
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1 SOLUCIONES DE CONSUMIBLES PARA BIOANÁLISIS Soluciones de preparación de muestras y cromatografía líquida para operaciones cuantitativas de BIOANÁLISIS
2 En Waters comprendemos los singulares desafíos a los que se enfrenta la comunidad bioanalítica, como la necesidad de aumentar al máximo la sensibilidad, incrementar el rendimiento y crear nuevos métodos robustos que se puedan transferir a laboratorios de todo el mundo. En consecuencia, creamos soluciones de preparación de muestras y cromatografía líquida para bioanálisis cuantitativo en torno a un flujo de trabajo sencillo y lógico que ofrece muestras limpias y separaciones selectivas. Y para llegar al cenit en la calidad de los datos bioanalíticos, la productividad del laboratorio y el cumplimiento normativo, integramos estas químicas punteras con la solución del Sistema de bioanálisis regulado de Waters. Combina deliberadamente la nueva ACQUITY UPLC I-Class de dispersión reducida la mejor entrada actual de su clase para MS con el espectrómetro de masas de alta sensibilidad Xevo TQ-S, bajo el control de un nuevo software utilizando el sistema de información científica UNIFI, preparado para ajustarse a la normativa. 2
3 SOLUCIONES DE CONSUMIBLES PARA BIOANÁLISIS 3
4 SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS Principales Ventajas: Un diseño singular elimina pasos dilatorios para aumentar el rendimiento. Filtrado libre de precipitados para lograr el máximo de actividad del sistema frente a los métodos clásicos. Perfecto por su limpieza, compatibilidad con MS y recuperación del analito. 4
5 PLACA DE PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS SIROCCO SIMPLEMENTE TRANSPARENTE La placa de precipitación de proteínas (PPT) Sirocco elimina los pasos adicionales dilatorios de manipulación de muestras que se emplean tradicionalmente con la PPT clásica. La singular tecnología de las membranas y puntas de válvula permite que el analista lleve a cabo la precipitación de proteínas en el pocillo seguida del paso final de filtración. Este enfoque permite un procesamiento eficiente de las muestras que obtiene filtrados transparentes con pequeños volúmenes de muestra. Sirocco puede automatizarse para procesar gran número de muestras de forma eficiente. COMPARACIÓN DE TIEMPOS DE PROCESAMIENTO Con las placas Sirocco, las muestras pueden procesarse en un tiempo significativamente menor que con PPT clásica, aumentando así el rendimiento del laboratorio. RECUPERACIÓN La placa Sirocco fue analizada para determinar la recuperación del analito utilizando 7 analitos salpicados en plasma de rata, empleando un estándar interno. Los resultados muestran excelentes recuperaciones en todos los analitos enumerados. PPT Clásica PPT Sirocco minutos 15 minutos Ejemplo de carga Ejemplo de carga Recuperación por PPT (%) Mezcla Mezcla Mix Vacío 0 Atenolol Nadolol Metoprolol Oxprenolol Labetalol Alprenolol Propranolol Centrifugación Inyección Directa Transferencia del sobrenadante 5
6 Suma de recuentos del área de 5 fosfolípidos SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS El camino más rápido a lo más limpio Los productos de preparación de muestras Ostro ofrecen una solución novedosa para la limpieza de fosfolípidos en plasma y suero. Con un desarrollo de métodos mínimo o nulo y utilizando un protocolo sencillo, esta tecnología puede incorporarse rápidamente para optimizar el flujo de trabajo de su laboratorio. La placa Ostro de 96 pocillos proporciona extractos más limpios y reproducibles que otros dispositivos o técnicas de eliminación de fosfolípidos y permite análisis más sensibles, mayor rendimiento de muestras y menos tiempo de parada de los instrumentos. ELIMINACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS El nivel restante de 5 fosfolípidos tras la preparación de muestras con Ostro es menor que en la extracción líquido-líquido y que en la extracción líquida respaldada por sólidos. REPRODUCIBILIDAD Eliminación % comparativa de fosfolípidos totales de 6 lotes diferentes de plasma utilizando Ostro (RSD 0.19%), placa de eliminación de fosfolípidos del competidor A (RSD 24.5%) y placa de eliminación de fosfolípidos del competidor B (RSD 40.9%) % de eliminación de fosfolípidos Ostro Competidor A Competidor B Ostro LLE SSLE Suma de 5 fosfolípidos abundantes portadores de fosfatidilcolina con m/z 496, 524, 704, 758 y
7 PRODUCTOS DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS OSTRO Principales Ventajas: Elimina significativamente más fosfolípidos que las técnicas de la competencia, para obtener extractos más limpios. Mejora la reproducibilidad para lograr métodos más homogéneos y consistentes. Aumenta el rendimiento con un protocolo fácil de poner en práctica. 7
8 SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS Principales Ventajas: Máxima sensibilidad para compuestos farmacéuticos tradicionales y péptidos terapéuticos. Mínimos efectos de la matriz para análisis por LC/MS/MS. Inigualable calidad del producto, rendimiento y reproducibilidad. 8
9 Productos Oasis para extracción de muestras Sensibilidad en su forma más pura La sensibilidad es uno de los principales requisitos para el éxito de un análisis biológico. Lograr la máxima sensibilidad requiere el aislamiento de compuestos de interés de las interfases presentes en las muestras biológicas. Los productos patentados Oasis para extracción en fase sólida (SPE) están disponibles en una amplia gama de formatos y rellenos, que permiten a los investigadores desarrollar metodologías selectivas para los compuestos de interés. Los productos Oasis facilitan a los investigadores la creación de métodos de SPE reproducibles y de alta precisión, insuperables en su sensibilidad y selectividad. SENSIBILIDAD Los rellenos mixtos Oasis, creados en torno al singular copolímero Oasis HLB humectable con agua, ofrecen dos modos de retención, lo que permite mayor selectividad y sensibilidad de limpieza para compuestos ácidos o básicos, incluso si el relleno de los pocillos se seca. Obtenga una sensibilidad inigualable con la placa Oasis µelution, que puede concentrar una muestra hasta 15x sin necesidad de evaporación o reconstitución. LOQ de la benzodiacepina alprazolam 1 pg/ml de 375 µl de plasma LOQ del propionato de fluticasona 5 pg/ml de 375 µl de plasma 100 0% A. Muestra enriquecida % B. Blanco de matriz min % 0% A. Muestra enriquecida B. Blanco de matriz min EFECTOS DE LA MATRIZ Tras la extracción con un relleno mixto Oasis, se evaluaron los efectos de la matriz para un grupo de 5 antidepresivos en varios lotes de orina. Se determinó que la RSD de los factores de la matriz se hallaba entre el 5.5 y el 8.4 %, bastante inferior al límite del 15 % exigido por los organismos reguladores. Analito % RSD de los factores de la matriz Amitriptilina 6.03 Nortriptilina 5.53 Imipramina 8.36 Desipramina 7.15 Doxepina 5.96 CALIDAD El cuidadoso diseño de procesos y los exhaustivos controles de calidad de Waters han establecido un nuevo estándar en reproducibilidad lote a lote para rellenos EFS. Esto permite a los investigadores desarrollar métodos bioanalíticos consistentes, exactos y precisos. No hacen falta reservas de lotes: Altas recuperaciones homogéneas a lo largo de más de 15 años de producción. % de recuperación Años RSD de la recuperación para: Procainamida: 1.90% Ranitidina: 1.68% Paracetamol: 1.65% 9
10 Soluciones de cromatografía líquida Tecnología de columnas Gracias a la mayor sensibilidad, mejor rendimiento y excepcional fiabilidad analítica que ofrece la tecnología UPLC, el Sistema ACQUITY UPLC se ha convertido en la plataforma de LC de elección para análisis biológicos. Con 5 sustratos de partículas y 20 químicas de columna inferiores a 2 µm disponibles para aplicaciones biofarmacéuticas y de moléculas pequeñas, Waters tiene una columna de UPLC para satisfacer cualquier exigencia de sus aplicaciones. ACQUITY UPLC BEH C 18 O O Si O Con niveles sin precedentes de forma de los picos, eficiencia y estabilidad química, la columna C 18 BEH Technology [híbrida con puentes de etileno] de 1.7 µm es una solución de separación versátil y de rendimiento extremo para una amplia gama de analitos. Con la capacidad de operar en un ph entre 1 y 12, la columna BEH C 18 utiliza el poder del ph para actuar sobre la retención, selectividad y sensibilidad de los compuestos ionizables, mejorando la sensibilidad de los análisis por LC/MS. ACQUITY UPLC HSS T3 O O Si O Específicamente diseñada para la retención mejorada de compuestos y metabolitos polares, la columna HSS [sílice de alta resistencia] T3 de 1.8 µm es una columna C18 de baja densidad de ligandos que ofrece una excepcional capacidad de retención sin necesidad de reactivos de par iónico. Esto permite alcanzar límites de detección y de cuantificación más bajos para métodos de LC/MS ACQUITY UPLC BEH HILIC Utilizando una fase móvil rica en acetonitrilo para mejorar la retención, la eficiencia de ionización y la respuesta de la espectrometría de masas para compuestos extremadamente polares, la columna BEH HILIC [cromatografía de interacción hidrófila] de 1.7 µm permite límites de detección más bajos en comparación con los métodos convencionales de fase reversa. Además, los extractos con alto contenido orgánico de PPT, LLE o SPE pueden inyectarse directamente, lo cual mejora de forma espectacular el rendimiento de muestras, la solidez y la sensibilidad. ACQUITY UPLC BEH300 C 18 O O Si O Específicamente diseñada y sometida a pruebas de QC para el análisis rápido de péptidos con alta resolución, la columna BEH C 18 de 300 Å garantiza la separación con éxito de una variada gama fisicoquímica de péptidos. Ahora se puede utilizar una sola columna para retener y separar péptidos con una amplia gama de hidrofobicidad, punto isoeléctrico y peso molecular. 10
11 COLUMNAS ACQUITY UPLC Principales Ventajas: Mejora la productividad del laboratorio al reducir el tiempo de análisis sin dejar de mejorar la calidad de los datos. Alcanza límites de detección más bajos al permitir una respuesta de MS más elevada con picos cromatográficos estrechos. Mejora la caracterización de las muestras al reducir la supresión de MS debida a los componentes residuales de la matriz. 11
12 Sales Offices: Austria y exportación en Europa (Europa Central y Sureste, CEI y Oriente Medio) Australia Bélgica y Luxemburgo Brasil Canadá China República Checa Dinamarca Finlandia Francia Alemania Hong Kong Hungria India Irlanda Italia Japón Corea México Países Bajos Noruega Polonia Puerto Rico Russia/CEI / Singapur España Suecia Suiza Taiwán Reino Unido Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA EE. UU. T: F: El sistema de gestión de calidad de las instalaciones de fabricación de Waters en Taunton, Massachusetts y en Wexford, Irlanda, cumple los estándares de gestión de calidad y garantía de calidad de la norma internacional ISO 9001:2008. El sistema de gestión de calidad de Waters es auditado periódicamente por el organismo de registro para garantizar su cumplimiento. Waters, The Science of What s Possible, UPLC, ACQUITY UPLC, UNIFI, Xevo, Oasis, Ostro, Sirocco y BEH Technology son marcas comerciales de Waters Corporation Waters Corporation. Impreso en EE. UU. Mayo de ES SC-CM
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