Caracterización Genética
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- Nicolás Serrano Calderón
- hace 5 años
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2 Cualquier gen que muestre polimorfismo (dos o más alelos) y que sea estable durante la vida del individuo se puede utilizar como marcador genético.
3 Microsatélites Son muy frecuentes y están repartidos por todo el ADN y, a menudo, presentando un alto grado de polimorfismo. El modelo de herencia es mendeliano y los alelos detectados presentan codominancia. Se necesitan cantidades muy pequeñas de material biológico para la determinación de las variantes alélicas, Las técnicas empleadas para la detección de la variabilidad son muy simples.
4 Microsatélites Microsatélite: HLM6 Nº de acceso GenBank: U36498 Tamaño: 418 pb GATCCTGAGCACGGCACCTGGCACATTCATGGACATTCG TGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATG CGTGCGCGCGCGCTGATATAGAGAGAAAGGGGAGGGA GGGAGCGGAAACAGAGACAAAGTGGAGAGATATCGAA AATGGGTCAAAATACTAATGGGTACACCTGGATAAAGGG TATATGGTTGTTTACCATCCAGGCAACTTTTCCACAAGTTT ATCTTTAAATAAATGCATTTTAAAAATGGACCGTTGGCTG TTGTCCCAAATTTTGCCTAACCTTTGAGATTTCTGGCTTT GATTCCCGCAGCTGCCATCGCTAGCGTACCCAGACCCC AGAAGTGTGCAATGGTGACTTTAAAACAGTTGTCGCAGG TTCTGTCCCAGGCAAGAAAACCTGGATC
5 Aplicaciones de los microsatélites para el estudio de la diversidad genética: Conocer la estructura de poblaciones, su historia y su evolución Caracterizar poblaciones Tomar decisiones a la hora de evaluar y conservar recursos genéticos (adscripción individual, distancias genéticas) Control de Paternidad Trazabilidad (identificación individual)
6 Sangre Pelo y tejidos LAVADO Y CENTRIFUGACIÓN EXTRACCIÓN DEL ADN/ARN PURIFICACIÓN DILUCIÓN
7 Electroforesis en secuenciador automático
8 Análisis de densitometría de los fragmentos amplificados
9 Identificación alélica (I)
10 Identificación alélica (II)
11 Fórmula genética individual
12 CARACTERIZACIÓN DE LA OVEJA CANARIA Se utilizaron las siguientes muestras: Chiapas, 41 Chamula 42 Café 45 Palmera 47 Merino 44 Canaria 40 Sopravissana 44
13 CARACTERIZACIÓN DE LA OVEJA CANARIA Cuadro 1. Estadísticos F y probabilidad de equilibrio global de los microsatélites en razas ovinas Locus Fis Fit Fst BM BM BM BM BM CSRD CSSM D5S ETH ETH HSC ILSTS INRA INRA INRA MAF MAF McM OarCP OarCP OarFCB OarFCB OarFCB RM SPS TGLA TGLA TGLA Media Error estándar Se utilizó un panel de 28 microsatélites
14 ESTADÍSTICOS F Wright (1951) introdujo un método para partir el coeficiente de endogamia total de una población subdividida (Fit) entre el componente debido a apareamientos no aleatorios dentro de subpoblaciones (Fis) y la subdivisión entre poblaciones (Fst) o efecto de la deriva. La correlación entre los genes de los individuos (I) y los de la población total (T) es representada por Fit, que corresponde a la endogamia total. La correlación entre los genes de los individuos y los de la subpoblación (S) es representada por Fis, La correlación entre los genes de la subpoblación y los de la población total está representada por Fst. Los estadísticos F se relacionan entre sí de la siguiente manera: (1 Fit) = (1 Fst)(1 Fis)
15 FST como indicador de subdivisión poblacional: FST varía entre 0 y 1 y mide el grado de subdivisión a través de sus efectos de aumento de endogamia = reducción de heterocigosis (con respecto a la misma población global pero sin subdivisión)
16 CARACTERIZACIÓN DE LA OVEJA CANARIA Cuadro 2. Tamaño de muestra, número medio de alelos por población heteroci gosidad esperada, insesgada y observada, y valor de Fis (Weir&Cockerham, 1984). Variedad Nº de animales Nº de Alelos Hesp Hins Hobs Fis Chiapas Chamula Café Palmera Sopravissana Merino Canaria
17 Ho = Heterocigosis observada (individuos heterocigotas) en las subpoblaciones He = Heterocigosis esperada (por H-W) en las subpoblaciones Hins = Heterocigosis esperada (por H-W) en la población total
18 CARACTERIZACIÓN DE LA OVEJA CANARIA Distancias Genéticas entre las poblaciones ovinas estudiadas. Raza Chiapas Chamula Café Palmera Sopra Merino Canaria Chiapas Chamula Café Palmera Sopraviss ana Merino Canaria DA Arriba de la diagonal (Nei, 1972). DS Debajo de la diagonal (Nei et al., 1983).
19 CARACTERIZACIÓN DE LA OVEJA CANARIA Se utilizó un panel de 28 microsatélites
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