BIOSEGURIDAD. Uso de elementos de protección personal y otras barreras de contención

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1 BIOSEGURIDAD Uso de elementos de protección personal y otras barreras de contención Dra. Patricia García C. Departamento de Laboratorios Clínicos Escuela de Medicina Pontificia Universidad Católica de Chile

2 BIOSEGURIDAD Conjunto de medidas destinadas a proteger la salud del trabajador, la comunidad y el ambiente. El uso de elementos de protección personal y de barreras de contención protege al operador de la exposición a agentes biológicos.

3 BIOSEGURIDAD Colegio de Patólogos Americanos Políticas y procedimientos Minimizar el riesgo ocupacional de agentes infecciosos según recomendaciones actuales y nivel de bioseguridad del laboratorio. Manejo de derrames con material contaminado Manejo y procesamiento seguro de las muestras Controles de ingeniería apropiados al nivel de bioseguridad del laboratorio Gabinetes de bioseguridad adecuados para el uso de agentes que se transmiten por vía aerea y se certifican anualmente. Manejo adecuado de Desechos

4 BIOSEGURIDAD CLSI 2005 Higiene de manos Barreras de protección Gabinetes bioseguridad Manejo de desechos Esterilización-desinfección Transporte seguro de muestras Manejo de accidentes Entrenamiento del personal

5 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5 th Edition bmbl5/bmbl.pdf

6 Clinical Laboratory Safety CLSI 2012

7 Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos ISP Agosto 2013

8 Porqué hay que protegerse? Salpicaduras y accidentes percutáneos con consecuencia de infección

9 Porqué hay que protegerse? Inhalación (-) y contacto directo/digestivo (-) con consecuencia de infección

10 Es necesario conocer Nivel de Riesgo Nivel de Bioseguridad

11 Niveles de Riesgo en Laboratorios de Microbiología Nivel de Riesgo I Tipo de agente Agentes de bajo riesgo para el individuo y para la comunidad. Ejemplo Género Corynebacterium (excepto C.diphtheriae ) II III IV Agentes de moderado riesgo para el individuo y bajo para la comunidad Agentes de alto riesgo para el individuo y bajo para la comunidad (independiente de la clasificación de aerosol o gotita). Estos agentes se consideran de riesgo para el personal de Laboratorio Agentes de alto riesgo para el individuo y alto para la comunidad Género Staphyloccocus Manipulación de cultivos de: Mycobacterium tuberculosis Bacillus anthracis Neisseria meningitidis Francisella tularensis Brucella spp Burkholderia spp Yersinia pestis Hongos dimórficos Virus Ébola

12 Niveles de Bioseguridad en Laboratorios de Microbiología Nivel de Bioseguridad Nivel 1 Nivel 2 Descripción Nivel básico de contención basado en prácticas microbiológicas corrientes como Lavado de manos, uso de delantal, etc Acceso limitado, EPP, Manejo desechos, señales de riesgo, delimitación de áreas, trabajo en gabinete sólo si hay generación de aerosoles Nivel 3 Nivel 4 Todas las manipulaciones de laboratorio se llevan a cabo en un gabinete de bioseguridad u otros equipos cerrados, presión negativa. Personal altamente entrenado Son aplicables al trabajo con agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual y comunitario. Trajes especiales, edificio separado, ducha de salida, etc.

13 Conociendo Nivel de Riesgo Nivel de Bioseguridad Elementos de protección personal y otras medidas de contención Riesgo por contacto con sangre y/o fluidos corporales (aplicación de precauciones estandar por VIH, VHB, VHC, etc) Riesgo por autoinoculación oral o permucosas de bacterias de Riesgo II (Staphylococcus aureus, E coli O157, Salmonella, Shigella, etc). Riesgo por inhalación de aerosoles

14 Elementos de protección personal: Delantal Se debe utilizar delantal cerrado de manga larga para el trabajo en áreas técnicas. La protección es mayor cuando son de abertura trasera y puño ajustado especialmente para laboratorios de microbiología. Este delantal debe dejarse en el laboratorio antes de dirigirse a otras áreas. El delantal debe ser lavado al interior de la institución En el caso de ropa de tela, se recomienda pechera anti-fluidos cuando existe riesgo de salpicaduras, que debe ser eliminada, idealmente después de cada uso. Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos ISP, Agosto 2013

15 Elementos de protección personal: Guantes Es necesario el uso de guantes cuando exista la posibilidad que las manos entren en contacto con materiales infecciosos, superficies y equipos contaminados. Debe utilizarse guantes desechables que no deben ser reutilizados. Las manos deben ser lavadas luego de su retiro Forma correcta ponerse guantes Forma correcta sacarse guantes Y cuando leemos placas de medios de cultivo. debemos usar guantes? Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos ISP, Agosto 2013

16 Elementos de protección personal: Guantes Qué determina que un tecnólogo médico contamine o se contamine con microorganismos de cultivos positivos? Muchos factores, como la capacitación, el nivel de experiencia y/o competencia, la adherencia a los procedimientos estándares y el uso de buenas prácticas de trabajo Es probable que una placa esté contaminada por la superficie externa? Dado que es probable que la superficie exterior de una placa de cultivo se contamine antes de la incubación, es aconsejable que se utilicen las precauciones de contacto incluso después de las placas se han incubado y los organismos hayan crecido. Por lo tanto, se recomienda el uso de guantes para aumentar las buenas prácticas de trabajo durante la lectura y el subcultivo de las placas. Carta respuesta de Thomas Galassi, Director de la OSHA (Occupational Safety & Health Administration ) 19 de abril de 2011

17 Elementos de protección personal: Guantes Esto es consistente con varios documentos de laboratorio que ofrecen recomendaciones para el uso de guantes en el laboratorio. CLSI en su 3ra edición 2005 Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline dice: " Se recomienda a los trabajadores del laboratorio usar guantes cuando se manipule material o se trabaje en áreas que puedan estar contaminados con sangre o material potencialmente infeccioso y en algunos casos la contaminación no siempre es visible.". CDC en su 5ta edición 2009 del Manual Bioseguridad en Laboratorios Microbiológicos y Biomédicos dice: " Se debe usar guantes para proteger las manos de la exposición a materiales peligrosos y la selección del guante debe basarse en una evaluación adecuada del riesgo ". Carta respuesta de Thomas Galassi, Director de la OSHA (Occupational Safety & Health Administration ) 19 de abril de 2011

18 Elementos de protección personal: Protección facial Están diseñadas para proteger los ojos y el rostro de salpicaduras e impactos de objetos, son de uso personal, deben estar fabricadas de plástico irrompible. Es necesario el uso de protección facial cuando exista riesgo de salpicaduras. Puede ser protector facial o mascarilla + lentes protectores Su uso es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio. Es necesario asegurarse que el material permita una visión correcta, brinde protección lateral y frontal, permita ventilación indirecta y el uso simultáneo de anteojos correctores prescritos. Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos ISP, Agosto 2013

19 Elementos de protección personal: Mascarillas Mascarilla quirúrgica: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de salpicaduras con sangre u otro fluido potencialmente infeccioso para evitar la exposición de la mucosa oral y nasal. Mascarilla de alta eficiencia (N-95) Se debe utilizar siempre que exista riesgo de generación de aerosoles de agentes que se puedan transmitir por inhalación: Ej cada vez que se manipulan fuera del gabinete de bioseguridad muestras que provienen de un paciente en el que se sospecha Mycobacterium tuberculosis Su uso es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio. Pueden ser reutilizadas por el trabajador siempre y cuando se mantenga limpia, no deformada y con el filtro seco. Mascarilla autofiltrante: Se debe utilizar al manipular o estar expuesto a productos químicos como gases, vapores o sus combinaciones con productos contaminantes particulados. Existen varios tipos de acuerdo a la protección respiratoria que ofrecen. Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos ISP, Agosto 2013

20 Otras medidas de contención: Equipos de protección personal Gabinetes de Bioseguridad: Es el principal equipamiento usado para minimizar la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos generados en el laboratorio. Proveen protección sólo si se utilizan adecuadamente. Prácticas inapropiadas pueden interferir con la operación de los gabinetes, asi como su ubicación en el laboratorio. Deben ser usados cuando se trabaja con alta concentración o grandes volúmenes de agentes infecciosos. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

21 Generación de aerosoles Actividades que generan aerosoles: Centrifugar Pipetear Mezclar Agitar Abrir contenedores Moler

22 Otras medidas de contención: Equipos de protección personal Gabinetes de Bioseguridad: Disponen de dos sistemas por los que protege al operador y al ambiente: Barrera de aire Las barreras de aire se generan porque el aire se mueve en una sola dirección y a velocidad constante "cortina" de aire que se conoce como flujo de aire laminar. Filtros HEPA ( High Efficiency Particulate Air) Fabricados con láminas de fibras de borosilicato Atrapan partículas y agentes infecciosos contenidas en el flujo de aire con una eficacia del 99,97% partículas de hasta 0,3 de diámetro o más. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

23 Clases de Gabinetes de Bioseguridad GBS-Clase I GBS- Clase II Tipo A A1 A2 GBS- Clase III Tipo B B1 B2 Diferenciar de Campana de extracción de gases y Campanas de flujo laminar Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

24 Gabinetes de Bioseguridad Clase I El aire penetra por parte frontal, atraviesa la zona de trabajo y sale al exterior a través de un filtro HEPA. Protege al operador, al ambiente pero no evita la contaminación del producto porque no filtra el aire que entra. Son apropiadas para manipular agentes biológicos de los grupos 1, 2 Presión negativa dentro de GBS Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

25 Gabinetes de Bioseguridad Clase II, tipo A1 Ventilador interno extrae aire de la sala hacia GBS a una determinada velocidad La superficie de trabajo está barrida por aire limpio procedente de un filtro HEPA. La salida del aire se produce a través de otro filtro HEPA. Son equipos válidos para el manejo de agentes biológicos de los grupos 1, 2 ó 3. No se debe usar para trabajar con vapores tóxicos. No requieren conexión al exterior y tiene un 70% de recirculación de aire y un 30% sale al exterior filtrado Velocidad del flujo: 75 pies/min Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

26 Gabinetes de Bioseguridad Clase II, tipo A2 Cuando tienen salida al exterior estos eran llamados B3. Requieren estar en una sala con presión negativa. Velocidad de flujo: 100pies/min Velocidad del flujo: 100 pies/min Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

27 Gabinetes de Bioseguridad Clase II, tipo B1 Requieren salida al exterior. Recircula un 30% y 70% es expulsado al exterior filtrado Velocidad de flujo de 100 pies/min Velocidad del flujo: 100 pies/min Velocidad del flujo: 100 pies/min Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

28 Gabinetes de Bioseguridad Clase II, tipo B2 Aire no recircula en su interior 100% del aire es expulsado el exterior filtrado Velocidad interna de flujo 100 pies/min Velocidad del flujo: 100 pies/min Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

29 Gabinetes de Bioseguridad Clase III Son recintos herméticos en presión negativa, por lo que su interior está completamente aislado del entorno. Se opera en ellas por medio de unos guantes con trampa para introducir el producto. El aire entra a través de un filtro HEPA y se expulsa al exterior a través de dos filtros HEPA. Trabajo con patógenos clase 3-4 Realización de operaciones riesgosas Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

30 Buenas prácticas para trabajar en Gabinetes de Bioseguridad I y II 1. Preparación Checklist con materiales necesarios 2. Dejar espacio entre paredes de GBS y materiales 3. Se recomienda poner toalla absorbente 4. Realizar movimientos suaves fuera y dentro de GBS 5. Disminuir otras actividades dentro de la sala 6. Uso de delantales abrochados por detrás y guantes 7. Apertura debe quedar bajo zona facial 8. Al encender el motor se debe esperar 4 min antes de iniciar actividades. 9. Esperar 1 min luego de poner manos y brazos dentro 10. No ocluir o bloquear rejilla frontal, trabajar a 10 cm de ella 11. Abrir tubos y botellas verticalmente 12. Limpieza de GBS al terminar el trabajo con alcohol 70% Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition, 2009

31 Gabinetes de Bioseguridad. Recomendación Guía ISP Para los laboratorios de Microbiología se recomienda el uso de gabinetes de bioseguridad (preferentemente clase II A2), al realizar procedimientos que puedan generar aerosoles infecciosos Si hay generación de aerosoles, la siembra de muestras clínicas se recomienda realizarla bajo gabinete de bioseguridad al igual que el procesamiento de cultivos positivos de agentes que puedan ser transmitidos por inhalación de aerosoles infecciosos, especialmente Mycobacterium tuberculosis y Neisseria meningitidis. Las muestras de bajo riesgo de contener agentes transmitidos por inhalación de aerosoles, tales como deposición y orina se debe utilizar al menos protección ocular y mascarilla quirúrgica, las que protegen fundamentalmente de salpicaduras.

32 Revisemos un poco mas profundo: Mycobacterium tuberculosis SEGURIDAD DE LABORATORIO La seguridad de laboratorio es un tema complejo. Para más detalle Los servicios de Laboratorio en el Control de la Tuberculosis, OMS Preparación de frotis de BAAR Capítulo XIII Normas de Bioseguridad del PCT Muchos laboratorios que procesan el esputo infeccioso en países de recursos limitados realizan sólo microscopía de frotis directa. No se ha documentado que la realización de microscopía de frotis directa resulte en la transmisión de M. tuberculosis (suponiendo que no se utiliza la centrifugación). La microscopía de frotis directa puede realizarse con seguridad en un gabinete abierto. Ni medidas de control ambientales ni protección respiratoria personal son necesarias durante la preparación de frotis, sin uso de centrífuga.

33 Revisemos un poco mas profundo: Mycobacterium tuberculosis Preparación de suspensiones de M. tuberculosis Laboratorios que procesan preparaciones líquidas de M. tuberculosis en suspensión (centrifugación, cultivos y pruebas de sensibilidad a los medicamentos) deben considerarse en mayor riesgo para la transmisión de M. tuberculosis. Capítulo XIII Normas de Bioseguridad del PCT Puede mejorarse la seguridad: Corrigiendo la ventilación en área donde se realizan cultivos y Test sensibilidad de MTBC Reduciendo el número de laboratorios que manejan concentrados con MTBC

34 Revisemos un poco mas profundo: Mycobacterium tuberculosis Riesgo en el laboratorio M tbc puede estar presente en LCR, lavado gástrico, expectoración, orina y tejidos. Las muestras deben ser consideradas potencialmente infecciosas y manejadas con precaución. El mayor riesgo para el personal del laboratorio se genera al manejar cultivos líquidos, preparación de cortes congelados y autopsias. Recomendaciones: Trabajar con todas las recomendaciones del Nivel de Bioseguridad 2 cuando no exista generación de aerosoles, tal como la preparación de los frotis. Se recomienda secar el frotis en una estufa más que en un mechero. Las actividades que generen aerosoles deben realizarse en in Gabinete de Bioseguridad, certificado anualmente. Se requiere Nivel de Bioseguridad 3 cuando se trabaje con cultivos de M. tuberculosis El Nivel de Bioseguridad 3 incluye el uso de respirador particulado CLSI M29-A3, 2005 Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline

35 Revisemos un poco mas profundo: Neisseria meningitidis N. meningitidis puede estar presente en exudados faringeos, LCR, sangre y saliva. El riesgo para el personal de Laboratorio puede ser por inoculación parenteral, ingestión, exposición a gotita en membranas mucosas e inhalación de aerosoles infecciosos Muestras para estudio de N. meningitidis, incluido cultivo, no asociado a infección invasora, pueden ser manipulados en un Nivel de Bioseguridad 2. Todas los cultivos de sitios estériles de N. meningitidis deben ser manipulados en un Gabinete de Bioseguridad. El personal de laboratorio que esta expuestosrutinariamente a aerosoles de N. meningitidis debe considerar la vacunación

36 Conclusiones La experiencia ha demostrado que la prudencia en las prácticas de Bioseguridad para todos los niveles ( 1-4) y la adherencia a las guías y recomendaciones contribuyen a la salud de las personas que trabajan en los laboratorios, a sus familiares y a la comunidad. Estas recomendaciones, por lo tanto, constituyen las medidas mínimas para la contención de los riesgos. La aplicación de las recomendaciones deben estar basadas en el riesgo específico de cada laboratorio en conjunto con la información científica disponible. Jonathan Y. Richmond, Ph.D. Director Office of Health and Safety Public Health Service Centers for Disease Control and Prevention. Atlanta

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