ESTUDIO MUTACIONAL DEL GEN APC EN FAMILIAS CON POLIPOSIS COLICA FAMILIAR DE LA COMUNIDAD AUTONOMA ARAGONESA M Strunk, E Piazuelo, P Félez*, MT

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1 ESTUDIO MUTACIONAL DEL GEN APC EN FAMILIAS CON POLIPOSIS COLICA FAMILIAR DE LA COMUNIDAD AUTONOMA ARAGONESA M Strunk*, E Piazuelo*, P Félez*, MT Arroyo, MA Pérez, A García*, P Jiménez*, A Ferrández, M Boudet, A Lanas. Servicio de Aparato Digestivo. Unidad Mixta de Investigación*. Hospital Clínico Universitario de Zaragoza. Introducción: La Poliposis Cólica Familiar es una enfermedad hereditaria caracterizada por la presencia de múltiples pólipos en el intestino. La práctica totalidad de los pacientes desarrollan cáncer colorectal antes de los 50 años si no se realiza tratamiento quirúrgico profiláctico. La identificación del gen APC como causante de esta entidad permite el diagnóstico presintomático de individuos portadores de mutaciones y por tanto en riesgo de desarrollar la enfermedad. Objetivo: Identificar las mutaciones en el gen APC en pacientes con PAF y familiares incluidos en el Programa de Prevención de CCR de la Comunidad Autónoma de Aragón. Métodos: Se incluyeron en el estudio 51 individuos correspondientes a 19 familias. Se realizó screening de mutaciones en los exones 2, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 mediante electroforesis en gel de gradiente desnaturalizante (DGGE), exones 3 y 7 mediante secuenciación directa y exon 15 mediante test de la proteína truncada (PTT) a partir de ADN genómico obtenido de sangre periférica de los pacientes. Cualquier patrón anormal identificado mediante DGGE o PTT fue posteriormente analizado mediante secuenciación. Resultados y conclusiones: En el 57,9% de las familias incluidas en el estudio (11/19) se identificó una mutación en el gen APC. De las mutaciones identificadas, 6 eran mutaciones ya descritas: S367fsX376, R283X, R449X, R554X, T934fsX953 mientras que 3 eran mutaciones no registradas en la base de datos internacional de mutaciones del gen APC: Q757X, L954X, Q793X. La mutación S367fsX376 se identificó en 3 familias procedentes de la misma zona geográfica de la Comunidad.

2 PAPEL DE LOS RECEPTORES DE LA PROSTAGLANDINA E2 EN EL TRATAMIENTO DEL ADENOCARCINOMA ESOFAGICO. P Jiménez, E Piazuelo, F Esteva, M Strunk, A García-Gonzalez, I Arenas, A Lanas. Unidad Mixta de Investigación. Hospital Clínico Universitario. Zaragoza. Introduccción: La ciclooxigenasa-2 (COX-2) y su principal metabolito, prostaglandina E2 (PGE2), juegan un importante papel en el esófago de Barrett y adenocarcinoma esofágico. Estudios recientes sugieren que los receptores de la prostaglandina E2 (EP) están implicados en la proliferación celular y carcinogénesis. Sin embargo, no se conoce qué receptores regulan la señalización celular de la PGE2 en el adenocarcinoma de esófago. Objetivo: Determinar en qué medida la inhibición de los receptores EP1 y EP2 afecta a la proliferación celular en células de adenocarcinoma esofágico. Métodos. Células humanas de adenocarcinoma esofágico asociado a esófago de Barrett se obtuvieron de la EACC (línea celular OE33). La expresión de la COX-2 fue determinada mediante Western-blot. Se estudió el efecto en la proliferación celular de: 1) inhibidores selectivos de la COX- 2 (NS-398 y SC-58125), 2) un antagonista selectivo EP1 (SC-51322), 3) un antagonista dual EP1/EP2 (AH-6809) y 4) un agonista EP2 (Butaprost) midiendo la incorporación de timidina en el ADN celular. Los niveles de PGE2 se analizaron mediante RIA El análisis estadístico se determinó mediante el t-test. Resultados: El análisis de Western-blot mostró que las células OE33 expresan COX-2, y esta expresión es inducida por el suero y los ácidos biliares. El tratamiento con los inhibidores selectivos de la COX-2 disminuyó significativamente tanto la síntesis de PGE2 (NS M= * pg/10 5 cel., SC M= ** pg/10 5 cel; control= pg/10 5 cel) como la proliferación celular (NS M= % del control; NS M= % control*; SC M= % control, SC M= % control). *p<0.05. La proliferación celular no fue afectada ni por el antagonista EP2 ni por el agonista EP2 a ninguna de las dosis testadas (0.1, 1, 10 M). Sin embargo, el bloqueo selectivo del receptor EP1 indujo una inhibición dosis-dependiente de la proliferación celular. Conclusión: La administración de un antagonista selectivo del receptor EP1 disminuye la proliferación celular de células de adenocarcinoma esofágico asociado a Barrett, lo que sugiere un papel potencial de los antagonistas EP1 en el tratamiento del adenocarcinoma esofágico.

3 LA ADMINISTRACION DE SUPEROXIDO DISMUTASA PREVIENE EL DESARROLLO DE ADENOCARCINOMA EN UN MODELO DE ESOFAGO DE BARRETT EN RATA E Piazuelo, C Cebrian, A Escartin, M Strunk, P Jiménez, A Ferrandez *, J Arenas *, J Ortego **, A Lanas *. Unidad Mixta de Investigación. Servicios de Aparato Digestivo* y Anatomía Patológica** Hospital Clínico Universitario de Zaragoza Introducción: Diferentes estudios han demostrado que los radicales libres, especialmente el anión superóxido, están involucrados en la patogenia de la esofagitis por reflujo y el esófago de Barrett. Se desconoce si la administración de barredores de radicales libres tiene algún efecto protector en la progresión de esofagitis a esófago de Barrett y adenocarcinoma. Métodos: En un modelo experimental de esófago de Barrett mediante la creación de una esofagoyeyunostomía con preservación de estómago se evalúa el desarrollo de esófago de Barrett y adenocarcinoma a lo largo de 3 meses de evolución. Grupos de Tratamiento: Grupo 1 = Operación ficticia; Grupo 2 = Esofagoyeyunostomía; Grupo 3 = esofago yeyunostomia + tratamiento con SOD (Ontosein = 0.3 mg/100 g de peso/ 3 días). En cada grupo de tratamiento se sacrifican 6-8 animales/mes de evolución. Los resultados se evalúan mediante análisis de covarianza para variables cuantitativas y el método de Bonferroni para las comparaciones múltiples. En el caso de variables cualitativas se ha ajustado un modelo logístico, que evalúa igualmente el efecto del fármaco y el nº de meses transcurridos desde el inicio de las lesiones. Resultados: La operación ficticia no induce ningún cambio de la mucosa esofágica en el tiempo. La esofagoyeyunostomía induce ulceración e inflamación mucosa en todos los animales afectando al 46.2% de la mucosa esofágica en el mes 3. Este proceso se acompaña de la aparición progresiva de metaplasia intestinal alejada de la anastomosis (9% en el primer mes % 3 er mes) y adenocarcinoma (9.1% en el primer mes y 87.5% en el 3 er mes). Esta transformación se acompaña de un incremento en la liberación de anión superóxido a lo largo del tiempo (6 ± 2 CPM/mg tejido basal vs. 71 ± 24 CPM/mg 3er mes; p<0.05) y reducción de los niveles mucosos de SOD (31 ± 5 U/gr tejido basal vs 11± 4 U/gr 3 er mes; p<0.05). El tratamiento con SOD se asocia con disminución del grado de ulceración al 3 er mes (19.1% p<0.05), reducción de la frecuencia de MI alejada de la anastomosis (24% en el conjunto del periodo examinado vs. 51% en controles; p = 0.01) y de la frecuencia de adenocarcinoma (33% al 3 er mes; p= 0.01). Conclusiones: El tratamiento antioxidante con SOD previene el desarrollo de adenocarcinoma en el esófago de Barrett inducido experimentalmente en rata.

4 EPIDEMIOLOGIA Y EVOLUCION DEL ESOFAGO DE BARRETT EN LA POBLACION ARAGONESA EN LOS ULTIMOS 25 AÑOS. J Alcedo*, F Sopeña, A Ferrández, J Arenas, Y Ber, R Sainz, A Lanas Servicio de Aparato Digestivo. Hospital Clinico Universitario Lozano Blesa. Zaragoza. *Sección de Aparato Digestivo. Hospital San Jorge. Huesca. Introducción: La incidencia de adenocarcinoma de esófago ha aumentado notablemente en los países occidentales, lo que se ha asociado a un incremento paralelo en la incidencia de reflujo gastroesofágico. El esófago de Barrett (EB) es un factor de riesgo conocido para adenocarcinoma. Objetivo: Identificar cambios en la incidencia, prevalencia y evolución del EB en una población definida de España. Material y métodos: POBLACION: Residentes del Area Sanitaria III dependiente del H. Clínico Universitario de Zaragoza ( h), con diagnóstico de EB. Este área ha contado con una única Unidad de Endoscopia Digestiva durante los últimos 28 años. METODOS: Se revisaron los archivos de la Unidad de Endoscopia del Hospital Clínico Universitario desde 1 de Enero de 1976 hasta 31 de Diciembre de Se realizó seguimiento de los casos hasta el 31 de Enero de Resultados: Se identificaron 465 casos. La incidencia cruda del diagnóstico de EB aumentó 19 veces, desde 1,5/ personas y año en el trienio , hasta 28,5/ en En este período la misma tasa ajustada por edad y sexo se multiplicó por 15,7, mientras que las fibrogastroscopias sólo crecieron 1,9 veces. Más aún, durante los últimos 6 años del estudio el número de endoscopias digestivas altas no aumentó y sin embargo la incidencia de diagnósticos de EB lo hizo en 4 veces, desde 8/ personas y año en 1997 hasta 32/ en La prevalencia cruda de diagnósticos de EB se incrementó desde 12/ personas y año en 1985 hasta 155/ en La prevalencia de segmento corto de esófago de Barrett (< 3cm) en 2001 fue de 99/ Se diagnosticaron un total de 40 casos de displasia (37 de bajo grado y 3 de alto grado) y 23 de cáncer esofágico. En el seguimiento, el cual pudo ser realizado en el 72% de los pacientes sin carcinoma en el momento del diagnóstico, 11 pacientes desarrollaron displasia y 9 carcinoma (4 adenocarcinomas, 2 escamosos, 1 indiferenciado y 2 de estirpe desconocida), lo que supone 1 caso por cada 94 pacientes y año para displasia, y 1 caso por cada 120 pacientes y año para carcinoma. Conclusiones: La incidencia y prevalencia en el diagnóstico de EB ha aumentado drásticamente en nuestra comunidad, lo que puede ser explicado sólo parcialmente por el aumento en el número de exploraciones endoscópicas. Tanto el adenocarcinoma como el carcinoma escamoso se desarrollan en pacientes con EB, pero esta complicación es menos frecuente que lo comunicado en estudios previos.

5 RESISTENCIA DE HELICOBACTER PYLORI AL METRONIDAZOL Y A LA CLARITROMICINA: ANÁLISIS DESCRIPTIVO ENTRE 1996 Y F Gomollón, S Santolariaª, B Sicilia, M Ferrero b, MJ Revillo c, J Ducóns a, M Villar, M Siles d, M Montoro a. S. Ap Digestivo. H. Miguel Servet de Zaragoza y San Jorge de Huesca a. S. Microbiología. H. San Jorge de Huesca b y Miguel Servet de Zaragoza c. Inspección Farmacéutica, Áreas II y V, Salud. Zaragoza d. Introducción: Se revisa en el área geográfica de Aragón, la resistencia de H. pylori a los antibióticos claritromicina y metronidazol, en pacientes con y sin tratamiento erradicador previo, así como su evolución en los últimos años y su relación con el consumo anual de antibióticos. Pacientes y metodo: Estudio retrospectivo en el que se analizaron todos aquellos pacientes con infección por H.pylori que presentaron un cultivo positivo entre los meses de enero de 1997 y diciembre del Se empleó la concentración mínima inhibitoria (CMI) determinada por E-test, para definir la resistencia a claritromicina (CMI > 2 mg/l) y metronidazol (CMI > 32 mg/l) Resultados: Se estudiaron 537 pacientes, 389 sin tratamiento erradicador previo y 148 con tratamiento erradicador. La tasa media de resistencia de H.pylori fue superior en los pacientes que habían recibido tratamiento previo. Se observó un 8,7% (IC del 95%, 6,1-12) de resistencia a claritromicina y un 13,8 % (IC del 95%, 10,4-17,3) a metronidazol en los pacientes sin tratamiento previo, frente a un 39,2% (IC del 95%, 31,3-47,1) y un 37,8% (IC del 95%, 30-45,7) en aquellos con tratamiento previo (p<0,001). En los pacientes sin tratamiento previo una edad mayor de 40 años se asoció con mayor tasa de resistencia a claritromicina y el diagnóstico endoscópico de ulcera péptica con mayor tasa de resistencia a metronidazol. En los pacientes con tratamiento previo no se observaron diferencias en relación con la edad, sexo o diagnóstico endoscópico. El análisis de la evolución muestra una estabilización de la resistencia a claritromicina con tendencia al descenso (9,7% en 1997; 6,1% en el 2000) y un descenso de la resistencia al metronidazol (38,7% en 1997; 6,9% en el 2000), no existiendo una relación clara con el consumo anual de estos antibióticos. Conclusión: En nuestra área geográfica, existe una tasa media de resistencia primaria de H.pylori a la claritromicina y el metronidazol, y una tasa alta de resistencias secundarias. Las resistencias primarias tienden a la estabilización en el caso de la claritromicina y al descenso en el caso del metronidazol, no existiendo una relación clara con el consumo anual de estos antibióticos.