ScanGel ScanBrom ml
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- María Antonia Revuelta Campos
- hace 7 años
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1 ScanGel ScanBrom ml BROMELINA PARA PRUEBAS CRUZADAS IVD Todos los productos fabricados y comercializados por la sociedad Bio-Rad se hallan bajo un sistema de garantía de calidad desde la recepción de las materias primas hasta la comercialización de los productos finales. Cada lote de producto final se somete a un control de calidad y sólo se comercializa si está en conformidad con los criterios de aceptación. El fabricante conserva la documentación referente a la producción y al control de cada lote. 13
2 I - UTILIZACIÓN Y PRINCIPIO DEL REACTIVO Este reactivo está estrictamente reservada para uso profesional e in vitro. Destinado a la realización de la prueba directa de compatibilidad con la técnica enzimática en 1 tiempo, el test combina los principios de aglutinación y filtración en gel. La reacción se obtiene y se lee tras la centrifugación de unos microtubos especialmente diseñados, rellenos de gel neutro. La suspensión de glóbulos rojos, el suero o el plasma y el reactivo ScanBrom a ensayar se depositan en el pocillo de los microtubos que se centrifugan tras un periodo de incubación. Los glóbulos rojos no aglutinados se depositan en el fondo del microtubo, mientras que los aglutinados se retienen por todo el gel en función de su tamaño. Su posición en el gel determina la intensidad de la reacción II - CARACTERÍSTICAS DEL REACTIVO ScanBrom es una solución de bromelina en forma líquida, lista para usar, estable y estéril, preparada a partir de un extracto de Ananas Comosus. La bromelina es una enzima proteolítica que modifica los antígenos de los glóbulos rojos de forma que se incrementa la reactividad de ciertos pares antígeno/anticuerpo, especialmente en los sistemas RH, P, I, JK, LE. Por el contrario, los antígenos de los sistemas MNS, FY, YT, CH/RG, XG, IN y GE se destruyen o alteran con las enzimas proteolíticas. Este reactivo contiene azida sódica (< 0,1 %) como conservante. El azida sódico puede reaccionar con las tuberías del laboratorio para formar azidas de cobre o plomo altamente explosivos. Para evitar las acumulaciones de estas azidas en las cañerías, enjuagar las tuberías con abundante agua si las soluciones que contienen azidas se eliminan por el desagüe tras su inactivación. El código del producto y su volumen se mencionan en la etiqueta de la caja. III - CADUCIDAD Y CONSERVACIÓN Este reactivo debe conservarse a una temperatura entre +2 C y +8 C, no debe congelarse en ningún caso. La fecha límite de utilización y las condiciones de almacenaje se indican en la etiqueta de cada frasco. 14
3 Una vez abierto, el reactivo es estable durante 4 semanas siempre que se respeten las condiciones de conservación y de manipulación que eviten cualquier contaminación. No utilizar el reactivo si se observa un cambio en su aspecto (por ejemplo : turbidez, depósitos ). IV - PRECAUCIONES La calidad de los resultados depende del respeto de las buenas prácticas de laboratorio siguientes : No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. No utilizar tarjetas que muestren signos de desecación o burbujas, o si la lengüeta de sellado muestra signos de deterioro o está parcialente retirada. Es indispensable tomar las precauciones necesarias para no provocar contaminaciones inter-microtubos, especialmente en las etapas de distribución. Utilizar una punta de pipeta para cada muestra y para cada glóbulos rojos-test. Comprobar la precisión y el correcto funcionamiento de las pipetas y de los otros equipos. Llevar guantes y gafas de protección durante la manipulación de los reactivos y de las muestras. No pipetear directamente con la boca. Evitar las salpicaduras. En caso de salpicaduras, limpiar las superficies manchadas con lejía de 12ºCl diluida al 10% y secar con papel absorbente. El material utilizado para la limpieza deberá ser desechado en un contenedor especial para residuos contaminados. Producto y fungible que hayan estado en contacto con muestras o reactivos que contenga material de origen humano deben ser descartados una vez descontaminados. Las fichas de seguridad están disponibles bajo petición. V - RECOGIDA Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS La sangre debe obtenerse en condiciones de asepsia en un tubo sin o con anticoagulante (EDTA). Tras la obtención, la prueba debe realizarse lo antes posible. Las muestras que no puedan analizarse rápidamente deberán conservarse entre +2 C y +8 C para ser sometidas a prueba en las 48 horas siguientes. En ningún caso debe observarse hemólisis. La sangre del donante se obtiene de un segmento de la tubuladura de la bolsa de sangre (CPD). No calentar las muestras. 15
4 VI - TÉCNICAS Material suministrado ScanBrom Material necesario pero no suministrado ScanLiss : medio de suspensión de los glóbulos rojos ScanLiss 100 ml ScanLiss 500 ml ScanGel NEUTRAL IH QC : Control de serología de grupos sanguíneos IH QC 4 x 6 ml Centrífuga : ScanGel Centrifuge Incubador : ScanGel Incubator Pipetas automáticas o semiautomáticas Puntas de pipetas Tubos de un solo uso Contenedor especial para residuos con riesgo biológico Lejía Guantes de látex Papel absorbente Gafas de protección Controles Controles positivo (suero conocido que contenga al menos un anticuerpo) y negativo (suero conocido que no contenga ningún anticuerpo). IH QC : Control de serología de grupos sanguíneos. Procedimiento Seguir estrictamente el protocolo propuesto. Antes de su utilización, llevar todos los reactivos a temperatura ambiente. Por centrifugación (2000 g x 2 minutos), separar el suero o el plasma de los glóbulos rojos de la muestra a probar. Cuando la obtención se sangre se realiza en tubo seco, el suero se debe volver a centrifugar a 1500 g durante 10 minutos. a) Preparación de la suspensión de glóbulos rojos (donante) Poner 1 ml de ScanLiss en un tubo de un solo uso identificado. Añadir 10 µl del precipitado globular (glóbulos rojos del donante). Mezclar. La suspensión de glóbulos rojos está lista para su uso. 16
5 b) Técnica 1. Identificar cada tarjeta o la parte de la tarjeta con el nombre o el número del receptor y el número del o de los donantes correspondientes. Retirar completamente la lengüeta de aluminio. Resuspender los hematíes antes de usar. 2. Distribuir 50 µl de cada suspensión de glóbulos rojos preparada en a) en el pocillo de los microtubos adecuados. 3. Añadir inmediatamente 25 µl de suero o de plasma del receptor en el pocillo de los microtubos correspondientes. En ningún caso el periodo de tiempo entre la distribución de la suspensión de glóbulos rojos y la del suero o plasma debe exceder los 10 minutos. 4. Añadir 25 µl de ScanBrom en el pocillo de cada microtubo. 5. Incubar inmediatamente 15 minutos a +37 C en el ScanGel Incubator. 6. Centrifugar inmediatamente 10 minutos en ScanGel Centrifuge. En ningún caso el periodo de tiempo entre el final de la incubación y el inicio de la centrifugación debe exceder los 10 minutos. 7. Leer las reacciones. VII - INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS La presencia de aglutinados (en la superficie o dispersos en el gel) o de hemólisis en un microtubo corresponde a un resultado positivo. Un sedimento de glóbulos rojos y la ausencia de hemólisis en el fondo del microtubo corresponde a un resultado negativo. Resultado positivo Resultado negativo + a Los resultados sólo son válidos si los controles positivo y negativo dan los resultados esperados. Un resultado positivo (aglutinación y/o hemólisis) en uno de los microtubos demuestra la existencia de incompatibilidad entre el suero o el plasma del receptor y los glóbulos rojos del donante. VIII - COMPORTAMIENTO La evaluación de las especificaciones ha dado resultados concordantes con el reactivo utilizado como referencia. Cada resultado ha sido comparado con el obtenido en técnica de filtración de gel. Algunas incompatibilidades no se han podido demostrar realizando únicamente esta prueba pero, por el contrario, sí se han observado con la prueba indirecta de la antiglobulina utilizando la técnica ScanGel. Además, ciertos antígenos como MNS1 (M), MNS2 (N), MNS3 (S), FY1 (Fy a ), FY2 (Fy b ) y XG1 (Xg a ) se destruyen o se alteran cuando los glóbulos rojos se tratan con 17
6 enzimas proteolíticas. Por tanto, la técnica enzimática no puede utilizarse como única técnica para la prueba de compatibilidad. Se ha ensayado la reproducibilidad de la aplicación y ha demostrado unas buenas especificaciones tanto intra como interensayo. LÍMITES Los resultados anormales pueden ser consecuencia de : una contaminación bacteriana o química del suero, del plasma, de los glóbulos rojos o del material. una medicación o un estado patológico del paciente que provoque una reacción cruzada. el uso de un medio de suspensión para los glóbulos rojos diferente al recomendado. una preparación de los glóbulos rojos diferente a la recomendada. una resuspensión incompleta de los glóbulos rojos. una hemólisis de las muestras o de los glóbulos rojos. la presencia de fibrina (imagen de un sedimento celular compacto en el fondo de un microtubo acompañado de una fina banda rosada en la zona superior del gel correspondiente a los glóbulos rojos retenidos por los residuos de fibrina). una degradación de la actividad enzimática de la (no respetar las normas de conservación). contaminación entre microtubos. uso de otro procedimeinto del descrito anteriormente. 18
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8 Bio-Rad 3, bd Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette - France Tél.: /2007 Fax.: Code:
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