Salmonella. Laboratorio de Microbiología Aplicada. Dra.. Esther Z. Vega Bermúdez

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José Miguel Moreno Ortiz
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1 Salmonella Laboratorio de Microbiología Aplicada Dra.. Esther Z. Vega Bermúdez

2 Salmonella sp.

3 Salmonella Salmonella enterica Salmonella bongori Subs. enterica Subs. salamae Subs. arizonae Subs. diarizonae Subs. indica Subs. houtenae From: Porwollik, S., et al., Characterization of Salmonella enterica subspecies I genovars by Use Of Microarrays. J. of Bacteriol. 186:

houtenae From: Porwollik, S., et al., 2004.

4 Incidencia de Salmonella

5 Características Enterobacterias Bacilos Gram (-) Mótiles con flagelación perítrica No esporulan No fermentan lactosa 2, 300 especies Crece entre o C

6 Variantes Genéticas Mediada por Plasmidios Utilización de lactosa y sucrosa Microorganismos atípicos pueden escapar a la detección en situaciones clínicas Las especies de Salmonella no son un grupo homogéneo de organismos

escapar a la detección en situaciones clínicas Las

7 Reservorios / Alimentos Relacionados Carnes crudas Aves Huevos Leche y productos lácteos Pescado Camarones Salsas Mezclas para bizcocho Postres de crema otros

8 Patogénesis Dosis infecciosa tan bajo como células (depediendo de hospedero) Antígenos estructurales (pared celular o antígeno O, H- flagelar y el IV-antígeno capsular termolábil -poder frente a los ácidos) Sustancias tóxicas Endotoxinas Exotoxinas (efecto irritante y citotóxico para el tracto intestinal) Ruta oral-fecal

IV-antígeno capsular termolábil -poder frente a los ácidos) Sustancias tóxicas

9 Sintomatología y Enfermedades Período de incubación de 6-48hrs Diarreas Dolor abdominal Fiebre entre 8-72hrs Dolor de cabeza y en el cuerpo Escalofríos Naúseas Vómitos Septicemias Bacteremias Cistitis, endocarditis y osteomilitis Síndrome de Reiters que puede terminar en artritis crónica Fiebre tifoidea ó paratifoidea

Naúseas Vómitos Septicemias Bacteremias Cistitis, endocarditis y osteomilitis

10 Diagnóstico y Tratamiento Pruebas de serología y de heces fecales Aislar el paciente Tratamiento para todos en el hogar Antibíoticos

11 Muestreo en Alimentos MétodosMétodos convencionales de aislación que requieren de cinco días para confirmar resultados. CultivoCultivo C o en nevera.

12 Salmonella

13 Metodología Pre-Enriquecimiento Caldo de lactosa Permite la recuperación de células heridas Aumenta la razón Salmonella:Non-Salmonella Agua de dilución peptonada Productos Animales Dilución 1:10 I.e.. 25 g muesra a 225 ml de caldo 24 horas a 35 o C

Salmonella:Non-Salmonella Agua de dilución peptonada

14 Enriquecimiento Selectivo 1 ml de caldo de Lactosa 10 ml Selenite Cystine 10 ml tetrathionate broth Permite el crecimiento de Salmonella No hay resultados despúes de este paso 24 horas a 35 o C

15 Placas Selectivas Tres tipos de medio selectivo Bismuth Sulfite Marrón, gris,, negro con metallic sheen Hektoen Enteric Agar Azul-verdoso con o sin centro negro o glossy black Xylose Lysine Desoxycholate Rosado con o sin centro negro Estriado de Selective Enrichments Incubación de h a 35 o C Resultados PRESUMPTIVE POSITIVE

o glossy black Xylose Lysine Desoxycholate Rosado con o sin centro negro Estriado

16 Medio Diferencial Discernimiento bioquímico Triple Sugar Iron Agar Streak Slant and Stab Butt 1% Lactosa 0.1% Glucosa Sulfato Ferroso Indicador de H 2 S Tiosulfato Producción de H 2 S Rojo fenol Alkalina Rojo, Acido Amarillo Incubación a 35 o C por 24 horas

1% Glucosa Sulfato Ferroso Indicador de H 2 S Tiosulfato

17 Triple Sugar Iron Agar Reacción de Salmonella Red Slant (Alkalino( Alkalino) Acid Butt (Amarillo) Precipitado Negro

18 Lysine Iron Agar- Discernimiento bioquímico Stab Butt and Streak Slant Se quiere condiciones anaeróbicas en el fondo para que ocurra la decarboxilación Decarboxilación a partir de L-Lysina Lysina Sulfato Ferroso Bromo Cresol Purple Violeta Alkalino,, Amarillo - Acido Glucosa Tiosulfato

decarboxilación Decarboxilación a partir de L-Lysina Lysina Sulfato

19 Lysine Iron Agar Reacción de Salmonella Alkaline Butt Purple Precipitado Negro Sólo es negativo si hay condiciones ácidicas, pueden obtenerse otras reacciones no típicas

20 Confirmación Bioquímica Aglutinación de antígenos superficiales con anticuerpos específicos para Salmonella Antígenos de Salmonella O Somático Lipopolisacárido H Flagellar Proteína K Capsular - Polisacáridos

Salmonella Antígenos de Salmonella O Somático

21 Aglutinación Mezcle anticuerpos con un poco de cultivo Aglutinación es un resultado positivo

22 Aislamiento vs. Enumeración Usualmente sólo se aisla Se enumera para propósitos de investigación Método MPN Método de filtración por membranas No Accurate

23 Otros métodos- - kits bioquímicos

24 Identificación basada DNA-DNA

25 Identificación basada en detección de antígenos

26 Identificación basada en la utilización de sustratos

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