ESTUDIO DE REOLOGÍA SANGUÍNEA EN SUJETOS NORMALES Y PACIENTES CON ERITROCITOSIS EXCESIVA

Transcripción

1 ESTUDIO DE REOLOGÍA SANGUÍNEA EN SUJETOS NORMALES Y PACIENTES CON ERITROCITOSIS EXCESIVA PROYECTO ALFA EUROPEAN COMMISSION Autor: Bernardo Torrico Arzady, M.Sc. Asesores: Ginés Viscor Carrasco, Ph.D. Hilde Spielvogel, M.D. Universidad Mayor de San Andrés Universitat de Barcelona

2 OBJETIVO PRINCIPAL Dilucidar, a través de estudios de hemorreología,, el posible papel de la viscosidad sanguínea en el síndrome de Eritrocitosis Excesiva.

3 JUSTIFICACIÓN El posible papel de la viscosidad sanguínea en el síndrome de Eritrocitosis Excesiva no está bien establecido; y muchos pacientes que asisten al IBBA presentan un cuadro clínico de EE., algunos de ellos con hematocritos muy altos, por encima de 70%. Estos datos demuestran la necesidad de desarrollar estudios de hemorreología en poblaciones expuestas que viven a grandes alturas como ocurre en la ciudad de La Paz y el Alto de Bolivia.

4 HIDRODINÁMICA Y VISCOSIDAD DE LA SANGRE La sangre es un fluido no newtoniano formado por plasma y varios componentes celulares: glóbulos rojos y blancos, plaquetas, etc. Su fluidez depende mucho de los glóbulos rojos; de su propiedad para agregarse formando rodillos y su gran capacidad para deformarse.

5 Paso de glóbulos rojos, a través de microporos en una membrana de policarbonato

6 Definición de viscosidad Es el cociente entre tensión tangencial (T) y gradiente de velocidad (γ)( F T = F/A F X A dx µ γ = dµ/dx η = T/γ

7 Viscosidad sanguínea Viscosidad aparente sangre y plasma F τ = F/A γ = du/dx u A Perfil de velocidades du dx u η = τ / γ γ Perfil del gradiente de velocidad Viscosímetro rotatorio cono-placa Análisis de la viscosidad a un gradiente de velocidad definido para toda la muestra Viscosidad relativa η rel = η sangre / η plasma Aportación reológica de la fracción celular

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9 VISCOSÍMETRO ROTATORIO CONO- PLACA Análisis de la viscosidad a un gradiente de velocidad definido para toda la muestra.

10 MATERIAL Y MÉTODOS EQUIPO: Viscosímetro Brookfield LV II. POBLACIÓN DE ESTUDIO: Población control: sujetos sanos que viven en la altura (estudiantes de la UMSA). Población de estudio: Pacientes con eritrocitosis excesiva (pacientes que asisten al IBBA). Se ha determinado un tamaño de muestra de 30 para cada grupo.

11 ESQUEMA DEL PROTOCOLO A SEGUIR CON LAS MUESTRAS DE SANGRE CMS EE SANGRE 6-8 ml HEMATOLOGÍA WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC, PLT Recuento de Reticulocitos. CONTROL (sujetos sanos) CENTRIFUGACIÓN 3 ml. WBC, G. blancos x ul de sangre RBC, Hematíes x ul de sangre HGB, conc. Hb, g-dl HCT, microhematocrito, % MCV, volumen corpuscular medio, FL MCH, Hemoglobina corpuscular media, pg MCHC, Concentración de Hb corpuscular media, g-dl PLT, Plaquetas x ul REOLOGÍA VISCOSIDAD 0,5 ml

12 ESQUEMA DEL PROTOCOLO A SEGUIR CON LAS MUESTRAS DE SANGRE CENTRIFUGACIÓN Plasma Paquete de hematíes VISCOSIDAD 0,5 ml Proteínas Tot. Fibrinógeno. Suspensión de Hematíes normales en plasma Hcto = 45% VISCOSIDAD NP Suspensión de Hematíes normales en solución de Ringer-albúmina. Hcto = 45% VISCOSIDAD NA Suspensión de Hematíes fijados con glutaraldehido Hcto = 45% V IVISCOSIDAD DA

13 LA VISCOSIDAD DE LA SANGRE Viscosidad (mpa s) NP 10 agregación NA DA deformación orientación 1 0,01 0, Gradiente de velocidad (s -1 )

14 Recuento de Reticulocitos Azul brillante de cresilo

15 Estructura del Eritrocito Diagrama del citoesqueleto y proteínas integrales del plasmalema eritrocítico. Se determinará el diámetro de los GR de los sujetos normales y de los pacientes con eritrocitosis excesiva mediante micrometria.

16 Datos de referencia: El 70 % de pacientes con Hcto a 48 %, pero ninguno de ellos llegó a 70%. Se estandarizaron todas las técnicas t para la determinación n de la viscosidad sanguínea. nea. Se están realizando pruebas de hematología. a. Se deben estandarizar pruebas complementarias como la determinación n de proteínas totales (Lowry( Lowry), cuantificación n de fibrinógeno y globulinas (electroforesis de proteínas). Se dispone del material para determinar el diámetro de los eritrocitos. El estudio será concluido en el mes de septiembre del presente año. a

17 Perspectivas de colaboración entre Europa y América Latina Conclusión del proyecto: Estudio de reología sanguínea en sujetos normales y pacientes con eritrocitosis excesiva UMSA UB. Publicación de artículos del trabajo realizado. Presentación y defensa del trabajo en la Maestría en Bioquímica Clínica y Gerencia de Servicios en Laboratorio UMSA. Determinar la evolución de los cambios de la viscosidad sanguínea en el desarrollo de la patología. Ensayar la eficacia de distintas estrategias terapéuticas. Determinación de la viscosidad sanguínea en ratas crónicamente hipoxicas (IBBA, Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas (UMSA) y Universidad de Barcelona. Estudio de reología sanguínea en sujetos que viven a diferentes alturas. UMSA Univ. Cayetano Heredia, Lima Perú, UB. Tesis Doctoral en Educación Superior : La innovación Docente desarrollando procesos de aplicación de nuevas tecnologías y E-E learning y didáctica universitaria en la carrera de Bioquímica de la UMSA, bajo la tutoría del Dr. Ginés Viscor (UB).

18 MUCHAS GRACIAS