Flow Cell. La muestra una vez tratada es dirigida a una celda de flujo (Flow(

Transcripción

1 Tecnología Coulter CVS

2 Flow Cell La muestra una vez tratada es dirigida a una celda de flujo (Flow( cell) ) en la cual por el diseño o hidrodinámico, los leucocitos se alinean y pasan formados uno a uno y en donde se realizan las siguientes mediciones

3 Volumen Mediante impedancia de baja frecuencia se determina el volumen de la célulac

4 Conductividad La conductividad de alta frecuencia de Radiofrecuencia (RF) determina la conductividad interna de la célula c

5 Scatter La dispersión n (scatter( scatter) ) de luz láser l indica la estructura y forma de la célula c

6 De esta manera son realizadas las 3 determinaciones de manera simultánea Las lecturas de estas 3 señales análogas es enviadas al analizador para su amplificación n y proceso, luego el sistema genera 3 gráficos DF1: Volumen vs. Scatter DF2: Volumen vs. Conductividad DF3: Volumen vs. Conductividad extrayendo las señales de Neutrófilos y Eosinófilos

7 DF1: Volumen vs. Scatter

8 DFA

9 DF2 El sistema caracteriza cada célula que pasa hasta completar un conteo de células o partículas que sobrepasen un cierto volumen o bien hasta que transcurran 20 segundos, cualquiera de las 2 situaciones que ocurra primero.

10 Informe del coulter maxim

11 Informe del Cell Dyn 3500

12 Sysmex XS i

13 Sysmex XS i Características Principales 21 Parámetros, Diferencial Leucocitario de 5 partes Manejo de Datos sobre Windows XP Professional Registro de resultados de pacientes (numéricos y gráficos) Control de Calidad Interno y Externo Análisis de WBC por Citometría de Flujo Fluorescente Enfoque Hidrodinámico para recuento de RBC y PLT Análisis de Hemoglobina libre de cianuro

14 Mínimo Volumen de aspiración 20 ul en tubos con EDTA * Mínimo volumen de muestra requerido Volumen muerto Modo manual 500 µl Modo automuestreador 1ml Modo capilar 140µL

15 Sysmex XS i Beneficios para el Usuario Validación de los resultados de las muestras Con sólo s un clic pueden verse los resultados y validar

16 Parámetros WBC, RBC, Hgb, Hct,, MCV, MCH, MCHC, PLT RDW-CV, RDW-SD, HDW Neut%, Lymph%, Mono%, Eo%, Baso%, NRBC% MPV Retic%, Retic#, IRF IG%, IG#

17 Linealidad extendida x 10 3 / µl HGB 0 25,0 g/ dl 0 8,00 x 10 6 / µl HCT 0 60% x 10 6 / µl

18 Tecnología a para Glóbulos rojos y Plaquetas Método de Electroenfoque Hidrodinámico Es el standard usado por Sysmex en los instrumentos de la serie X para la determinación de conteos precisos de plaquetas y glóbulos rojos Las células son rodeadas por una capa de fluído que las guía una por una a través del centro de la apertura Cada célula es contada y medida individualmente Un segundo flujo de fluído en la parte posterior de la apertura asegura que las células no recirculen

19 Tecnología a para Hemoglobina Reactivo libre de cianuro Grupo hidrofílico del SLS que se une a la molécula de la globulina Ocurre un cambio de configuración Oxidación de Fe 2+ --> > Fe 3+ Grupos Hidrofílicos de SLS se unen a Fe --> > SLS-Hb Fe 2+ Fe 3+ Fe 3+ SLS

20 Sysmex XS i Tecnología El XS utiliza el mismo método para la medición exacta de RBC/HTO que los otros analizadores de la familia X El hematocrito es medido basado en el volumen de las células c rojas determinado por detección n de CD

21 Principios de medición Citometría de flujo usando un láser l semiconductor para medir: luz dispersa frontal volumen celular luz dispersa lateral estructura interna de la célulac fluorescencia lateral (Tinción n de ADN y ARN)

22 Side scate Fluorescen Foward scater

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24 Sysmex XS i Tecnología Citometría de Flujo Fluorescente Diferencial completa de los leucocitos

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26 Por Citometría de Flujo se obtiene información acerca de la composición y madurez celular Fluorescencia Información del contenido de RNA y DNA Dispersión lateral Láser Información de la estructura interna Dispersión frontal Tamaño de la célula

27 Sysmex XS i Tecnología

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29 Sysmex XS i Beneficios para el usuario Opción n de selección n de análisis para maximizar el flujo de análisis y los costos operacionales Modo CBC Modo CBC + DIFF Análisis de luz desviada frontal Análisis de luz desviada lateral y de la fluorescencia lateral

30 + +

31 Desarrollo de nuevos softwares Masters La tecnología que se utiliza es muy potente y brinda más y más posibilidades de medición. Las aplicaciones se desarrollan para cuantificar lo que aparece en los gráficos a partir de utilizar fluorescencia. X PRO Es el soft básico, sobre el que se montan las aplicaciones Informe a medida del usuario Rangos para Control de Calidad Medidor para reactivos y seguimiento de trazabilidad IG Master RET Master Para cuantificar gránulos inmaduros Para cuantificar Hb en Reticulocitos

32 Cuantificación de Gránulos Inmaduros Información útil sobre el diferencial extendido de leucocitos IG: promielocitos mielocitos metamielocitos maduración de neutrófilos Blastos promielo mielo metamielo bandas segmentos IG

33 Cuantificación n de Gránulos Inmaduros IG Master fluorescencia Canal del diferencial Normal IG %, # Dispersión lateral

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35 RBC 분석 High angle detector (5 o - 15 o ) 670nm Laser Diode Low angle detector (2 o -3 o )

36 RBC Cytogram and Histograms Macro Micro RBC Volume (fl) 120fL 60fL 28g/dL 41g/dL fl RBC Volume (V) g/dl Hgb Concentration (HC) Hypo Hgb Concentration Hyper (g/dl) pg Hgb Content (CH)

37 Medida de los eritroblastos

38 Recuentos de Reticulocitos Método de Referencia: Azul de Metileno Variación n entre observadores Altos coeficientes de variación Laboriosos Métodos automatizados Azul de metileno Fluorescentes

39 Canal reticulocitos - Fluorescente RETSEARCH II (Diluyente + Colorante) WBC Tinción: Polimetino: ARN Oxazina: ADN Fl muy alta RET Fl alta RBC Fl baja

40 Canal de los reticulocitos

41 Utilidad Clínica - FIR.Confirmación de Anemia Aplástica.Permite la clasificación de anemias por su capacidad eritropoyética.talasemia vs. deficiencia de Hierro.Anemia de los procesos crónicos.hipoproducción vs. respuesta eritroide temprana.detección de implante correcto luego de transplante

42 Utilidad Clínica.Monitoreo de tratamientos inmunosupresores.monitoreo terapéutico de: tratamientos con Eritropoyetina. Corrección de anemias nutricionales Tratamiento de Mielodisplasias.Definición de necesidad de transfusión en neonatos Evolución post-tte días post-tte GB Reti (%) IRF (%) HPC (%)

43 Nuevos parámetros Recuento automatizado de granulocitos inmaduros IG Recuento de plaquetas inmaduras IPF Contenido de Hb de los reticulocitos

44 Plaquetas Reticuladas Son mas densas y reactivas que las plq maduras El contenido de RNA está relacionado con la megacariopoyesis Reflejan la actividad de la trombopoyesis

45 Determinacion de las plaquetas inmaduras

46 Contenido de Hb de los reticulocitos Ret-He Reticulocitos con contenido de Hb <28pg :Hipocr: Hipocrómicos Son identificados con colorantes fluorescentes por la posición n en el dispersograma de acuerdo con la fluorescencia y la luz dispersada frontalmente

47 Contenido de Hb de los reticulocitos Ret-He

48 Contenido de Hb de los reticulocitos Ret-He Aplicación clinica Cantidad real de Fe para la sintesis de Hb Detección n precoz de la deficiencia de Fe (cuando los marcadores bioquimicos pueden sufrir interferencia) Monitorea la terapia con Epo en pacientes con anemias crónicas

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50 XE-2100

51 Sysmex XS i Beneficios para el Usuario Control de Calidad 20 archivos para CBC + DIFF 1 archivo para Control Interno