Fecha de incio: 1 de noviembre de Fecha de término: 3 1 de octubre de 2002, prorrogado hasta el 28 de febrero de 2003.

Transcripción

1 INSECTOS ASOCIADOS CON CADAVERES EN GUATEMALA: UNA NUEVA HERRAMIENTA PARA EL FORTALECIMIENTO DEL SISTEMA DE JUSTICIA Responsable de la ejecución del proyecto: Lic. Enio B. Cano, M-Sc., Investigador Principal Laboratorio de Entomología Sistemática Universidad del Valle de Guatemala Edificio 11, salón 305 Apartado Postal 82,O 1901 Guatemala, Guatemala. Correo electrónico: Teléfonos: al 40, ext Fax: Unidad Ejecutara: Laboratorio de Entomología Sistemática Universidad del Valle de Guatemala Apartado Postal 82,O 1901 Guatemala, Guatemala. Fecha de incio: 1 de noviembre de Fecha de término: 3 1 de octubre de 2002, prorrogado hasta el 28 de febrero de Monto total del proyecto: Q. 369,801.S0 Monto solicitado al FONACYT: Q. 94, Monto de contraparte (IWG): 274,844.00

2 INDICE 1. Introducción 2. Antecedentes 2.1. Criminalidad e investigaciones criminalísticas en Guatemala 2.2. Insectos en cadáveres humanos 3. Objetivos 4. Metodología 4.1. Trabajo de campo para estudios de sucesión ecológica 4.2. Trabajo de laboratorio para estudios de sucesión ecológica 4.3. Colecta y revisión de colecciones para la elaboración del listado de especies y el Manual de Entomología Forense para Guatemala Determinaciones taxon6micas y descripciones 4.5. Estudios de ciclos de vida de Diptera de importancia forense 5. Resultados y discusión 5.1. Listado de especies de importancia forense para Guatemala 5.2. Manual de Entomología Forense Para Guatemala 5.3. Ciclos de vida de Diptera de importancia forense para Guatemala 5.4. Modelos de sucesi6n ecológica de insectos en cadáveres 6. Conclusiones 7. Recomendaciones 8. Bibliografía 9. Ejecución financiera de los recursos solicitados 10. Anexos

3 INSECTOS ASOCIADOS CON CADAVERES EN GUATEMALA: UNA NUEVA HERRAMIENTA PARA EL FORTALECIMIENTO DEL SISTEMA DE JUSTICIA 1. INTRODUCCION Enio B. Cano Laboratorio de Entomología Sistemática Universidad del Valle de Guatemala Apartado Postal 82,01901 Guatemala, Guatemala La entomología forense es la aplicación del estudio de los insectos y otros artrópodos en asuntos legales, especialmente en el litigio y proceso penal relacionado a muertes violentas. En los últimos años, grupos de entomólogos alrededor del mundo se han vinculado a laboratorios forenses y se han involucrado en equipos de investigaciones médico-legal. Esto obedece a que la evidencia de insectos recolectados adecuadamente, de y alrededor de los cadáveres humanos, pueden permitir realizar estimaciones objetivas del intervalo post-mortem, así como proveer otro tipo de información valiosa relacionada a las circunstancias que rodearon la muerte de la víctima (Benecke 1998, Lord 2000). Existen tres razones para el uso de insectos en la investigación médico legal. Primero, los insectos son los primeros en detectar un cuerpo en descomposición, seguido de lo cual ovipositan sobre la carroña iniciando un reloj biológico que culmina con la emersión de los adultos, lo que constituye la base para la estimación del intervalo post mortem. Segundo, la fauna de artrópodos coloniza los cadaveres en estados específicos de descomposición, formando ensambles particulares, lo que permite la estimación del intervalo post mortem en el largo plazo. Y tercero, los insectos de cadáveres humanos generalmente son ignorados por los investigadores forenses en la escena del crimen con lo cual se pierde evidencia adicional que puede ser util para corroborar o reorientar las investigaciones, y en algunos casos puede constituir evidencia contundente para conducir a una condena legal. En este proyecto, utilizando como modelo de estudio 8 cerdos de libras y varias cabezas de cerdos de libras, estudiamos la sucesión ecológica de insectos durante el proceso de descomposición cadavérica. Todos los insectos colectados fueron identificados y preparados para almacenamiento en colección. Ese material fue la base para la elaboración del listado de especies de importancia forense en Guatemala y para la elaboración de un manual de entomología forense para el país. Por otro lado, estudiamos los ciclos de vida de varias especies de moscas Calliphoridae de importancia forense en la estimación del intervalo post mortem en el corto plazo. Los resultados demuestran que la sucesión ecológica de insectos en cadáveres mantiene patrones generales. Sin embargo, existen variaciones a esos patrones, sobre todo por diferencias climáticas, variación individual, colonización por hormigas Solenopsis gemmimta y ataque por vertebrados carrofieros (zopilotes y perros ferales). En general, los cerdos bajo sol se descompusieron mucho más rápido que los cerdos bajo sombra, con diferencias de uno a dos días. Las especies de mayor importancia forense fueron las moscas de la familia Calliphoridae. Las especies dominantes bajo sol fueron Cochliomyia macellaria y Chrysomya rujfacies, mientras

4 que en sombra fueron Phaenicia eximia, Phaenicia purpurescens y Paralucilia fulvinota. La sucesión ecológica en general sigue el siguiente patrón: despúes de la muerte (casi inmediatamente) los insectos comienzan a llegar al cadáver. Las primeros grupos en llegar son moscas de las familias Calliphoridae (las moscas verdes y azules) y Sarcophagidae, a veces junto con avispas carroñeras (Hymenoptera). Las moscas colocan sus huevos sobre los orificios del cadáver (nariz, boca, oidos, ano) y al día siguiente es posible observar larvas del primer estadío que se desarrollan a una gran velocidad, devorando el cadáver. Con el paso de los dias las larvas más viejas emigran del cadáver y empupan en el suelo generalmente alejadas del cadáver, por lo cual muchas veces desaparecen de los restos. Cuando el cadáver se encuentra en el proceso de descomposición activa aparecen otros grupos de moscas, hormigas y escarabajos carroñeros y depredadofes. Cuando los restos están secos aparecen escarabajos como los Dermestidae, Cleridae y Nitidulidae, que son especialistas en degradar materia orgánica seca. En total fueron recolectadas al menos 106 entre especies y morfoespecies de artrópodos necrofílicos, pertenecientes a los órdenes Diptera (45 spp.), Hymenoptera (10 spp.), Coleoptera (36 spp.), Lepidoptera (2 spp.), Blattaria (1 sp.), Hemiptera (2 spp.), Dermaptera (1 sp.), Orthoptera (1 sp.), Araneae (3 spp.), Collembola (varias spp.), Diplopoda (2 spp), Diplura (1 sp.) y Acarina (varias spp.). El manual de entomología forense, elaborado con los insumos obtenidos durante el desarrollo del presente proyecto, incluye información actualizada sobre taxonomía, distribución y ciclos de vida de aplicación exclusiva para Guatemala. AdemAs, el manual contiene información detallada y un protocolo para la colecta y procesamiento del material entomológico asociado a cadáveres. El manual incluye información detallada para la utilización de la información entomológica en la estimación del intervalopost mortem, calculado por 1) la medida de la longitud en milímetros de las larvas más viejas de Calliphoridae, 2) la crianza de insectos en incubadora o temperatura ambiente y 3) la medida de la relación entre la temperatura y la tasa de desarrollo desde la oviposición hasta la eclosión de los adultos (grados-hora y grados-día acumulados). Se recomienda la divulgación producida por este proyecto a abogados, jueces, investigadores criminalisticos, policías, médicos forenses, antropólogos forenses y estudiantes de áreas relacionadas. Se recomienda al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología y al Ministerio Público de Guatemala, el apoyo hacia la búsqueda científica de elementos prueba novedosos, que como el presente estudio, apoyan el fortalecimiento del sistema de justicia del país. 2. ANTECEDENTES 2.1. Criminalidad e investigaciones criminalísticas en Guatemala En Guatemala se ha estimado un promedio de 3,221 muertes por actos violentos, entre 1992 y 1996 (MINUGUA, 1997a). En 1996, el total de muertes violentas de acuerdo a MINUGUA (1997b) sumaban 5,332, concentrados mayormente en el departamento de Guatemala, seguidos por Escuintla (12%), Jutiapa (6%), Izaba1 (6%) y Santa Rosa (5.1%). De acuerdo a MMUGUA (1997b), al relacionar los homicidios con el total de la población del país, Guatemala presenta el segundo lugar en criminalidad en

5 Latinoamérica con una tasa de 49 homicidios por cada 100 mil habitantes, tasa solo superada por Colombia. En 1996, los cinco departamentos con tasas de criminalidad mas altas fueron: Escuintla (16.5 homicidios/100mil hab.), izaba1 (12.7), Jutiapa (11.4), Santa Rosa (1 l. 1) y Guatemala (10.1). El artículo 251 de la Constitución Política de Guatemala establece que el Ministerio Público (MP) es la institución autónoma, auxiliar de la administración pública y los tribunales, cuya función es velar por el estricto cumplimiento de las leyes del país y ejercer la acción penal pública. La Ley Orgánica del MP señala que "es una institución con funciones autónomas, promueve la persecución penal y dirige la investigación de los delitos de acción pública; además vela por el estricto cumplimiento de las leyes del país. El código procesal penal de Guatemala (Figueroa 1999), en el capitulo V, artículo 181 establece que "Salvo que la ley disponga lo contrario, el Ministerio Público y los tribunales tienen el deber de procurar, por sí, la averiguación de la verdad mediante los medios de prueba permitidos y de cumplir estrictamente con los preceptos de este Código". Más adelante, en el articulo 182, dice "Se podrán probar todos los hechos y circunstancias de interés para la correcta solución del caso por cualquier medio de prueba permitido..." y en el artículo 195, establece lo referente al levantamiento de cadáveres: "En caso de muerte violenta o sospechosa de criminalidad, el Ministerio Público acudirá al lugar de aparición del cadáver con el objeto de realizar las diligencias de investigación correspondientes. Una vez finalizadas, ordenará el levantamiento, documentando la diligencia en acta en la cual se consignarán las circunstancias en las que apareció, así como todos los datos que sirvan para su identificación. En aquellos municipios en los que no hubiere delegación del Ministerio Público, el levantamiento será autorizado por el juez de paz". El MP, al recibir un caso, debe realizar un proceso de selección para determinar en cuáles debe ejercer la acción penal. En 1996, el MP recibió 153,854 casos, de los cuales 65% quedaron en investigación., 9% fueron archivados, 5% desjudicializados, y solamente el 1.4% se convirtieron en acusaciones formales con suficientes elementos de prueba. Esta grave situación fue claramente señalada en los Acuerdos de Paz entre el Gobierno de Guatemala y la URNG (1996:p.116): "Una de las grandes debilidades estructurales del Estado guatemalteco reside en el sistema de administración de justicia, que es uno de los servicios públicos esenciales. Este sistema y, dentro de 61, la marcha de los procesos judiciales, adolecen de fallas y deficiencias. La obsolencencia de los procedimientos legales, la lentitud de los trámites, la ausencia de sistemas modernos para la administración de los despachos y la falta de control sobre los funcionarios y empleados judiciales, propician corrupción e ineficiencia." La investigación criminal es otra de las falencia5 de la justicia penal. La descoordinación entre el Ministerio Público y la Policía Nacional constituye un serio obstáculo para la eficiencia de la investigación (Parodi et al. 1998, p.141). Esta situación se presenta debido a varios factores: poca preparación de los fiscales y policías para dirigir la investigación; escasa comunicación entre ambas instituciones, subsistiendo recelos y cuestionamientos respecto a quién debe realizar la investigación, y ausencia de un centro de investigaciones científicas (instituto de criminalística con todas las ciencias y técnicas aplicadas) adecuadamente organizado y provisto de la tecnología y el personal calificado para servir de apoyo a la administración de justicia (Parodi et al. 1998, p. 141). Por ejemplo, en el año 2000 la Policía Nacional Civil detuvo a 67,985 personas de las cuales 639 llegaron a juicio por parte del Ministerio

6 Público, pero de esa cifra, sólo promovieron 305 sentencias (Prensa Libre, 13 enero 2001, pag. 10) Insectos en cadáveres humanos El renombrado Dr. Carlos Federico Mora, en 1931 fue la primera persona que en Guatemala llamó la atención sobre el papel de los insectos y otros artrópodos en la descomposición cadavérica (Mora 1931, p ). De acuerdo a Mora (193 l), en nuestro país no es nada raro encontrar cadáveres "engusanados" con larvas de dipteros 24 horas después de la muerte, sobre todo cuando se trata de muertos abandonados a la intemperie. Yendo más allá, Mora (1931, p.35) seiíala que "la clase de lamas o de insectos que se encuentra sobre el cadáver, da algunos indicios que permiten apreciar el tiempo [desde la muerte]", citando un famoso estudio, pero concluyendo que "numerosas observaciones llevadas a cabo posteriormente, han podido demostrar lo aleatorio de estos cálculos, y han enseñado que las clasificaciones de insectos, no dan resultados concluyentes sino en casos de excepción". Semejantes conclusiones de uno de los científicos más influyentes de Guatemala probablemente haya conducido a que actualmente los investigadores criminalísticos le presten muy poca o ninguna atención a la fauna cadavérica y a que los insectos no se utilicen como elementos de prueba. Por ejemplo, Aragón (1968) consideró a los insectos dipteros, coleópteros, lepidópteros y acarinos (sic), como elementos destructores del cadáver y les Ilamó auxiliares de la putrefacción, pero no los consideró como parte de las muestras que deben analizarse en un labaratorio medico legal. Sin embargo, estudios recientes han demostrado que los artrópodos necrófilos son muy útiles en la estimación del intervalo post-mortem, debido a que las diferentes especies colonizan los cadáveres en estados específicos de descomposición (e.g. Benecke 1998). Cada especie tiene un ciclo de vida de duración casi constante y coloniza un cuerpo por un limitado período de tiempo; esto trae como consecuencia una sucesión ecológica de insectos de cadáveres (Catts y Goff 1992 ). Los insectos también pueden corroborar si el cuerpo ha sido movido tanto de dentro de una casa hacia el campo, o si ha sido trasladado de una región geográfica a otra (Catts & Goff 1992). La teoria subyacente a la estimación del intervalo post-mortem (IPM) por medio de la utilización de insectos es muy simple: Debido a que los insectos llegan a los cuerpos inmediatamente despúes de la muerte, la estimación de la edad de los insectos también provee una estimación del tiempo en que ocurrió la muerte. De acuerdo al antiguo estudio de Bornemizza (1957), después de la muerte y cuando el cuerpo comienza a despedir malos olores, los diversos grupos de insectos son atraídos al cadáver, Los primeros en llegar son diferentes especies de moscas adultas de las familias Calliphoridae y Sarcophagidae (Diptera). Otros grupos aparecen posteriormente, hasta que los restos del cadáver están tan secos que no proveen alimento para los insectos. Además, durante la sucesión ecológica los diferentes grupos de insectos se especializan en partes diferentes de los cadáveres. Por ejemplo, algunos escarabajos se especializan en huesos por lo cual aparecen hasta que los huesos esthn expuestos. Los coleópteros depredadores de larvas de moscas como los Staphylinidae, únicamente aparecen hasta que han llegado las moscas y han colocado sus huevos. Conforme la putrefacción avanza, llegan más grupos de insectos hasta que el cadáver se seca. Después de que el cadáver se ha secado, aparecen derméstidos, tineidos, y algunos ácaros, desapareciendo las larvas de mosca. Los datos obtenidos de los estudios de sucesión ecológica y duración de los ciclos de vida pueden ser incorporados a bases de datos forenses y cuando existen

7 3. OBJETIVOS 1. Realizar un listado de las especies de insectos (con énfasis en Diptera y Coleoptera) de importancia para la ciencia forense en los departamentos de Guatemala, Escuintla y El Progreso. 2. Elaborar una guía para la identificación taxonómica de los diferentes estadíos de insectos de importancia en la ciencia forense en Guatemala y su distribución geográfica. 3. Estudiar la duración de los ciclos de vida de las especies de Diptera de mayor importancia para la ciencia forense en Guatemala a fin de apoyar la estimación del intervalo Post-mortem. 4. Elaborar un modelo de la sucesión ecológica en cadáveres de cerdos estudiados en la ciudad de Guatemala, a fin de apoyar la estimación del intervalo Postmortem Trabajo de campo para estudio de sucesión ecológica Diseño para estudios con cabezas de cerdos: Utilizamos 4 cabezas de cerdos (Sus scrofa domestica L.) para estudios preliminares de sucesión ecológica. Realizamos dos experimentos. El 2 1 XII 2001 a las 1 1 :O0 hrs colocamos una cabeza de cerdo en un área de bosque de cipreses y una cabeza en un área sin vegetación. El colocamos dos cabezas de cerdo en las mismas localidades. El experimento bajo sol fue destruido por vándalas y vándalos. Diseño para estudios con cerdos enteros: Utilizamos 8 cerdos (Sus scrofa domestica L.) de entre 28 y 40 libras cada uno, como modelos estudiar la descomposición cadavérica y los insectos atraídos y desarrollados dentro y fuera del cadáver. Todos los cerdos fueron comprados a la misma empresa (Granja Experimental, Universidad de San Carlos de Guatemala) y fueron alimentados con el mismo producto. En cada experimento se usaron cuatro cerdos de la misma camada. Los cerdos fueron sacrificados con un golpe en el cráneo y asfixia. Luego de sacrificados fueron envueltos en bolsas de plástico y trasladados durante media hora hasta el lugar de estudio (zona 15) donde fueron colocados inmediatamente en cajas de hierro de 3/8, para evitar levemente el ataque por vertebrados carrofieros. Los dos experimentos fueron realizados así: El día 14. VI colocamos en diferentes sitios, dos cerdos bajo sol directo y dos cerdos bajo sombra de cipreses, a las 10:30 hrs. Todos los cerdos fueron hembras (28-44 libras). El día 13 de enero de 2003 colocamos en diferentes sitios, dos cerdos bajo sol directo y dos cerdos bajo sombra de cipreses, a las 9:30 hrs. Dos cerdos fueron machos (35 y 33 libras) castrados y dos cerdos fueron hembras (37 y 34 libras). Los dos cerdos bajo sol fueron devorados por zopilotes entre el primero y segundo día del experimento. Debido a que no conocemos estudios sobre sucesión ecológica cuando los cadáveres han sido devorados por vertebrados, continuamos revisando esos experimentos durante los siguientes 30 días.

8 Colecta de especímenes y toma de datos Debido a que la ciudad de Guatemala es la región del país con mayor criminalidad, el estudio se realizó en el campus central de la Universidad del Valle de Guatemala zona 15, en la colonia Pinares del Norte zona 18 y en la ciudad Universitaria zona 12. Todas las localidades situadas a aproximadamente 1510 msnm, con áreas descampadas y áreas de bosque de cipreses. Durante el transcurso del estudio los experimentos fueron revisados por dos personas al menos una vez cada día durante 30 días. En la revisión se colectaron insectos adultos voladores con red entomológica, insectos adultos y pupas en el suelo con pinzas, insectos pequeños con pinceles humedecidos en alcohol y larvas de todos los estadíos con pinzas. Los adultos de todas las especies fueron fijados en propanol al 80% mientras que las larvas fueron fijadas en líquido Khale's. Todo el material recolectado está almacenado en la Colección de Artrópodos de la Universidad del Valle de Guatemala. En los experimentos con cerdos enteros se tomó la temperatura dentro del cadáver, en el suelo y a un metro arriba del cadáver. Se colocó un higrotermógrafo para el registro de la humedad relativa y la temperatura semanal, cerca de los experimentos Trabajo de laboratorio para estudios de sucesión ecológica El material fijado en Khale's proveniente del campo fue lavado con agua destilada y pasado a propanol al 80%. Montajes en portaobjeto fueron preparados para al menos una larva de cada especie de importancia forense. Esas larvas fueron tratadas con KOH al 10% y calor durante tres horas, luego fueron lavadas con agua destilada y se le extrajeron las piezas bucales y se prepararon los espiráculos en posición para ser observables. Esos especímenes se montaron en una placa con cubreojeto utilizando Polivinil-alcohol y posteriormente fueron secadas en un horno a 40 C durante diez días. Las larvas montadas en portaobjetos fueron revisados con un microscopio binocular en seco débil y objetivo de inmersión (1000X). Las larvas en alcohol se revisaron con un estereomicroscopio (400X). Los adultos fueron montados en alfileres entomológicos y revisados con estereomicroscopio (400X). Algunas moscas muy pequeñas fueron montadas utilizando HDMS (Hexametil disilazano) y alfileres entomológicos Colectas y revisión de colecciones para la elaboración del listado de especies y el manual de entomología forense para Guatemala. Además del material de los experimentos, se realizaron viajes de colecta a Izabal, Escuintla, Zacapa, El Progreso, Chimaltenango, Quetzaltenango y Huehuetenango, con el objetivo de colectar insectos asociados a carroña que podrían tener importancia forense. Esas muestras fueron colectadas usando trampas pitfall cebadas con hígado de res y experimentos con cabezas de cerdo y luego el material fue fijado en propanol al 80% y khale's Determinaciones taxonómicas y descripciones La determinación taxonómica de los estadíos inmaduros se realizó con la ayuda de las claves de Greenberg y Szyska (1984), Liu y Greenberg (1989), Stehr (1991) y Castner et al. (1996). Los adultos fueron identificados por medio de las claves de Borror et al. (1989), Baumgartner y Greenberg (l984), Dear (1979, 1985), Castner et al. (1 996), McAlpine (1 977), y con la ayuda del material comparativo de la Colección de Artrópodos de la Universidad del Valle de Guatemala. También se mantuvieron larvas y pupas en incubadoras para obtener los adultos, debido a que los adultos (machos y hembras) son la base de la identificación taxonómica en moscas y otros taxa.

9 4.5. Estudios de los ciclos de vida de Diptera de imporancia forense Se estudió en detalle el ciclo de vida de Phaenicia eximia, colocando 20 vasos plásticos con 4 onzas de hígado de res fresco a las 10:OO hrs, en un área bajo sombra de pinos y cipreses, en la zona 15. Media hora despúes las muestras fueron revisadas para ver presencia de huevos de Ph. eximia. Todas las muestras con huevos fueron llevadas al laboratorio e incubadas a 26 C con HR de 75%, manteniendo el hígado como alimento. Todos los días, a las 09:OO y a las 17:OO se tomaron larvitas las cuales fueron fijadas en liquido de Khale's. Cuando el 10% de las larvas empuparon se consideró que la fase de pupa había llegado y luego se continuó revisando todos los días a las mismas horas para detectar la salida de los adultos. Cuando el 10% de los adultos había eclosionado, consideramos concluido el experimento. Repetimos ese experimento dos veces, pero solo presentamos los resultados de uno de ellos. Posteriormente todas las larvas fueron medidas con un vernier y los datos fueron analizados en el programa SPSS 9.0 (SPSS Inc. 1999) usando los valores de la longitud media con mas-menos dos desviaciones estándar de la media vrs. el tiempo en horas del desarrollo de las larvas. Parte de las larvas y pupas colectadas vivas en los experimentos de sucesión ecológica tambicn fueron criadas en incubadoras con humedad y temperatura constante (26 C y 75% HR), hasta la emersión de los adultos. Esto permitió completar el estudio de la duración de los ciclos de vida de cada especie bajo condiciones relativamente naturales. 5. RESULTADOS Y DISCUSION 5.1. Listado de especies de importancia forense para Guatemala Colectamos al menos 106 diferentes especies de artrópodos, principalmente insectos, asociados a los cadáveres de cerdos, en las diferentes localidades y en los diferentes experimentos realizados. Las especies más importantes y abundantes son las moscas Calliphoridae, con 11 especies de importancia forense. Grupos como Acarina y Collembola incluyen varias especies no identificadas. La riqueza de especies en cadáveres es muy alta, sin embargo, pocas especies son verdaderamente importantes en la ciencia forense, lo que sugiere que los estudios se pueden restringir a algunos pocos grupos. La clasificación de los artrópodos encontrados es la siguiente: ORDEN DIPTERA CALLIPHORIDAE Calliphora sp. Chrysomya megacephala Chrysomya mfifacies Cochlyiomya hominivorax Cochlyiomya macellaria Phaenicia eximia Phaenicia pupurescens Phaenicia sericafa Hemilucilia semidiaphana Hemilucilia segmentaria Paraluciliafulvinota

10 CECIDOMYIlDE Cecidomyiidae sp. CHLOROPIDAE Chloropidae sp. l DESCONOCIDOS Diptera sp. 1 Diptera sp.2 Diptera sp.3 Diptera sp.4 DOLICHOPODIDAE Dolichopodidae sp. DROSOPHILIDAE Drosophila sp. 1 MUSCIDAE Fania sp. 1 Fania sp..2 Musca domestica Muscina stabulans Ophyra sp. Stomoxys calcitrans Synthesiomyia nudiseta OTITIDAE Otitidae sp. 1 PHORIDAE Phoridae sp. 1, pequeila Phoridae sp.2, amarillo grande PIOPHILIDAE Piophila casei PLATYSTOMIDAE Platystomidae sp. 1 PSYCHODIDAE Psychodidae sp.1 Psychodidae sp.2 SARCOPHAGIDAE Sarcophagidae sp. 1 Sarcophagidae sp.2

11 Sarcophagidae sp.3 Sarcophagidae sp.4 Sarcophagidae sp.5 Sarcophagidae sp.6 Sarcophagidae sp.7 Sarcophagidae sp.8 Sarcophagidae sp.9 SEPSIDAE Sepsidae sp. SPHAEROCERIDAE Sphaeroceridae sp. 1 STRATIOMYIDAE Hermetia illucens ORDEN HYMENOPTERA VESPIDAE Agelaia yepocapa Agelaia sp. PORMICIDAE Forrnicidae sp.1 Formicidae sp.2 Solenopsisgemminata APIDAE Trigonafurviventris Partamona bilineata MICROHYMENOPTERA Microhymenoptera sp. 1 Microhymenoptera sp.2 Microhymenoptera sp.3 ORDEN COLEOPTERA CARABIDAE Carabidae sp. 1 Carabidae sp.2 DERMESTIDAE Dermestes bicolor Dermestes maculatus

12 HISTERIDAE Hister nr. coenosus o Histeridae sp. 1 m Histeridae sp.2 o Histeridae sp.3 CLERIDAE m Necrobia nrfipes SILPHIDAE m Nicrophonrs quadrimaculatus o Oxelyiron discicolle NITIDULIDAE o Omosita colon ST APHY LINID AE m Staphylinidae sp. 1 o Staphylinidae sp.2 o Staphylinidae sp.3 Staphylinidae sp.4 o Staphylinidae sp.5 Staphylinidae sp.6 Staphylinidae sp.7 Staphylinidae sp.8 Staphylinidae sp.9 Staphylinidae sp.10 o Staphylinidaesp.11 S taphylinidae sp. 12 Staphylinidae sp. 13 Staphylinidae sp. 14 o Staphylinidae sp. 15 Staphylinidae sp. 16 Staphylinidae sp. 17 m Staphylinidae sp. 18 SCARABAEIDAE m Phanaeus eximius Phanaeus pyrois o Onthophagus incensus Coprislugubris o Ataenius sp. TENEBRIONIDAE BIapstinus sp.

13 ORDEN LEPIDOPTERA e Lepidoptera sp l. e Lepidoptera sp.2 ORDEN BLATTARIA BLATTELLIDAE e Blattella germanica ORDEN HEMIPTERA LYGAEIDAE Lygaeidae sp. l ALrnIDAE e Burtinus notatipennis ORDEN DERMAPTERA Derrnaptera spp. ORDEN ORTHOPTERA ACRIDIDAE Acrididae sp. 1 ORDEN ARANEAE SALTICIDAE Salticidae sp. 1 Salticidae sp.2 LYCOSIDAE Lycosidae sp.1 ORDEN COLLEMBOLA Collembola spp. CLASE DIPLOPODA Diplopoda sp. 1 Diplopoda sp.2 ORDEN DIPLrn Diplura sp. 1 ORDEN ACARINA Acarina spp.

14 5.2. Manual de Entomología Forense para Guatemala El manual de entomología forense es el producto de utilidad práctica inmediata más importante del presente proyecto. Se pretende publicar en el futuro cercano que sea accesible a la comunidad interesada. Debido a que es explicativo por si solo, y debido a que puede ser repetitivo con respecto a parte de los resultados del proyecto, se presenta en el anexo l. Este manual se presenta como una alternativa a la Guía para la identificación de insectos de importancia forense en los departamentos de Guatemala, Escuintla y El Progreso, debido a que contiene más información, un protocolo de trabajo detallado y se aplica a todo el país Ciclos de vida de Diptera de importancia forense para Guatemala En los estudios realizados encontramos que los insectos de mayor importancia forense corresponde a los Diptera de la familia Calliphoride: Phaenicia eximia, Phaenicia purpurescens, Paralucilia fulvinota, Chrysomya rujisacies y Cochliomyia macellaria. De esas especies han sido descritos en detalle los ciclos de vida de Chrysomya rufifacies (Byrd y Butler 1997) y Cochliomyia macellaria (B yrd y Butler 1996). Sin embargo, hasta hoy no habían sido descritos los ciclos de vida de Phaenicia purpurescens ni de Phaenicia eximia. Los ciclos de vida de Coleoptera no se consideraron por ser demasiado largos y porque su duración excedía los límites marcados para los estudios de sucesión ecológica. Ciclo de vida de Phaenicia purpurescens En unos pocos especímenes colectados, encontramos que las larvas empuparon el y que los adultos emergieron el 19 III 2002 (pupa= días). Asumiendo que los adultos ovipusieron entre el y el , la duración de las larvas (+ huevos) sería de unos días. Por tanto el ciclo completo de Ph. purpurescens en época fria y seca (febrero a marzo 2002) sería de días. Baumgartner y Greenberg (1985) señalaron a esta especie como de amplia distribución pero rara y de biología desconocida, por lo cual los datos obtenidos son de gran importancia. Ciclo de vida de C. macellaria De C. macellaria es importante señalar que coloniza los cadáveres principalmente bajo sol intenso, y es menos frecuente en cadáveres bajo sombra. En uno de los experimentos realizados, obtuvimos un ciclo de vida completo de 12 a 13 días bajo sol intenso en la época de canicula en el mes de agosto de Ciclo de vida de Ch. &facies En condiciones naturales hemos obtenido ciclos de vida de 14 a 17 días, bajo condiciones de sol intenso. Los ciclos más cortos corresponden a la época de canicula (agosto) y los más largos a los meses de diciembre y enero. Ciclo de vida de Paralucilia fulvinota Esta especie únicamente apareció en experimentos bajo sombra durante la época fría del año. En uno de los experimentos las hembras pusieron sus huevos entre el , uno a dos días despúes de colocado el experimento. Las primeras larvitas aparecieron el 24 II Las larvas del tercer estadio empuparon el entre el Los adultos emergieron el IIi Esto nos da un ciclo de vida de días, con uno a dos días para el huevo, días para las larvas y 6-8 dias para las

15 pupas hasta ser adultos. Esos datos solo pueden aplicarse a condiciones similares entre febrero y marzo de cada aao. Ciclo de vida de Phaenicia eximia Bajo condiciones naturales, el ciclo de vida de Phaenicia eximia puede variar de acuerdo, temperatura y a la cantidad y calidad del alimento, pero de acuerdo a nuestros datos, el ciclo de vida varía entre 14 y 25 días. Por ejemplo, en un experimento a 26 C con poco alimento, los huevos fueron puestos el 30 IV 2002, las primeras larvitas aparecieron el 1 IV 2002, empuparon el 10 V 2002 y los adultos aparecieron el 20 V 2002, lo que nos da 20 días de duración. Bajo condiciones controladas de 26 C y 75% de humedad relativa, con suficiente alimento, encontramos que el ciclo de vida de Ph. eximia es de 14 días (figura 1). Los huevos duran cerca de 0.8 días, las larvas duran unos 7 días y las pupas 4.85 días. Sin embargo, a bajas temperaturas (diciembre-enero), bajo sombra, en condiciones naturales, el ciclo de vida tuvo una duración de 25 dias. Número de horas acumuladas I Figura 1. Cambios en el tamaiío de las larvas de Phaenicia eximia en función del tiempo transcurido (horas), en condiciones de laboratorio (t= 26OC, HR= 75%) Modelos de sucesibn ecológica de insectos de cadáveres Estados de descomposición: Se observaron los mismos estados de descomposición descritos por Tullis y Goff (1987) para estudios de sucesión de insectos en cadáveres de cerdo, excluyendo el "estado seco", debido a la dificultad de tipificar10 en climas húmedos (Tullis y Goff 1987). En las figuras 2. 3 y 4, se muestran los estados de descomposición tal y como

16 aparecieron en nuestros experimentos. En general, los cerdos bajo sol directo tuvieron un proceso más acelerado (por uno o dos días) en relación a los cerdos bajo sombra, Un cerdo que estuvo colonizado por hormigas Solenopsis, retrasó su descomposición por varios días y dos cerdos que fueron devorados por los zopilotes, llegaron al estado de esqueletonización en solo cuatro días. Estado fresco: Ocurrió desde el momento en que se sacrificaron los cerdos hasta que se notó la hinchazón del abdómen, producto de la actividad anaeróbica bacteriana. En este estado siempre aparecieron moscas Calliphoridae, Sarcophagidae y Muscidae y en varias ocasiones, abundantes avispas carrofieras bebiendo la sangre del cadáver. Al segundo día hay eclosión de las primeras larvas. Estado hinchado: Desde que se hincha el cadáver hasta que se rompe la piel y salen los gases de descomposición. Aparecen las larvas y se nota la formación de masas de "gusanos" en varias partes del cuerpo. Aparecen olores de descomposición. Hay presencia de abundantes adultos de moscas Calliphoride, Sarcophagidae y Muscidae. En algunos casos observamos abundantes adultos de la avispa Agelaia yepocapa. Estado de descomposición activa: Comienza cuando salen los gases y se rompe la piel, con la salida de productos líquidos de descomposición. Hay abundantes larvas de Calliphoridae comiendo del cadáver. Hay abundancia de adultos de insectos de varios grupos incluyendo Silphidae, Staphylinidae, Histeridae, Sepsidae, Muscidae, Calliphoridae, Sarcophagidae, Apidae (Trigona, Partamona), y Vespidae (Agelaia spp.). Termina cuando la última larva de Calliphoridae abandona el cadáver para empupar en el suelo. Estado de descomposición avanzada: Comienza cuando desaparecen las larvas de Calliphoridae y termina cuando no quedan más que restos sin ningún tipo de actividad entomológica. Abundantes moscas Sepsidae, Stratiomyiidae (Hermetia illucens) y Piophilidae (Piophila casei) y coleópteros como Necrobia rufzpes, Omosita colon y Dennestes spp., son abundantes en este estado de descomposición Modelo generalizado de sucesión ecológica en cadáveres La sucesión ecológica en general sigue el siguiente patrón: despúes de la muerte (casi inmediatamente) los insectos comienzan a llegar al cadáver. Las primeros grupos en llegar son moscas de las familias Calliphoridae (las moscas verdes y azules) y Sarcophagidae, a veces junto con avispas carroñeras (Hymenoptera). Las moscas colocan sus huevos sobre los orificios del cadáver (nariz, boca, oidos, ano) y al día siguiente es posible observar larvas del primer estadío que se desarrollan a una gran velocidad, devorando el cadáver. Con el paso de los dias las larvas más viejas emigran del cadáver y empupan en el suelo generalmente alejadas del cadáver, por lo cual muchas veces desaparecen de los restos. Cuando el cadáver se encuentra en el proceso de descomposición activa aparecen otros grupos de moscas, hormigas y escarabajos

17 carroñeros y depredadores. Cuando los restos están secos aparecen escarabajos como los Derrnestidae, Cleridae y Nitidulidae, que son especialistas en degradar materia orgánica seca. La figura 2 muestra el modelo generalizado y simplificado extraído de los datos del presente estudio (ver cuadros 1 a lo), para Guatemala. Formicidae Staphylinidae Histeridae - I Scarabaeiy Constantes en el tiempo IJClcñdasI Estado del cadáver en proceso de descomposición Figura 2. Modelo de sucesión ecológica simplificado para insectos asociados a cadáveres en la ciudad de Guatemala. Se excluyen adultos y puparios de Calliphoridae y Sarcophagidae y adultos de grupos menores. El grosor de la flecha indica la abundancia relativa de cada taxón ylo estadio Diez casos de sucesión ecológica en cerdos En los estudios que se realizaron con cerdos como modelos de sucesión ecológica, apareceron patrones generales y variaciones notables a esos patrones de sucesión ecológica, atribuibles a variaciones individuales y condiciones climáticas, pero sobre todo variaciones debidas a la colonización por hormigas Solenopsis gemminata y la depredación de los cadáveres por zopilotes y perros ferales. En estadística este efecto se conoce como "non demoniac intrusion", y debido a que fue inevitable en el estudio, se presentan los resultados de los cuadros 1 a 10, como estudios de caso.

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20 Cuadro 1. Sucesión ecológica de insectos en cabeza de cerdo bajo sol, 21 2Uí 2001 Sarcophaga (larva) Trigona sp. Phoridae sp. 1, sin alas - -- Histeridae sp.2 Omosita colon Necrobia rufipes (adultos).. vncias

21 Cuadro 2. Sucesión ecológica de insectos en cabezas de cerdo bajo sombra, 21 XII 2001.

22 Cuadro 3. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 1 bajo sombra, 14 VIII 2002 al 14 M 2002 ~Gecies *-unes con abundancia moderada p= pupa o pupario Especies abundantes y constantes a= adulto

23 Cuadro No. 4. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 2 bajo sombra, 14VILI 2002 al 14 M 2002 & Especies comunes con abundancia moderada Especies abundantes y constantes p= pupa o pupario a= adulto

24 Cuadro No. 5. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 1 bajo sol, 14Vm 2002 al 14 IX 2002 ~sbcies kmunes con abundansia moderada Especies abundantes y constantes p= pupa o pupario a= adulto

25 Cuadro No. 6. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 2 bajo sol, 14 VIiI 2002 al 14 IX 2002 ~s&es &munes con abundancia moderada p= pupa o pupario Especies abundantes y constantes a= adulto

26 24 Cuadro No. 7. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 1 bajo sombra, al ~siecies &munes con abundancia moderada Especies abundantes y constantes p= pupa o pupario a= adulto

27 Cuadro No. 8. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 2 bajo sombra, al 12 II 2003 ' Especies comunes con abundancia moderada p= pupa o pupario Especies abundantes y constantes a= adulto

28 Cuadro No. 9. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 1 bajo sol, al ~Gecies &munes con abundancia moderada Especies abundantes y constantes p= pupa o pupario a= adulto

29 Cuadro No. 10. Sucesión ecológica de insectos en cerdo No. 2 bajo sol, al 12 II 2003 Especies abundantes y constantes a= adulto

30 6. CONCLUSIONES l. Se conocen al menos 106 especies de artrópodos, principalmente insectos, asociados a cadáveres de cerdos y humanos en Guatemala, los cuales tienen importancia forense. 2. Las especies de insectos de mayor importancia forense en Guatemala son: Phaenicia eximia, Phaenicia purpurescens, Paralucilia Julvinota, Chrysomya rufifacies, Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae), Piophila casei (Diptera: Piophilidae), Hermetia iiiucens (Diptera: Stratiomyidae), Necrobia rujipes (Coleoptera: Cleridae), Dermestes maculatus, Dermestes bicolor (Coleoptera: Dermestidae), Omosita colon (Coleoptera: Nitidulidae) y la avispa Agelaia yepocapa (Hymenoptera: Vespidae) 3. La duración de los ciclos de vida de las especies de importancia forense en Guatemala facilita la estimación del intervalo postmortem en el corto plazo (0-25 días), utlizando información de temperatura ambiental y10 la longitud de las larvas. 4. La sucesión ecológica en los cadáveres estudiados constituye un patrón de comparación para la estimación del intervalo postmortem en la ciudad de Guatemala, bajo condiciones de temperatura y altitud similares, en el largo plazo (15-60 días). 5. En los experimentos de sucesión hay notables diferencias entre los cadáveres bajo sombra y bajo sol directo: Los cadáveres bajo sombra se retrasan como mínimo un día en su proceso de descomposición en relación a los cadáveres bajo sol. Por otro lado, las especies de moscas Calliphoridae que los colonizan son diferentes. CochIiomyia macellaria y Chrysomya mjifacies colonizan los cadáveres bajo sol; Phaenicia eximia, Ph. purpurescens y ParaluciIia fulvinota colonizan los cadáveres bajo sombra. 6. Las especies indicadoras de intervalo postmorten de más de 25 días son: abundantes especímens de PiophiIa casei (larvas), Necrobia rujpes (adultos y larvas), Dermestes spp. (adultos y larvas), Omosita colon (adultos y larvas) y Hermetia illucens (larvas). 7. Los vertebrados carroñeros pueden acelerar el proceso de descomposición cadavérica, produciendo un esqueleto en tan solo 4 días. 8. La colonización de cadáveres por hormigas SoIenopsis gemminata puede retrasar el proceso de colonización por moscas Calliphoridae por varios días, desacelerando el proceso de descomposición cadavérica. 9. La evidencia entomológica ofrece nuevas posibilidades al fortalecimiento del sistema de justicia y debe ser considerada seriamente en el proceso penal guatemalteco.

31 7. RECOMENDACIONES 1. Se recomienda la publicación del Manual de Entomología Forense Para Guatemala. 2. Se recomienda la realización de estudios de sucesión ecológica en cerdos, en otras localidades del país con ambientes diferentes (e.g., altiplano, Izabal, Petén, Zacapa, Cuchumatanes, Costa Sur), para mejorar nuestro conocimiento sobre variabilidad en la colonización y descomposición cadavérica y biogeografía de insectos forenses. 3. Se recomienda la realización de estudios de sucesión ecológica de insectos utilizando cadáveres humanos. 5. Se recomienda la realización de experimentos de sucesión simulando condiciones que no han sido estudiadas como cadáveres enterrados, cadáveres en el agua, cadáveres en espacios encerrados, etc. 6. Se recomienda la realización de experimentos con numerosas repeticiones para apoyar el uso científicamente fundamentado de la información entomológica en el proceso penal. 7. Se recomienda la realización de un curso de entrenamiento al personal del Ministerio Público, Policía Nacional Civil y Cuerpos de Bomberos, para demostrar la importancia y utilidad de recolectar y manejar con cuidado la evidencia entomológica, ubicua en los cadáveres. Aragón, H.A Medicina forense. Estudios Universitarios Vol. 11, Editorial Universitaria, Universidad de San Carlos de Guatemala, Guatemala. 279pp. Baumgartner, D.L. y B. Greenberg The genus Chrysomya (Diptera: Calliphoridae) in the New World. J. Med. Entomol. 21: Baumgartner, D.L. y B. Greenberg Distribution and medical ecology of blow flies (Diptera: Calliphoridae) of Pení. Ann. Entomol. Soc. Am. 78: Benecke, M Six forensic entomology cases: Description and commentary. Journal of Forensic Sciences 43: Bornemizza, G.F An analysis of aríhropod succession in carrion and the effect of its descomposition on the soil fauna. Austral. J :l-12. Borror, D.J., C.A. Triplehorn y N.F. Johnson An introduction to the study of insects. Saunders College hblishing, Philadelphia. 875pp. Byrd, J.H. y J.F. Butler Effects of temperature on Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae) development. Journal of Medical Entomology 33: Byrd, J.H. y J.F. Butler Effects of temperature on Chrysomyia &facies (Diptera: Calliphoridae) development. Journal of Medical Entomology 34(3): Castner, J.L., J.H. Byrd y J.F. Butler Forensic insect field identification cards. Forensic Sciences Foundation, American Academy of Forensic Sciences. Colorado Springs, Colorado.

32 Catts, E.P. y M.L. Goff Forensic entomology in criminal investigations. Annual Rev. Entomology 37: Dear, J.P A revision of the Toxotarsinae (Diptera: Calliphoridae). Papeis Avulsos Zool. Sao Paulo 32: Dear, J.P A revision of the New World Chrysomini (Diptera: Calliphoridae). Revta Bras Zool. 3: Figueroa, R Código procesal penal, concordado y anotado con la jurisprudencia constitucional, incluye Exposición de Motivos, elaborada por César Barrientos Pellecer. F&G Editores, Guatemala. Gobierno de Guatemala-Unidad Revolucionaria Nacional Guatemalteca Acuerdos de paz. Asamblea de la Sociedad Civil, ASC. Guatemala. Greenberg, B. y M.L. Szyska Inmature stages and biology of fifteen species of Peruvian Calliphoridae (Diptera). Ann. Entomol. Soc. Arn. 77: Liu, D. y B. Greenberg Inmature stages of some flies of forensic irnportance. Ann. Entomol. Soc. Arn. 82(1): Lord, W.D Case studies in forensic entomology. Accesado el 12x McAlpine, J.F A revised classification of the Piophilidae including 'Neottiophilidae' and 'Thyriophoridae' (Diptera: Schizophora). Mem. Can. Ent. 103: MINUGUA. 1997a. Estudio sobre la seguridad publica y la Policía Nacional de Guatemala. Asesoría Policial de MINUGUA, Guatemala. MINUGUA. 1997b. Estadisticas departamentales sobre violencia. Area de Fortalecimiento del Poder Civil, MINUGUA, Guatemala. Mora, C.F Manual de Medicina Forense. Tipografia Nacional, Guatemala. 389pp. Parodi, C., J. Maier, A. Ortiz y A. Domínguez Asumiendo el reto: Justicia y seguridad en Guatemala. En: International Institute for Democracy and Electoral Assistance (eds.). Democracia en Guatemala: La misión de un pueblo entero. Internat. Inst. Dem. Elect. Ass., Colombia. p Stehr, F. W. (ed.) Imature insects. KendallíHunt Publishing Company. Vols Tullis, K. y M.L. Goff Arthropod succession in exposed carrion in a tropical rainforest on O'ahu Island, Hawaii. Journal of Medical Entomology 24:

33 9. Ejecución financiera de los recursos solicitados EJECUCION PRESUPUESTARLA En la siguiente tabla se presenta e1 desglose de los gastos, de acuerdo a lo asignado Capacitación Equipo Materiales y suministros Mantenimiento y reparaciones Documentación e información Publicación de resultados Registro de patentes Gastos no previstos Gastos administrativos Otros gastos Gastos de transporte Viáticos Sewicios bhsicos Arrendamiento de instalaciones 13, , , , , , , , I 1, , , , Cuotas de inscripción I Y Servicios de laboratorio 1 1 Suma 94, , , , , , , , , , , , , , , , , ANEXOS ANEXO 1. Manual de entomología forense para Guatemala.

34 MANUAL DE ENTOMOLOGIA FORENSE PARA GUATEMALA ENTOMOLOGIA FORENSE La entomologia forense es el estudio de los insectos y otros artrópodos presentes en cadhveres humanos y vinculados a algún tipo de criminalidad. El documento más antiguo que muestra la importancia de la entomología forense en la investigación criminal fue escrito en el siglo XIII en un manual de Medicina Legal chino, en el cual se describe el caso de un homicidio en el que apareció un labrador degollado por una hoz. Para resolver el caso hicieron que todos los labradores de la zona que podían encontrarse relacionados con el muerto, depositasen sus hoces en el suelo, al aire libre, observando que tan solo a una de ellas acudían las moscas y se posaban sobre su hoja, lo que llevó a la conclusión de que el dueño de dicha hoz debía ser el asesino, pues las moscas eran atraídas por los restos de sangre que habían quedado adheridos al 'arma' del crimen (Greenberg 199 1). En Guatemala fiie el renombrado Dr. Carlos Federico Mora, la primera persona que Ilamó la atención sobre el papel de los insectos y otros artrópodos en la descomposición cadavérica (Mora 1931, p ). De acuerdo a Mora (1931), en nuestro país no es nada raro encontrar cadáveres "engusanados" con larvas de dípteros 24 horas después de la muerte, sobre todo cuando se trata de muertos abandonados a la intemperie. Yendo más allá, Mora (1931, p.35) señala que "la clase de larvas o de insectos que se encuentra sobre el cadáver, da algunos indicios que permiten apreciar el tiempo [desde la muerte]", citando un famoso estudio, pero concluyendo que "numerosas observaciones llevadas a cabo posteriormente, han podido demostrar lo aleatorio de estos cálculos, y han enseñado que las clasificaciones de insectos, no dan resultados concluyentes sino en casos de excepción". Semejantes conclusiones de uno de los científicos más influyentes de Guatemala probablemente haya conducido a que actualmente los investigadores criminalisticos le presten muy poca o ninguna atención a la fauna cadavérica y a que los insectos no se utilicen como elementos de prueba. Por ejemplo, Aragón (1968) consideró a los insectos dípteros, coleópteros, lepidópteros y acarinos (sic), como elementos destructores del cadáver y les llamó auxiliares de la putrefacción, pero no los consideró como parte de las muestras que deben analizarse en un labaratorio médico legal. Sin embargo, recientes han demostrado que los artrópodos necrófilos son muy útiles en la estimación del intervalo post-mortem, debido a que las diferentes especies colonizan los cadáveres en estados específicos de descomposición (e.g. Benecke 1998). Cada especie tiene un ciclo de vida de duración casi constante y coloniza un cuerpo por un limitado periodo de tiempo; esto trae como consecuencia una sucesión ecológica de insectos de cadáveres (Catts y Goff 1992 ). Los insectos también pueden corroborar si el cuerpo ha sido movido tanto de dentro de una casa hacia el campo, o si ha sido trasladado de una región geográfica a otra (Catts & Goff 1992). La teoría subyacente a la estimación del intervalo post-mortem (IPM) por medio de la utilización de insectos es muy simple: Debido a que los insectos llegan a los cuerpos inmediatamente despúes de la muerte, la estimación de la edad de los insectos también provee una estimación del tiempo en que ocurrió la muerte.

35 METODOS DE COLECTA Y PREPARACION DE INSECTOS ASOCIADOS A CADAVERES En Guatemala la colecta de artrópodos o insectos asociados a cadáveres como parte de la evidencia no es una práctica común o más probablemente, no es una práctica, entre los forenses del Ministerio Público. De acuerdo a comentarios de médicos forenses y peritos del Ministerio Público, únicamente se recolectan insectos cuando el forense a cargo lo ordena o cuando el caso es "muy sonado", o cuando se trata de una persona adinerada o de un extranjero. En mi experiencia las pocas muestras recibidas en mi laboratorio (tres) han llegado en muy mal estado de conservación (en agua o en seco) y con los datos en forma de código, en las bolsas de seguridad tradicionales de los forenses pero en botecitos plásticos no herméticos. Debido a que los buenos datos así como la buena preservación de los especímenes es muy importante para la correcta determinación taxonómica y estimación de la edad de los especímenes, presento a continuación el listado de equipo y soluciones de preservación que deben aplicarse. Material de colecta en la escena Red entomológica Viales de colecta de nalgene y viales de cristal con tapadera de baquelita Frascos de vidrio de boca ancha con tapadera Pinzas entomológicas de punta fina (en Guatemala se pueden encontrar pinzas de las usadas por oculistas) Pinceles Contenedores plásticos (como de sandwich) con tapadera Papel 100% algodón para elaboración de etiquetas (otro papel libre de ácido puede funcionar bien) Tijeras Rapidógrafos desechables 0.1 ó 0.005, marca Pigma, para escribir las etiquetas. Termómetro de inserción (thermocouplé) Psicrómetro Guantes de polietileno desechables Aspirador de insectos Linterna para colecta nocturna Pala de mano Bolsas ziploc Regla graduada Libreta de campo tipo "Rite in the Rain" y sus respectivos lapiceros Liquidos presewantes: Propano1 al SO%, Etanol al 70% y líquido Khale's Formula de Khale's (para 106ml): Etanol al 95% 30ml Formaldehido 12ml Acido acético glacial 4ml Agua destilada 60ml

36 r aspirador de insectos Corcho o tap6n de Tapon de gaui (impide el paso de insectos a la boca) Tubo de Los especimenes se succionan por,-- -..' Frasco Bastidor de aluminio 1 red entomológica I Red de tela fina Rnmhilla de 1117 inrnixlwmte CiihieHa aitw.rior de metal Emhidn de metal ExIl embudo de berlese Miimtrn ri~. hnraiasrn n hiimiis Malla de Fmwn cnn alrnhnl Equipo de colecta de insectos de importancia forense

37 Material de colecta v análisis en laboratorio Embudo de Berlese Contenedores plásticos (como de sandwich) con tapadera para cría de especimenes en cautiverio Pinzas entomológicas de punta fma Pinceles Contenedores plásticos (como de sandwich) con tapadera Papel 100% algodón para elaboración de etiquetas (otro papel libre de ácido puede funcionar bien) Tijeras Rapidógrafos desechables 0.1 ó 0.005, marca Pigma, para escribir las etiquetas. También se pueden hacer etiquetas en computadoras pero se debe utilizar una impresora con tinta indeleble original. Estereomicroscopio de alta resolución (hasta 450x) Microscopio compuesto Portaobjetos Cubreobjetos Líquidos para el montaje en directo en portaobjetos: Hoyers, Polivinil-alcohol, Euparal. Líquidos para montaje en poriaobjetos previa deshidratación: Agua destilada, Alcohol absoluto, Xilol, Mercoglass, Permount, Bálsamo de Canadá. Alfileres entomológicos números 000, 00, 0, 1, 2,3 y minuten. Horno secador de muestras y especímenes Incubadora con control de humedad y temperatura para la cría de insectos. Higrotennógrafo Hexa metil disilazano (HMDS) para preparación de muestras en alfiler. Colecta en la escena Haskell y Williams (2000), elaboraron un protocolo para la colecta de especimenes y toma de datos en la escena del crimen, que con algunas modificaciones se presenta a continuación: Revisión de la escena en búsaueda de insectos 1. Evaluación de la riqueza de especies y abundancia relativa de las especies mas comunes.

38 2. Revisión detallada para detectar la presencia y distribución de adultos, huevos, larvas y pupas o puparios en o alrededor del cuerpo Prestar atención a los estados inmaduros en especial huevos, huevos vacios, larvas, exuvias larvales, puparios, puparios vacios (adultos eclosionados), heces y otras marcas dejadas por insectos como huellas de larvas migratorias o mordidas en el cadáver Prestar atención a insectos depredadores como coleópteros (e.g., Silphidae, Staphylinidae, Histeridae), hormigas y avispas Prestar atención a la actividad de vertebrados carrofieros como zopilotes, perros y gatos ferales y a como afectaron al cadaver Prestar atención a la posición exacta del cuerpo: incluyendo posición de las extermidades, de la cara y la cabeza; notar cuales partes del cuerpo están en contacto con el sustrato; notar donde pega el sol y la sombra durante un ciclo de un día normal Prestar atención a la actividad de insectos en un radio de 3-6 metros del cuerpo. Observar el vuelo, descanso, o insectos adultos y larvas o puparios en el suelo, próximos al cuerpo.

39 1.6. Prestar atención cualquier fenómeno poco usual ya sea antropogénico o natural que puede alterar el ambiente del cuerpo (e.g. trauma o mutilación del cuerpo, cuerpos quemados, cuerpos cubiertos o encerrados en algíin material, enterramiento, movimiento del cuerpo o desmembramiento). Toma de datos climatoló~icos en la escena La temperatura y humedad (probablemente también la lluvia, sol, duración del día, nubes y niebla) están muy relacionadas a la duración del ciclo de vida de los insectos y son de mucha utilidad a la hora de determinar el Intervalo Post Mortem. Los datos que deben tomarse son los siguientes: 1. Temperatura ambiente del aire tomados a un metro arriba del cuerpo. 2. Temperatura de la superficie del cuerpo (sobre la piel). 3. Temperatura debajo del cuerpo. 4. Temperatura de las masas de larvas (insertando el termómetro entre los gusanos). 5. Temperatura del suelo a unos 5cms de produndidad. 6. Humedad relativa utilizando un psicrómetro. 7. Idealmente debe quedarse un Higrotermógrafo en la escena del crimen por unas dos semanas para conocer la evolución de las condiciones climática. 8. Debe tomarse datos de temperatura y humedad de al menos dos semanas antes de localizado el cuerpo, utilizando la información de la estación meteorológica más cercana, bajo condiciones similares. 9. Cobertura vegetal sobre el cuerpo (cantidad de sombra proyectada por el dosel) medida con un densitómetro. Colecta de insectos antes de Que el cuerpo sea removido 1. Los insectos voladores se capturan con una red entomológica y luego de colectados los especímenes se introducen en viales conteniendo propanol al 80%. Los datos de colecta son introducidos en el mismo vial del especimen utilizando papel algodón y un rapidógrafo desechable de tinta indeleble (Pigma 0.1 o 0.005). 2. Los insectos que no vuelan o lentos, incluyendo larvas se colectan con pinzas entomológicas. Insectos muy pequeños se capturan con pinceles humedecidos en alcohol. Se anotan todos los datos de colecta y se agregan a los viales. Las larvas y huevos deben ser fijadas en líquido Khale's y otros insectos pueden ser fuados directamente en propanol al 80%. 3. Se debe colectar insectos vivos, principalmente huevos, larvas y puparios de Diptera, los cuales deben trasladarse al laboratorio y mantenerse en una incubadora con húmedad y temperatura regulada, similar a la de la escena del crimen. Se recolectan en botes plásticos dentro de los cuales se coloca papel absorvente tipo "majordomo". Estos insectos se mantienen con hígado de res fresco y un sustrato de arena de río esterilizada, en vasos plásticos de 1 litro con tapadera de muselina. 4. Se pueden colectar insectos con trampas de cartón pegajosas tipo "tienda de campafia", de 25 cms X 23 cms, colocadas a 1 metro del cuerpo. 5. Los lugares del cuerpo en donde es más probable encontrar insectos incluyen: cavidades nasales, ojos, orejas y oidos, boca, nuca, cabello, aberturas genitales y anales y áreas con algún tipo de traumatismo (cortes, colgajos, disparos, raspones, etc.).

40 Colecta de insectos desmíes remover el cuerpo 1. Despúes de que es removido el cuerpo quedan muchos insectos debajo del cuerpo, sobre el suelo y debajo del suelo, por lo cual debe colectarse muestras de insectos como larvas, pupas y adultos, sobre el suelo y unos centímetros más abajo, utilizando una pala pequeña y pinzas entomológicas. El material se guarda en viales con propano1 al 80% y líquido Khale's, con sus respectivos datos de colecta. 2. También se colectan muestras hojarasca y de suelo (aproximadamente 100cc), las cuales se guardan en bolsas plásticas ziploc con sus respectivos datos y se llevan al laboratorio donde se procede a colocar en un embudo de Berlese para obtener los insectos y otros artrópodos presentes, tres días despúes. Preparación, montaie e identificación del material en laboratorio El material recolectado debe ser preparado, montado y etiquetado previo a la determinación taxonómica. 1. Insectos en alfiler Los insectos que seran pinchados en alfiler incluyen adultos de moscas, avispas, coleópteros, hormigas y chinches. Generalmente las moscas, avispas y chinches, se pinchan en el tórax, los coleopteros se pinchan en el élitro derecho y las hormigas se colocan en puntas, pegadas con esmalte de uña. Puparios de moscas criadas en cautiverio se colocan en punta junto con los adultos. Q 3 Coleoptera Homoptera Diptera Hymenoptera Hemiptera Forma correcta de pinchar los especimenes adultos Despúes de pinchados se ponen a secar en un horno a 40 C, durante dos días. Lo siguiente es colocar a cada especímen su etiqueta de identificación, con los datos importantes de localidad, fecha, hora, altitud, vegetación, etc. y en otra etiqueta los datos pertenecientes al caso que se está tratando. Así preparados se colocan en cajas entomológicas separados por morfoespecies y están listos para ser identificados utilizando claves, guías, revisiones taxonómicas y toda la literatura disponible, utilizando un estereomicroscopio de alta resolución.

41 2. Insectos en placas (principalmente larvas de Diptera) Los insectos que serán montados en placas con cubreobjeto incluyen huevos y lamas de todas las especies encontradas. El procedimiento es el siguiente: 1. Se coloca la larva en una solución de KOH al 10% durante horas (de acuerdo con el color y dureza del insecto), o hirviéndolo en la misma solución durante unos minutos a 3 horas. El objetivo es destruir los tejidos blandos y dejar las estructuras del exoesqueleto y el aparato bucal, visibles. 2. Se lava el especimen con agua destilada y con etanol al 30%. 3. En otro recipiente se colorea el especimen con solución Essig y 3 gotas de la tinción triple Wilky. 4. Se deshidrata en etanol graduado al 35%, 50%, 75%, 85% y 95% durante 5 a 10 minutos en cada uno. 5. Se lava en una solución de etanol absoluto. 6. Se aclara en xileno (= xilol), aceite de clavo (eugenol) o aceite de cedro durante 5 a 10 minutos. 7. Se monta sobre el portaobjetos en Bálsamo de Canadá, Permount, Polivinil Alcohol, Euparal o cualquier otro medio de montaje. 8. Se colocan dos etiquetas en la muestra. Una con los datos de colecta y la otra con la identificación taxonómica definitiva o tentativa. 8. Se seca al horno a aproximadamente 40-50'~ por unos tres a diez dias. GUATEMALA.Guatema1a. Guatemala. UVG. Z Vi En me pelo púbico. ~JI cadáver humano mconbado a Las 08NOhrg en bosque de pino con aicino cerca de un basurero.. Cara MP. r (Schamlaus) (Orden Phthiraptera) Det: E.B ano, *, 1 Datos de colecta Nombre de quien identificó la muestra 3. Insectos vivos Los insectos que se mantienen vivos deben permanecer en recipientes de plástico cubiertos con cedazo, en incubadoras a temperatura similar a la de la escena del crimen o a temperatura ambiente. En todo caso debe existir control de la temperatura a la que se están desarrollando. Las muestras deben ser revisadas diariamente, al menos dos veces al día anotando los cambios observados.

42 ARTROPODOS ASOCIADOS A CADAVERES EN GUATEMALA ANATOMIA Y BIOLOGIA BASICA DE INSECTOS DE IMPORTANCIA FORENSE El cuerpo de un insecto está dividido en tres distintas regiones: CABEZA, TORAX y ABDOMEN. La cabeza contiene la boca y sus órganos asociados que sirven para manipular la comida (partes bucales), los principales órganos sensoriales (ojos, antenas), y el cerebro, el centro de la integración nerviosa y de la memoria. El tórax es la región de la locomoción y sostiene las patas y alas. Se compone de protórax, mesotórax y metatórax. Las patas tienen típicamente seis segmentos: coxa, trocanter, fémur, tibia, tarsos y pretarsos con variación en forma y tamaño entre los diferentes grupos taxonómicos. Las alas contienen una serie de venas que permiten diferenciar entre grupos distintos. El abdómen está formado por varios segmentos (la parte dorsal se llama tergo y la parte ventral estemon) y contiene el aparato reproductor. Los genitales generalmente se encuentran en los segmentos abdominales 8 y 9, y son de mucha importancia en la separación de especies, principalmente de moscas. Tórax Terguito Antena Cabeza Ocelos Ojo compuesto Partes bucales Mpos Esternito Plenirito um Anatomía básica de un insecto El conocimiento de las estructuras y su posición así como de la forma de las venas de las alas y la disposición de las setas (pelos) en el cuerpo de los insectos, son de gran importancia para la clasificación taxonómica de las especies. En el caso de las moscas (Diptera), las estructuras y setas de la cabeza y el tórax son de gran utilidad en la separación de familias, generos y especies.

43 plsca kauloarbilal placa facial fimur III cabeza de mosca Calliphoridae tórax de mosca Calliphoridae Seta presutural Seta prcsunirales intraalar Setas presuturaler acrosticales Seta posthumeral externa - setas notopleurales setas postsuturales inüaalares Se!as ponsuturales acrosticales quetotaxia del mesonoto de mosca Calliphoridae METAMORFOSIS La metamorfosis son los cambios o transformaciones que se operan en los insectos durante el desarrollo post-embriónico. Este fenómeno está bien difundido entre los animales, pero en ningún grupo es tan constante y tan marcado como en los insectos. Metamorfosis gradual Es el tipo de metamorfosis incompleta donde los insectos se caracterizan por ser de vida terrestre y poseen un desarrollo gradual. La etapa que sigue al huevo se llama ninfa. Las ninfas crecen gradualmente y se parecen a los adultos excepto que no tienen alas y pueden carecer de ocelos o de algunos segmentos tarsales o antenales. El desarrollo de las alas es gradual y ocurre externamente en los últimos instares ninfales. Las alas rudimentarias están presentes como almohadillas dorsales. Generalmente las ninfas y adultos viven de la misma comida.

44 Metamorfosis completa Es el tipo de metamorfosis que se caracteriza por tener formas larvales similares entre sí y porque presenta el estadío de pupa, que sigue a los estadíos larvales. Durante la etapa pupa1 la larva se transforma dramática y completamente. Es la forma de desarrollo más exitosa y un 85% de las especies de insectos la muestran. En las moscas (Diptera) la pupa se encuentra cubierta por la última exuvia (muda) larval que persiste endurecida y que encierra a la pupa.. Se le llama pupario. Ciclos de vida de insectos en cadáveres En estudios realizados en la ciudad de Guatemala utilizando cerdos como modelo, se ha encotrado que despúes de la muerte (casi inmediatamente) los insectos comienzan a llegar al cadáver. Las primeros grupos en llegar son moscas de las familias Calliphoridae (las moscas verdes y azules) y Sarcophagidae, a veces junto con avispas carrofieras (Hymenoptera). Las moscas colocan sus huevos sobre los orificios del cadáver y al día siguiente es posible observar larvas del primer estadío que se desarrollan a una gran velocidad, devorando el cadáver. Con el paso de los dias las larvas más viejas emigran del cadáver y empupan, generalmente alejadas del cadáver, por lo cual muchas veces desaparecen de los restos. Cuando el cadáver se encuentra en el proceso de descomposición activa aparecen otros grupos de moscas, hormigas y escarabajos carroñeros y depredadores y finalmente cuando los restos están secos aparecen escarabajos como los Dermestidae, Cleridae y Nitidulidae, que son especialistas en degradar materia orgánica seca. Hay variaciones en cuanto a los ciclos de vida de cada especie y estos estados de sucesión en los cadáveres así como la duración del ciclo de vida de cada especie, son de mucha utilidad para la estimación del intervalo post-mortem. NOCIONES DE NOMENCLATURA Y TAXONOMIA DE INSECTOS La taxonomía es la práctica de colocar nombres a los organismos vivientes, ubicándolos dentro de un sistema de clasificación por jerarquías. La base de toda clasificación es la especie. Tradicionalmente las jerarquías de clasificación siguen el sistema de Linneo de mediados del siglo XVIII, que incluye las jerarquías y el concepto binomial para especie: cada especie pertenece a un género y lleva un epíteto específico, ambos escritos en latín y con letra tipo itálica.

45 PARA ANIMALES REINO FILO SUBFILO CLASE ORDEN FAMILIA GENERO ESPECIE PARA PLANTAS REMO DIVISION SUBDIVISION CLASE ORDEN FAMILIA GENERO ESPECIE Por ejemplo, si nosotros queremos elaborar todo el sistema de clasificación de un insecto como la mosca verde, Phaenicia eximia procedemos así: REINO FILO SUBFILO CLASE ORDEN FAMILIA GENERO ESPECIE Animalia Arthropoda Mandibulata Insecta Diptera Calliphoridae Phaenicia Phaenicia eximia En entomología tradicionalmente el reconocimiento del Orden y Familia de cada especie es la base fundamental de todo estudio y es relativamente fácil. El reconocimiento de genero y especie generalmente lleva más tiempo y requiere de laboratorios equipados y literatura especializada. En general, la idea de utilizar un único sistema de clasificación y un solo nombre científico tiene razones prácticas. Por ejemplo el nombre científico de la mosca común se escribe Musca domestica. Cuando cualquiera de nosotros usa el nombre Musca domestica, todas las personas de cualquier parte del mundo sabemos a que especie se está refiriendo. Sin embargo si decimos "la mosca", "la mosca de las casas", "la mosca de la basura", "la mosca grisita chiquita", "house fly" o cualquier otro nombre que se nos ocurrra, va a resultar muy dificil que todo mundo sepa a que mosca nos estamos refiriendo en realidad. De ahí la importancia de los nombres científicos. Para realizar la identificación taxonómica de insectos es indispensable la utilización de claves taxonómicas y guías de identificación. Esas no existen para Guatemala pero en el siguiente apartado presentamos un listado de las especies más comúnmente encont radas en el país, su forma de identificación y algunos datos sobre su ciclo de vida. ORDENES MAS COMlTNES DE INSECTOS Para poder reconocer los órdenes y familias más importantes de insectos es necesario conocer las estructuras del cuerpo de acuerdo a como se indica en la figura anterior. Muchas de las estructuras útiles para separar los órdenes importantes se encuentran en la forma de la boca y la presencia, número y forma de las alas.

46 Los órdenes más comunes de insectos son: Odonata: Las libélulas y caballitos del diablo. Blattaria: Las cucarachas. Homoptera: Los insectos escamas, moscas blancas, chicharras, chiquirines y pulgones. Lepidoptera: Las mariposas diurnas y las palomillas nocturnas. Orthoptera: Los saltamontes, chapulines, grillos y esperanzas. Isoptera: Las termitas (tanto las polillas de las casas como las de los termiteros). Phthiraptera: Los piojos y ladillas, incluyendo los piojos de las gallinas y otras aves. Hymenoptera: Las abejas, abejorros, avispas y hormigas. Phasmida: Los quiebrapalitos o insectos palo. Dermaptera: Las tijeretas. Coleoptera: Los escarabajos y otros insectos similares con un estuche para las alas. Siphonaptera: Las pulgas de las personas, los gatos, perros y otros animales. Mantodea: Las mantis religiosas. Hemiptera: Las chinches apestosas, chinches de cama, chinches de chagas y otras. Diptera: Las moscas, mosquitos, tábanos, rodadores, jejenes, colmoyotes, etc.

47 ORDENES MAS COMUNES DE I~stc; I A ODONATA BLATTARIA (BLATTODEA) HOMOPTERA LEPIDOPTERA 46 ORTHOPTERA ISOPTERA PHTHIRAPTERA HY MENOPTERA PHASMIDA (PHASMATODEA) DERMAPTERA COLEOPTERA SIPHONAPTERA MANTODEA HEMIPTERA DIPTERA

48 CLAVE PARA LAS DE LARVAS DE TERCER INSTAR DE MOSCAS DE IMPORTANCIA FORENSE EN GUATEMALA 1 1. Espidculos postaiores con 1 Espidalos postm<res abaniras, proyeeciooes PwKc~o~~~ laterales ~~s proyecciones I latemies ausentes. prominaites, > 5mm. cuerpo eroespuelao deificado, hasta 2 cms de longitud Hermelia illucens Area espiracular lisa 8 con no m8s de 8 hibtrculos Area espiracular rodeada por 10 o mhs tuberculos 1 ~anuraslsinuasas o en forma de ejol Ranuras rectas Espiráculos posteriores dn ues ranuras oblicuas Espidculos postaiores c&!res ranuras verticales e9 cubiertos y situados m posici6n profunda Synlhesiomia nudiseta 'dae spp. Ophyra sp. spp. I 1 Area lath fusiforme presente Ama lataal fusiforme ausente, 1 con eslerito dental accesorio acmorio ausente -y --.-,.,a w Esclerito I dental Esclento I dental Espinas I carnosas HemJucrlia semrdi'aphano. accesono ausente accesorio presente en todo el cuerno Hemiluc~lia segmenfaria t traqum pwo p~m~tadas e 2, L 6 Cmhllo~a macellarfa, b4d Ch ysomya megacephola muy común m cadáveres traqueas pigmentadas,m\ Cochllomylo hominlvorar. rara ea cadiveres &42' Chryromyo ru$fccres Phaenicia eximia Ph. purpurescens Ph. sericalo Ph. cuprina Esclaito dental accesorio presente Callfphom spp

49 LAS ESPECIES DE INSECTOS DE IMPORTANCIA FORENSE EN GUATEMALA DIPTERA CHRYSOMYINAE Chrysomya rufifacies (Macquart) Esta especie originalmente se distribuía en las regiones tropicales del Viejo Mundo (Byrd y Castner 200 1) y fue introducida en el continente americano desde fuiales de los años 70s. En Guatemala se registró su presencia por 1979 (Kurahashi 1980), con el nombre de Chrysomya albiceps (Wiedeman). Los adultos de esta especie se caracterizan porque son de un color verde-azulado metálico con la parte posterior de los segmentos del abdómen azul metálico o ligeramente púrpura metálico. La cara es anaranjado-amarillenta, con los ojos ampliamente separados en las hembras y contiguos en los machos. El estigma respiratorio protorácico es blanco o blanquecino. En Guatemala es la especie más común en cadáveres bajo sol directo y usualmente aparece desde el primer día. Los huevos fueron descritos por Liu y Greenberg (1 989). Se caracterizan por la presencia de flancos que se curvean alrededor del collar mícropilar y terminan cerca del mismo nivel que el micrópilo (Liu y Greenberg 1989). Las larvas son blanquecinas y se pueden distinguir fácilmente porque presentan varias proyecciones carnosas en forma de espinas en todo el cuerpo. Byrd y Castner (2001) indican que las larvas son depredadoras y además caníbales, y si falta carrofia se pueden alimentar de larvas de la misma o de otras especies. El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaringeo y porque los segmentos 2-6 presentan anillos espinosos anteriores completos (Liu y Greenberg 1989). El segundo instar larva1 presenta los segmentos 2-5 con anillos espinosos anteriores completos, con grandes procesos setosos sobre las superficies dorsal y lateral de los segmentos 5-12 y espinas dorsales pigmentadas con una, dos o tres puntas (Liu y Greenberg 1989). El tercer instar se caracteriza porque los segmentos 3 y 4 tienen procesos más pequefios que los de los segmentos 5-1 1, con la mayoría de procesos setosos, la superficie de la cutfcula casi completamente cubierta de espinas y el peritrema de los espiráculos posteriores incompleto (Liu y Greenberg 1989). Los puparios ("pupas") son de color caft rojizo y se pueden identificar fácilmente porque tambitn presentan proyecciones cortas en forma de espinas escarnosas en todo el cuerpo. El ciclo de vida de Chrysomya rufifacies es de aproximadamente 17 días a 26OC en Hawai (Lee 2000). En Guatemala en el mes de diciembre de 2001 encontré que el ciclo es cercano a los 16 o 17 días en cadáveres de cerdo bajo sol y a baja tempertura (19-23 C). Baumgarher (1993) cita los siguientes datos de horas-grados acumulados (accumulated degree hours (ADH)) a diferentes temperaturas: 8579 ADH a una temperatura de 19OC; ADH a una temperatura de 22 C; 8865 ADH a una temperatura de 29 C; 338 a 352 ADH a una temperatura de 30 C.

50 Chrysomya megacephala (Fabricius) Esta es una especie de amplia distribución, desde Asia, Sudáfiica y Sudamerica, ahora bien establecida en los Estados Unidos (Byrd y Castner 2001) y esta es la primera vez que se cita de Guatemala. Los adultos de esta especie se parecen a los de Chr. mfifacies de la cual se diferencian principalmente por la cabeza notablemente más grande, los ojos grandes y prominentes y el espir~culo protorácico de color negro o café oscuro. Son de un color verde-azulado metálico con la parte posterior de los segmentos del abdómen azul metálico. La cara es anaranjado-rojiza, con los ojos ampliamente separados en las hembras y contiguos en los machos. El ciclo de vida fue estudiado en detalle por Wells y Kurahashi (1994) Cochliomyia macellaria (F.) El barrenador secundario del ganado como se le conoce, de amplia distribución en el Continente, fiie una especie muy común en cadáveres y carrofia hasta antes de la llegada de las especies Chiysomyia mfifocies y Chr. rnegacephala. Los adultos de esta especie se caracterizan porque son de un color verde-azulado metálico con tres líneas oscuras carcteristicas en la superficie dorsal del tórax, las cuales no llegan al abddmen. La cara es anaranjado-amarillenta, las patas de color cafe a caf6 rojizo y presentan los ojos ampliamente separados en las hembras y contiguos en los machos. En Guatemala es la hemos encontrado en cadáves de cerdo tanto bajo sombra como bajo sol, a 1500msnm. Se conoce de varias localidades del país y es aparentemente de amplia distribución.

51 Los huevos fueron descritos por Liu y Greenberg (1989) en base a material de los Estados Unidos. Se caracterizan por la presencia de flancos que se curvean marcadamente alrededor del collar micropilar, encerrando menos de la mitad del collar micropilar y con unas estructurasm verticales en forma de gancho en el plastron (Liu y Greenberg 1989). Los estadios larvales fueron descritos por Liu y Greenberg (1989) usando material de los Estados Unidos y por Greenberg y Szyska (1984), usando material de Perú. Las larvas son blanquecinas y se pueden distinguir fácilmente porque en la parte posterior presentan el sistema respiratorio traqueal fácilmente visible en forma de lineas negras espiraladas o arremolinadas, sobre el fondo blanco de la larva (Byrd y Castner 2001). El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-9 (a veces 10) presentan anillos espinosos anteriores completos (Liu y Greenberg 1989). El segundo instar larval presenta los anillos espinosos como en el primer instar y las espinas dorsales pigmentadas con dos puntas (ocasionalmente con una o tres) (Liu y Greenberg 1989). Aparte del esquelo cefalofaringeo, el tercer instar se caracteriza porque el peritrema de los espiráculos posteriores es incompleto, con las anillos espinosos y espinas como en el segundo instar, además, en la larva viva los túbulos de Malpighi son negros (Liu y Greenberg 1989). Los puparios ("pupas") son de color café rojizo con toda la superficie agujereada y rugosa (la superficie de los puparios de Calliphora, Phaenicia y Lucilia son lisos); las burbujas membranosas están ausentes y los cuernos respiratorios no son visibles exteriormente (Liu y Greenberg 1989). Cochliomyia hominivorax Los adultos son similares a C. macellaria excepto que son algo más grandes y de coloración azulada. La larva presenta el peritrema incompleto, las traqueas están mucho más pigmentadas.

52 Paralucilia fulvinota Esta especie resultó muy común en los experimentos de febrero, marzo y abril del año 2002, bajo sombra de cipreses en la zona 18 de la ciudad de Guatemala y entre enero y febrero del año 2003 bajo sombra de cipreses en la zona 15 de la ciudad de Guatemala. Los adultos se pueden reconocer por la coloración azul metálica y es muy similar a Ph. eximia y a Ph. purpuracens de las cuales se puede diferenciar porque la "stem vein" presenta setas en regular abundancia (como en Chrysomyia). Greenberg y Szyska (1984) describieron los estados inmaduros de P. fulvinota en base a material de Perú. En esta especie el último instar larval y la prepupa tienen coloración azulada. Las larvas del tercer estadío presentan peritrema incompleto y moderadamente pigmentado. y no presenta peritrema en los espiráculos posteriores. Presentan áreas laterales fusiformes y el esqueleto cefálico no presenta un esclerito dental accesorio. Hemilucilia semidiaphana Citada de "Guatemala" y poco conocida. Ha sido llamada Hfravifacies por otros autores. La cabeza es amarilla excepto en la parte superior del occipucio y el vertex que son negros. El tórax es café con reflejos metálicos verdes y púrpuras. El espiráculo anterior es alargado, blanco cremoso a amarillo, mientras que el posterior es café. Las patas son usualmente amarillentas, pero las patas medias y posteriores son algo café en algunos especimenes. El abdómen presenta los terguitos 1 y 2 amarillos, pero en algunos especimenes es oscuro, el resto del abdómen presenta reflejos verde, púrpura y azul. La larva presenta el peritrema incompleto, no tiene área lateral fusiforme y presenta un esclerito dental accesorio.

53 HemiIuciIia segmentaria Los adultos presentan los parafaciales y los calipteros inferiores sin setas. Las setas presutural y dorsocentral est'an presentes. Los palpos son de longitud normal. El tórax es amarillo a café pálido con reflejos verdes y azules. La parte anterior es extensamente amarilla, incluyendo el proepistemon y el basisternon. Las patas son amarillentas incluyendo la coxa. En algunos especimenes la tibia posterior y todos los tarsos son más oscuros. El abdómen es de color amarillento en los terguitos 1 y 2, todo lo demás es café con reflejos metálicos verde-azulados.

54 CALLIPHORINAE Calliphora vicina (Robineau-Desvoidy) No hemos encontrado esta especie en Guatemala pero es muy probable su presencia principalmente en el altiplano del país, razón por la cual se incluye información sobre biología y taxonomía. El número de horaslgrados acumuladas para C. vicina es de 16,765 (lo C), 13,29 1 (1 2.5"C), 10,687 (19"C), 9,805 (22"C), 1 1,725 (25 C) (Greenberg 199 1). De acuerdo a Greenberg (1991), el estadio de huevo dura 88 (lo C), 38 (12S C), 19 (19 C) o 14 (25 C) horas. A 10 C los tres primeros instar larvales duran 224 horas, mientras que las larvas postalimentadas duran 355 horas y el instar pupa1 dura 980 horas (Greenberg 1991). A 12.5 "C el primer instar larval dura 49 horas, el segundo dura 58 horas, el tercero dura 65 horas, las larvas postalimentadas duran 199 horas y las pupas duran 980 horas (Greenberg 1991). A 19 C el primer instar larval dura 22 horas, el segundo dura 23 horas, el tercero dura 65 horas, las larvas postalimentadas duran 118 horas y las pupas duran 336 horas (Greenberg 1991). A 25 C el primer instar larval dura 18 horas, el segundo dura 19 horas, el tercero dura 26 horas, las larvas postalimentadas duran 122 horas y las pupas duran 261 horas (Greenberg 1991). Calliphora peruviana (Robineau-Desvoidy) Esta especie conocida desde México hasta Sudamérica es relativamente frecuente en las regiones altas de Guatemala. La he encontrado en la ciudad capital (1500m), en Volcán Chicabai en Quetzaltenango (2700m) y en la altiplanicie de la Sierra de los Cuchumatanes (3500m) en Huehuetenango. El huevo de C. peruviana no ha sido descrito pero probablemente sea similar al de C. vicinu (Robineau-Desvoidy) y C. hida Hall, descritos por Liu y Greenberg (1989). En estas especies el plastron normalmente se extiende casi toda la longitud del huevo (con especimenes presentando el plastron corto, con cerca de % de la longitud); los flancos terminan al topar el collar micropilar, sin rodearlo (Liu y Greenberg 1989). Los estadios larvales fueron descritos por Greenberg y Szyska (1984), usando material de Perú. El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-7 presentan anillos espinosos anteriores completos (a veces el segmento 7 con anillo incompleto en el dorso); espinas no presentes en la parte posterior del segmento 10 (Greenber y Szyska 1984). El segundo instar larval presenta los anillos espinosos como en el tercer (Greenberg y Szyska 1984). Aparte del esquelo cefalofaringeo, el tercer instar se caracteriza porque los segmentos anteriores 2-8 presentan anillos espinosos; espinas escamosas, moderadamente pigmentadas y con una a dos puntas; peritrema de los espiráculos posteriores completo (Greenberg y Szyska 1984). Los puparios ("pupas") son de color café rojizo con la superficie lisa y las burbujas membranosas con aproximadamente 70 glóbulos (Liu y Greenberg 1989).

55 Phaenicia eximia (Wiedemann) Una de las especies más abundantes en cadáveres de cerdo en zonas boscosas de la ciudad capital, principalmente en la época más fría del año. Los adultos de esta especie se caracterizan porque son de un color azul metálico o azul-verdoso metálico. De acuerdo a Liu y Greenberg (1989) los huevos de P. eximia tienen flancos que se cuervean marcadamente. Los estadios larvales fueron descritos por Greenberg y Szyska (1984) y Liu y Greenberg (1989), usando material de Pení. El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-7 presentan anillos espinosos anteriores completos (a veces el segmento 7 con anillo incompleto en el dorso) (Greenber y Szyska 1984). El segundo instar larval presenta los anillos espinosos completos en segmentos 2-6 y segmento 7 usualmente incompleto en el dorso (Greenberg y Szyska 1984). Aparte del esquelo cefalofaringeo, el tercer instar se caracteriza porque los segmentos anteriores 2-7 presentan anillos espinosos anteriores completos (a veces el segmento 7 con anillo incompleto en el dorso); espinas escamosas, moderadamente pigmentadas y con una punta; peritrema de los espiráculos posteriores completo; áreas fusiformes laterales ausentes (Greenberg y Szyska 1984). Los puparios ("pupas") son de color cafd rojizo con la superficie lisa, similar al de Ph. cuprina (Greenberg y Szyska 1984).

56 Phaenicia purpurescens Los adultos de esta especie se caracterizan porque son de un color un intenso color violeta-morado metálico. En Guatemala son frecuentes en áreas de bosques nubosos y las hemos encontrado visitando heces humanas y carroña de cerdo. En ausencia de información sobre estados inmaduros, el estudio del material recolectado en Guatemala será de vital importancia. Phaenicia sericata (Meigen) Esta especie de importancia medicocriminal en otros paises no fue colectada en nuestros experimentos pero si la hemos encontrado en Guatemala aunque las poblaciones son raras. Los adultos de esta especie son de un color verde-azulado metálico, verde amarillento, verde, hasta dorado bronce, y se distribuyen casi en todo el mundo (Byrd y Castner 2001). De acuerdo a Liu y Greenberg (1989) los huevos de Ph. sericata tienen flancos rectos que divergen suavemente para encerrar parcialmente el collar micropilar. Los estadios larvales fueron descritos por Liu y Greenberg (1989), usando material de los Estados Unidos. El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-7 presentan anillos espinosos anteriores completos y porque ningun segmento tiene anillos espinosos posteriores completos (Liu y Greenberg 1989). El segundo instar larval presenta los anillos espinosos anteriores completos en segmentos 2-7 y solamente el segmento 11 con anillo espinoso posterior complet (Liu y Greenberg 1989). Aparte del esquelo cefalofaríngeo, el tercer instar se caracteriza porque los segmentos 2-8 presentan anillos espinosos anteriores completos y únicamente el segmento 11 con anillo espinoso posterior completo; las espinas son pigmentadas y de una sola punta; el peritrema es completo (Liu y Greenberg 1989). Los puparios ("pupas") son de color café rojizo con la superficie lisa, y la burbuja membranosa presenta cerca de 23 glóbulos (Liu y Greenberg 1989). Los datos de Greenberg (1991) indican que para Phaenicia sericata el número de horas grados acumulados es de 7410 a 19OC, 7648 a 22OC y 7877 a 29OC. De acuerdo a Greenberg (1991), el estadio de huevo dura 23 (22OC) o 18 (29OC) horas, el primer instar larval dura 27 (22OC) o 16 (29OC) horas, el segundo instar larval dura 22

57 (22OC) o 16 (29OC) horas, el tercer instar larval dura 22 (22OC y 29OC) horas, el tercer instar de larvas postalimentadas dura 108 (22OC) o 94 (29OC) horas y el estado de pupa dura 143 (22OC) o 130 (29OC) horas. Phaenicia cuprina (Wiedemann) Los adultos de esta especie se caracterizan porque son de un color verde cobrizo metálico. No la hemos encontrado en Guatemala pero sospechamos de su presencia. Probablemente sus poblaciones son raras. De acuerdo a Liu y Greenberg (1989) los huevos de Ph. cuprina tienen flancos rectos que divergen suavemente para encerrar parcialmente el collar micropilar. Los estadios larvales fueron descritos por Greenberg y Szyska (1984), usando material de Perú. El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-8 presentan anillos espinosos anteriores completos y el segmento 9 con filas de espinas pobremente definidas en el dorso (Greenber y Szyska 1984). El segundo instar larval presenta los anillos espinosos completos en segmentos 2-7, con el segmento 7 con espinas esparcidas y la banda ocasionalmente interrumpida en el dorso (Greenberg y Szyska 1984). Aparte del esquelo cefalofaringeo, el tercer instar se caracteriza porque los segmentos 2-8 presentan anillos espinosos anteriores completos y el segmento 9 con filas de espinas pobremente definidas en el dorso, algunas veces con una o dos filas completas; espinas moderadamente pigmentadas y con una punta; peritrema de los espiráculos posteriores completo; áreas fusiformes laterales ausentes (Greenberg y Szyska 1984). Los puparios ("pupas") son de color café rojizo con la superficie lisa, similares a los de Ph. eximia (Greenberg y Szyska 1984).

58 Lucilia illustris (Meigen) Esta especie no se ha registrado de Guatemala pero tiene amplia distribución holártica. Es de color verde azulado metálico y con las patas negras. Los huevos de L. illustris son similares a los de Ph. sericata (Liu y Greenberg 1989). El primer estado (instar) larval se puede distinguir por la forma del esqueleto cefalofaríngeo y porque los segmentos 2-9 presentan anillos espinosos anteriores completos y las espinas posteriores dorsal del segmento 11 en menos de tres filas; las espinas son pigmentadas y de una sola punta (Liu y Greenberg 1989). El segundo instar Larval es similar al primero (Liu y Greenberg 1989). Excepto por el esqueleto cefalofaríngeo, el tercer instar es similar al primer instar (Liu y Greenberg 1989). Los puparios ("pupas") son de color café rojizo con la superficie lisa y presentan burbujas membranosas con cerca de 30 glóbulos (Greenberg y Szyska 1984). SARCOPHAGIDAE Hemos encontrado varias especies de Oxysarcophaga, Sarcophaga y otros géneros de Sarcophagidae no identificados, abundantes en los cadáveres de cerdos de los experimentos realizados. Los Sarcophagidae son moscas grises, grandes, con lineas oscuras longitudinales en el tórax y el ápice del abdómen es de color anaranjado-rojizo. Normalmente aparecen despúes de que llegan los Calliphoridae, y cuando el tejido seco de los cuerpos en avanzado estado de descomposición, se rehidratan por la lluvia, pueden producir una nueva ola de invasión, como ocurrió en algunos de los experimentos que realizamos. Las larvas se caracterizan porque los espiráculos posteriores están situados en una cavidad y en posición vertical. En Guatemala se conocen al menos 47 especies de Sarcophagidae. Sarcophaga haemorrhoidalis (Fallen) Aunque no encontramos esta especie en Los experimentos realizados en la ciudad de Guatemala, si la hemos encontrado atraída a trampas con carrofia. Es una especie importante en entomologia medicocriminal (Byrd y Butler 1998). Los estudios de laboratorio han demostrado (Byrd y Buttler 1998) que el ciclo de vida pude durar entre 252 y 802 horas, variando entre 252 y 502 horas a una temperatura de 25OC. Algunos

59 estudios sugieren que las larvas de esta especie pueden retrasar su periodo de pupación si las condiciones no son óptimas (c.$ Byrd y Buttler 1998). PIOPHILIDAE Piophila casei (L.) Esta pequeña mosca que también es una plaga común en los quesos y en el jamón, ha sido encontrada de forma abundante en la ciudad de Guatemala y Retalhuleu. Las larvas son pequeñas y blanquecinas y se caracterizan porque cuando están vivas son capaces de saltar relativamente grandes distancias. Los adultos pueden aparecer temprano en la colonización de cadáveres pero en Guatemala hemos visto larvas saltonas hasta cerca de los 26 días despúes de colocados los experimentos. Los adultos presentan el mesonoto sin setas fuertes, excepto tres filas de setulas repartidas en la parte dorsocentral y acrostical (McAlpine 1977).. MUSCIDAE Musca domestica L. La mosca doméstica es un visitante muy común en los cadáveres de cerdo de los experimentos y se encuentra más asociada a los seres humanos que ninguna otra mosca. De ahi su importancia forense. Se puede identificar fácilmente por la venación alar. Hydrotea (= Ophyra) aff. leucostoma (Wiedemann) Esta mosca es característicamente negra con brillo intenso cuando son adultos y las larvas pueden atacar las larvas de mosca doméstica (Byrd y Castner 2001). Ha sido muy poco estudiado el material colectado en los experimentos de cerdos de este proyecto.

60 Fania spp. Las especies de Fania se separan de los otros Muscidae porque la vena anal 2A se cuva alrededor del ápice de la vena cuib+la. Los adultos miden alrededor de 6-8 mm, de coloración gris, negra o café oscuro, con polinosidad plateada. Las larvas se caracterizan porque son aplanadas dorsoventralmente y porque el cuerpo está cubierto de proyecciones laterales carnosas prominentes. Muscina stabulans Esta especie es muy similar a M domestica pero se caracteriza por la mancha anaranjada-amarillenta localizada desde la media a la parte dista1 del escutelum. Muy pocos especímenes adultos fueron recolectados en los experimentos realizados. Synthesyiomyia nudiseta (Wulp) Esta especie de Muscidae se caracteriza por presentar el abdómen de coloraciónm rojiza o anaranjada como los Sarcophagidae pero con cuatro lineas longitudinales oscuras en el tórax. Rabinovich (1970) encontró que bajo temperatura constante de 20 C el promedio de duración de los estadios fue de 2 días para el huevo, 10.1 días para la larva,

61 14.9 días para la pupa, 10.3 días para el adulto teneral y 63 días para el adulto reproductivo. A 28OC Rabinovich (1970) encontró que la duración de los ciclos es de 1 días para el huevo, 8.6 días para la larva, 8.2 días para la pupa, 7.6 días para el adulto teneral y 52 días para el adulto reproductivo. En las larvas criadas en laboratorio observamos que las prepupas produces una secreción pegajosa, forman un cocón comunitario y empupan en el. PHORIDAE Megaselia spp. Varias especies de Phoridae han sido recolectados en los experimentos realizados. Las hembras de unas especies no tienen alas y no pueden volar, manteniéndose principalmente en el suelo, o en la parte del suelo en contacto con los cadáveres. Otras especies más grandes y voladoras son muy comunes a lo largo del proceso de descomposición y en tumbas del Cementerio la Verbena, aparecen con frecuencia puparios de Megaselia aff. scalaris (Loew). Es muy frecuente ver volar esta especie en los cementerios de la ciudad capital. De acuerdo a Greenberg (1991), el promedio mínimo de duración de los diferentes estadios de M. scalaris a 22OC es de 3 1 horas para el huevo, 73 horas para la larva (lo., 2"., y 3er., instar alimentándose), 60 horas para la larva postalimentada y 363 horas para la pupa. De acuerdo a Greenberg y Wells (1998) para Megaselia abdita, el promedio mínimo de duración del ciclo de vida a 23OC es de 23 horas para el huevo, 120 horas para la larva y 272 horas para la pupa.

62 STRATIOMYIDAE Hermetia illucens (L.) Esta especie ha sido encontrada en exhumaciones de cadáveres enterrados por más de 6 meses, en Antigua Guatemala. En las exhumaciones se extrajeron solo larvas, las cuales se caracterizan porque son aplanadas, segrnentadas y con el cuerpo duro, con deposiciones de carbonato de calcio. Los adultos son negros y las alas tienen una ventana central. SEPSIDAE Los Sepsidae observados en los cadáveres son pequeños, negros brillantes y se posan sobre los cadáveres o alrededor de ellos en hojas, ramas o sobre el suelo. Las larvas presentan los espiráculos posteriores colocados al final de una proyección caudal. COLEOPTERA SILPHIDAE Oxelyirum discicolle (Brullé) Los adultos son de coloración general negro, con el pronoto con margenes anaranjadorojizo, los élitros negros y el octavo segmento abdominal ventrai completamente anaranjado. Esta especie tiene amplia distribución en Guatemala y se conoce desde lugares tropicales húmedos, hasta zonas de montaíía. Es muy común en la ciudad

63 capital y aparece en los cadáveres en estado de descomposicion activa. Las larvas son alargadas y con muchísimas setas. Nicrophorus mexicanm Matthews El pronoto es negro, de forma cuadrada. Los élitros son negros, cada uno con dos manchas transversales de color anaranjado-rojizo y con la quilla epipleural larga, extendiéndose casi a nivel de la base del escutelo. La antena está coloreada de anaranjado en los tres últimos segmentos. En Guatemala es más común en las zonas de montaña arriba de 1600msnm. Nicrophorm quadrimaculatus Matthews Pronoto algo redondeado de colo negro. Los élitros son negros, cada uno con dos manchas laterales de color anaranjado-rojizo y con la quilla epipleural corta. La antena está coloreada de anaranjado en los tres últimos segmentos. En Guatemala es más común en las zonas de montaiía arriba de 1500msnm. CLERIDAE Necrobia rufipes (De Geer) Los adultos son de color azul metálico, algunas veces con brillo violeta o verde. Las patas y los primeros cinco segmentos de la antena son café-rojizo, los ojos son

64 negros y la parte ventral del cuerpo es negro-verdosa. La longitud varía entre 3.5 a 7mm. La especie presenta dimorfismo sexual que se puede detectar porque en las hembras cada una de las puntuaciones de las estrías elitrales contiene una seta negra ligeramente inclinada hacia adelante mientras que en los machos esas setas están dirigidas hacia atrás. La larva fue descrita por Simmons y Ellington (1925). NITIDULIDAE Omosita colon (L.) Los Nitidulidae son comunes en materia orgánica en descomposición. En nuestros experimentos hemos encontrado muy abundante esta especie que aparece en el estado avanzado de descomposición, cuando el cadáver está momificado o seco. Se alimenta de cartilado, piel seca y músculo seco adherido a los huesos. Es una especie muy pequeña, de 2-4mm. Aparece junto con los Demestes y Necrobia rujpes. Se carcteriza porque los élitros son oscuros con manchas más claras en la mitd anterior y en la mitad posterior. La antena forma una pequeña maza. En general los élitros dejan descubierta solo una pequeña porción del pigido pero en algunos especímenes en alcohol se pueden ver los últimos dos segmentos del abdomen y el pigido descubiertos. DERMESTIDAE Dermestes spp. Probablemente unas tres especies de Dermestes han sido encontradas en los experimentos de este proyecto. Demestes maculatus y Dermestes bicolor han sido las

65 más frecuentes. Aparecen generalmente en los estados avanzados de descomposición en cadávers momificados o secos. Se alimentan de cartílago, piel y del músculo seco adherido a los huesos. Las larvas son características y con muchísimas setas, pasando por varios estadíos antes de convertirse en adultos. TENEBRIONIDAE Blapstinus sp. Se caracteriza por se de color negro y porque los ojos están completamente divididos en la parte lateral externa. STAPHYLINIDAE Los estafilinidos adultos se caracterizan porque son elongados con los élitros muy cortos. Son depredadores y de ahí su asociación con cadáveres de vertebrados. Varias especies aún no identificadas han sido encontradas a lo largo de este estudio.

66 HISTERIDAE Los histéridos son escarabajos depredadores con varias especies presentes en cadáveres en los experimentos realizados. No es un grupo muy abundante y aún buena parte del material no ha sido identificado. Son escarabajos negros, de forma subcuadrada y con mandíbulas visibles. Scarabaeinae SCARABAEIDAE Se conocen aproximadamente 150 especies de Scarabaeinae de Guatemala, la mayor parte de ellas alimentándose de heces de mamíferos y carroña. En cadáveres humanos los Scarabaeinae aparecen generalmente en estado avanzado de descomposición (descomposición activa) despúes que desaparecen las larvas de moscas. En Guatemala únicamente he registrado a Onthophagus incensus en cadáveres humanos, cerca de la ciudad capital. Sin embargo en nuestros experimentos utilizando cerdos en la ciudad de Guatemala hemos encontrado además del O. incensus a Copris lugubris, Phanaeus pyrois y Phanaeus eximius.

67 HYMENOPTERA FORMICIDAE Las hormigas fueron muy comunes en todos los experimentos realizados tanto al sol como a la sombra. En una ocasión, una de las muestras fue totalmente colonizadas por hormigas (probablemente Solenopsis sp.). Las moscas que rodearon la carroña no pudieron acceder y días despúes se pudo observar a las hormigas cargando los huevos de moscas. Este experimento fue diferente de otros en lugares similares pero evidencia que las hormigas pueden variar la sucesión ecológica y deben ser tomadas en consideración a la hora de hacer estimaciones del IPM. En experimentos en la Universidad de San Carlos de Guatemala y en la Universidad del Valle de Guatemala, en áreas de bosque, las avispas Agelaia sp. y Mischocyttarus mastigophorus fueron encontradas libando sangre en trampas de hígado fresco, en horas de la mafiana. Estuvieron presentes siempre antes que las moscas Phaenicia eximia. APIDAE Hemos encontrado varias especies de abejas sin aguijón principalmente de las especies Trigonafulviventris (de abdómen anaranjado) y Parthamona biline ata (negra con dos lineas claras paralelas en la cara), en cadáveres de cerdo en estado intermedio a avanzado de descomposición.

68 VESPIDAE Las avispas Vespidae Agelaia yepocapa y Agelaia sp. fueron muy comunes libando la sangre, depredando huevos y larvas de Calliphoridae y colectando la carroña de los cerdos muertos. En varios de los experimentos fueron muy importantes como removedores de carroña. HEMIPTERA ALYDIDAE Burtinus notatipennis Sta1 Esta especie fue encontrada en algunas ocasiones en los restos de cerdos en el estado de descomposición avanzada, esqueletonizados o momificados, bajo sol directo. Se caracteriza porque presenta el fémur posterior más grueso que el anterior o medio y con una fila de espinas en el margen postero ventral; la tibia posterior es recta y con únicamente una pequeña espina en la región ventro apical.

69 ESTIMACION DEL INTERVALO POST-MORTEM El intervalo post-mortem puede ser calculado por medio de cuatro métodos relativamente sencillos. 1) La medida de la longitud en milímetros de las larvas más viejas. 2) Crianza de insectos en incubadora o temperatura ambiente 3) La medida de la relación entre la temperatura y la tasa de desarrollo desde la oviposición hasta la eclosión de los adultos (grados-hora y grados-día acumulados) 4) La sucesión ecológica de insectos 1. La medida de la longitud: El método consiste en tomar los datos de las longitudes de las larvas y convertirlas a horas o días de desarrollo. Este modelo asume que, a temperaturas moderadas (15-25OC) la longitud de las larvas aumenta conforme pasa el tiempo, hasta estabilizarse, reducirse en tamafio y transformarse en pupa. Para el caso de la especie Phaenicia eximia desarrollamos un modelo de crecimiento a 26OC, como se ve en la siguiente figura. B 14 a a P " g 10 'a, a 4 < o V1 6 i 4 9 N a o 2 N I 1 I I 1 I.m S ni5 1183s 149.m 1894s m.m tos 16 Número de horas acumuladas Por ejemplo, si encontramos que las larvas más grandes de Phaenicia eximia tienen una longitud promedio de lomm, entonces, asumiendo que la temperatura promedio fue de 26OC en el tiempo que transcurrió desde la muerte hasta que fueron encontradas las larvas, podemos sugerir que las moscas tienen entre 45 y 46 horas de haber llegado al cadaver a oviponer. Si asumimos (y si tenemos evidencia de que así es) que el cadaver estuvo disponible para las moscas desde el momento de su deceso, entonces, el intervalo Post-mortem estimado es de horas. En el caso de encontrar pupas vacías de Ph. eximia, la gráfica nos dice que el cadaver debe tener 306 horas o más, de haber estado accesible a la oviposición de las moscas.

70 Los problemas potenciales para esta estimación provienen del hecho de que la longitud de las larvas varia de acuerdo al tipo de liquido en el que fueron fijadas (alcohol, khale's o vivas). Otro problema que podría surgir es que nuestra estimación del intervalo postmortem nos lleve a una hora nocturna. El problema se presenta porque existe evidencia de que bajo condiciones normales, las moscas Calliphoridae no ovipositan en la noche. Otrs problemas pueden provenir del hecho de que no se conocen modelos de desarrollo para todas las especies importantes. Sin embargo, de acuerdo a lo encontrado en Guatemala, las especies de moscas Calliphoridae de importancia forense son las mismas especies de importancia forense de otros paises donde sus ciclos de vida si han sido estudiados (e.g., Chrysomya rufifacies y Cochliomyia macellaria). En especial debe tenerse mucho cuidado de que las larvas más viejas encontradas, sean en realidad las más viejas y no las que fueron más abundantes o visibles para el investigador. 2. Crianza de insectos en incubadora o temperatura ambiente En el caso de obtener muestras de especimenes vivos, estos se pueden mantener vivos alimentados con hígado de res, en recipientes de helado de 1 litro, colocados en medio de un recipiente tipo "tuppenvare" con cedazo en la tapadera. La base del "tuppenvare" debe contener arena de río esterilizada o vermiculita, la cual será de utilidad para la pupación de las lapas del 111 estadio. Utilizando los datos publicados del ciclo de vida de las especies de importancia forense en Guatemala como Phaenicia eximia (este informe), Cochliomyia macellaria (Byrd y Butler 1996) o (Byrd y Butler 1997), es relativamente fácil estimar el intervalo postmortem a partir del momento en que los estados inmaduros fueron colectados. Por ejemplo, si colectamos larvas del 111 estadio de Chrysomya ruffacies en un cadaver bajo sol y al final obtenemos los adultos 9 días despúes de colectados, podemos estimar un intervalo postmortem de 6 días al momento en que las larvas fueron colectadas del cadáver. Esta estimación se basa en el hecho de que nuestros experimentos en la ciudad de Guatemala obtuvimos un periodo de 15 días para completar el ciclo de vida de C. rufifacies bajo sol directo en cadáveres de cerdo. 3. Los ~radoslhora v gradosldia acumulados El enfoque más utilizado en entomología forense es el de convertir las temperaturas y las horas en grados horas acumulados (ADH en inglés). Este modelo asume que a temperaturas moderadas (15-25OC), la tasa de desarrollo es una función linear de la temperatura (se ignoran los puntos que se desvían a valores extremos). El cálculo de los ADH se hace multiplicando el tiempo por la temperatura en grados centígrados y calculando los ADH basados en las gráficas desarrolladas para cada especie. Por ejemplo, si encontramos abundantes larvas del 111 instar de Phaenicia eximia, y sabemos que el tiempo requerido para completar el estado de huevo es de 16 horas, el de larva 1 es de 19 horas y el de larva 11 es de 2 1 horas, entonces se puede calcular que las larvas requieren 56 horas para llegar al 111 estadio. Luego, sabiendo que el estudio se realizó a 26 OC, se calcula el número de ADH multiplicando las 56 horas requeridas para llegar a larva 111 por los 26OC a los que se realizó el estudio. En total tenemos1456 ADH para llegar a larva 111. Para convertir esos datos a ADD solo los dividimos por 24 horas (1456/24= ADD).

71 Por ejemplo, si se encuentra un cadáver a las 07:OO hrs el 5 de marzo y los insectos fueron preservados en khale's el mismo dia a las 09:OO hrs y encontramos que esas larvas mas viejas estaban mudando del primer instar al segundo instar, procedemos así. Sumamos el total de ADH necesarias para pasar desde huevo hasta llegar a principios del segundo instar, los datos dicen que se requiere 35 horas a 26OC (= 910 ADH). El siguiente paso es conocer cual ha sido la temperatura durante cada hora previa a la fijación de las larvas en Khale's, que sea equivalente a 910 ADH. Sabemos por los datos meteorológicos cercanos que la temperatura promedio entre las 12:OO y las 09:OO de ese día fue de 20 C (9 horas X 20'~ = 180 ADH). Luego sabemos que la temperatura promedio de las 24 horas previas (dia 4 de marzo) a la medianoche ya calculada fue de 19OC (24 X 19OC = 456 ADH). Si sumamos esas 24 horas con las otras 9 horas obtenemos un valor de 636 ADH (33 horas), que nos indica que nos faltan 274 ADH. El día 3 de marzo la temperatura promedio las 24 horas fue de 20 C, lo que equivale a 480 ADH (20 x 24 = 480 ADH). Entonces, por regla de tres, si para 480 ADH necesito 24 horas, cuantas horas necesito para completar 274 ADH (respuesta = 13.7 horas). Finalmente, sumando las primeras 9 horas, las segundas 24 horas y las últimas 13.7 horas, el intervalo postmortem estimado es de 46.7 horas. Trazando desde las 9 de la maiiana del 5 de marzo para atrás, calculamos que el deceso ocurrió el día 3 de marzo cerca de las 10 de la maiiana. Debido a que tenemos dos horas extras porque tardamos en fijar las larvas, el IPM es de 44.7 horas, estimando la posible muerte a las 12:OO del medio día del 3 de marzo. 4. La sucesión ecoló~ica de insectos Este método requiere de estudios de sucesión ecológica en cadáveres en condiciones similares a las de nuestro interés. Hay muchos factores que pueden afectar la estimación del intervalo postmortem basados en la sucesión ecológica como la época del año, las lluvias, la humedad relativa, la temperatura ambiental, la temperatura del suelo, la insolación, la sombra, la inaccesibilidad de los insectos al cadáver, la destrucción por vertebrados carroñeros, etc. Sin embargo, de manera general, utilizando las gráficas de sucesión en cadáveres de cerdos en la ciudad de Guatemala, podemos realizar estimaciones relativamente confiables, medidas en días. De manera general en los primeros dos días se encuentran abundantes moscas Calliphoridae y sus larvas de los primeros estadios. Aproximadamente entre los 12 y 16 días (en época cálida) y entre los 15 y 23 días en época fría, encontramos abundantes adultos recién emergidos, posados en las plantas o estructuras que rodean el cadaver. Luego de que desaparecen las moscas Calliphoridae y cuando el cadaver comienza a desecarse, aparecen adultos de los escarabajos Necrobia ruppes, Omosita colon y Dermestes spp, entre los 20 y 60 días despúes de la muerte, dependiendo de la época. En un ocasión encontramos abundantísimas larvas de la mosca Piophila casei, aproximadamente a los 26 días. En un caso encontramos que las hormigas Solenopsis gemminata retrasan la oviposición de las moscas por unos dos días y luego por el ataque continuo a las larvas, también retrasan el proceso de descomposición, permaneciendo los cadáveres con aspecto esponjoso (como el jamón "spam") y con abundantes líquidos productos de descomposición durante mucho más tiempo que en los casos de cadáveres sin hormigas Solenopsis.

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