Guía teórico - Práctica

Transcripción

1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE ENTRE RÍOS FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Guía teórico - Práctica BOTÁNICA MORFOLÓGICA 2017

2 UNIVERSIDAD NACIONAL DE ENTRE RÍOS FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Prof. María Ester Cariello Ing. Agr. Roberto D. Montesino Revisión y Actualización Bióloga Yanina Gimena Gillij 2011 Revisión 2014 Revisión y Actualización Ing. Agr. María Noelia Sattler 2017 Facultad de Ciencias Agropecuarias U.N.E.R. 1

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4 CONSIDERACIONES GENERALES El alumno deberá contar con los siguientes elementos para realizar los preparados microscópicos: 1. Porta-objetos: Son vidrios rectangulares de 2,5 por 7,5 por 0,1 cm. Allí se coloca el material a observar. Aproximadamente Cubre-objetos: Sirve como su nombre lo indica para cubrir la preparación. Son vidrios cuyo tamaño puede ser de 18 por 18 mm. En un número algo mayor que el de portaobjetos, pues son muy frágiles. 3. Vidrios de reloj: o cualquier otro recipiente pequeño. Ej. : tapa o cajitas pequeñas de plástico donde se coloca el material cortado. 4. Médula de sauco, de hinojo (seco), o planchitas delgadas y finas de telgopor: para cortar material blando o muy delgado. 5. Navaja, bisturí u hojitas de afeitar: cualquiera de estos elementos deben tener buen filo. Si al intentar cortar el objeto ofrece resistencia, si el filo no es bueno se arruina el corte. Una caja. 6. Portaagujas: se compran en las casas de cirugía, o se fabrican con pinceles o plumines en desuso. Si el material es de plástico, se calienta el ojo de la aguja y se fija al extremo del manguito, si es de madera se lo fija con algún producto cementante. Es conveniente tener más de una aguja histológica. 7. Pinza de punta fina: se compran en las casas de cirugía, o se fabrican gastando con una lima el extremo de una pinza de depilar. 8. Pincel fino: se utiliza para retirar los cortes del agua y para limpiar cualquier impureza que pudiera adherirse al corte. 9. Frasquitos con roscas o goteros para: 9.1 solución de hipoclorito: se prepara con lavandina comercial, diluida con 1 o 2 volúmenes de agua destilada. 9.2 solución de glicerina: se prepara con glicerina líquida 1:1 con agua destilada. 9.3 alcohol: para repasar con un algodón el material de vidrio (porta-objetos, cubreobjetos). Técnicas de preparaciones microscópicas Las observaciones se realizan sobre células, tejidos, órganos. En estos últimos la observación es macro y microscópica. Existen técnicas simples para una observación rápida y otras más elaboradas. A continuación se detallan los pasos a seguir para una observación rápida (técnica simple). La técnica incluye coloración y montaje, pero si no se cuenta con el tiempo suficiente para hacerla completa, puede acortarse, como se indicará luego: 1. Se colocan en primer lugar seis recipientes (vidrio de reloj) en línea paralela al borde de la mesa. 2. En el número 1 se agrega agua destilada, en el número 2 solución de hipoclorito de sodio, número 3 agua destilada, número 4 solución de safranina diluida, número 5 y 6 agua destilada. 3. Si se trata de un trozo de tallo, por ejemplo, se coloca en la médula de sauco o entre dos pedacitos de telgopor o médula de hinojo. En el caso de no contar con esos elementos, se toma directamente el tallo entre los dedos índice y pulgar de la mano izquierda y se procede a cortar tomando la navaja u hojita de afeitar. Es necesario practicar varias veces manteniendo la superficie de corte bien horizontal. Se eligen los cortes más delgados (transparentes). Recordemos que el haz de luz debe atravesarlos para poder percibir a través de las lentes del microscopio todos los detalles de la estructura. Los cortes opacos se desechan. 4. Los cortes delgados se colocan en el recipiente Nº 1, se retiran luego con la ayuda del pincel y se acomodan sobre el porta-objetos, se hace una observación rápida al microscopio y si el corte es bueno se pasa al recipiente Nº 2. Facultad de Ciencias Agropecuarias U.N.E.R. 1

5 5. En el recipiente Nº 2, el hipoclorito elimina todo lo que sea materia orgánica, dejando más transparente el material. Se lo deja Se lo retira con ayuda del pincel o aguja. 6. El material pasa al recipiente Nº 3 donde se lava rápidamente Se coloca en el recipiente Nº 4 durante 3. La safranina colorea de rojo las paredes cutinizadas, lignificadas y suberizadas, también los cromosomas. 8. Se retira de la solución de safranina con una aguja y se lo lleva al recipiente Nº 5 que contienen agua destilada donde se eliminan los restos del colorante. 9. Se procede al montaje del material. Para ello contamos con portaobjetos limpios (previamente lavados con detergente) donde se coloca una gota de solución de glicerina 1:1, sobre ella el preparado se acomoda con la aguja histológica. Se coloca luego el cubre objetos (asegurarse de que esté limpio), que se apoya sobre uno de los lados del portaobjetos, se lo va dejando caer lentamente para evitar que se formen burbujas. Si la solución de glicerina sobrepasa los bordes del cubre-objetos, se absorbe con papel de filtro u otro papel absorbente. Es importante que la zona alrededor del cubre-objetos quede desengrasada. 10. Se sella con esmalte de uñas incoloro que se pasa por el borde del cubreobjetos, se deja secar y se pasa nuevamente. Se rotula, indicando: material, tipo de corte, fecha, etc. Los preparados teñidos en la forma indicada anteriormente pueden conservarse durante un año o más y guardarse en cajas especiales. Cuando se decoloran se los vuelve a colorear pasándolos por agua destilada, solución de safranina y nuevamente agua destilada y a continuación el montaje. Para la observación de un corte no es necesario cumplir con todos los pasos indicados en la técnica. Puede hacerse una coloración rápida luego de cortado, coloreándolo con safranina sin pasar por hipoclorito (técnica rápida), estos cortes una vez utilizados se desechan. Tipos de secciones: todo órgano puede ser estudiado según tres tipos de secciones: Sección transversal: es una sección perpendicular al eje del órgano. (1) Sección radial: es una sección que pasa por el eje del órgano. Si fuera un órgano alargado, se podría hablar de una sección longitudinal - radial. (2) Facultad de Ciencias Agropecuarias U.N.E.R. 2

6 Sección tangencial: en los órganos alargados es una sección que no pasa por el eje del mismo. Se presenta paralela a cualquier plano que pasa por su eje. (3) Posición de las paredes: Periclinales : cuando son paralelas a la superficie del órgano. Anticlinales : cuando son perpendiculares a la superficie del órgano. Pueden ser radiales o transversales. Facultad de Ciencias Agropecuarias U.N.E.R. 3

7 Presentación de informes El alumno deberá tener en cuenta las indicaciones que a continuación se detallan en el esquema para la presentación de los informes de los trabajos prácticos (hojas lisas blancas, tamaño A4) Botánica Morfológica 4. Histología 5. Tejido epidérmico 1. Nombre y apellido 2. Fecha 3. Nombre de la materia 4. Título general 5. Título parcial 6. Esquemas 6. Facultad de Ciencias Agropecuarias U.N.E.R. 4