COULTER STKS
DIAGNÓSTICO VS PRONÓSTICA Entrada Sintomas Infección Enfermedad
PARACLINICOS Y SU CORRELACION PROBABILIDAD PRETEST LIKELIHOOD RATIO LR TEOREMA DE BAYES LR(+) CONFIRMA 3.0 LR(-) ) DESCARTA 0.1
PRUEBAS PRONÓSTICAS PRUEBA ENFERMEDAD PUNTO DE CORTE LR(+) LR(-) PCR SEPSIS 4,0mg/dL. 6,84 (67%) 0 SHOCK SEPTICO 1,50 0,17 LEUCOCITOS FARINGITIS 12000/mm3. 1.50 (40%) 0,88 APENDICITIS 3,25 0,15 PCT PANCREATITIS INFECTADA 5,0ng/mL ml. 9,70 (90%) 0,09 GRIPAL 0,88 2,15 TRIGLICERIDOS MENINGITIS 120mg/dL. 0,55 1,50 UCI 3,15 0,45
DEFINICIÓN Hto Hematocrito Hb Hemoglobina RBC Recuento Eritrocitos Hematíes, G.Rojos WBC Recuento Leucocitos G. Blancos DIFERENCIAL Ne% Eo% Ba% Mo% Ly%
ANTECEDENTES HISTÓRICOS 1950 Wright,Wintrobe 1959 Joseh,Wallace Coulter 1967/75 Van Villa WBC J.England DWBC Coulter Indices Eritrocitarios Mohandas - Laser 1976/80 Wycherley Osea y Combleet, Kessinger Histogramas Electromagnetismo Conductividad Otros Technicon Coulter
LÉXICO MÉDICO LEUCOCITOS TOTALES WBC 5000-10000/mm 3 CITOSIS FILIA NEUTRÓFILOS LINFOCITOS EOSINÓFILOS MONOCITOS BASÓFILOS 55-65% 25-35% 1-4% 3-8% 0-1% PENIA Absoluto VS relativo
IMPEDANCIA Malas Conductoras eléctricas Interaccion intracelular Con radiaciones de baja Frecuencia(Electromagnetismo, radio, otras) CONDUCTIVIDAD DISPERSION LASER Variabilidad En la Refraccion de luz laser
METODOLOGÍAS TÉCNICAS Y CONCEPTO GENERACIONAL 2A SEMIAUTOMATIZADO 3A AUTOMATIZADO, NO DILUCIONES,INDICES SECUNDARIOS 4A SISTEMAS GRAFICOS DISTRIBUCIÓN 5A LEUCOCITOS, DISPERSOGRAMAS, RETICULOCITOS ETC. DISPERSIÓN (Luz - Imagen) IMPEDANCIA (Flujo Eléctrico-Cambios) CONDUCTIVIDAD (Características) CITOMETRÍA DE FLUJO
CARACTERÍSTICAS BIOLÓGICAS CELULARES VCM 85-95 fl HCM 27-33pg Vol 90fl Area 97um 2 2,2-2.8 um 0,5-1.1um 140um 2 7-8 um
Linfocito Linfocito 7-10um 10um 60 60-90fL 90fL Mononuclear Mononuclear Gr Gránulos nulos azur azurófilos filos Citop.gris Citop.gris-azul azul NC aumentada NC aumentada Adherencias Adherencias Neutr Neutrófilo filo 9-15um 15um 120 120-140fL 140fL Polinuclear Polinuclear Gr Gránulos nulos Espec Específicos ficos Citop.rosado Citop.rosado NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Eosin Eosinófilo filo 12 12-17um 17um 140 140-150fL 150fL Binuclear Binuclear PCE PCE-PCM PCM-NDE NDE Citop.azul Citop.azul NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Bas Basófilo filo 10 10-14um 14um 100 100-120fL 120fL Polinuclear Polinuclear FAC FAC-Proteasa Proteasa FAL FAL Citop.rosado Citop.rosado NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Monocito Monocito 12 12-20um 20um 150 150-200fL 200fL Mononuclear Mononuclear Gr Gránulos nulos azur azurófilos filos Citop.gris Citop.gris NC aumentada NC aumentada Adherencias Adherencias
Caracteristicas Nucleares Tamaño Peroxidasa Basófilo
FUNCIONAMIENTO TÉCNICO
Funcionamiento técnico ERITROS,Hb Y/O PLAQUETAS LEUCOS Reticulocitos Otros PLAQUETAS
OSCILOSCOPIO
CANTIDAD INTENSIDAD (CANALES)
A FL B FL C FL D FL E FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1
350 FL 125 FL 90 FL 55 FL 20 FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1 UMBRALES ERITROCITARIOS 40 FL 35 FL 30 FL 25 FL 20 FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1 UMBRALES PLAQUETARIOS
6 5 4 Número3 2 1 0 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 FENTOLITROS Histograma Moda de partículas Tamaño o de las partículas Distribución n en torno a la media
HISTOGRAMAS RBC WBC PLT HGB Número de Canales Tamaño o Umbrales Número de CámarasC Diluyente de CámarasC
Moda Población n Principal RBC 36-360fl 360fl Valor medio VCM ADE TOE Dedos 60 90 120 fl
MICROCITICOS HIPOCROMICOS RBC 36-360fl 360fl NORMOCITICOS NORMOCROMICOS MACROCITICOS NORMOCROMICOS 30 60 90 120 fl
Sin estabilizante Con estabilizante
ANGULO BAJO 2 3 o Conteo Volumen
10mg/dL 15mg/dL 120fL 60fL CITOGRAMAS ERITROCITARIOS
Tamaño Scatter Plot Granularidad ANGULO ALTO 5 15 o HGB GRÁNULOS
Colorante Cámara para tincionar gránulos de peroxidasa PEROXIDASA SURFACTANTES 4 CLORO 1 NAFTOL. Reactividad Claridad Oscuridad REACCIÓN COLOREADAS NO REACCIÓN INCOLORAS CANAL PEROXIDASA
Tamaño PEROXIDASA
REACTIVOS SURFACTANTES ÁCIDO TALICO. CANAL BASÓFILO LOBULARIDAD
Tamaño REFRACCIÓN
OPACIDAD TAMANO + - + - + - + - + - + - + - + -
TAMAÑO fl 350 Mono Neutro B B Mono Neutro Baso Eos B Baso Eos 30 Linfo Linfo No Blancos No Blancos Granularidad - Opacidad
Monocitos Neutrófilos DISPERSOGRAMA Eosinófilos Linfocitos No leucocitos Basófilos
RESPUESTA INMUNE RESPUESTA HEMATOLÓGICA RESPUESTA FISIOLÓGICA SINTOMATOLOGÍA DIAGNÓSTICO CLÍNICO
Linfocitos T - B Monocitos (Macrófagos Kuffer,Histiocitos,Gliales) Basófilos (Mastocitos) C.en velo (Dendríticas) Neutrófilos,Eosin filos,eosinófilos Eritrocitos - GR Plasma Leucocitos - GB Plaquetas Trombocitos Funciones celulares
Intracelulares Intracelulares Virus Bacterias Mycobacterias,, Salmonella, Listerias, Legionellas. Clamidias, Ricketsias Parásitos Tripanosomas,Leishmanias Hongos Histoplasma, Blastomices, Coccidioides, Paracoccidioides. Extracelulares Extracelulares Cocos piógenos ( Staphylococcus-Streptococcus ), Cocos gram negativos ( Meningococo -Gonococo), Bacilos entéricos ( E.Coli ), Bacilos gram positivos ( Clostridun ) etc. Estrictos Evasores del sistema Inmune
CD 4+ CD T h 2 IL - 4 IL - 3 Mastocito IL - 5 Eosinófilos EOSINOFILIA 1-4% Factores Quimiotácticos Histamina, Heparina, Leucotrienos,, PGS MBP; ECP Neurotoxina Peroxidasa
fiebre tifoidea,brucelosis, Tuberculosis, subagudas. CD4+ Citotoxicidad CD8+ Hipersensibilidad retardada MONOCITOS LINFOCITOS
HLA ABO Transplantes Complejos Inmunes autoinmunes Enfermedad cronica Respuesta Extracelular Hipersensibilidad II Macrófagos Respuesta Intracelular Hipersensibilidad III LT-CD8 Neutrofilia Linfocitosis Alergenos Hipersensibilidad I Mastocitos Eosinofilos Eosinofilia Enfermedades Cronicas BAJA ANTIGENECIDAD Macrófagos Interleuquinas Monocitosis
LEUCOPENIA citosis/filia
Progenitor linfoide Linfocito Pro B Pre B B inmadura B madura Plasmocito HLA-DR TdT, CD34 c Ig CD19 s Ig c Ig CD10 CD79a CD22 CD5 CD38
Dispersión lateral SSC Mayor a 10º (Side Scatter) Granularidad - complejidad Intensidad de Fluorescencia Relativa FL1/FL2/FL3/FL4 LASER Desvía a la luz incidente. Emite fluorescencia. Dispersión frontal FSC Menor a 10º Forward Scatter Tamaño
Granulocitos Gráfica de puntos Como se ubican espacialmente las poblaciones de leucocitos de sangre periférica? Complejidad interna SSC G M Detritos L L L G G Linfocitos M Tamaño relativo FSC M Monocitos
Negativas Low Intemediate High M2 M1
Marcaje con un solo Ac Control Negativo - Isotipo Gate: G1 Complejidad interna SSC Control de isotipo Qua Event % Gat % To UL Región 0 1 0.0 0.0 UR 0 0.0 0.0 LL 931 20.0 3.5 LR 371 79.9 14.1 Tamaño relativo FSC Fluorescencia naranja (FL2) UL LL Gráfica de puntos UR LR Fluorescencia verde (FL1) Anti-CD3 FITC
Anti-CD3 FITC Anti-CD4 PrCP Anti-CD8 PE Fluorescencia naranja (FL3) Anti-CD4 PE UL UR LL LR Gráfica de puntos Células marcadas UL 5% CD4- CD8+ UR 60% CD4+ CD8+ LL 25% CD4+ CD8- LR 10% CD4- CD8- Fluorescencia verde (FL3) Anti-CD8 PrCP
R1
Healthy patient 202 patient 188 IFNγ CD107a/b
COULTER STKS