RepublicofEcuador EDICTOFGOVERNMENT± Inordertopromotepubliceducationandpublicsafety,equaljusticeforal, abeterinformedcitizenry,theruleoflaw,worldtradeandworldpeace, thislegaldocumentisherebymadeavailableonanoncommercialbasis,asit istherightofalhumanstoknowandspeakthelawsthatgovernthem. NTE INEN 0767 (1985) (Spanish): Carne y productos cárnicos. Determinación de mohos y levaduras
1. OBJETO 1.1 Esta norma establece el método para determinar el contenido total de mohos y levaduras en carne y productos cárnicos. 2. TERMINOLOGIA 2.1 Mohos. Hongos multicelulares que forman estructuras ramificadas extensas, coloreadas o no; en la industria alimenticia se les conoce con el nombre de micelios; éstos pueden formar sobre ciertos alimentos, toxinas llamadas micotoxinas. 2.2 Levaduras. Hongos unicelulares de forma esférica, alargado, ovoide, piriforme y a veces en forma de micelio. Su tamaño es superior al de las bacterias. 3. INSTRUMENTAL 3.1 Mezclador mecánico, con vasos de metal o de vidrio, resistentes a las condiciones de esterilización. Debe operar no menos de 15 000 r/min, ni más de 20 000 r/min. 3.2 Aparato para recuento de colonias, provisto de un lente de tres aumentos y campo iluminado con luz blanca difusa. 3.3 Refrigeradora, regulada entre 0-5 C, para mantener las muestras. 3.4 Cajas Petri de vidrio (15. x 100 mm) o plásticas (de 15 x 90 mm) estériles. 3.5 Utensilios, para la preparación de los medios de cultivo. 3.6 Pipeta volumétrica, de 1 cm 3. 3.7 Balanza analítica, sensible al 0,1 g (Continúa) -1-1984-169
INEN 767 4. REACTIVOS 4.1 Medio de cultivo 4.1.1 Sabouraud Agar sabouraud 65 g Agua destilada estéril 1 000 cm 3 4.1.2 Calentar la mezcla hasta ebullición para disolver completamente, distribuir en tubos y esterilizar. 4.2 Solución Buffer de peptona 4.2.1 Diluyente Fosfato disódico 9,0 g Peptona 10,0 g Cloruro de sodio 5,0 g Fosfato monopotásico 1,5 g Agua destilada estéril 1 000 cm 3 4.2.2 Disolver los componentes en 1 000 cm 3 de agua, mediante ebullición; ajustar el ph en tal forma que, luego de la esterilización, sea de 7,0 ± 0,1 a 20 C. Transferir 225 cm 3 en botellas de 500 cm 3 de capacidad y porciones de 9 cm 3 a tubos de cultivo o frascos. Colocar en el autoclave durante 20 min, a 121 ± 1 C para esterilizar. 5. PREPARACION DE LA MUESTRA 5.1 Deberán cumplirse las disposiciones establecidas en la Norma INEN 17. 5.2 La preparación de la muestra se realizará de acuerdo con la Norma INEN 776. 5.3 La toma y preparación de la muestra, a más de responder a lo indicado en 5.2, se realizará en estricta asepsia, con bisturí y pinzas perfectamente esterilizadas. 6. PROCEDIMIENTO 6.1 Pesar 25 g de muestra preparada, con aproximación a 0,1 g y colocar en el mezclador estéril. Adicionar 225 cm 3 del diluyente (ver 4.2.1);; accionar el mezclador por un tiempo no mayor de 2,5 minutos entre 15 000 a 20 000 revoluciones por minuto, (dil.: 1:10). (Continúa) -2-1984-169
INEN 767 6.2 Después de la maceración, tomar por duplicado 1 cm 3 del macerado (1:10) y colocar en un tubo que contenga 9 cm 3 del medio (1 :100) y así sucesivamente si el caso lo requiere con una pipeta estéril y transferir a cajas Petri; añadir aproximadamente 15 cm 3 del medio de cultivo (ver 4.1.1) previamente licuado y enfriado a 47 C. 6.3 Mezclar suavemente el contenido de la Caja Petri, con movimientos en diferentes sentidos y dejar solidificar. 6.4 Colocar las cajas Petri en posición invertida, a temperatura ambiente (22 a 25 C) durante un tiempo mínimo de cinco días, y máximo de quince días. 6.5 La lectura debe comenzarse el tercer día, y se volverá a repetir el quinto día, valiéndose del aparato recuento para colonias (ver 3.2). 6.6 Las primeras colonias que se desarrollan son las levaduras, que suelen tomar forma redondeada, cóncavas y de cgr blanco, crema o amarillento. El aspecto de los mohos es característico (ver 2.1). 7. CALCULOS 7.1 El número de hongos y levaduras se calcula multiplicando el número de colonias contadas por el factor de dilución y expresarlo en un gramo de muestra. 8. ERRORES DE METODO 8.1 La diferencia entre los resultados de una determinación efectuada por duplicado no debe ser mayor a tres; en caso contrario, debe repetirse la determinación. 9. INFORME DE RESULTADOS 9.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmética de los resultados de la determinación. 9.2 Deben indicarse el método usado y el resultado obtenido; debe mencionarse, además, cualquier condición no especificada en esta norma, o considerada como opcional, así como cualquier circunstancia que pueda haber influido sobre el resultado. 9.3 Deben incluirse todos los detalles para la completa identificación de la muestra. (Continúa) -3-1984-169
INEN 767 APENDICE Z Z.1 NORMAS A CONSULTAR INEN 17 Leche y productos lácteos. Examen microbiológico. Disposiciones generales Z.2 BASES DE ESTUDIO M.A.Raglai. Manuals of food quality control. Microbiological analysis of Food and Water. Enumeration of mesophilic aerobic bacteria (aerobic plate count). Food and Agriculture Organization,of the United Nations. Roma, 1979. F.D.A. División of microbiology. Food and Drug. Administration. Chapter IV 5th edition. Washington, 1978. FAO Food and nutrition paper., Manuals of food quality control. 4 microbiological analysis. Enumeration of yeast and manuals Food. and Agriculture Organization of the United Nations. Rama, 1979. -4-1984-169
Documento: NTE INEN 767 INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA TITULO: CARNE Y PRODUCTOS CARNICOS. MOHOS Y LEVADURAS. Código: AL 03.02-323 ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: REVISIÓN: Fecha de aprobación anterior por Consejo Directivo Oficialización con el Carácter de por Acuerdo No. de publicado en el Registro Oficial No. de Fechas de consulta pública: de 1978-08-14 a 1978-09-27 Fecha de iniciación del estudio: Subcomité Técnico: Fecha de iniciación: 1984-06-28 Fecha de aprobación: 1984-09-26 Integrantes del Subcomité Técnico: NOMBRES: Sr. Herbert Krampl Sr. Paul Benz Dr. Kleber López P. Dra. Teresa de Guzmán Ing. Pablo Pólit Dra. Maria Martínez Dra. Magdalena Buz Dra. Cecilia Oleas de A. Dr. Hugo Barberis Dra. Teresa Ávila Dra. Leonor Orozco INSTITUCIÓN REPRESENTADA: FABRICA DE EMBUTIDOS JURIS FEDERER CIA. LTDA. UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL MINISTERIO DE SALUD. (INHLIP)- Guayaquil ESCUELA POLITECNICA MINISTERIO DE SALUD (INIMMS) MINISTERIO DE SALUD MINISTERIO DE SALUD (INIMMS) CONSULTOR DIRECCION DE HIGIENE LABORATORIO MUNICIPAL INEN Otros trámites: 4 Esta norma sin ningún cambio en su contenido fue DESREGULARIZADA, pasando de OBLIGATORIA a VOLUNTARIA, según Resolución de Consejo Directivo de 1998-01-08 y oficializada mediante Acuerdo Ministerial No. 235 de 1998-05-04 publicado en el Registro Oficial No. 321 del 1998-05-20 El Consejo Directivo del INEN aprobó este proyecto de norma en sesión de 1984-09-27 Oficializada como: Obligatoria Por Acuerdo Ministerial No.469 de 1985-07-11 Registro Oficial No. 242 de 1985-08-05
Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815 Dirección General: E-Mail:furresta @inen.gov.ec Área Técnica de Normalización: E-Mail:normalizacion@inen.gov.ec Área Técnica de Certificación: E-Mail:certificacion@inen.gov.ec Área Técnica de Verificación: E-Mail:verificacion@inen.gov.ec Área Técnica de Servicios Tecnológicos: E-Mail:inencati@inen.gov.ec Regional Guayas: E-Mail:inenguayas @inen.gov.ec Regional Azuay: E-Mail:inencuenca @inen.gov.ec Regional Chimborazo: E-Mail:inenriobamba @inen.gov.ec URL:www.inen.gov.ec